母系遗传氨基糖苷类抗生素致聋家系的线粒体DNA突变分析

目的确定母系遗传氨基糖苷类抗生素致聋家系的线粒体DNA突变位点，并研究其临床表型．方法应用PCR和DNA序列分析技术，对一个有明确氨基糖苷类抗生素应用史的母系遗传耳聋家系共18人(包括聋人和听力正常者)的线粒体DNA进行研究。结果该家系中有9份样品存在线粒体DNA 12SrRNA1555位点A—G的突变，其余样品为1555G点突变阴性。结论提示线粒体DNA点突变是导致该家系致聋的主要因素之一。     

邢台市聋哑学生线粒体DNA C1494T和A1555G突变分析

目的调查邢台市聋哑学校耳聋患者线粒体DNA m.C1494T和m.A1555G突变情况。方法对2013-2014年河北省邢台市聋哑学校的115例耳聋学生进行遗传性耳聋问卷调查、体格检查和听力学评估。采用Sanger测序法检测线粒体12SrRNA m.C1494T和m.A1555G两个突变位点。结果 2例(1.7%)携带线粒体DNA m.A1555G均质性突变,1例(0.9%)携带线粒体DNA m.C1494T均质性突变。结论邢台地区线粒体DNA m.A1555G突变发生率与其他地区比较偏低,m.C1494T突变发生率与其他地区比较偏高。在地区性耳聋病因调查中运用基因诊断技术,可以用于早期诊断,遗传咨询和指导该家系成员预防药物性耳聋。     

线粒体脑肌病伴高乳酸血症和卒中样发作综合征有基底节钙化者的线粒体DNA突变情况观察

目的通过对脑CT示基底节钙化的线粒体脑肌病伴高乳酸血症和卒中样发作综合征(MELAS)患者的线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)突变进行研究,验证大部分MELAS综合征患者mtDNA突变位点在3243,探讨基底节钙化是否可作为线粒体病的筛选诊断指标。方法应用聚合酶链反应-限制性片断长度多态性(PCR-RFLP)方法对20例MELAS综合征患者肌肉或外周血mtDNA的A3243G点突变进行检测,并将PCR产物进行DNA序列分析。结果经APaⅠ酶切13例检测到A3243G点突变。侧序共14例检测到A3243G点突变。20例均无T3271C点突变。结论大部分MELAS综合征患者mtDNA突变位点在3243;基底节钙化与mtDNA异常关系密切,年轻患者的基底节钙化可作为线粒体病的筛选诊断指标。     

新疆地区795例非综合征性耳聋患者A1555G和C1494T突变分析

目的 研究新疆地区非综合征性耳聋患者线粒体DNA 12S rRNA A1555G和C1494T的突变情况并进行分析,为药物性耳聋的预防提供帮助。方法 收集新疆地区795例非综合征性耳聋患者的临床资料,抽取外周静脉血5~10 ml,采用芯片检测的方法进行DNA 12S rRNA A1555G和C1494T突变位点的检测。并对阳性突变患者家属进行病因学分析和遗传咨询。结果 795例非综合征性耳聋患者中线粒体DNA 12S rRNA A1555G和C1494T的突变检出率分别为1.26%(10/795)、0.25%(2/795)。检出的10例A1555G突变中,有7例分布在汉族人群中,2例分布在回族中,1例在维吾尔族中。A1555G突变在汉族、维吾尔族、回族、哈萨克族NSHL中的检出率差异有统计学意义(χ²=9.761,P=0.021)。2例C1494T突变均分布在汉族中,C1494T突变在汉族、维吾尔族、回族、哈萨克族NSHL中的检出率差异无统计学意义(χ²=3.855,P=0.278)。所有有药物接触者中,82.43%患者为重度及极重度耳聋,17.57%为轻度及中度耳聋。结论 线粒体DNA 12S rRNA A1555G突变在汉族中的检出率显著高于维吾尔族,而C1494T在各民族中的检出率无明显差异。     

非综合征性耳聋家系的临床分析与基因检测

目的:探讨母系遗传氨基糖甙类抗生素致聋家系的临床表型与基因突变的关系。方法:收集贵州省遵义地区不同民族的6个母系遗传非综合征性耳聋家系的临床资料及血液样本,经PCR-RFLP及测序技术检测线粒体DNA 1555G、3243G、7445G突变,并通过对各家系线粒体DNA高变区序列测定及编码区限制性片段多态性分析以划分单倍型类群。结果:经酶切及测序证实其中4个家系存在线粒体DNA 1555G突变,但未发现线粒体DNA 3243G、7445G突变。6个耳聋家系分别属于A、D6、D、G、B5 a及M*单倍型。结论:该地区线粒体DNA 1555G突变引起氨基糖甙类抗生素高度敏感致聋的家系发生率较高,提示线粒体DNA 1555G突变检测有一定的临床应用价值。     

绍兴市聋哑学校非综合性耳聋分子病因学分析

目的对绍兴市聋哑学校非综合性耳聋患者进行分子病因学分析。方法对绍兴市聋哑学校116名学生进行病因问卷调查和听力检测,应用PCR扩增及焦磷酸测序法对112名非综合性耳聋患者进行GBJ2 235delC和线粒体DNA 12SrRNA A1555G基因突变检测。结果在112例非综合征性耳聋患者中,6例（5．36％）存在线粒体DNA 12srRNAA1555G点突变,其中3例有明确的氨基糖甙类抗生素应用史,11例（9．82％）存在GBJ2 235delC纯合突变,5例（4．46％）存在GBJ2 235delC杂合突变。结论绍兴地区线粒体DNA 12SRrRNAA1555G突变率高于全国水平,GBJ2 235delC突变处于较低水平。通过耳聋基因检测可以明确或提示部分非综合性耳聋的病因,对防聋和指导聋儿家庭婚育起到积极作用。     

儿童听力障碍遗传学检测的临床应用研究

[目的]进行儿童听力障碍的遗传学检测,发现耳聋的原因并进行遗传咨询.[方法]对31例中度以上耳聋患儿进行临床听力测试,收集外周静脉血样本,从白细胞中提取DNA,聚合酶链反应扩增GJB2基因、SLC26A4基因和线粒体DNA目的片段,对扩增片段直接测序进行GJB2基因、SLC26A4IVS7-2位点、mtDNA1494和1555突变分析.[结果]共31人次接受耳聋遗传学检测,发现和耳聋基因突变有关者10例(32%).发现GJB2致病纯合突变或复合杂合突变4例,杂合突变3例,鉴别出IVS7-2A＞G纯合突变和杂合突变各1例,发现1555A＞G突变1例.[结论]耳聋遗传学检测在儿童感音神经性耳聋的早期诊断和干预方面有一定作用.     

先天性耳聋167例分子病因学分析

[目的]通过对柳州地区167例先天性聋患者三种常见耳聋易感基因GJB2,线粒体DNA12SrRNAA1555G和SLC26A4(PDS)基因突变检测数据分析,探讨该地区先天性耳聋患者中耳聋易感基因突变频率并作机理分析.[方法]对新生儿(NICU)听力筛查未通过者和门诊散发确诊为先天性耳聋患者,采集静脉血样,采用PCR扩增及限制酶切技术进行耳聋易感基因检测.[结果]167例患者中有1例(0.6%)线粒体DNA1555G突变,2例(1.2%)GJB2 235delC纯合突变,1例235delC杂合突变,1例299～300delAT杂合突变;SLC26A4基因IVS7-2 A＞G杂合突变10例(5.7%).总体分子水平上能明确诊断或强烈提示遗传性耳聋者占9%.[结论]柳州市先天性耳聋患者中三种耳聋常见易感基因致病突变频率均低于全国平均水平.聋病相关基因的检出对于聋病病因学分析、防聋治聋、降低耳聋的发病率具有明确的指导意义.     

遗传性耳聋基因芯片检测的临床应用研究

目的 探讨遗传性耳聋基因芯片检测的临床意义,评价其在临床上快速检测常见遗传性耳聋基因的可行性.方法 研究对象为105例聋哑患儿,取外周血5ml,分离提取全血淋巴细胞基因组DNA,用遗传性耳聋基因芯片检测中国人中常见的4个耳聋相关基因上的9个热点突变,包括GJB2(35delG,176del16bp,235delC及299delAT),GJB3 (C538T),SLC26A4 (IVS7-2A＞G、2168A＞G)和线粒体DNA 12S rRNA (A1555G、C1494T).结果 在105例样本中,共检出17例携带致聋突变(16.19％).其中,线粒体DNA 12S rRNA 1555 A＞G异质突变1例(0.95％); GJB2基因突变7例(6.67％),包括235 del C纯合突变2例,235 del C/GJB2 299 del AT复合杂合突变2例,235 del C单杂合突变3例;SLC26A4基因突变9例(8.57％),包括IVS7-2 A＞G纯合突变1例,2168 A＞G纯合突变1例,IVS7-2 A＞G单杂合突变3例,2168 A＞G单杂合突变4例.未检出GJB3基因突变.结论 耳聋相关基因突变位点在我国也具有较高的阳性率,基因检查方法和以往传统的检测想法相比,具有准确性高、速度快、假阳性率低的优点,而且该检查方法操作简便,建议临床上进一步推广运用.     

湖北省非综合征型耳聋患儿GJB2、SLC26A4和线粒体12S rRNA突变分析

目的 分析非综合征型耳聋患儿的GJB2、SLC26A4基因和线粒体12S rRNA突变频率,扩充中国人群常见耳聋基因突变流行病学数据,为发展适合的聋病基因筛查提供数据基础。方法 收集220名散发非综合征型耳聋病例的外周血样本和临床资料;应用聚合酶链反应(PCR)和直接测序,对患者和150例正常对照进行GJB2、SLC26A4基因和线粒体12S rRNA突变检测。结果 1)220例患者中146(66.36%)例患者携带至少1个GJB2基因突变,35(15.91%)例患者携带至少1个SLC26A4基因突变,3(1.36%)例为线粒体A1555G突变。正常对照中3(2%)例携带GJB2致病突变。2)GJB2基因c.235delC(19.32%)突变是最常见的致病突变,其次是SLC26A4基因IVS7-2A>G(9.09%)突变。3)检出的36种突变中,包括2种GJB2和1种SLC26A4新突变。结论 本研究扩充了GJB2基因、SLC26A4基因和线粒体DNA A1555G突变在中国人群中的基因突变数据,并发现了3种新的突变,为分子诊断和扩展聋病基因筛查提供数据参考。