裸鼠原位种植大肠癌肝转移三种建模方法的比较

目的 比较3种不同的人大肠癌裸鼠原位种植肝转移模型,建立稳定有效的人大肠癌裸鼠原位种植肝转移模型.方法 逐步传代法皮下成瘤传5代,采用84只BALB/C-nu/nu裸鼠,随机分为4组,结肠原位荷包缝合法和结肠原位纤维蛋白胶黏合法和结肠微注射1×106和1×105SW1116细胞法建立大肠癌裸鼠原位种植肝转移模型.各组裸鼠死亡后立即解剖观察原位以及肝脏、肺、脾脏、胰腺、肠系膜等脏器组织的转移并且进行苏木素-伊红(HE)染色进行镜下观察有无转移.结果 荷包缝合组和纤维蛋白胶组结肠原位种植肝转移成功率均为100%比微注射法50.0%和14.3%高,纤维蛋白胶法比其他两种方法所形成的结肠原位肿瘤和肝转移瘤均大而多.HE染色表明肝转移肿瘤性质与结肠原位种植瘤相同.结论 结肠原位纤维蛋白胶黏合法比较其他二种原位种植肝转移模型的手术成功率高,肝转移率高、操作简单.     

裸鼠结肠癌肝转移模型的建立

目的 探讨建立裸鼠结肠癌肝转移模型的方法.方法 45只裸鼠随机分为三组,分别用门静脉注射法,脾脏注射法和肝脏注射法建立结肠癌肝转移模型,并比较三种肝转移瘤模型在结肠癌肝脏转移率和自然生存期.结果 门静脉注射组,脾脏注射组和肝脏注射组肝脏转移率分别为100%(15/15),60%(9/15),100%(15/15);自然生存期分别为41.47±2.35 d,042.69±2.13 d,41.31±2.55 d.结论 门静脉注射法建立裸鼠结肠癌肝转移模型是一种简便、有效的方法.     

结肠皮下易位结肠癌荧光原位移植模型的建立

目的 建立结肠皮下易位结肠癌荧光原位移植模型并对其肿瘤生物学进行评价.方法 选取10只BALB/C nu/nu裸鼠,将其盲肠转移至皮下,并将携带荧光的肿瘤移植在盲肠处;对5只荷瘤裸鼠予以20 mg/kg的氟尿嘧啶（5-FU）腹腔注射（处理组）,另5只作为对照.观察成瘤裸鼠肿瘤生长情况、肠系膜淋巴结及肝脏转移情况.结果 10只裸鼠模型均成功构建,肿瘤移植后荧光灯下最早发现肿瘤时间为3～9（4.7±1.3）d.5-FU处理组肿瘤生长速度明显低于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）.处理组肠系膜淋巴结转移1例,对照组淋巴结转移1例,腹膜转移1例;原位肿瘤、淋巴结和腹膜转移肿瘤病理检查均为低分化癌.结论 结肠皮下易位结肠癌荧光原位移植模型有建立方便、成功率高、肿瘤易早期观察、可反复取材等优点,是一种实用的结肠癌新模型.     

结肠皮下易位结肠癌荧光原位移植模型的建立

目的 建立结肠皮下易位结肠癌荧光原位移植模型并对其肿瘤生物学进行评价.方法 选取10只BALB/C nu/nu裸鼠,将其盲肠转移至皮下,并将携带荧光的肿瘤移植在盲肠处;对5只荷瘤裸鼠予以20 mg/kg的氟尿嘧啶(5-FU)腹腔注射(处理组),另5只作为对照.观察成瘤裸鼠肿瘤生长情况、肠系膜淋巴结及肝脏转移情况.结果 10只裸鼠模型均成功构建,肿瘤移植后荧光灯下最早发现肿瘤时间为3～9(4.7±1.3)d.5-FU处理组肿瘤生长速度明显低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).处理组肠系膜淋巴结转移1例,对照组淋巴结转移1例,腹膜转移1例;原位肿瘤、淋巴结和腹膜转移肿瘤病理检查均为低分化癌.结论 结肠皮下易位结肠癌荧光原位移植模型有建立方便、成功率高、肿瘤易早期观察、可反复取材等优点,是一种实用的结肠癌新模型.     

结肠皮下易位结肠癌荧光原位移植模型的建立

目的 建立结肠皮下易位结肠癌荧光原位移植模型并对其肿瘤生物学进行评价.方法 选取10只BALB/C nu/nu裸鼠,将其盲肠转移至皮下,并将携带荧光的肿瘤移植在盲肠处;对5只荷瘤裸鼠予以20 mg/kg的氟尿嘧啶(5-FU)腹腔注射(处理组),另5只作为对照.观察成瘤裸鼠肿瘤生长情况、肠系膜淋巴结及肝脏转移情况.结果 10只裸鼠模型均成功构建,肿瘤移植后荧光灯下最早发现肿瘤时间为3～9(4.7±1.3)d.5-FU处理组肿瘤生长速度明显低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).处理组肠系膜淋巴结转移1例,对照组淋巴结转移1例,腹膜转移1例;原位肿瘤、淋巴结和腹膜转移肿瘤病理检查均为低分化癌.结论 结肠皮下易位结肠癌荧光原位移植模型有建立方便、成功率高、肿瘤易早期观察、可反复取材等优点,是一种实用的结肠癌新模型.     

门静脉注射白细胞介素-12治疗肝转移肿瘤的实验研究

目的　探讨通过门静脉系统局部应用白细胞介素 12 (IL 12 )对于肝转移肿瘤的治疗作用。方法　通过门静脉注射 2× 10 5个MCA 2 0 5肿瘤细胞建立小鼠肝转移肿瘤模型 ,同时脾脏被移植到皮下 ,作为反复多次向门静脉系统注射的途径。第 3～ 7天 ,0 1μgIL 12通过腹腔或脾脏注射 ,同时对照组中通过脾脏注射等体积的平衡盐水。第 2 1天检查肝转移肿瘤的情况。结果　在肝转移模型中 ,IL 12腹腔注射组和IL 12脾脏注射组的肝脏重量 (1 33± 0 0 8)g和 (1 2 9± 0 0 7)g明显小于对照组 (1 92± 0 17)g ,P <0 0 5 ,IL 12腹腔注射组和IL 12脾脏注射组的肝脏转移结节数目 (1 5 3± 0 5 8,0 6 0± 0 89)明显少于对照组 (18 2 5± 5 71,P <0 0 5 )。在IL 12脾脏注射组中 (n =6 ) ,3只小鼠的肝脏肿瘤完全消失。结论　通过门静脉系统局部应用IL 12是治疗肝转移肿瘤的有效方法。     

结肠癌原位瘤模型方法探讨

目的研究常用结肠癌原位瘤模型方法的优劣,建立稳定的结肠癌原位瘤成瘤模型及肝转移模型。方法采用CT26小鼠结肠癌细胞系直接接种于Balb/c小鼠盲肠浆膜下层,或皮下成瘤后采用组织原位种植接种于小鼠盲肠浆膜下层。分析接种4周后原位成瘤及肝转移发生情况。另外,将CT26细胞分别接种于小鼠的小肠浆膜下和盲肠浆膜下。比较接种后成瘤效果及并发症发生率。结果采用细胞注射和组织种植两种方法的原位成瘤率均为100%(5/5),但细胞注射组原位瘤明显大于组织种植组。细胞注射4周后肝转移率为60%(3/5),而组织种植组没有发生肝转移(P0.01)。小肠原位种植成瘤率为100%(5/5),但早期肠梗阻发生率为80%(4/5),而盲肠注射组早期未见肠梗阻发生。结论就接种类型而言,细胞原位注射较组织原位种植更适合结肠癌肝转移模型;而就注射部位而言,结肠癌肝转移模型应首选盲肠注射,而非小肠注射。     

人结肠癌SW480裸鼠肝转移模型的建立

肝脏是结直肠癌最常见的靶向转移部位．肝转移成为结直肠癌患者死亡的最主要因素。虽已有大肠癌早期肝转移的预测研究报告．但以人结直肠癌细胞在裸鼠体内建立肝转移模型。已成为研究结直肠癌肝转移机制和抗转移治疗的主要实验方法。本研究模拟结直肠癌切除术后癌细胞回流入门静脉至肝脏血道播散而发生肝转移的过程．采用脾脏种植法建立SW480裸鼠肝转移模型。     

建立裸小鼠大肠癌肝脏微转移模型的方法研究

目的：研究一种建立裸小鼠癌肝脏微转移模型的方法。方法：运用盲肠造疝原位瘤块接种法建立裸小鼠的大肠癌模型，同时以Alu基因为标志，利用PCR法检测接种后不同时期的裸小鼠肝脏中发生微转移的肿瘤细胞。结果：盲肠原位接种瘤块后2周，大部分裸小鼠均长出直径1cm的盲肠实体，接种成功率为88％。接种后4－6周的裸小鼠中，常规病理检查未发现异常，57．1％（4／7）肝组织中检测到Alu基因，表明裸小鼠肝脏中存在着微转移的肿瘤细胞。结论：利用盲肠造疝瘤块原位接种法建立裸小鼠的大肠癌模型，方法简单且成功率高，同时易于观察肿瘤的生长，这一发现可为以后大肠癌微转移的基础研究提供一定的帮助。     

两种结直肠癌肝转移动物模型建立方法的比较及评价

建立小鼠结直肠癌细胞肝转移动物模型,为研究结直肠癌肝转移机制及筛选评估抗转移药物提供工具。采用60只6～8周龄BALB／c小鼠,选取鼠大肠癌细胞株CT26接种于BALB／c小鼠直肠黏膜下层后,再随机选择30只小鼠行盲肠造口,观察其原位移植瘤体积大小、肝转移癌情况（包括肝脏表面转移癌结节大小、数目和转移率）,成瘤时间及小鼠的生存期。结果显示,两种造模方法均能复制出结直肠癌肝转移动物模型,病理结果证实肝转移肿瘤符合典型的低分化腺癌特征。术后30d两组肝脏转移情况的比较,直肠直接接种组肝转移率（15．7％）和直肠接种盲肠造口组肝转移率（61．5％）,差异有统计学意义（P〈0．05）。术后30d两组淋巴结转移情况比较,直肠直接注射组及直肠接种盲肠造口组淋巴结转移率分别为5．2％和46．2％,差异有明显统计学意义（P〈0．05）。结果表明,两种小鼠大肠癌细胞株肝转移动物模型均能较好模拟结直肠癌体内肝转移过程,直肠接种盲肠造口法的小鼠肝转移模型具有肝脏转移率高,小鼠生存期长,成瘤时间较短等优点。     

WTp53基因联合TK/GCV、CD/5-FC系统抑制结肠癌肝转移的实验研究

目的研究WTp53基因联合TK／GCV、CD／5-FC系统对结肠癌肝转移的抑制作用。方法32只裸鼠随机分为4组，每组8只。脾内注射法建立结肠癌肝转移动物模型。第1组：脾内注射SW480细胞（对照组）；第2组：脾内注射SW480／p53细胞；第3组：脾内注射SW480／TK-CD细胞，腹腔注射GCV、5-FC；第4组：脾内注射SW480／p53与SW480／TK-CD等比例混合细胞，腹腔注射GCV、5-FC。观察各组裸小鼠的肝转移率、肝转移瘤数目、肿瘤细胞凋亡指数（AI）、生存期等指标。结果各治疗组裸鼠肝转移的发生率下降，平均肝转移瘤数减少，其动物的生存期延长，肝转移瘤内的癌细胞凋亡率增高。联合基因治疗组效果最好，且WTp53与TK／GCV、CD／5-FC有交互协同作用。结论WTp53基因与TK／GCV、CD／5-FC系统联合应用具有协同效应，可有效地抑制结肠癌肝转移的形成。     

白细胞介素10和转化生长因子β1与小鼠结肠癌肝转移的关系

目的了解小鼠脾脏接种结肠癌细胞发生肝转移所需肿瘤细胞数的临界值,探讨白细胞介素10（IL-10）和转化生长因子β1（TGF-β1）在结肠癌肝转移过程中的作用及意义。方法选择6-8周雌性Balb／c小鼠36只,随机分为6组,各6只。实验组通过脾脏注射小鼠结肠癌CT26细胞建立小鼠结肠癌肝转移模型,注射细胞数分别为1×10^5个（A组）、5×10^4个（B组）、1×10^4个（C组）、5×10^2个（D组）和1×10^3个（E组）,对照组为正常小鼠。于术后21天处死小鼠,肉眼观察肝脏肿瘤转移情况并行肝脏组织学观察及IL-10和TGF-β1免疫组织化学染色。结果A、B组小鼠肝脏转移率均为100％,其他各组小鼠均未见有肝转移瘤形成。IL-10和TGF-β1表达在对照组均为阴性,但在各实验组小鼠肝脏表达均为阳性,且表达量随着脾脏注射CT26细胞数量的增加而升高,IL-10和TGF-β1的表达量在A、B、C组与D组或E组间比较,差异均有统计学意义（P=0．000）,但在D、E两组间比较,差异无统计学意义。结论5×10^4个CT26细胞脾脏注射可成功建立小鼠结肠癌肝转移模型;CT26细胞可诱导肝脏产生IL-10和TGF-β1,IL-10和TGF-β1可促使结肠癌肝转移瘤的形成。     

成纤维细胞生长因子5对胰腺癌细胞生长和肝转移能力的影响

目的:观察成纤维细胞生长因子5 (FGF5)对人胰腺癌细胞生长和肝转移能力的影响。方法:利用高表达FGF5的人胰腺癌PANC-1细胞系(北京大学第一医院外科大肠癌实验室提供),通过短发卡RNA(shRNA)稳定转染技术,构建FGF5低表达细胞系PANC-1-FGF5 -,并以未转染质粒和转染对照粒的PANC...     

Patterns of metastasis by the human prostate cancer cell line PC-3 in athymic nude mice

Cells from the PC-3 human prostate cancer cell line were evaluated in athymic nude mice in order to determine the influence of size of the primary tumor and site inoculation on the incidence and pattern of metastasis. At autopsy, all organs, including the skeleton, were evaluated for metastasis. Subcutaneous injections resulted in metastases to the draining axillary lymph node and lungs (56% and 13%, respectively), and were correlated with size of the primary tumor. Tail vein injection resulted in a high incidence of lung metastasis, while injection into the peritoneal space, spleen, and seminal vesicles resulted in intraabdominal tumor growth, liver metastasis, and large tumors within the seminal vesicles, respectively. Skeletal metastases were not observed in any of the animals studied. We conclude that injection of PC-3 cells into various sites results in different patterns of metastasis, but may not constitute an entirely suitable animal model of human prostate cancer due to the lack of metastasis to the skeleton.     

A metastatic model of human colon cancer constructed using cecal implantation of cancer tissue in nude mice

COL-2-JCK, a human colon cancer xenograft line able to be transplanted into nude mice, was implanted in the subserosal layer of the cecum, either as cancer tissue or as a single cell suspension. When cancer tissue was used for the cecal implantation, 100% extensive local tumor growth and a high incidence of metastases to the regional lymph nodes, peritoneum, liver, and lung was observed. In contrast, when the cell suspension of this line was injected into the cecal wall, no metastases were observed, with significantly reduced local tumor growth. The use of cancer tissue maintaining the original cancer tissue structure is therefore considered imperative for allowing full expression of the biological characteristics of cancer cells. This nude mouse model using the cecal implantation of cancer tissue should thus prompt further study on the biology of human colon cancer.     

Vaccination by suicide gene therapy against a model of hepatic metastasis from colon cancer in the rat

Suicide gene therapy consists of transferring into tumor cells a viral or bacterial gene encoding for an enzyme which converts a non-toxic product into a lethal drug. STUDY AIM: To analyze the therapeutic potential of vaccination with tumor cells expressing the bacterial cytosine deaminase (CD) gene and 5-fluorocytosine (5-FC) treatment in a rat liver metastasis model. MATERIAL AND METHOD: We used a rat colon carcinoma cell line which, after subcapsular or intraportal injection in syngenic animals, generates single or multiple experimental liver metastases, respectively. We have shown that introduction of a vector expressing the CD gene in this colon carcinoma cell line results in 5-FC sensitivity (PRObCD). RESULTS: Intrahepatic subcapsular injection of PRObCD tumor cells, followed by 5-FC treatment, induces total regression of a wild-type tumor pre-established in the contralateral liver lobe in 45% of animals with a 96% decrease in mean volume (p < 0.0001), demonstrating the existence of a distant bystander effect. This vaccination significantly increased the survival of rats with single (log-rank p < 0.0001) or multiple (log-rank p = 0.01) liver metastasis CONCLUSIONS: These results suggest that suicide gene-modified tumor cells can act as potent therapeutic vaccines against liver metastasis from colon carcinoma.     

大肠癌肝转移动物模型的研究进展

肝脏是大肠癌转移的最常见器官.为更好地研究大肠癌肝转移,建立和选择合适的大肠癌肝转移模型十分重要.在此就大肠癌肝转移模型:原位植入模型,经脾接种癌细胞,门静脉内注射,直接将癌细胞种植到肝脏的相关研究进展进行综述.     

循环中胰岛素样生长因子-Ⅰ水平调节结肠癌的生长和转移研究

目的　探讨血清中肝特异性胰岛素样生长因子 Ⅰ (IGF Ⅰ )水平在刺激小鼠结肠癌生长和转移中的作用。方法　我们实验中所用的肝脏特异性IGF Ⅰ基因缺失 (LID)小鼠 ,其循环中IGF Ⅰ水平仅为正常小鼠 (对照组小鼠 )的 2 5 %。将Colon 3 8腺癌组织块 (碎片 )植入LID和对照组小鼠的盲肠表面。总共 15 6只 5周龄的雄鼠 (其中 82只LID小鼠 ,74只对照鼠 )接受了肿瘤移植。小鼠被随机分成两组 :一组接受腹腔注射重组人IGF 1(rhIGF 1) ,每天 2次 ,共 6周 ,另一组接受生理盐水注射。结果　接受rhIGF Ⅰ注射组的LID和对照小鼠 ,血清IGF 1和IGFBP 3水平均升高。在生理盐水注射组中 ,对照鼠的盲肠肿瘤的发生率和肝脏转移率显著高于LID小鼠。和盐水注射组相比 ,腹腔注射rhIGF 1组中 ,LID和对照组小鼠均有显著的盲肠癌发生率和肝脏转移率。对照小鼠的肝脏转移结节数明显高于LID鼠。结肠癌组织VEGF的表达和血管的密度依赖于血液中IGF Ⅰ水平。结论　血液循环中IGF I水平在结肠癌发展和转移中起了重要作用。     

两种异位种植结肠癌肝转移动物模型的比较

目的建立并对比两种异位种植结肠癌肝转移小鼠模型。方法以1×106个/mL小鼠结肠癌细胞株(CT26)0.2mL对BALB/c小鼠分别行肝门静脉注射法,脾脏种植切除脾脏法构建结肠癌异位种植肝转移动物模型。术后待小鼠自然死亡,比较两种动物模型的肝转移率和成瘤效果、肺转移率以及小鼠生存期的差异。结果肝门静脉注射法与脾脏种植切除脾脏法相比,前者在肝转移率、肝脏成瘤效果和肺转移率方面高于后者,后者在小鼠生存时间和操作难易程度方面优于前者。结论本研究建立并对比了两种具有高转移率的结肠癌肝转移小鼠模型,肝门静脉法在肝转移率和肝脏成瘤效果方面更具优势,适合对肝转移率和取材要求较高的实验研究;而脾脏种植切除脾脏法则更适合验证周期较长的药物实验。     

Nude mouse resists hepatic metastasis of the allogeneic tumor,colon-26

The ability of the host-immune defense mechanism of nude mice and their immunocompetent littermates to prevent liver metastases from the murine colon carcinoma, colon-26, was assessed. Give thousand tumor cells suspended in 0.05 ml of Hank's balanced salt solution were inoculated into the spleens of BALB/c nu/+and BALB/c nu/nu mice. On the 21st day after inoculation, all the mice were sacrificed, and the liver metastases counted and the livers weighed. All the BALB/c nu/+mice were found to have developed hepatic metastases with a mean of 10 nodules, whereas no hepatic metastases were observed in any of the 10 BALB/c nude mice. On the other hand, 4 of 6 nude mice developed hepatic metastases after treatment with anti-asialo GM1 antibody. These results indicate that the BALB/c nude mouse has an excellent host-immune defense mechanism for preventing liver metastasis, with NK cells in the liver and/or blood circulation perhaps playing an important role.