五种抗ENA抗体同时检测方法的建立及其意义

制备出一种含五种可提取性核抗原(ENA),用免疫双扩散法一次可同时检测抗Sm,抗RNP,抗SSA,抗SSB及抗Jo-1五种自身抗体。免疫印迹法证明所提取的ENA抗原对五种标准抗体具有抗原活性。本方法在琼脂糖板中加入3.5％的PEG-6000及用考马斯亮蓝染色,明显增加了沉淀线的清晰度,提高了抗ENA抗体检测的敏感性。     

不同组织来源的可溶性核抗原（ENA）抗原性的比较

用同一种方法从牛胸腺,兔胸腺、人脾、猪脾组织中提取 ENA,并进行四种提取物(CTE、RTE、HSE、PSE)抗原性的比较.经过对90例 SLE 和30例 SS 病人的检测,结果证明:四种组织均含有 ENA抗原成份,但含量不同,HSE 抗原性最好,适合做抗 Sm、抗 RNP、抗 SSA、抗 SSB 抗体的 ID 法检测.CTE 也含有四种成份。但只适于做 CIE 筛选试验,而 RTE 和 PSE 权适合做抗 Sm、抗 RNP 抗体的 ID 法检测.     

ENA多肽抗体谱检测在结缔组织病中的临床意义

为 探讨可提取性核抗原 (ExtractableNuclearAntigen ,ENA)多肽抗体谱在检测结缔组织病中的诊断价值 ,我们对 6 9例结缔组织病患者血清进行了ENA抗体谱的检测并统计分析 ,报道如下。1　资料与方法1.1　资料来自我院 1999年～ 2 0 0 1年门诊及皮肤科、肾脏病科住院的病人 ,女 4 8例 ,男 2 1例 ,年龄 9岁～ 6 7岁。其中系统性红斑狼疮 (SLE) 2 6例 ,均符合美国ARA1982年修订诊断标准[1] ;混合结缔组织病 (ECTD) 15例 ;干燥综合症 (SS) 4例 ;全身性硬皮病 (PSS) 5例 ;多发性肌炎 (PM)或皮肌炎 (PM/DM) 19例。 36例健康体检人群作为…     

ANA和ENA检测在自身免疫性疾病中的应用评价

探讨抗核抗体和抗可溶性核抗原抗体的不同检测方法对自身免疫性疾病诊断的指导意义。回顾性分析2007年1月至2009年10月间在长征医院就诊的患者血清自身抗体的检测结果,549位患者,其中自身免疫病患者224例,非自身免疫病325例,所有患者血清同时检测ANA和ENA。以Hep-2细胞/肝组织为基质的间接免疫荧光法检测ANA,免疫印迹法检测ENA。两种检测方法产生4种检出模式:ANA+/ENA+、ANA-/ENA-、ANA+/ENA-和ANA-/ENA+。前两种模式共占检测的62.84%。ANA和ENA在自身免疫病患者中的阳性率(63.4%和58.5%)显著高于非自免病患者(16.9%和25.2%),ANA和ENA在自身免疫病组和非自身免疫病组间阳性率比较,差异有统计学意义(P<0.01)。两检测结果仅在MCTD和SLE患者中存在相关性(P<0.01),在其他观察组中不存在相关性(P>0.05)。间接免疫荧光法相对费时,而且需要操作者具备一定的经验,作为初筛实验,ANA的检测较ENA有更高的灵敏度,两者联合检测则将有利于提高检测的灵敏度和可靠性。     

应用HEP-2细胞检测抗核抗体

<正> 自身免疫性结缔组织病(OTD)的共同特点是患者血循环内有一系列针对核抗原的自身抗核抗体(ANA),这些抗哺乳动物细胞核内各种巨分子的抗核抗体在人类结缔组织病中具有相当的特异性。故ANA的检测对这些疾患的诊断、鉴别诊断、病情判断、预后估价和发病机理的研究有重要意义。 本研究应用大白鼠肝印片和人鳞状上皮癌单层培养细胞(HEP-2)作基质,对各种结缔组织疾病的ANA的敏感性和特异性进行检测和比较,现将结果报告如下。     

可抽提核抗原(ENA)的抗原性多肽研究

<正> 目前国内在ENA抗体的检测上主要是应用商品化的猪脾ENA与兔胸腺ENA,为了评价和比较这二种不同组织来源ENA在ENA抗体检测上的敏感性,本文用免疫印迹技术(IBT)从分子水平比较它们所含的Sm,RNP,SSB及SSA抗原性多肽数量和分子量的差异,并用IBT与CIE二法比较测定ENA抗体的敏感性。     

人脾浸出液抗原检测抗ENA抗体及实用价值

<正> 可提取性核抗原(Extractable NuclearAntigen,简称 ENA)的抗体包括多种自身抗体,目前临床常用的有抗Sm、抗RNP、抗SS-A、抗SS-B抗体。前两种抗体多采用小牛或兔胸腺提取物(Rabbit thymus extract,简称RTE)为抗原。测后两种抗体则以Wil-2细胞提取物(以下简称Wil-2)为抗     

抗核抗体及抗体谱表达与流产的相关性

目的了解流产人群中抗核抗体(ANA)和可提取核抗原(ENA)抗体谱的表达情况,探讨其与流产的相关性。方法采用间接免疫荧光法、免疫印迹法检测1734例流产妇女血清ANA、ENA抗体,以正常生育妇女203例为对照。结果流产组和对照组ANA阳性率为19.33%和7.39%,ENA抗体为17.99%和4.43%,两组ANA和ENA抗体阳性率差异有统计学意义(P0.05)。流产组中检出10种ANA核型,检出率较高的是颗粒型(9.01%)、核颗粒型(2.24%)和胞浆型(2.17%),ENA抗体谱均有检出,主要为SS-A(8.07%)、Ro-52(6.52%)和n RNP/Sm(2.25%)。结论本地区流产患者ANA核型、ENA抗体多样,ANA、ENA抗体的表达与流产相关。     

免疫印迹法检测抗核糖体抗体及其临床意义

抗核糖体抗体主要见于 SLE,对 SLE的诊断具有一定特异性。本文用免疫印迹法(IBT)证实兔胸腺 ENA 中38,16.5,15KD 多肽具有核糖体抗原表位,应用兔胸腺ENA代替胞浆纯化核糖体用 IBT检测抗核糖体抗体,结果表明该抗体在40例 SLB中的阳性率为 15％,在抗Sm和/或抗 RNP抗体阳性的 SLE患者中,阳性率可达 30.8％,而在 143例非 SLE风湿病患者中阳性率仅1.4％,差别显著(p<0.01)。本文SLE中抗核糖体阳性与阴性二组在主要临床特征上无显著差别(P>0.05)。     

进行性系统性硬皮病患者ENA多肽抗体检测

本文对96例进行性系统性硬皮病(PSS)患者用免疫印迹技术(IBT)及以人喉癌上皮细胞(HEP-2细胞)为基质片进行可提取核抗原(ENA)多肽抗体谱和免疫荧光抗核抗体(IFAN-A)配对检测。结果显示:IFANA阳性67例(68.8％),其荧光核型以颗粒型为主,有57例(85.0％),其它核型中核仁型7例(10.4％),着丝点型3例(4.5％),未见周边型和均质型。ENA多肽抗体检测阳性58例(60.4％),其中以抗Scl-70为主,占阳性患者的44.8％(26例)。由于抗Scl-70与IFA-NA颗粒型密切相关(p相似文献   

系统性自身免疫病患者抗核抗体的分类测定

可提取性核抗原 (ENA)中抗 Sm、抗 u1 - RNP、抗 SS- A、抗 SS- B、抗 Sc L- 70和抗 JO- 1分别是 SL E、MCTD、SS、PSS、PM与 DM的标志抗体 ,过去用琼脂双向扩散法、免疫荧光法、对流免疫电泳法、RNA-免疫沉淀法和免疫印迹法操作烦琐 ,结果判断不够客观 ,除免疫印迹法外均不能同时测定。本文介绍的 EIA法具有简便、快速、灵敏和大批量同步半定量检测的优点 ,易于推广应用。1　材料和方法1.1　研究对象1.1.1　器官非特异组 :检测 1996～ 1999年临床确诊的系统性结缔组织病患者 144例。其中系统性红斑狼疮 (SL E) 38例 ,类风…     

空弯菌抗原诱导的自身抗体产生动力学

用CJ-S131菌苗经口免疫小鼠16周,观察免疫小鼠体内的自身抗体(抗ds-DNA,ss-DNA,组蛋白和ENA抗体)产生动力学。在CJ-S131菌苗连续免疫的16周内,免疫小鼠有两个自身抗体产生峰。免疫后第6周,出现第一峰,抗组蛋白和ENA抗体的阳性率高于抗ds-DNA和ss-DNA抗体;在第16周,抗ds-DNA和ss-DNA抗体的阳性率高于抗组蛋白和ENA抗体。在正常小鼠体内,存在“自然”抗核酸抗体(抗ds-DNA和ss-DNA抗体),随年龄而增长,但个体差异较大;而抗核蛋白抗体(抗组蛋白和ENA抗体)始终测不出。上述结果提示,抗组蛋白抗体和抗ENA抗体在自身免疫病的发病机理和早期诊断中,具有潜在意义,值得进一步研究。     

13种自身抗体检测对SLE的诊断价值及临床意义

目的探讨13种自身抗体对系统性红斑狼疮（SLE）的诊断价值和临床意义。方法抗核抗体（ANA）的检测采用间接免疫荧光法;抗ds-DNA抗体的检测采用快速金标渗滤法;11种可抽提核抗原（ENA）抗体的检测采用免疫印迹法。结果（1）223例SLE患者抗核抗体谱中,ANA、ds-DNA及抗ENA抗体SS-A/Ro60、SmD1、SS-A/Ro52和U1-RNP的阳性率较高,分别为95.06%、52.91%、50.22%、27.35%、24.66%和21.08%;Jo-1和P0抗ENA抗体的阳性率较低,分别为1.79%和0.90%;正常对照组仅ANA有5%的阳性率,其余抗体均为阴性。（2）抗体阳性的患者主要集中在10～50岁之间,10岁以下和50岁以上的患者比较少,平均年龄35岁。（3）SLE患者ANA-LIA的检测大多数患者的条带在4条以内,随着条带的增多,患者的数量减少。（4）抗ds-DNA抗体与抗SmD1抗体、抗核小体抗体的阳性率有显著差异（P〈0.01）,与抗SS-A/Ro60抗体的阳性率比较无显著差异（P〉0.05）。抗SmD1抗体与抗核小体、抗SS-A/Ro60抗体的阳性率有显著差异（分别为P〈0.05和P〈0.01）,与抗U1-RNP抗体的阳性率无显著差异（P〉0.05）。（5）104例SLE患者的血清免疫球蛋白和补体水平的异常,主要体现在IgG和C3异常。结论自身抗体的检测对SLE的诊断、治疗和疗效观察具有重要意义,多项自身抗体联合检测有利于提高SLE的免疫学诊断的阳性率。     

自身抗体检测在自身免疫性疾病中的价值

目的:探讨ENA(抗可提取性核抗原抗体)、ANA(抗核抗体)和抗ds-DNA抗体(双链DNA抗体)在AID患者中的相关性及敏感性。方法:分析2013年2月至2014年4月在我院接受治疗的AID患者的临床资料。检测入组患者的ENA、ANA、抗ds-DNA抗体表达情况。比较男性、女性的自身抗体阳性情况差异,并探讨不同荧光模式的ANA对应的ENA各项阳性情况以及ANA表达与ENA、抗ds-DNA表达相关性。结果:本研究共纳入研究对象180例,其中男性患者67例,女性患者113例。女性患者的ANA(χ2=12.23,P0.01)、抗ds-DNA阳性率(χ2=5.906,P=0.015)均显著高于男性。nRNP、ss-A阳性标本中的颗粒型ANA比例最高,而Scl-70阳性标本中均质型ANA比例最高;ANA阳性标本的ENA阳性率(χ2=6.406,P=0.011)、抗ds-DNA阳性率(χ2=43.49,P0.01)显著高于ANA阴性的标本。结论:男性自身抗体阳性率明显低于女性,颗粒型在ANA核型中占据比较高的比率,抗ds-DNA和ENA的阳性检出率与ANA阳性率有着一定的关系。     

自身抗体检测在儿童系统性红斑狼疮诊断中的意义

目的探讨抗核抗体(ANA)、抗双链DNA(ds-DNA)、抗ENA抗体检测在儿童系统性红斑狼疮(SLE)诊断中的价值.方法利用酶免疫斑点技术对56例SLE患儿的抗核抗体、抗ds-DNA、抗ENA抗体进行检测.结果56例SLE患儿ANA阳性率最高94.6%,抗ds-DNA阳性率为55.4%,抗Sm/RNP阳性率64.8%,抗SSA/SSB阳性率60.7%.结论SLE患者血清中存在多种自身抗体,自身抗体的联合检测对SLE的诊断和病情的监测有着重要的意义.     

可抽提的核抗原的性质及其抗体的临床意义

本文研究了可抽提的核抗原(Extractable nuclear antigen,简称ENA)的性质及其抗体的临床意义。ENA的两种主要成分是Sm抗原和RNP。Sm抗原有较大的异质性,不同抗Sm血清的相应抗原亦不完全相同。抗Sm抗体对SLE有较高的特异性,阳性率为21％,但与SLE活动和肾损害无关。MCTD病人抗RNP抗体100％阳性。抗Sm抗体和抗RNP抗体与抗ds DNA抗体无关,而与高滴度颗粒型荧光抗核抗体密切相关。     

血清可溶性白细胞介素6受体的检测及其临床意义

以夹心ELISA方法检测30名正常对照者,22份可抽提核抗原(ENA)抗体阳性血清及49名Grave病患者血清sIL-6R水平.结果表明;本方法的灵敏度为80pg/ml,批内及批间误差分别为7.5%和9.6%.正常对照组、Grave病缓解组、Grave病未缓解组及ENA抗体阳性组的血活sIL-6R浓度分别为185.55±53.0ng/ml、191.65±62.0ng/ml、241.67±69.0ng/ml和264.86±108.53ng/ml.经统计学处理Grave氏病未缓解组和ENA抗体阳性组sIL-6R水平明显高于正常对照组对,Grave病缓解组与上常对照组血清sIL-6R浓度无差异提示slL-6R检测在ENA抗体产生中的作用和Grave病监测病情中的价值.     

肿瘤细胞组蛋白的免疫原性研究

为了寻找肿瘤患者血清中多种抗核抗体 (antinuclearantibodies,ANA )生成的新的可能免疫原 ;进一步论证细胞活化是核抗原性发生改变并诱导抗体产生的根本因素。提取SP2 / 0瘤细胞组蛋白免疫同系BALB/c小鼠 ,用ELISA方法检测IgG类抗组蛋白、抗dsDNA抗体 ,免疫荧光法检测ANA核型 ,免疫印迹法测定可溶性核抗原 (ENA )抗体。结果 :SP2 / 0瘤细胞组蛋白诱导同系BALB/c小鼠产生了IgG类抗组蛋白、抗dsDNA、抗Sm、抗SS A/SS B等多种自身ANA ,其核型有周边型、均质型、颗粒型等。推测肿瘤细胞组蛋白是诱导ANA生成的免疫原之一。     

RA33/36抗原的提取、半纯化及 相应抗体的检测

目的　提取、半纯化RA33/ 36抗原 ,探讨RA33/ 36抗体对类风湿关节炎 (RA)诊断的特异性及敏感性。方法　以Ehrlich腹水癌细胞核提取物作粗抗原 ,采用肝素 琼脂糖凝胶CL - 6B层析柱对此粗抗原进行分离半纯化。分别用粗抗原和半纯化抗原作抗原 ,免疫印迹法检测 12 0例RA患者、40例红斑狼疮 (SLE)患者、35例干燥综合征 (SS)患者、2 5例系统性硬化症 (SSc)患者、10例混合性结缔组织病 (MCTD)患者和 30例正常对照血清中的RA33/ 36抗体。结果　①SDS -PAGE示 2种抗原在相对分子质量 (Mr)为 33× 10 3 和 36× 10 3 处均可见条带 ,半纯化抗原杂带较粗抗原明显减少。②与粗抗原相比 ,半纯化抗原免疫印迹反应条带明显减少 ,且特别清晰 ,但阴性和阳性结果相同。③RA36抗体并不总是与RA33抗体以 2条带的形式同时出现。④RA33抗体和RA36抗体对RA诊断的敏感性差异无显著性 ,而特异性RA36抗体优于RA33抗体。⑤RA36抗体与RF、APF、ESR、关节相X线分期、关节功能分级无明显相关性。结论　半纯化抗原可直接用于检测RA33/ 36抗体 ,或用其作质量控制 ;RA36抗体可能是RA的一种可作为标记的特异性抗体 ,应对此抗体进行更深入研究。     

核不均一性胞核核糖核蛋白Ⅰ(hnRNPI)抗原表位在系统性硬化症中临床意义的研究

目的探讨核不均一性胞核核糖核蛋白I(hnRNPI)抗原表位多肽在系统性硬化症(systemic sclerosis,SSc)中的临床意义,初步建立简便快捷的ELISA检测方法,为系统性硬化症的早期诊断寻找新的临床指标。方法根据已知的hnRNPI蛋白的氨基酸序列,应用不同的蛋白质抗原表位图谱分析软件对其进行表位分析,经比对筛选后,化学合成hnRNPI短肽序列2个,分别命名为I-1_(264-292)及I-2_(441-461),作为抗原对临床上包括硬皮病在内的多种结缔组织病患者血清相应抗体进行ELISA检测,包括SSc 42例、系统性红斑狼疮(SLE)102例、干燥综合征(SS)26例、混合型结缔组织病(MCTD)16例、未分化结缔组织病(UCTD)13例,其他结缔组织病(CTD)30例、类风湿关节炎(RA)26例及正常对照54例。结果抗hnRNPI-1及抗hnRNPI-2多肽抗体在SSc组中阳性率均明显高于其他疾病组(P<0.05),在SSc中敏感性分别为47.62%及38.1%,特异性分别为93.43%及91.08%,二者之间差异无统计学意义(P>0.05)。另外,除了与SSc患者病程相关外,该二抗体均与发病年龄、临床症状、器官受累、ESR、抗Scl-70抗体、抗着丝点抗体及抗核仁抗体之间未发现有统计学意义的相关性(P>0.05)。结论I-1及I-2分别是位于hnRNPI蛋白表面的抗原表位之一,具有抗原性,其抗体对SSc的临床诊断具有较高的敏感性及特异性,且在病程早期具有更高的阳性率,有助于SSc的早期诊断。