MMP2、TIMP2在子宫颈鳞癌中的表达及其意义

【目的】探讨MMP2、TIMP2在子宫颈鳞癌组织的表达及其意义。【方法】采用免疫组织化学S P法 ,分别检测 4 5例子宫颈鳞癌组织、30例宫颈上皮内瘤样病变 (cervicalintraepithelialneoplasia ,CIN)和 14例正常宫颈组织中MMP2、TIMP2的表达情况。【结果】MMP2、TIMP2在子宫颈鳞癌、CIN、正常宫颈组织中的阳性表达率分别为 82 .2 %、80 .0 % ;4 3.3%、5 0 .0 % ;2 1.4 %、35 .7%。鳞癌组的MMP2表达与CIN组及正常组相比差异有显著性 (P <0 .0 1)。TIMP2的鳞癌组与CIN组及正常组相比差异有显著性意义 (P <0 .0 1)。MMP2的阳性表达率与患者 3年生存期呈密切相关 (P <0 .0 5 )。MMP2、TIMP2的表达与肿瘤大小、临床分期及病理分级均无明显相关性。【结论】MMP2、TIMP2的过度表达与子宫颈癌的发展有密切关系 ,可作为临床预测其预后的重要指标。     

人类乳头状瘤病毒感染与食管鳞状细胞癌发生的关系

【目的】研究人类乳头状瘤病毒感染与食管鳞状细胞癌发生的关系。【方法】利用免疫组织化学技术检测65例食管癌、14例非典型增生食管上皮和51例正常食管黏膜组织中人类乳头状瘤病毒（HPV）16／18E6蛋白的表达。【结果】在正常食管黏膜、非典型增生上皮及鳞状细胞癌组织中HPV16／18E6的阳性率分别为13．7％（7／51）、42．9％（6／14）和73．8％（48／65）．癌组织中HPV16／18E6蛋白的阳性表达率明显高于非典型增生上皮和正常食管黏膜（P〈0．05）。非典型增生上皮中HPV16,18E6蛋白的阳性表达率亦明显高于正常食管黏膜（P〈0．05）;在食管鳞状细胞癌组织中HPV16/18E6的阳性表达率与癌组织的分化程度未见明显关系（P〉0．05）。【结论】高危型HPV16／18型感染可能在食管癌的发生中起重要作用。     

PCNA在子宫颈上皮内瘤变及宫颈癌中的表达及其意义

增殖细胞核抗原(PCNA)是一种反映细胞增殖活性的标志物。为了探讨PCNA在子宫颈上皮内瘤变(CIN)及子宫颈鳞癌中的表达及其临床意义,作者等采用免疫组化方法对患有慢性宫颈炎的宫颈组织,子宫颈上皮内瘤以及子宫颈鳞癌组织中PCNA表达状态进行了检测。     

P16在子宫颈鳞状上皮内瘤变、子宫颈鳞癌的表达及临床意义

目的：检测P16蛋白在子宫颈鳞状上皮病变的表达情况，探讨其在诊断子宫颈上皮内瘤变及子宫颈鳞癌的意义。方法：采用免疫组织化学技术S—P法，检测16例子宫颈鳞癌、60例子宫颈上皮内瘤变、12例子宫颈鳞状上皮反应性增生及10例正常子宫颈的P16蛋白表达情况。结果：正常子宫颈鳞状上皮及子宫颈鳞状上皮反应性增生P16蛋白阳性表达率为0，（0／22）。CIN Ⅰ P16蛋白阳性表达率为57．1％（8／14），均表现为弱阳性表达，表达方式主要为胞浆表达；CINⅡ阳性表达率为83．3％（15／18），主要表现为阳性表达，表达方式为胞核／胞浆共同表达；CINⅢ（原住癌）阳性表达率为100％（28／28），主要表现为强阳性表达，表达方式为胞核／胞浆共同表达，以胞浆表达为明显。P16蛋白在CIN中总阳性表达率为80．5％（51／60），与对照组（正常子宫颈及鳞状上皮反应性增生组）阳性率为0（0／22）相比，差异有统计学意义（P〈0．01）。P16蛋白在子宫颈鳞癌阳性表达率为100％，均为强阳性表达，表达方式为胞核／胞浆共同表达，并以胞浆表达为明显，P16蛋白在宫颈鳞癌的表达中，与癌细胞的分化程度无关（P〉0．05）。结论：P16蛋白的阳性表达情况与CIN的分级关系密切，尤其是高度CIN和鳞状细胞癌，可作为一个免疫组织化学标志物，辅助诊断CIN及子宫颈鳞癌。     

食管鳞状细胞癌组织中细胞凋亡与增殖的研究

目的 :探讨食管鳞状细胞癌组织中细胞凋亡、增殖细胞核抗原 (PCNA )之间的关系及与食管癌发生、发展及预后的关系。方法 :47例原发性食管鳞癌手术切除标本为一组 ,2 0例正常食管黏膜组织为对照组 ,采用免疫组织化学方法及TUNEL法检测其PCNA的表达及细胞凋亡。结果 :癌组织中平均增殖指数 (PI)、平均凋亡指数(AI)及PI/AI比值均较正常组高 (P <0 0 5 )。PI随肿瘤病理分级及临床分期的增加以及淋巴结转移和浸润深度的增加而增高 (P <0 0 5 ) ;AI则随肿瘤病理分级的升高而降低 (P <0 0 5 ) ;PI/AI比值随肿瘤病理分级的升高及淋巴结的转移而增加 (P <0 0 5 )。食管鳞癌组织中PCNA高表达组 (PI >5 0 % )的术后 5年生存率低于PCNA低表达组(PI≤ 5 0 % ) (P <0 0 5 )。结论 :PCNA的异常表达状态能较好地反映食管鳞癌的浸润、转移能力 ,对预后判定有一定价值。增殖凋亡失衡贯穿于食管鳞癌发生、发展的整个过程 ,PI/AI比值有可能作为一个监测肿瘤发生的标志     

MMP-9、PCNA在骨肉瘤中的表达及其临床意义

【目的】研究骨肉瘤组织中基质金属蛋白酶-9（MMP-9）和增殖细胞核抗原（PCNA）的表达及两者的相关性及临床意义。【方法】对54例骨肉瘤组织和20例正常骨组织进行MMP-9和PCNA免疫组化染色。【结果】两者在骨肉瘤组织中的阳性表达明显高于正常组骨组织,且呈正相关（P〈0．05）;MMP-9在骨肉瘤组织中的表达与其临床分期无明显相关性;而与骨肉瘤侵袭软组织及预后有显著相关性。PCNA在骨肉瘤组织中的表达与其临床分期和预后有相关性。【结论】MMP-9和PCNA在骨肉瘤组织的表达明显上调;MMP-9与骨肉瘤的侵袭、转移有关,可作为预测转移潜能的指标。PCNA可作为骨肉瘤增殖的一个指标。     

宫颈鳞癌组织中MTA1蛋白的表达及其意义

目的探讨MTA1蛋白表达与宫颈鳞癌发生发展及浸润转移的关系。方法应用免疫组织化学SP法检测49例宫颈癌组织及其相应的30例癌旁非典型增生组织和49例正常组织中MTA1蛋白及的表达。结果①伴有淋巴结转移组MTA1蛋白阳性表达率高于无淋巴结组,两组间相比差异有统计学意义（P〈0.05）。②浸润至外膜MTA1蛋白的阳性表达率高于深肌层及浅肌层,差异有统计学意义（P〈0.05）;浸润至深肌层组MTA1蛋白的阳性表达率稍高于浅肌层组,两者相比差异无统计学意义（P〉0.05）。③癌组织MTA1蛋白阳性表达率均高于相应的癌旁非典型增生组织及正常宫颈黏膜组织,三者两两相比差异有统计学意义（P均〈0.05）。结论MTA1蛋白在宫颈鳞癌组织表达明显升高,MTA1于宫颈鳞癌的形成及浸润转移密切相关。     

Smoothened蛋白及mRNA在子宫颈鳞状细胞癌组织中的表达及意义

目的探讨Smoothened(Smo)蛋白及mRNA在子宫颈鳞状细胞癌组织中的表达及意义。方法应用免疫组织化学方法及原位杂交法检测70例子宫颈鳞状细胞癌组织、48例子宫颈上皮内瘤变(CIN)组织及65例正常子宫颈黏膜组织中Smo蛋白及mRNA的表达水平,分析Smo基因与子宫颈鳞状细胞癌病理特征的联系。结果 Smo蛋白及mRNA在正常宫颈黏膜组织中呈阴性或弱阳性表达,在CIN和子宫颈鳞状细胞癌组织中呈强阳性,其表达率显著高于正常宫颈黏膜组织(P<0. 05); Smo蛋白的阳性表达率与子宫颈鳞状细胞癌浸润深度、病理学分级、有无淋巴结转移呈正相关(P<0. 05)。结论子宫颈鳞状细胞癌的发生、发展及浸润转移或与Smo蛋白阳性表达率升高有关,有望成为宫颈癌生物治疗的新靶点。     

宫颈癌组织细胞凋亡及PCNA表达的研究

目的检测宫颈鳞癌细胞凋亡与PCNA比值与宫颈癌预后的关系。方法应用原位末端标记法（TUNEL）及免疫组化技术对53例宫颈鳞癌石蜡包埋组织进行检测。结果不同分化程度癌组织中细胞凋亡和增殖细胞核抗原（PCNA）的阳性率不同。分化程度高，细胞凋亡率高；分化程度低，PCNA阳性率高。同时有细胞凋亡和PCNA阳性表达的低分化最高。结论二者的比值可能是判定宫颈癌预后的一个可靠指标。     

PCNA和P21蛋白在子宫内膜癌中的表达及意义

目的探讨P21蛋白和增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclearantigen,PCNA)在子宫内膜癌中的表达及意义。方法应用免疫组织化学SP法检测正常子宫内膜组织20例(对照组)、子宫内膜非典型增生组织9例(非典型增生组)和子宫内膜腺癌组织57例(子宫内膜癌组)中P21蛋白和PCNA的表达情况。结果对照组P21蛋白阳性表达率明显高于非典型增生组与子宫内膜癌组(P<0.05),子宫内膜癌组PCNA高增殖率明显高于对照组与非典型增生组(P<0.05);P21蛋白阳性表达率及PCNA高增殖率在子宫内膜组织的手术-病理分期、分化程度及淋巴结转移方面差异有统计学意义(P<0.05);子宫内膜癌组PCNA高增殖率P21表达阳性者为37%,P21表达阴性者为80%,差异有统计学意义(P<0.05);子宫内膜癌组织P21蛋白阳性表达率与PCNA高增殖率呈负相关(r=-0.414,P=0.002)。结论 P21蛋白和PCNA异常表达可能在子宫内膜癌的发生、发展中起重要作用。     

基于腹腔镜超声的纹理分析鉴别诊断肾透明细胞癌和非透明细胞癌的价值初探

目的 探讨基于腹腔镜超声图像的纹理分析在鉴别诊断肾透明细胞癌与非透明细胞癌中的价值.方法 回顾性分析我院经病理证实的83例肾细胞癌患者的腹腔镜超声检查资料,其中肾透明细胞癌66例,非透明细胞癌17例.在腹腔镜二维超声图像上通过ITK-SNAP软件手工勾画感兴趣区,采用Pyradiomics工具包提取纹理特征.使用组内相关系数选择具有良好稳定性和可重复性的特征;使用最大相关最小冗余(mRMR)和最小绝对收缩和选择算子(LASSO)回归进行特征选择并构建预测模型;绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析该预测模型的诊断效能.结果 基于6个纹理特征构建的预测模型为:Y=-1.452+0.329×wavelet.LL glszm SmallAreaLowGrayLevelEmphasis-0.187×wavelet.LH firstorder Mean-0.209×wavelet.HH glszm SmallAreaLowGrayLevelEmphasis-0.107×original gldm DependenceVariance+0.351×wavelet.LH glrlm RunEntropy+0.058×wavelet.HH glszm ZonePercentage.该模型鉴别肾透明细胞癌与非透明细胞癌的ROC曲线下面积、敏感性、特异性和准确率及其对应的95例可信区间分别为0.860(0.771～0.945)、0.765(0.529～0.941)、0.864(0.788～0.939)、0.843(0.747～0.914).结论 基于腹腔镜超声图像的纹理分析可以准确鉴别肾透明细胞癌与非透明细胞癌.     

T-淋巴瘤细胞的超微结构

为了研究T细胞淋巴瘤患者骨髓中恶性T细胞（malignant T cell，MTC）的超微结构，用流式细胞术分析13例T细胞淋巴瘤患者骨髓浸润MTC抗原表达，电子显微镜观察MTC的形态结构。结果发现：所有患者MTC大小不等，6／13例细胞大小轻度不均，7例显著不均，直径范围在12-28μm之间。所有患者MTC核异染色质少于正常淋巴细胞，核仁范围在2-8μm之间；10／13例细胞核不规则。8／13例MTC胞浆丰富；7／13例细胞表面有丰富的突起或伪足。5／13例Golgi体、分泌泡、致密颗粒和微丝较丰富；8／13例MTC线粒体肿胀明显。结论：骨髓MTC体积普遍不均匀增大；细胞核折叠、切迹、扭曲与核旁微丝增加相关。患者MTC表面突彤绒毛与胞浆Golgi体、分泌泡、致密颗粒及中间微丝呈明显同步发育，大部分患者MTC线粒体明显水肿。     

X线对舌鳞癌细胞系Tca8113细胞周期的影响

目的:探讨放射线对人舌鳞癌细胞系Tca8113细胞周期变化的影响。方法:采用流式细胞仪检测不同剂量X线照射后不同时间点的细胞周期变化。结果:人舌鳞癌细胞系Tca8113与未照射细胞相比,经X线处理后,S期减少,G2/M期阻滞程度具有剂量和依赖性,G2/M期阻滞在12 h与24 h时与照射剂量呈正相关。在12 h或24 h达到阻滞高峰后,48 h的结果显示最大峰值回落。结论:人舌鳞癌细胞系Tca8113细胞X线照射后存活后代生长延缓,放射敏感性增高,呈S细胞减少和G2期阻滞。     

宫颈永生化细胞和癌细胞的亚细胞蛋白质组学初步研究

目的通过蛋白质双向凝胶电泳方法（2-DE）建立人类乳头状瘤病毒．16阳性的宫颈上皮永生化细胞（H8细胞株）和宫颈癌细胞（Caski细胞株）亚细胞（细胞质、细胞膜、细胞核）蛋白电泳图谱,进行差异蛋白质组学研究筛选差异蛋白点。方法分别对H8和Caski细胞提取细胞质、细胞膜和细胞核蛋白,通过2-DE筛选出差异点进行基质辅助激光解吸飞行时间串联质谱（MALDI-TOF-MS／MS）分析。结果对H8细胞和Caski细胞亚细胞蛋白双向电泳图谱比较,初步比较筛选了6种细胞质差异蛋白点、3种细胞膜差异蛋白点和9种细胞核差异蛋白点。结论通过对HPV-16阳性的宫颈癌前和癌变的亚细胞结构差异蛋白进行分析,为寻找宫颈癌特异性肿瘤标志物和靶向治疗提供实验依据。     

肿瘤细胞裂解物致敏的树突状细胞对肝癌HepG2细胞杀伤的体外研究

目的：探讨肿瘤细胞裂解物致敏的树突状细胞（DC）作为佐剂对肝癌HepG2细胞系的杀伤作用。方法：反复冻融法裂解培养的肝癌HepG2细胞提取细胞抗原,然后致敏Dc,观察后者对自身T淋巴细胞增殖的影响以及T细胞对HepG2细胞的杀伤作用。结果：肝癌HepG2细胞裂解物致敏的DC能显著促进T细胞的增殖。后者对细胞有明显的杀伤效应。结论：肿瘤细胞裂解物提取方法简单,其作为细胞抗原致敏DC制备的肿瘤疫苗能保证抗肿瘤免疫反应的全面性和有效性,并降低可能出现的肿瘤免疫耐受,将有很好的临床应用前景。     

Cell microarrays

In the postgenomic era, DNA and protein arrays are increasing the speed at which knowledge is gathered on gene expression in cells and tissues. At the same time, researchers realize that a miniaturized and parallelized analysis of whole cells may equally expedite the acquisition of data describing cellular properties and function. Researchers are starting to explore means of generating and using cell microarrays to investigate cells at higher throughput. In this initial phase of exploration, cell microarrays are being developed for various cellular analyses including the effects of gene expression, cellular reactions to the biomolecular environment, and profiling of cell surface molecules. This article will provide an overview of different types of eukaryotic cell microarrays described to date, how they are generated, and their fields of application.     

Cell Envelope Stress Response in Cell Wall-Deficient L-Forms of Bacillus subtilis

L-forms are cell wall-deficient bacteria that can grow and proliferate in osmotically stabilizing media. Recently, a strain of the Gram-positive model bacterium Bacillus subtilis was constructed that allowed controlled switching between rod-shaped wild-type cells and corresponding L-forms. Both states can be stably maintained under suitable culture conditions. Because of the absence of a cell wall, L-forms are known to be insensitive to β-lactam antibiotics, but reports on the susceptibility of L-forms to other antibiotics that interfere with membrane-anchored steps of cell wall biosynthesis are sparse, conflicting, and strongly influenced by strain background and method of L-form generation. Here we investigated the response of B. subtilis to the presence of cell envelope antibiotics, with regard to both antibiotic resistance and the induction of the known LiaRS- and BceRS-dependent cell envelope stress biosensors. Our results show that B. subtilis L-forms are resistant to antibiotics that interfere with the bactoprenol cycle, such as bacitracin, vancomycin, and mersacidin, but are hypersensitive to nisin and daptomycin, which both affect membrane integrity. Moreover, we established a lacZ-based reporter gene assay for L-forms and provide evidence that LiaRS senses its inducers indirectly (damage sensing), while the Bce module detects its inducers directly (drug sensing).     

肿瘤细胞生物治疗中单个核细胞采集的影响因素分析

目的:探讨在肿瘤细胞生物治疗单个核细胞采集中,影响终产品单个核细胞计数(mononuclear cell,MNC)和采集效率(collection efficiency,CE)的因素。方法:对共计142例肿瘤患者和健康供者的采集数据进行分析,包括年龄、性别、身高、体重、身体质量指数(body mass index,BMI)、全身血容量、诊断类别、血管通路、操作者、终产品量、ACD抗凝剂用量、流速、循环次数、采前血红蛋白(Hb)、红细胞计数(RBC)、血小板计数(Plt)、白细胞计数(WBC)、淋巴细胞计数、单核细胞计数、中性粒细胞计数、去掉抗凝剂的循环血量、终产品单个核细胞计数和单个核细胞的采集效率。其中单个核细胞CE(%)=终产品MNC×100/(采前MNC×去掉抗凝剂的循环血量)。采用T检验和多元线性回归分析研究影响终产品MNC和CE的因素。结果:肿瘤患者的CE高于健康供者(24.41±1.91,20.01±0.99,P=0.043),不同操作者之间CE不同(P=0.01,H=18.59)。终产品MNC与终产品容量、ACD抗凝剂用量、采前淋巴细胞计数呈正相关(P=0.00,P=0.01,P=0.00,r=0.811);MNC的CE与流速、采前RBC计数呈负相关,与操作者工作年限、ACD抗凝剂用量呈正相关(P=0.01,P=0.04,P=0.03,P=0.00,r=0.495)。结论:采前淋巴细胞计数越高、ACD抗凝剂用量和终产品容量越多,终产品MNC越多;ACD抗凝剂用量越多,操作者资历越高单个核细胞CE越高;采前RBC越高、采集流速越快,单个核细胞CE越低。