妊娠中晚期SD大鼠胰岛功能研究

目的 研究妊娠中晚期SD大鼠的葡萄糖耐受能力及胰岛素分泌状况.方法 选择妊娠15 d的SD大鼠作为实验组(n=6),以同批次未妊娠雌性SD大鼠作为对照组(n=6).两组大鼠分别行腹腔内注射葡萄糖耐量试验(IPGTT).原位胶原酶灌注法分离SD大鼠胰岛,倒置相差显微镜观察胰岛形态;放射免疫学法测定葡萄糖刺激后胰岛细胞的胰岛素分泌水平.结果 IPGTT结果显示,实验组大鼠葡萄糖负荷后30、60、90和120 min时点的血糖值均明显低于对照组(P<0.05或P<0.01).与对照组比较,实验组大鼠胰岛体积明显增大,胰岛细胞致密度增加.含16.7 mmol/L葡萄糖的KRB缓冲液刺激1 h时,实验组大鼠胰岛素分泌水平明显高于对照组(P<0.01).结论 妊娠中晚期SD大鼠的葡萄糖耐受能力及经葡萄糖刺激的胰岛素分泌能力均明显增强.     

外源性胰岛素对于胰岛素一相分泌的影响

目的：探讨外源性胰岛素对离体大鼠胰岛第一时相胰岛素分泌的影响．方法：雄性SD大鼠胰腺采用V型胶原酶经胰管灌注消化分离得到胰岛，用100μU／mL外源性胰岛素分别孵育0，60，120和240min（n=8）后，给予葡萄糖刺激，分别测定0，3，5，10和30min胰岛素分泌量．结果：不同时间胰岛素预处理后，各组在葡萄糖刺激时均产生胰岛素第一时相分泌（P〈0．05），但随着胰岛素孵育时间的延长，胰岛素第一时相分泌峰值降低（P〈0．01）．结论：100μU／mL外源性胰岛素损害胰岛素第一时相分泌，且孵育时间越长，抑制程度越明显．     

JAK2/STAT5通路在胰岛对妊娠适应中的作用

目的 探讨妊娠中晚期SD大鼠胰岛功能增强的机制.方法 以妊娠15d的SD大鼠(实验组,n=24)和同批次未妊娠的雌性SD大鼠(对照组,n=24)作为实验对象.通过位灌注胰岛分离的方法获得单个胰岛,用胰酶消化胰岛,形成单个细胞,原代分离的胰岛加入含5.6 mmol/L葡萄糖和15％ FBS的DMEM培养基终止消化,用含2.8 mmol/L葡萄糖(对照)或5.6 mmol/L葡萄糖的KRB缓冲液培养1h,利用全细胞膜片钳记录B细胞膜电压依赖型钾通道(Kv)电流.采用Real-Time PCR技术测定胰岛JAK2/STAT5通路的关键分子催乳素受体(PRLR)、Janus蛋白酪氨酸激酶(JAK2)、信号转导和转录激活子5(STAT5A和STAT5B)、葡萄糖代谢的关键分子葡萄糖转运体2(GLUT2)、葡萄糖激酶(GK),以及胰岛素分泌相关的分子ATP敏感性钾通道(KATP)、电压依赖性钙通道(VDCC)mRNA的表达.结果在10～60 mV膜电压条件下,实验组大鼠在5.6 mmol/L葡萄糖刺激下,胰岛单个R细胞细胞膜Kv电流显著低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).实验组大鼠胰岛组织PRLR、JAK2、STAT5A、STAT5B、GLUT2、VDCC、KATP mRNA的相对表达量上调,分别为对照组的2.50、1.84、1.54、2.45、1.41、1.68、1.55倍(P＜0.05或P＜0.01),两组大鼠胰岛组织GK mRNA的相对表达量比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 妊娠中晚期SD大鼠胰岛功能增强可能与催乳素促进JAK2/STAT5通路、葡萄糖代谢及胰岛素分泌相关分子的表达有关,为糖尿病的治疗提供了新的思路.     

Roux-en-Y胃旁路术与外源性胰岛素治疗2型糖尿病大鼠疗效分析

目的：对链脲佐菌素引起的2型糖尿病大鼠采用胃旁路术（GBP）与外源性胰岛素治疗,观察和比较两者的近期疗效以及治疗后大鼠的胰岛细胞数目变化情况。方法：选择体格健壮的67只大鼠,采用腹腔注射链脲佐菌素的方式建立2型糖尿病研究模型,随机分为对照组（n=20）、胰岛素组（n=20）、GBP组（n=27）,术前和术后1、4、12周动态监测3组大鼠的体重、空腹血糖以及空腹C肽,术后12周处死大鼠,进行胰岛素免疫组化分析,并观察大鼠的胰岛数目以及胰岛的分泌情况。结果：术后4、12周,GBP组体重与对照组、胰岛素组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。术后GBP组、胰岛素组空腹血糖明显下降（P〈0．05）。术后4、12周,GBP组、胰岛素空腹C肽明显高于对照组（P〈0．05）;术后12周,GBP组空腹C肽明显高于胰岛素组（P〈0．05）,平均胰岛数量明显高于对照组和胰岛素组（P〈0．05）,胰岛素免疫组化平均灰度值明显低于对照组和胰岛素组（P〈0．05）。结论：采用短期内胃旁路术治疗2型糖尿病大鼠的胰岛细胞出现增生,大鼠的胰岛素分泌液得到改善,疗效优于外源性胰岛素的治疗效果,其长期疗效需进一步分析。     

游离脂肪酸对大鼠胰岛分泌功能和胰岛细胞凋亡的影响研究

目的：研究游离脂肪酸对体外培养SD大鼠胰岛功能和胰岛细胞凋亡的影响并探讨可能机制。方法：取健康雄性SD大鼠胰岛原代分离培养,分为6组,培养1d：NC1组（5．6mmol／L葡萄糖）、FFA1组（0．25mmol／L）、FFA2组（0．5mmol／L）;培养3d：NC2组（5．6mmol／L葡萄糖）、FFA3组（0．25mmol／L）、FFA4组（0．5mmol／L）;每组6个样本,每个样本20个胰岛。采用RT—PCR扩增胰岛素、PDX-1、Bax、Caspase-3基因mRNA表达,TUNEL法检测胰岛细胞凋亡率,放射免疫法检测胰岛素水平。结果：①FFA1、FFA2组Insulin、PDX-1基因表达量、胰岛素分泌较NC1组明显下降,FFA1、FFA2组凋亡基因Bax、Caspase-3表达量及胰岛细胞凋亡率较NC1组明显升高,差异有统计学意义（P〈0．05）;②FFA3、FFA4组Insulin、PDX-1基因表达量、胰岛素分泌较NC2组明显下降,FFA3、FFA4组凋亡基因Bax、Caspase-3表达量及胰岛细胞凋亡率较NC2组明显升高,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：游离脂肪酸抑制体外培养SD大鼠胰岛细胞的胰岛素分泌功能,其可能机制是FFA抑制胰岛素基因、PDX-1基因的合成,刺激胰岛细胞凋亡基因Bax、Caspase-3表达,并导致胰岛细胞凋亡,最终导致胰岛细胞分泌功能下降。     

软脂酸对美吡哒和高糖刺激大鼠胰岛β细胞功能抑制作用的研究

目的 观察软脂酸对美吡哒和高糖刺激的大鼠胰岛细胞β细胞功能的影响。方法 以0、0．25、0．5、1．0mmol/L软脂酸原代培养SD大鼠胰岛细胞,在24h、72h、120h测定上清胰岛素、葡萄糖浓度及细胞内胰岛素。结果 在不同培养时间不合软脂酸组上清中胰岛素、葡萄糖及细胞内胰岛素含量差别无统计学意义（P〉0．05）;而含软脂酸组随软脂酸浓度增加和培养时间延长,胰岛素分泌量、葡萄糖利用量和细胞内胰岛素含量逐渐减少（P〈0．05）。结论 在体外软脂酸抑制了美吡哒和高糖刺激的大鼠胰岛β细胞功能,这种抑制作用与胰岛细胞本身胰岛素抵抗相关。     

盐酸多奈哌齐对血管性痴呆大鼠海马CA1区caspase-3的表达及神经细胞凋亡的影响

目的观察盐酸多奈哌齐对血管性痴呆（VD）大鼠海马CA1区神经细胞凋亡及凋亡因子caspase-3表达变化的影响,探讨其可能的保护机制。方法应用双侧颈总动脉结扎法建立血管性痴呆大鼠动物模型,48只雄性SD大鼠随机分为：对照组（n=16）、实验组（n=16）和盐酸多奈哌齐干预组（n=16）。通过Morris水迷宫实验观察认知行为学改变,免疫组化法及原位凋亡（TUNEL）法检测大鼠海马CA1区caspase-3的表达及凋亡细胞。结果水迷宫实验发现与对照组相比,实验组和干预组大鼠逃避潜伏期延长,但干预组与实验组相比明显缩短（P〈0．01）;实验组和干预组caspase-3阳性细胞表达及凋亡细胞数量均较对照组明显增高（P〈0．01）,但二者在干预组的表达较实验组明显降低（P〈0．01）。结论盐酸多奈哌齐可以改善VD大鼠的行为学症状,抑制大鼠脑组织caspase-3的表达并减少凋亡发生。     

高脂高糖饮食诱导的2型糖尿病大鼠血清瘦素水平变化的研究

目的 研究分析2型糖尿病大鼠血清瘦素水平的变化及其与血糖、胰岛素之间的关系。方法 用自动生化分析仪分别测定实验组（由高脂高糖饲料与链脲佐菌素注射液诱导而成）和对照组（用常规饲料喂养）大鼠的血糖等各项生化指标，用放射免疫分析法分别测定实验组和对照组大鼠的瘦素、胰岛素等指标并进行分析。结果 实验组大鼠的胰岛素水平与对照组无显著差异（P=0．9940），瘦素水平则显著低于对照组（P=0．0042）：而血糖、总胆固醇则实验组明显高于对照组（P=0．015、0．0109）。结论 大鼠在2型糖尿病状态下，高血糖抑制胰岛素刺激脂肪组织分泌瘦素的效应而使瘦素水平降低。     

高脂喂养大鼠常用胰岛素敏感性测定方法的评估

目的探讨高脂喂养大鼠常用胰岛素敏感性测定方法与正糖高胰岛素钳夹技术的相关性。方法30只雄性Wistar大鼠随机分为2组,正常对照组（NC,n=15）和高脂喂养组（HF,n=15）,分别给予基础饲料和高脂饲料喂养,喂养10周后进行正糖高胰岛素钳夹试验、胰岛素耐量试验和葡萄糖耐量试验,进行大鼠胰岛素敏感性相关指标测定及指标间相关性分析。结果HF组大鼠葡萄糖输注率[GIR（0．90±0．15VS4．97±0．68）mg·kg^-1·min^-1,P〈0．01]和胰岛素耐量试验血糖自然对数的下降斜率KITT（24．41±6．77v548．61±4．71,P〈0．01）均显著低于Nc组,且KITT与GIR呈显著相关（r=-0．911,P〈0．01）。结论胰岛素耐量试验与正糖高胰岛素钳夹试验相关性显著。     

外源性胰岛素对于胰岛素一相分泌的影响

目的:探讨外源性胰岛素对离体大鼠胰岛第一时相胰岛素分泌的影响.方法:雄性SD大鼠胰腺采用Ⅴ型胶原酶经胰管灌注消化分离得到胰岛,用100 μU/mL外源性胰岛素分别孵育0,60,120和240 min(n=8)后,给予葡萄糖刺激,分别测定0,3,5,10和30 min胰岛素分泌量.结果:不同时间胰岛素预处理后,各组在葡萄糖刺激时均产生胰岛素第一时相分泌(P＜0.05),但随着胰岛素孵育时间的延长,胰岛素第一时相分泌峰值降低(P＜0.01).结论:100 μU/mL外源性胰岛素损害胰岛素第一时相分泌,且孵育时间越长,抑制程度越明显.     

长程高脂饲料对雌雄大鼠胰岛功能损害差异的探讨

目的动态观察长程高脂饲料对雌雄大鼠糖耐量和胰岛素作用的影响，并探讨其可能的机制。方法取正常SD大鼠100只，抽签式随机分组，其中雄性和雌性大鼠普通饲料组各20只，雄性和雌性大鼠高脂饲料组各30只。每个月动态监测大鼠体质量及空腹血糖的变化，在第14个月时进行腹腔注射糖耐量试验（IPGTT），检测葡萄糖耐量减退（IGT）的情况，测定第14个月时的空腹胰岛素分泌量及大鼠胰腺组织匀浆液中线粒体和微粒体的丙二醛（MDA）、谷胱甘肽（GSH）和过氧化氢酶（calalase，CAT）水平。结果第14个月时无论普食组或高脂组雄性大鼠腹腔注射糖耐量都受损，而雌性大鼠都未达到糖耐量受损，腹腔糖耐量测试表明雌雄大鼠在120min时血糖有显著性差异（P〈0．05）；14个月时高脂组雄性大鼠空腹胰岛素分泌量显著高于雌性大鼠（P〈0．05）；胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）显示高脂组雄性大鼠胰岛素抵抗程度较雌性大鼠显著升高（P〈0．05）；早相胰岛素分泌功能显示经过长程高脂喂养，雄性大鼠早相胰岛素分泌功能显著低于雌性大鼠（P〈0．05）；胰腺组织匀浆液中线粒体的MDA、细胞质的GSH和CAT的水平雌雄大鼠间虽然无显著性差异（P〉0．05），但总体趋势是无论是普食组还是高脂组，雄性大鼠氧化应激水平都高于雌性大鼠，抗氧化应激水平都低于雌性大鼠。结论雌性大鼠具有抵抗高脂诱导的糖耐量受损作用，其胰腺组织氧化应激水平较低可能是机制之一。     

黄芪多糖对2型糖尿病早期大鼠视网膜Muller细胞Kir2.1表达的影响

目的:探讨黄芪多糖对链脲佐菌素(STZ)诱导的2型糖尿病大鼠早期视网膜Muller细胞Kir2.1表达的影响。方法:雄性SPF级SD大鼠随机分为:正常对照组(C组,n=10),黄芪多糖对照组(CA组,n=10),饲以正常饲料;通过高脂饮食加小剂量STZ诱导复制2型糖尿病大鼠模型,将血糖>13.9 mmol/L者随机分为糖尿病组(DM组,n=8)及黄芪多糖治疗组(DA组,n=8)。治疗前后观察血糖、口服葡萄糖耐量变化。从4组大鼠视网膜提取总mRNA,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测Kir2.1 mRNA的表达。结果:DM组血糖显著高于C组,同时伴有明显的糖耐量下降(P<0.01),经黄芪多糖治疗8周后,DA组血糖降低,与DM组比较糖耐量改善(P<0.01)。RT-PCR扩增的Kir2.1 cDNA产物在DM组表达比在C组下降,而在CA组表达较DM上升(P<0.05),但在C组与CA组中未出现这种显著性的改变(P>0.05)。结论:黄芪多糖能够降低血糖,糖尿病大鼠早期视网膜Muller细胞Kir2.1蛋白表达下降,而黄芪多糖对于逆转这一早期的改变可能起到一定作用,从而起到减少糖尿病视网膜病变发病率的作用。     

袖状胃切除附加改良空回肠旁路术对GK大鼠血糖和血脂代谢的影响

目的 探讨袖状胃切除附加改良空回肠旁路术对非肥胖2型糖尿病动物模型(GK大鼠)血糖和血脂代谢的影响.方法 随机将 21只GK大鼠分为袖状胃切除附加改良空回肠旁路术(SG/MJIB)组9只、假手术(sham-SG/MJIB)组6只和饮食配对(PF)组6只.动态观察手术前和术后16周中各组大鼠体重、进食量、空腹血糖、葡萄糖...     

Risk factors for development of diabetes mellitus in women with a history of gestational diabetes mellitus

Objective To determine whether diabetes recurs in their later life when women have a history of gestational diabetes mellitus (GDM) or abnormal glucose tolerance test (impaired glucose tolerance, IGT). Methods Three groups of women were investigated at 5-10 years postpartum. GDM group (n=45) had been diagnosed as having GDM in their previous pregnancy. IGT group (n=31) had a history of abnormal glucose tolerance test during previous pregnancy. Normal control group (n=39) was normal previous pregnant population. Their previous obstetric and medical histories were thoroughly reviewed. Fasting plasma glucose (FPG) and oral glucose (75 g) tolerance test (OGTT) were repeated in all women. Results Diabetes mellitus (DM) was diagnosed in 33.3% of patients in the GDM group, while in 9.7% in the IGT group and in 2.6% in the normal control group. Incidence of recurring DM in later life was significant higher in the GDM group (P=0.017). When one or more blood glucose values exceeding WHO criteria for diagnosis of diabetes in their previous pregnancy, the incidence of DM in later life was 60% (3/5, including GDM in women having four abnormal OGTT values), 41.7% (5/12) in women having three, 25% (7/28) in women having two and 9.7% (3/31) in women having one. The women with DM, also with a history of GDM and abnormal OGTT in previous pregnancy, tends to have a high pregnant body mass index (BMI &gt;25 kg/m(2)). Conclusion The women suffering from GDM during previous pregnancy have a high risk of recurrence DM. Two or more abnormal OGTT values during pregnancy, blood glucose level exceeding the maximal values at 1 and 2 hours after oral glucose loading and high pregnant BMI are concluded to be useful factors in predicting the recurring DM in their later life.     

Reference values for 75 g oral glucose tolerance test in pregnancy

A 75 g oral glucose tolerance test was performed in 212 pregnant women with no predisposing factors suggesting glucose intolerance to establish the normal pattern of glucose metabolism in pregnancy. Reference values for the test were established for the middle of pregnancy (14-20 weeks, n = 43) and late pregnancy (28-37 weeks, n = 168). One woman was excluded because she had diabetes that required treatment with insulin. There were statistically significant differences between the two groups for samples taken both one and two hours after the glucose load. Reference ranges for the interpretation of the glucose tolerance test in pregnancy should therefore take account of the period of gestation. Arbitrary upper limits of normal (represented by the 97.5 centile) two hours after a 75 g oral glucose load are proposed at 7.5 and 9.6 mmol/l for the second and third trimesters, respectively.     

筛选妊娠糖尿病巨大儿大鼠模型的新方法

目的建立妊娠糖尿病巨大儿大鼠模型。方法SD雌性大鼠腹腔注射链脲佐菌素（streptozotoein，STZ）25mg／kg，之后与同系雄性大鼠合笼见栓者定为孕0d。孕6d测定血糖高出孕前20％者为模型组（M组），与正常对照组（C组）继续妊娠至孕21d行剖腹产术，分离胎鼠。结果M组胎鼠体重、身长、尾长均显著大于C组（均P〈0．001）、胎鼠血糖高于C组（P〈0．001）。结论腹腔注射25mg／kg STZ后挑选孕6d血糖高于孕前20％者可复制妊娠糖尿病巨大儿大鼠模型。     

糖代谢异常孕妇血糖水平与发生巨大儿的关系探讨

目的探讨妊娠期糖代谢异常孕妇葡萄糖耐量试验（OGTT）血糖水平与巨大儿发生的关系。方法分析125例妊娠期糖尿病（GDM）孕妇和21例妊娠期糖耐量受损（GIGT）孕妇的临床资料,根据分娩情况分为巨大儿组（n=36）和非巨大儿组（n=110）。采用t检验、χ2检验和多因素Logistic回归分析妊娠期糖代谢异常孕妇OGTT血糖水平与巨大儿发生的关系。结果①两组孕妇空腹血糖（FPG）和OGTT 1 h血糖差异有统计学意义（P〈0.05）,50 g葡萄糖筛查（GCT）值、OGTT 2 h血糖和OGTT3 h血糖差异无统计学意义（P〉0.05）。②孕妇FPG〈5.3 mmol/L各水平级别相对危险度（OR值）均〈1,发生巨大儿风险较低;FPG≥5.3 mmol/L各水平级别OR值均〉1,为巨大儿发生的危险因素。③孕期随体质量增加,OR值增高;体质量增加越快,巨大儿发生的风险越高;FPG〉5.1 mmol/L,体质量增长〉16～18 kg的孕妇其巨大儿发生率明显升高。结论妊娠期糖代谢异常孕妇FPG水平升高为发生巨大儿的主要危险因素,孕期血糖控制不佳可能导致巨大儿及相关并发症发生。     

十二指肠腔内套管置入术改善非肥胖型2型糖尿病大鼠糖代谢的作用

目的观察十二指肠腔内套管置入术（endoluminalsleeve,ELS）对非肥胖型2型糖尿病（type2 dabetesmellitus,T2DM）大鼠糖代谢的影响。方法24只雄性自发性糖尿病Goto—Kakizaki（GK）大鼠按随机数字表法分为手术（ELS）组和假手术（sham-operation,SO）组,每组12只。观察术前（0周）,术后1、3、6、12、24周2组空腹血糖（fastingplasmaglucose,FPG）水平,术前（0周）,术后6、24周行口服葡萄糖耐量试验（oralglucosetolerancetest,OGTT）,描绘血糖随时间变化曲线,计算葡萄糖耐量曲线下面积（areaunderthecurve,AUC）,并测定葡萄糖负荷2h后胰高血糖素样肽-1（glucagon-likepeptide-1,GLP-1）水平。结果术前2组大鼠间各项指标差异无统计学意义;与术前比较,ELS组术后1、3、6、12、24周FPG显著降低,差异有统计学意义（F组内=5．982,P=0．023）,术后6、24周AUC、血糖峰值低于术前,差异有统计学意义（F组内=11．602,P=0．003）,且OGTT血糖峰值出现时间由原来的60min提前到30min,葡萄糖负荷后的GLP-1水平明显升高,差异有统计学意义（F组内=43．24,P=0．012）;SO组术后各指标差异无统计学意义。结论十二指肠腔内套管置入术对非肥胖型T2DM大鼠具有稳定控制血糖和改善糖耐量的作用。     

胰岛素抵抗大鼠血糖正常阶段胸主动脉内皮超微结构改变

目的　观察胰岛素抵抗(IR)大鼠血糖正常阶段胸主动脉内皮超微结构改变。方法　高糖饲料喂养SD大鼠 12周复制IR模型。普通饲料喂养的SD大鼠为正常对照。透射电镜观察胸主动脉内皮超微结构。结果　与正常大鼠相比,IR大鼠收缩压(SBP)、血清三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇 (LDL C)、游离脂肪酸(FFA)、胰岛素(Ins)水平均显著升高(P值均<0. 01), 胰岛素敏感指数 (ISI)、血清高密度脂蛋白胆固醇 (HDL C)均显著降低(P值均<0. 01)。空腹血糖(FBG)、餐后 2h血糖(PBG2h)的差异无显著性 (P>0. 05)。电镜观察IR大鼠胸主动脉内皮可见部分内皮细胞和内皮下结构的病理改变。结论　高糖膳食诱发的IR大鼠在血糖正常阶段已存在胸主动脉内皮超微结构的病理改变。