非小细胞肺癌端粒酶活性的相对定量检测

应用端粒酶聚合酶链反应 (PCR) -酶联免疫吸附测定 (ELISA)法 ,检测手术切除标本中肺癌组织、癌旁组织及正常肺组织端粒酶活性。结果显示 :1 5例肺癌组织端粒酶活性为 0 84± 0 3 8;其中 8例鳞癌为 0 82± 0 3 9,7例腺癌为 0 86± 0 3 9,明显高于 1 5例癌旁组织 0 1 6± 0 0 3和 3例正常肺组织 0 1 4± 0 0 2 (均P <0 .0 0 1 )。以吸光度A450>0 .2 0为阳性 ,1 5例肺癌组织端粒酶活性阳性率为 86 7% (1 3 /1 5 ) ;其中腺癌阳性率为 85 7% (6 /7) ,鳞癌阳性率为87 5 % (7/8) ;而 1 5例癌旁组织和 3例正常肺组织端粒酶活性表达均为阴性。提示端粒酶活性可作为非小细胞肺癌诊断的特异性较强的分子标记物 ;TRAP PCR ELISA法检测端粒酶活性具有方法简便 ,结果可靠。     

非小细胞肺癌端粒酶活性表达及其临床意义

目的 :探讨非小细胞肺癌组织端粒酶活性表达及其临床意义。方法 :应用TRAP -PCR -ELISA方法检测36例非小细胞肺癌组织及相应的 32例癌旁组织 ,9例肺良性病变组织和 9例正常肺组织中端粒酶活性表达。结果 :肺癌组织中端粒酶活性表达阳性率为 75 % (2 7/ 36 ) ,癌旁组织为 6 .2 5 % (2 / 32 ) ,肺良性病变组织为 11.1% (1/ 9) ,正常肺组织为 0 % (0 / 9)。肺癌组织端粒酶活性表达与肺癌病理类型、组织分化程度、原发肿瘤大小、淋巴结转移情况及临床分期无明显相关。结论 :端粒酶在肺癌组织中的高表达可作为肺癌诊断和鉴别诊断的重要分子生物学指标之一     

肺癌组织中hTERT和P16基因的表达

目的 :研究端粒酶逆转录酶 (hTERT)和P16基因在肺癌组织中的表达 ,探讨肺癌发生过程中端粒酶激活的分子机制。方法 :应用原位逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)和端粒重复序列扩增法 (TRAP)分别对 4 7例肺癌及相应癌旁肺组织中hTERTmRNA与端粒酶活性进行检测 ,采用免疫组化SP法测定上述组织标本中P16蛋白表达。结果 :hTERTmRNA与端粒酶活性在肺癌组织中阳性表达率分别为 78.7%和 72 .3% ,均明显高于相应癌旁肺组织 (P <0 .0 1)。肺癌中hTERTmRNA表达与端粒酶活性呈明显正相关 (r=0 .70 2 ,P <0 .0 1)。P16蛋白在肺癌中阳性表达率为 2 9.8% ,显著低于癌旁肺组织 (93.6 % ,P <0 .0 1)。P16蛋白表达与hTERTmRNA表达及端粒酶活性均呈显著负相关 (r分别为 - 0 .74 5 ,- 0 .70 2 ,P均 <0 .0 1)。结论 :hTERTmRNA表达上调和P16蛋白表达缺失与肺癌的发生密切相关 ,并可能在肺癌端粒酶活性调节中发挥重要作用。     

端粒酶活性在非小细胞肺癌不同组织细胞中表达的研究

目的 对比研究端粒酶活性在非小细胞肺癌癌组织、癌旁组织、血液及痰液中的表达 ,以了解其临床意义。 方法 应用聚合酶联反应 -端粒重复序列扩增法 (PCR -TRAP)检测30例肺癌手术患者癌组织、癌旁组织、血液及痰液中的端粒酶活性 ,并以25例肺部良性疾病手术患者为对照组。结果 肺癌患者肺癌组织端粒酶活性阳性率83.3% (25/30) ,癌旁组织端粒酶活性阴性 ,外周血中端粒酶活性阳性率33.3 % (10/30) ,痰液标本中端粒酶活性阳性率56.7% (17/30)。对照组正常肺组织标本和外周血中端粒酶活性均阴性 ,痰液标本中端粒酶活性阳性率24.0% (6/25) ;两组病变组织、血液和痰液中端粒酶活性阳性率的差别均有显著性意义 (均P<0.05)。 结论 (1)非小细胞肺癌患者在肺癌组织、血液及痰液中均有端粒酶活性表达 ,其活性表达强度依次为肺癌组织、痰液、血液。 (2)痰液中端粒酶活性检测对肺部良恶性疾病的鉴别具有一定的诊断意义。     

纤支镜刷脱细胞端粒酶活性及涮洗液CEA浓度测定对肺癌的诊断价值

目的　探讨经纤支镜毛刷刷脱细胞端粒酶活性与涮洗液癌胚抗原 (CEA)浓度检测对肺癌的诊断价值。方法　采用端粒酶重复序列扩增法和放免法测定分别检测肺癌病变组织 (12 0例 )、非癌性肺疾病 (30例 )纤支毛刷刷脱细胞的端粒酶活性和毛刷涮洗液、血CEA浓度 ,并和病理学及细胞学检查结果进行比较。结果　肺癌病变处纤支毛刷刷脱细胞的端粒酶检出率为 80 % ,非癌性肺疾病纤支镜刷脱细胞的端粒酶检出率 10 % ,二者比较差异显著 (P <0 .0 1) ;肺癌组织部位刷脱细胞端粒酶检出率涮洗液CEA阳性与活检病理阳性率 (73% )及刷检细胞学阳性率 (5 6% )比较 ,差异无显著性 (P >0 .0 5 )。端粒酶阳性与细胞病理类型无关 ,CEA升高以腺癌、小细胞明显。结论　检测纤支镜毛刷刷脱细胞的端粒酶活性、涮洗液CEA浓度对肺癌的诊断有重要意义     

口腔鳞状细胞癌临床特征与端粒酶相关性研究

目的 :了解口腔鳞状细胞癌组织中端粒酶的活性及其与主要临床特性之间的相关性。　方法 :采用PCR ELISA法对不同TNM分期的 4 5例口腔鳞状细胞癌组织标本、12例口腔正常粘膜组织标本行端粒酶活性检测。　结果 :口腔鳞状细胞癌组端粒酶活性阳性率 (75 .6 7% )明显高于口腔正常粘膜组 (0 .0 0 % ) (P <0 .0 1)。口腔鳞状细胞癌临床晚期 (TNMⅢ、Ⅳ期 )端粒酶活性阳性率 (95 .0 0 % )明显高于临床早期 (TNMⅠ、Ⅱ期 ) (P <0 .0 5 ) ,伴颈淋巴结转移组端粒酶活性阳性率 (10 0 % )明显高于不伴颈淋巴结转移组 (6 3.33% ) (P <0 .0 5 )。　结论 :端粒酶活性与口腔鳞状细胞癌的临床分期及病变进程密切相关。     

抑癌基因PTEN在非小细胞肺癌发生发展中的作用

目的　研究抑癌基因 10q丢失的与张力蛋白同源的磷酸酶基因 (PTEN)在非小细胞肺癌 (NSCLC)组织中的表达水平与NSCLC的发生和发展的关系 ,以及PTEN和抑癌基因p2 7Kip1、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)表达的相关性。方法　以免疫组化方法分别检测 6 2例石蜡包埋的NSCLC组织中PTEN、p2 7Kip1和CyclinD1蛋白表达水平 ;用原位杂交方法检测 2 1例新鲜NSCLC组织中PTENmRNA的表达情况。结果　PTEN的表达在肺鳞癌中阳性率为4 0 0 % ( 12 / 30 ) ,肺腺癌中为 4 3 75 % ( 14 / 32 ) ;中高分化组肺癌中阳性率为 5 4 2 9% ( 19/ 35 ) ,低分化组中为2 5 93% ( 7/ 2 7) ;淋巴结转移组阳性率为 4 0 91% ( 9/ 2 2 ) ,无转移组阳性率为 5 4 84 % ( 17/ 31)。 2 1例新鲜肺癌标本原位杂交结果显示 ,鳞癌阳性率为 4 1 6 7% ( 5 / 12 ) ,腺癌阳性率为 33 33% ( 3/ 9)。同时检测了 p2 7Kip1和CyclinD1在肺癌中的表达状况。PTEN与p2 7Kip1表达呈正相关 ( χ2 =4 2 6 6 6 7,P <0 0 5 ) ,与CyclinD1的表达呈负相关 ( χ2 =4 5 5 814 ,P <0 0 5 )。结论　PTEN的失表达在NSCLC的发生、发展和转移过程中扮演着重要的角色。其失表达与NSCLC的分化程度 (P <0 0 5 )、淋巴结转移 (P <0 0 5 )有关 ,而与其组织学类型无关 (P >0 0     

肺癌组织端粒酶活性测定

①目的　探讨端粒酶作为肺癌诊断标记物的可行性及临床意义。②方法　用TRAP法检测 2 9例肺癌组织、2 7例癌旁组织和 35例正常组织标本中端粒酶活性表达。③结果　 2 9例肺癌组织中 2 1例 (72 .4 % )端粒酶活性表达阳性 ,2 7例癌旁组织中 6例 (2 2 .2 % )端粒酶活性表达阳性 ,35例正常组织均不表达端粒酶活性。癌组织、癌旁组织与正常组织标本端粒酶活性比较有显著差异 (χ2 =34.0 13、3.937,P <0 .0 1、0 .0 5 )。④结论　端粒酶表达与肿瘤发生有关 ,其癌旁组织中端粒酶活性有可能成为判定肿瘤复发和预后的指标。     

肺癌病人血管内皮生长因子表达与临床预后的关系

①目的　探讨肺癌病人血管内皮生长因子 (VEGF)表达与预后的关系。②方法　应用SABC免疫组织化学方法检测VEGF在 71例肺癌组织标本中的表达情况。③结果　肺癌组织VEGF表达阳性率为 76 .0 6 % ,明显高于肺良性病变的 2 0 .0 0 % (χ2 =2 1.2 1,P <0 .0 1) ;低分化癌VEGF阳性表达率显著高于高分化癌 (χ2 =4.146 ,P <0 .0 5 ) ,有淋巴结转移者显著高于无淋巴结转移者 (χ2 =5 .2 2 6 ,P <0 .0 5 ) ,Ⅲ～Ⅳ期癌显著高于Ⅰ～Ⅱ期癌 (χ2=5 .42 0 ,P <0 .0 5 )。④结论　VEGF是判断肺癌病人预后的重要指标之一。     

大肠癌端粒酶活性、p53蛋白表达的联合检测及其临床意义

目的 :探讨端粒酶活性、p5 3蛋白基因在大肠癌发生发展中的作用 ,以及端粒酶与临床病理特征及 p5 3蛋白之间的关系。方法 :TRAP法检测 4 0例大肠癌及癌旁正常组织中端粒酶活性 ,采用免疫组织化学法检测 4 0例大肠癌组织及癌旁组织中 p5 3蛋白的表达 ,并对端粒酶活性与临床病理特征以及 p5 3蛋白表达的关系进行分析。结果 :大肠癌组织端粒酶活性、p5 3蛋白阳性率分别为 82 .5 % (33/ 4 0 )、72 .5 % (2 9/ 4 0 ) ;癌旁正常组织端粒酶活性、p5 3蛋白阳性率分别为 12 .5 % (5 / 4 0 )、7.5 % (3/ 4 0 ) ,大肠癌组织显著高于正常组织 ,P <0 .0 1;大肠癌组织端粒酶活性与临床病理特征 (包括病理分化程度和是否有淋巴结转移 )之间无显著相关性 ;端粒酶活性与 p5 3蛋白表达之间无明显相关性。结论 :端粒酶在大肠癌组织高表达和在癌旁正常组织低表达的特性 ,有可能使端粒酶成为大肠癌诊断的一种标志物 ;p5 3参与大肠癌的发生发展过程 ;端粒酶活性与 p5 3蛋白表达之间无明显相关性 ,提示大肠癌是由多基因参与的疾病。     

支气管肺泡灌洗液中T-抗原检测对肺癌诊断的价值

目的 :探讨肺癌支气管肺泡灌洗液中T 抗原检测的诊断意义。方法 :收集 61例原发性肺癌和 3 1例非肺癌患者的支气管肺泡灌洗液 ,采用半乳糖氧化酶法检测痰液中T 抗原的敏感性和特异性。结果 :肺癌组T 抗原总阳性表达率为 68 3 % ,对照组BALF中T 抗原阳性率为 9 7%。中心型肺癌组支气管肺泡灌洗液中T 抗原阳性率 67 3 % ,纤支镜刷检细胞学阳性率为 61 2 % ,支气管肺泡灌洗液细胞学阳性率为 12 2 % ,支气管肺泡灌洗液中T 抗原的阳性率高于细胞学阳性检出率 ,二者比较差异有显著性 (P <0 .0 1)。周围型肺癌组支气管肺泡灌洗液中T 抗原阳性率为 71 4% ,纤支镜刷检细胞学阳性率为 5 0 0 % ,支气管肺泡灌洗液细胞学阳性率为 2 1 4% ,支气管肺泡灌洗液中T 抗原阳性率高于支气管肺泡灌洗液细胞学阳性率 ,二者比较差异有显著性 (P <0 .0 1)。结论 :支气管肺泡灌洗液中T 抗原有较高的敏感性和特异性 ,可作为肿瘤标志物为临床诊断提供重要线索     

支气管肺泡灌洗液端粒酶活性检测与肺癌的诊断

目的：研究肺癌支气管肺泡灌洗液（BALF）细胞端粒酶活性表达与肺癌发生机制的关系，方法：用聚合酶链反应－酶联免疫吸附分析法（PCR－ELISA）对36例肺癌和32例支气管，肺良性疾病患者的肺泡灌洗液细胞端粒酶活性的表达进行检测比较，结果：肺癌患者BALF细胞粒酶活性表达阳性率为83．3％（30／36），支气管，肺良性疾病BALF细胞端粒酶活性表达阳性率为6．6％（2／32），结论：端粒酶活性表达是肺癌诊断的标准志物之一，对肺癌的诊断具有一定的价值。     

端粒酶和erbB4基因在非小细胞肺癌中表达的研究

目的研究端粒酶和erbB4基因在非小细胞肺癌（NSCLC）组织中的表达及与肺癌临床、病理的关系。方法应用TRAP法测定56例肺癌组织标本中端粒酶的表达。同时应用免疫组化法检测56例肺癌石蜡组织中erbB4的表达。记录56例肺癌患者5年生存情况。结果NSCLC组织中端粒酶和erbB4阳性表达率分别为75%（42/56）及89.3%（50/56）。端粒酶、erbB4表达与不表达在临床分期组间的差异有统计学意义（P=0.004、0.005）,端粒酶表达与不表达患者5年生存率差异有统计学意义（P=0.0005）。结论检测端粒酶及erbB4表达有助于判断NSCLC临床特点及预后。     

食管癌及大肠癌和癌旁组织端粒酶活性的临床意义

目的：建立测定端粒酶活性的PCR－TRAP方法，并探讨其在食管癌、大肠癌诊断的意义。方法：应用端粒酶活性的PCR－TRAP方法，对36例食管癌、40例大肠癌及其癌旁组织进行了检测。结果：食管癌组织与癌旁组织端粒酶活性阳性检出率相比，差异有非常显性；伴随淋巴结转移的标本中端粒酶阳性检出率与未伴随淋巴结转移的标本比较，具有非常显性差异。40例大肠癌组织中端粒酶活性阳性检出率明显高于癌旁组织（P＜0．001）；伴随淋巴结转移的标本中端粒酶活性阳性检出率与未伴随淋巴结转移的标本相比，差异无显性。结论：端粒酶活性增高可能是致食管、大肠组织癌变的重要因素；端粒酶活性的检出可作为食管癌、大肠癌诊断的指标之一。     

银染端粒重复序列扩增法检测肺癌端粒酶活性

目的 评价端粒酶能否作为肺癌诊断的一具肿瘤标志物。方法 采用改良的银染端粒重复序列扩增法（ＴＲＡＰ）检测３４例人肺癌手术标本（包括癌组织、相应癌旁组织与正常组织标本各３４份,２８个相应淋巴结）的端粒酶活性。另有肺囊肿、肺炎性假瘤各３例作为对照。结果 ８８．３％（３０／３４）的肺癌癌组织端粒酶阳性,正常组织全部阴性。结论 端粒酶可以作为肺癌诊断的一人肿瘤标志物,改良的银染ＴＲＡＰ法成本低,污染少,有     

肺癌端粒酶活性、p53突变蛋白及细胞增殖DNA合成期比例相关研究

目的 探讨端粒酶、p53突变蛋白作为肺癌肿瘤标记物的可能性以及二者与细胞增殖DNA合成期比例（SPF值）的关系。方法 采用改良银染－端粒重复序列扩增法（TRAP）检测40例原发性支气管肺癌端粒酶活性，免疫组织化学方法检测其p53突变蛋白，流式细胞术检测其SPF值。结果 87．5％（35／40）肺癌组织端粒酶活性阳性，92．5％（37／40）p53突变蛋白阳性；SPF值在端粒酶活性阴性组、阳性组之间，p53突变蛋白阴性组、阳性组之间均有显著性差异。结论 端粒酶、p53突变蛋白可能是灵敏、特异的肺癌肿瘤标记物。端粒酶的异常活化、表达主要发生在细胞分裂周期的S期，p53突变蛋白可能参与端粒酶活化的调控。     

食管癌组织端粒酶活性检测的临床意义

目的 检测食管癌及癌旁食管粘膜组织中端粒酶活性,探索端粒酶活性与食管癌发生发展的关系。方法 采用PCR－TRAP方法检测43例食管癌和癌旁组织以及10例癌周正常食管粘膜的端粒酶活性。结果 43例食管癌组织38例（88．4％）表达阳性,癌旁组织7例（16．3％）表达阳性（P＜0．01）,10例正常食管膜表达阴性（P＜0．01）。端粒酶活性表达与病人的性别、肿瘤部位和大小、分化程度、临床分期、有无淋巴结转移无明显相关。结论 端粒酶活性与食管癌发生发展有密切关系,并有可能成为食管癌的临床肿瘤标记物,进而为食管癌早期诊断与治疗提供可靠指标。     

宫颈癌中端粒酶活性的研究

目的;研究宫颈癌组织及相应癌旁组织中的端粒酶活性,以探讨其作为宫颈癌肿瘤标志物的可能性。方法：采用TRAP法检测20例宫颈癌及相应癌旁组织中的端粒酶活性。结果：20例宫颈癌组织中端粒酶的阳性表达率为80％（16／20）,而相应癌旁组织的端粒酶阳性表达率为15％（3／20）,两者比较差异有显著性（P＜0．01）。结论：端粒酶是特异性较强的恶性肿瘤基因标志,有可能成为宫颈癌早期诊断和治疗的理想标志物。     

食管癌及癌前病变食管粘膜中端粒酶活性的检测及临床意义

目的探讨食管癌及癌前病变食管粘膜中端粒酶的表达及临床意义.方法采用端粒末端重复序列扩增技术(TRAP)检测44例食管癌组织,31例不典型增生,15例正常食管粘膜组织中端粒酶活性.结果44例食管癌组织中,35例端粒酶呈阳性表达,阳性率为79.54%.31例不典型增生组织中,18例端粒酶呈阳性表达,阳性率为58.1%.15例正常食管粘膜组织中,仅有4例端粒酶呈阳性表达,阳性率为26.67%.统计学分析,3组比较端粒酶阳性表达有显著性差异(P＜0.05).食管癌组织中端粒酶表达与浸润深度、大体类型、组织分化程度及淋巴结转移均无关.结论端粒酶的激活在食管癌的发生发展中起着重要作用,检测端粒酶活性对预测食管癌的发生和早期诊断有重要价值.