DNA修复基因的多态性以及DNA损伤与年龄相关性白内障的关系

目的 探讨DNA氧化损伤修复基因BLM、WRN、ERCC6以及OGG1的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNP)是否影响年龄相关性白内障(age-related cataract,ARC)的发生,并检测SNP是否会引起外周血淋巴细胞DNA损伤程度的改变.方法 从“江苏眼病研究”人群收集ARC患者789例及对照组531例.提取DNA分析BLM、OGG1、ERCC6及WRN基因18个SNP位点的基因型.同时应用彗星试验检测部分受试者外周血淋巴细胞的DNA损伤程度.结果 WRN-rs11574311与ARC、皮质型以及混合型ARC相关(P=0.003,OR=1.49;P=0.001,OR=1.68;P＜0.000 1,OR=2.08),BLMrs1063147与核型ARC相关(P=0.03,OR=1.31),WRN-rs2725383与皮质型ARC相关(P =0.01,OR=1.49),WRN-rs4733220以及WRN-rs2725338与混合型ARC相关(P=0.04,OR =0.74;P =0.003,OR =0.60).经过Bonferroni校正后,WRN-rs11574311仍与皮质型以及混合型ARC相关,WRN-rs2725338仍然与混合型ARC相关.SNP位点不同基因型的外周血淋巴细胞DNA损伤程度的差异无统计学意义.结论 WRN基因在ARC的发生发展过程中起重要作用,而且在不同亚型ARC中所起的作用也有所不同,说明不同亚型ARC可能具有特异性的危险因素以及致病机制.     

DNA修复基因在年龄相关性白内障患者晶状体皮质中表达的研究

目的　研究ＤＮＡ修复基因在年龄相关性白内障（ａｇｅ-ｒｅｌａｔｅｄｃａｔａｒａｃｔ,ＡＲＣ）患者晶状体皮质和正常对照晶状体皮质之间的表达差异。方法　使用ＴａｑＭａｎ人类ＤＮＡ修复基因表达芯片板检测年龄和性别匹配的３例ＡＲＣ患者和３例正常对照晶状体皮质组织中ＤＮＡ修复基因的表达。表达差异在１．５倍以上的基因使用实时荧光定量聚合酶链式反应（ｒｅａｌ-ｔｉｍｅＰＣＲ）进行验证（３０例ＡＲＣ患者和３０例正常对照）。数据使用ＳＰＳＳ１７．０软件进行分析,ＡＲＣ患者与正常对照间数据的比较采用独立样本ｔ检验。结果　ＴａｑＭａｎ人类ＤＮＡ修复基因表达芯片板检测显示:相对于正常对照晶状体皮质,在ＡＲＣ患者晶状体皮质中有７个ＤＮＡ修复基因（ＡＴＭ、ＥＲＣＣ６、ＰＯＬＡ１、ＰＯＬＤ１、ＰＯＬＱ、ＰＳＭＢ８、ＣＣＮＯ）表达下调１．５倍以上（０．３５±０．０７、０．２６±０．０９、０．４１±０．０７、０．３７±０．１４、０．３７±０．０７、０．１５±０．０５、０．５７±０．１３）,差异均有统计学意义（ｔ＝８．９８,Ｐ＝０．０１;ｔ＝４．７１,Ｐ＝０．０４;ｔ＝１０．４２,Ｐ＝０．０１;ｔ＝４．６５,Ｐ＝０．０４;ｔ＝８．９２,Ｐ＝０．０１;ｔ＝４．９４,Ｐ＝０．０４;ｔ＝７．６３,Ｐ＝０．０２）,４个基因（ＣＨＥＫ２、ＥＲＣＣ１、ＦＡＮＣＥ、ＧＡＤＤ４５Ｇ）表达上调１．５倍以上（２．５８±０．２５、１．９５±０．０９、８．８２±０．７８、３．１８±０．８９）,差异均有统计学意义（ｔ＝１８．１８,Ｐ＝０．００;ｔ＝２０．９２,Ｐ＝０．０１;ｔ＝１９．５５,Ｐ＝０．０１;ｔ＝６．２０,Ｐ＝０．０２）。ｒｅａｌ-ｔｉｍｅＰＣＲ的验证结果与其一致。结论　ＡＲＣ患者晶状体皮质和正常对照晶状体皮质中部分ＤＮＡ修复基因的表达存在差异,这些表达有差异的基因可能在ＡＲＣ的形成和发展中起到一定作用。     

年龄相关性白内障遗传流行病学研究进展

【摘要】年龄相关性白内障（age related cataract, ARC）为多因素疾病,目前确切病因不明。近年来流行病学研究表明ARC发病有一定的家族聚集性,遗传和分子流行病学研究进一步揭示了一些特定基因如谷胱甘肽S转移酶基因、DNA修复基因、EPHA2基因等特定基因多态性在人类ARC发病过程中的相关性和作用。而另一些基因,如晶状体膜蛋白基因、半乳糖激酶基因、α-晶状体蛋白基因等与ARC的相关性则需进一步研究证明,这些研究为ARC的发病机制提供了遗传学理论依据。（国际眼科纵览, 2013, 37： 117-122）     

年龄相关性白内障患者外周血淋巴细胞DNA损伤的研究

背景年龄相关性白内障是常见的致盲眼病,其病因及发病机制仍是当前的研究热点。研究提示DNA损伤在年龄相关性白内障的发生及发展过程中起重要作用。目的研究外周血淋巴细胞DNA损伤与年龄相关性白内障发生的关系。方法采用横断面研究设计。纳入的年龄相关性白内障患者211例和正常对照组受试者147名均来自“江苏眼病研究：阜宁县2011年眼病流行病调查”人群,两组人群的年龄均为50～80岁,组间性别构成比及年龄均匹配。应用彗星试验检测外周血淋巴细胞尾部DNA含量及Olive尾距（OTM）,对两组间测量指标的差异进行比较。将年龄相关性白内障患者分为50～59岁、60～69岁和≥70岁组,对3个组间的外周血淋巴细胞DNA损伤情况进行比较。研究遵循赫尔辛基宣言,经南通大学附属医院伦理委员会批准,所有研究对象均签署知情同意书。采用SPSS17．0统计学软件,对两组人群检测指标的差异进行独立样本t检验,对不同年龄组间检测指标的差异比较采用单因素方差分析。结果彗星试验结果显示,正常对照组受试者外周血淋巴细胞无拖尾现象,而年龄相关性白内障患者的外周血淋巴细胞变大,可见拖尾现象。年龄相关性白内障组患者外周血淋巴细胞尾部DNA百分比和OTM值分别为（21．75±3．51）％和6．54±1．65,均明显高于正常对照组的（9．31±3．60）％和2．18±1．10,差异均有统计学意义（t=32．67,P=0．00;t=28．02,P=0．00）;50—59岁组外周血淋巴细胞尾部DNA含量和OTM值分别为（20．04±2．86）％和5．92±1．14,60～69岁组为（20．77±2．93）％和6．134-1．14,≥70岁组为（22．79±3．67）％和6．95±1．9l,3个组间差异均有统计学意义（F=11．78,P=0．00;F=7．94,P=0．00）。两两比较后发现50～59岁组与≥70岁组、60～69岁组与≥70岁组阃差异均有统计学意义（TailDNA％：q=2．75,P=0．00;q=2．02,P=0．00;OTM：g=1．03,P=0．02;q=0．82,P=0．00）。结论年龄相关性白内障的发生和发展可能与DNA损伤有关。     

年龄相关性白内障基因异常表达的研究

目的比较年龄相关性白内障晶状体上皮细胞(LEC)基因表达与正常人的差异,探讨白内障发病的分子机制。方法术中撕取晶状体前囊36眼,其中单纯核性年龄相关性白内障10眼,成熟期年龄相关性白内障19眼,角膜移植供体眼及外伤性晶状体脱位7眼(正常对照)。3组晶状体囊膜分别提取总RNA,将合格的各组RNA样品做差异显示(DD-RT-PCR),寻找差异表达基因,再将其分离、扩增、测序,最后选取与白内障形成密切相关的胰岛素样生长因子结合蛋白(IGFBP-5)及溶酶体相关膜蛋白2(LAMP-2)基因进行验证。结果各组RNA纯度达到要求,总RNA完整,经差异显示,年龄相关性白内障组比正常人组低表达的条带有5条,高表达条带15条。对6条明亮条带测序后,其中3个片段分别与IGFBP-5、LAMP-2及小核糖体蛋白10(rps10)有很高的同源性,其他3个片段均为新近克隆未知功能的基因或基因组序列。验证表明,年龄相关性白内障IGFBP-5表达水平低于正常对照(P<0.01),而年龄相关性核性白内障LAMP-2表达水平高于正常对照。结论IGFBP-5和LAMP-2是年龄相关性白内障相关基因,差异显示技术在研究年龄相关性白内障发生中有重要意义。     

单核苷酸多态性与年龄相关性白内障的研究进展

年龄相关性白内障是最常见的白内障类型,也是全球首位的致盲性因素。大量研究表明,遗传因素在年龄相关性白内障发病过程中发挥着重要作用。单核苷酸多态性作为第３代分子遗传标志,是最常见的多态性表现形式,本文就近年来单核苷酸多态性与年龄相关性白内障相关性的最新研究成果作一简要综述。     

中老年人心血管疾病与年龄相关性白内障的关系

目的:评价人群心血管疾病对年龄相关性白内障(age-related cataract,ARC)发生的影响。方法:采用回顾性病例对照研究方法,2009-09/2011-03对360例病例和匹配的360例对照进行了调查。主要的测量指标为心血管疾病(cardiovascular disease,CVD)与ARC关联的比值比(OR)及其相应的95%可信区间(CI)。采用自行设计的调查表对研究对象进行调查。结果:病例组与对照组之间,年龄、职业,以及居住地的差异无统计学意义。调整了多种潜在性混杂因素后,空腹血糖受损的研究对象和已确诊的糖尿病患者发生ARC的危险性分别升高了62.4%和69.8%(OR=1.624,95%CI:1.068～2.553,P=0.007;OR=1.698,95%CI:1.412～2.719,P=0.009);高血压患者与ARC的关联性较强(OR=1.431,95%CI:1.098～1.997,P=0.007);现行吸烟者和现行饮酒者发生ARC的危险性也显著增高(OR=1.712,95%CI:1.312～2.344,P=0.010;OR=1.912,95%CI:1.310～2.896,P=0.003)。结论:糖尿病、高血压、吸烟及饮酒可使发生ARC的危险性增加,最终导致ARC的发生。     

年龄相关性白内障患者氧化损伤修复基因表观遗传学研究进展

氧化损伤是目前较为公认的年龄相关性白内障(ARC)发病机制.晶状体上皮细胞的氧化损伤会引起DNA损伤,而DNA氧化损伤修复能力不足或不及时均会引起ARC的发生.近年来发现,许多眼睛疾患的发病机制受表观遗传、环境及遗传等因素的影响,并且表观遗传学通过调控DNA氧化损伤修复基因的表达在ARC发生机制中起重要作用.本文系统阐...     

实时荧光定量PCR技术在年龄相关性白内障患者GSTM1、GSTT1基因拷贝数变异检测中的应用

目的　应用实时荧光定量ＰＣＲ技术检测年龄相关性白内障（ａｇｅ-ｒｅｌａｔｅｄｃａｔａｒａｃｔ,ＡＲＣ）患者谷胱甘肽-Ｓ-转移酶（ｇｌｕｔａ-ｔｈｉｏｎｅＳｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ,ＧＳＴ）Ｍ１、Ｔ１基因拷贝数变异。方法　采用实时荧光定量ＰＣＲ技术检测２７９例（５５８眼）ＡＲＣ组患者和１４５例（２９０眼）对照组的ＧＳＴＭ１、ＧＳＴＴ１基因重复或缺失等拷贝数变异情况,验证此方法在拷贝数检测中的准确性。结果　相同条件下ＧＳＴＭ１、ＧＳＴＴ１基因和ＲＮａｓｅＰ基因３次ＰＣＲ扩增曲线基本重合、扩增效率基本一致、Ｃｔ值基本相同。ＧＳＴＴ１基因完全缺失（０个拷贝）的ＡＲＣ个体（尤其是后囊下性ＡＲＣ）和对照组相比,差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）;至少有１个拷贝缺失的ＧＳＴＴ１基因型的个体发生ＡＲＣ和皮质性ＡＲＣ的风险升高（ＯＲ值分别为２．１６、４．８１,均为Ｐ＜０．０１）,而＞２个拷贝缺失的ＧＳＴＴ１基因型的个体发生这种风险降低（ＯＲ＝０．１９,Ｐ＜０．０５）。ＧＳＴＭ１基因拷贝数变异的ＡＲＣ个体与对照组相比,差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。结论　ＧＳＴＴ１基因拷贝数的缺失可能是ＡＲＣ特别是皮质性和后囊下性白内障发生的危险因素。实时荧光定量ＰＣＲ检测准确、效率高,适用于ＧＳＴＭ１、ＧＳＴＴ１基因拷贝数变异的检测,适用于包括ＡＲＣ在内的眼病流行病学调查研究。     

年龄相关性皮质性白内障波形蛋白基因外显子突变的研究

目的探讨波形蛋白(vimentin)基因外显子序列突变与年龄相关性皮质性白内障的关系。方法选择年龄相关性皮质性白内障患者110例(病例组)及同一地区正常对照100例(对照组)进行以医院病例资料为基础的对照研究。以外周血基因组DNA为模板,通过PCR扩增vimentin基因全部外显子,并将PCR产物纯化后测序。测序结果与GenBank公布的vimentin基因正常序列比对。结果病例组的血尿酸含量为(344.00±79.91)μmol·L-1较对照组(309.00±72.75)μmol·L-1显著增高(P=0.001),病例组的血肌酐含量为(59.20±13.57)μmol·L-1较对照组(55.24±13.61)μmol·L-1增高(P=0.04);2组测序结果显示vimentin基因全部外显子序列中,并未发现突变。结论年龄相关性皮质性白内障的发病机制与vimentin基因外显子序列突变无关,其致病基因有待进一步试验确定。     

Polymorphisms of DNA repair genes XPD and XRCC1 and risk of cataract development

The association between oxidative or ultraviolet (UV) light induced DNA damage in the lens epithelium and the development of lens opacities, and the existence of DNA repair in lens epithelial cells have been reported. Polymorphisms of DNA repair enzymes may affect repair efficiency. In this study, we aimed to determine the frequency of polymorphisms in two DNA repair enzyme genes, xeroderma pigmentosum complementation group D (XPD) codon 751 and X-ray cross-complementing group 1 (XRCC1) codon 399, in a sample of Turkish patients with maturity onset cataract. By using polymerase chain reaction (PCR) and restriction fragment length polymorphism (RFLP), we analysed XRCC1-Arg399Gln and XPD-Lys751Gln polymorphisms in 195 patients with cataract (75 patients with cortical, 53 with nuclear, 37 with posterior subcapsular, and 30 with mixed type) and in 194 otherwise healthy control group of similar age. There was a significant difference between frequencies for XPD-751 Gln/Gln genotype in cataract patients (12%) and healthy controls (20%) (P=0.008, OR=0.40, 95% CI=0.20-0.81). After stratification by the cataract subtypes, XPD-751 Gln/Gln genotype was found to be significantly different in patients with cortical (4%) type cataract in respect to control subjects (20%) (P=0.038, OR=0.16, 95% CI=0.04-0.64). In addition, the allele frequency of the C (Gln)-allele of XPD-Lys751Gln was found to be significantly different in mixed type cataract group (P=0.008, OR=0.48, 95% CI: 0.26-0.90). No statistically significant difference was found for the genotypic and allelic distributions of the polymorphisms in XRCC1 gene between the groups. These findings suggest that polymorphism in XPD codon 751 may be associated with the development of maturity onset cataract.     

Screening of methylation genes in age-related cataract

AIM: To analyze and screen the methylation status of whole-genome in age-related cataract samples. METHODS: Anterior lens capsule samples were collected from age-related cortical cataract patients over 50 years of age with LOCS III score of nuclear color ≥4 along with control subjects. DNAs were extracted and subjected to methylation microarray for the identification of methylated genes employing the high-throughput sequencing approach. RESULTS: Compared with the control group, 843 sites were found methylated, including 802 hypermethylation sites with 542 corresponding genes, 41 demethylation sites with 29 corresponding sites. COL4A1, GJA3, SIPA1L3 were confirmed by mass spectrometry, the results were consistent with high-throughput sequencing. CONCLUSION: DNA methylation microarrays is an efficient way for screening the aberrantly methylated genes. In this study, we are able to screen a few age-related cataract genes such as COL4A1, GJA3, and SIPA1L3 for their aberrant methylation patterns in cataract patients however further work is warranted to understand the significance of these findings.     

年龄相关性白内障患者miR-138的表达及其对人晶状体上皮细胞凋亡的影响

目的　检测miR-138在年龄相关性白内障晶状体组织中的表达情况,并探讨miR-138对人晶状体上皮细胞增殖和凋亡的影响及其可能的靶基因。方法　采用实时荧光定量PCR(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测年龄相关性白内障患者（白内障组）与正常对照组中miR-138和预测靶基因沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)的表达水平。向人晶状体上皮细胞系（SRA01/04）细胞中分别转染miR-138 模拟物、模拟物阴性对照物、miR-138抑制物、抑制物阴性对照物,采用RT-qPCR检测SIRT1的mRNA表达,Western blotting检测SIRT1的蛋白表达水平;转染72 h后细胞暴露于200 μmol·L^-1 H₂O₂ 1 h,Caspase-3活性检测试剂盒检测Caspase-3活性。双荧光素酶报告基因检测验证miR-138与SIRT1的靶向关系。结果　与正常对照组相比,白内障组miR-138的表达(3.64±0.19)显著升高（P<0.001）,SIRT1的mRNA表达(0.32±0.06)显著下降（P<0.001）;相对于模拟物阴性对照组,miR-138 模拟物组的SIRT1的mRNA(0.42±0.05)及蛋白(0.46±0.05)表达水平均明显降低,Caspase-3活性(3.24±0.17)明显升高（均为P<0.05）;相对于抑制物阴性对照组,miR-138抑制物组的SIRT1的mRNA(2.95±0.13)及蛋白(1.98±0.12)表达水平均明显升高,Caspase-3活性(0.42±0.05)均明显下降（均为P<0.05）;双荧光素酶报告基因检测确证SIRT1为miR-138的直接作用靶点。结论　miR-138在年龄相关性白内障患者晶状体囊膜中高表达,miR-138通过靶向性负性调控SIRT1表达,促进晶状体上皮细胞凋亡。     

热休克蛋白27在老年性白内障晶状体上皮细胞中的表达及意义

目的　探讨热休克蛋白(HSP) 27在老年性白内障晶状体上皮细胞中的表达及意义。 方法　采用Westernblot蛋白印迹法,检测老年性白内障 50例(其中皮质型 17例、核型 18例、后囊下型 15例 )、正常人晶状体 4例上皮细胞中HSP27的表达。 结果　HSP27在老年性白内障(0 411±0 188)和正常人 (0 147±0 006)晶状体上皮细胞表达有显著性差异,老年性白内障皮质型、核型、后囊下型HSP27表达也不相同。 结论　HSP27可能在老年性白内障的发生、发展中起重要作用,HSP27在皮质型、核型、后囊下型白内障发生的作用机制可能不完全相同。     

年龄相关性白内障患者晶状体倾斜和偏心及其影响因素——基于CASIA2的研究北大核心

目的运用新型眼前节光学相干断层成像仪CASIA2观察年龄相关性白内障患者晶状体倾斜及偏心的情况,并分析其影响因素。方法本研究为横断面研究。选取2020年4月至2021年5月于天津医科大学眼科医院就诊并接受白内障手术的310例(310眼)年龄相关性白内障患者。运用CASIA2的晶状体分析模式测量晶状体倾斜与偏心,并对其作描述性分析。采用单因素线性回归分析及多因素线性回归分析患者晶状体倾斜及偏心与影响因素的关系。纳入分析的影响因素包括:年龄、糖尿病史、眼轴长度(AL)、中央角膜厚度(CCT)、房水深度(AD)、晶状体厚度(LT)、Alpha角及Kappa角。结果纳入310例(310眼)白内障患者,年龄(68.8±8.5)岁,晶状体倾斜度为(4.97±1.59)°,偏心量为(0.21±0.12)mm。晶状体倾斜方向为颞下方,偏心方向为颞侧。其中,晶状体倾斜度>7°者占10.3%,偏心量>0.4 mm者占7.7%。单因素线性回归分析结果显示,晶状体倾斜度与晶状体偏心量、年龄、AL、Alpha角及Kappa角均有相关性(均为P<0.05);而晶状体倾斜度与糖尿病史、CCT、AD、LT均无相关性(均为P>0.05)。晶状体偏心量与年龄、倾斜度、Alpha角及Kappa角均有相关性(均为P<0.05);而晶状体偏心量与糖尿病史、AL、CCT、AD、LT均无相关性(均为P>0.05)。多因素线性回归分析结果显示,晶状体倾斜度与晶状体偏心量、AL及Alpha角均有相关性(均为P<0.05);而晶状体倾斜度与年龄、糖尿病史、CCT、AD、LT及Kappa角均无相关性(均为P>0.05)。晶状体偏心量与倾斜度及AL均有相关性(均为P<0.05);而晶状体偏心量与年龄、糖尿病史、CCT、AD、LT、Alpha角及Kappa角均无相关性(均为P>0.05)。结论年龄相关性白内障患者晶状体朝颞下倾斜、向颞侧偏心。在晶状体倾斜度较大的眼中,偏心程度更重。晶状体在短AL眼中及Alpha角大的眼中倾斜程度更重。白内障术前应综合考虑晶状体倾斜、偏心情况及AL、Alpha角等影响因素,合理选择功能型人工晶状体。     

年龄相关性白内障术后优势眼变化与视觉质量关系

目的：探讨年龄相关性白内障手术后优势眼的变化以及与患者视觉质量的关系。
　　方法：选取2013-01/2014-11在我院治疗的年龄相关性白内障患者102例204眼,根据术前最佳矫正视力( BCVA)分为两组,其中双眼 BCVA 差别≥2行者78例156眼为A组,双眼BCVA差别≤1行者24例48眼为B组,于术前及术后1,3 mo进行优势眼检测,以及对比敏感度检查和视觉满意度调查。
　　结果：术前优势眼矫正视力为0.34±0.11,明显高于非优势眼(0.15±0.09),差异有统计学意义(P<0.05);术后1,3 mo优势眼与非优势眼矫正视力比较差异无统计学意义(P>0.05);A组术后3mo有17眼发生优势眼转变,转变率为21.79%(17/78),B组术后3mo有5眼发生优势眼转变,转变率为20.83%(5/24),两组差异比较无统计学意义(P>0.05);优势眼发生转变组和未转变组患者不同空间频率对比敏感度检查差异无统计学意义( P>0.05);术后3 mo视觉满意度问卷调查显示, A组评分为91.35±10.26分,B组评分为90.15±9.75分(P>0.05),优势眼发生转变组评分为90.08±9.77分,未转变组评分为91.43±10.22分,差异无统计学意义( P>0.05)。
　　结论：年龄相关性白内障术后存在优势眼转变,但对视觉质量无影响。     

年龄相关性白内障术后视力再下降患者的临床特征分析

目的 分析年龄相关性白内障术后视力再下降患者的临床特征,为该病诊断和治疗提供依据.方法 收集2017年1月至2020年6月在北京朝阳医院眼科就诊的年龄相关性白内障术后视力再下降患者,回顾性分析其疾病构成比、裸眼视力、最佳矫正视力(BCVA)、等效球镜度、前房深度及眼底病变等.结果 本研究共收集283例(397眼)白内障...