蛇床子素对人舌鳞癌Tca8113细胞凋亡和自噬的影响

目的 研究蛇床子素对人舌鳞癌Tca8113细胞增殖、凋亡和自噬的影响,并探讨其可能的作用机制。方法 体外培养Tca8113细胞,并将细胞分为不加药的对照组和分别加入40、80、120、160 μmol/L蛇床子素的实验组。用四甲基偶氮唑盐实验和集落形成实验检测蛇床子素对Tca8113细胞的增殖作用,通过Hoechst33342染色法和流式细胞仪检测蛇床子素对人舌鳞癌Tca8113细胞24 h凋亡情况,Western blot检测Bcl-2、Bax、活化的半胱氨酸蛋白酶3及LC3、P62的表达情况。结果 蛇床子素可以明显抑制Tca8113细胞增殖,且药物对细胞的抑制率呈浓度依赖性;细胞集落形成能力降低;Hoechst33342染色和流式细胞术结果显示,蛇床子素呈浓度依赖性诱导细胞死亡;Western blot结果显示,蛇床子素能上调Bax和活化的半胱氨酸蛋白酶-3蛋白表达,下调Bcl-2蛋白表达。同时增加LC3Ⅱ、P62的表达,降低LC3Ⅰ的表达。结论 蛇床子素能抑制人舌鳞癌Tca8113细胞增殖,其机制可能与促进细胞凋亡并抑制细胞自噬流、自噬途径损伤而抑制细胞自噬有关。     

虫草素对人舌癌细胞凋亡、自噬的影响及其分子机制

目的研究虫草素对人舌癌TCA-8113细胞的细胞周期、凋亡和自噬的影响并探讨虫草素抑制舌癌发生的作用机制。方 法用CCK-8法检测虫草素对TCA-8113细胞增殖的作用;用流式细胞术检测不同浓度药物对细胞周期、细胞凋亡的影响;用荧 光定量PCR和Western blot 的方法检测凋亡相关基因Caspase-3,Caspase-9,Bcl-2、Bax;免疫组化方法检测自噬相关蛋白LC- 3β,P62,p-mTOR,AMPK。结果CCK-8 细胞增殖检测结果表明,虫草素能明显抑制TCA-8113 细胞的增殖,24 h 时IC50为 3.548 mg/mL;48 h时IC50为1.185 mg/mL;流式细胞结果显示,诱导细胞周期阻滞与S期,虫草素能显著的诱导TCA-8113细胞 凋亡,并且呈浓度依赖性。荧光定量PCR和Westen blot结果表明,虫草素可诱导促凋亡基因Bax、Caspase-3、Caspase-9的表达, 抑制抗凋亡基因Bcl-2的表达（P<0.05）;免疫组化的结果表明,虫草素可促进LC-3β和AMPK的表达,抑制P62和p-mTOR的表 达（P<0.05）。结论虫草素对TCA-8113细胞的抑制并促进细胞凋亡,同时通过AMPK/mTOR通路诱导细胞自噬。     

平阳霉素对人舌癌Tca8113细胞凋亡和端粒酶活性的影响

目的 探讨平阳霉素(PYM)处理人舌癌Tca8113细胞前后细胞增殖活性和凋亡以及人类端粒酶逆转录酶(hTERT)蛋白表达和端粒酶活性的改变，进一步揭示平阳霉素的抗癌机理并初步探讨端粒酶作为化疗敏感性指标的可行性。方法 以1／2血药峰值浓度的平阳霉素处理人舌癌Tca8113细胞12～72h，应用MTT法检测细胞增殖活性，光镜观察细胞凋亡变化特征并计算凋亡指数，用间接免疫荧光标记法通过流式细胞仪检测hTERT蛋白含量，同时行TRAP-PCR-ELIsA端粒酶活性检测。结果 Tca8113细胞在平阳霉素作用后，细胞增殖活性明显下降；出现明显的凋亡；hTERT蛋白表达下降的同时端粒酶活性也相应下降，而且四者都有一定的时间依赖性。结论 平阳霉素可使细胞增殖活性明显下降，诱导凋亡产生，下调hTERT蛋白表达及抑制端粒酶活性，且这四者有一定的相关性。     

木犀草素对人舌鳞状细胞癌Tca8113 细胞凋亡 及自噬的影响

目的 探究木犀草素对人舌鳞状细胞癌Tca8113 细胞体外凋亡和自噬作用的影响。方法 采 用MTT 法观察12.5、25.0、50.0 及100.0μmol/L 的木犀草素作用24 h 对细胞体外活性的影响;运用 Hoechst33342 染色法和流式细胞术观察体外细胞凋亡情况;Western blotting 检测Cleaved Caspase-3 蛋白、 B 细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）、B 细胞淋巴瘤-2 相关X 蛋白（Bax）和Beclin1 蛋白、P62 蛋白及LC3B 蛋白。 结果 MTT 法实验结果显示,木犀草素抑制Tca8113 细胞增殖,IC50 为47μmol/L。Hoechst33342 染色结果 显示,木犀草素使Tca8113 细胞形态发生改变,与时间呈正相关（P <0.05）。流式细胞术结果表明,47μmol/L 的木犀草素作用Tca8113 细胞12、24 h 后,凋亡率高于空白对照组（P <0.05）。Western bloting 检测结果表明, 木犀草素抑制Bcl-2 以及增加Bax 表达,导致Cleaved Caspase-3 表达增加,促进Tca8113 细胞凋亡（P <0.05）; 同时还升高Beclin1、LC3B、P62 蛋白水平（P <0.05）。结论 木犀草素影响人舌鳞状细胞癌Tca8113 细胞凋 亡和自噬的发生。     

miR-200c对舌癌Tca8113细胞增殖和凋亡的影响

目的：探讨 miR-200c 对人舌鳞状细胞癌 Tca8113细胞增殖和凋亡的影响。方法将 miR-200c 的模拟物通过脂质体转染到人舌鳞状细胞癌 Tca8113细胞内,通过四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测细胞增殖能力、流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡率、Western blot 检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）和 Bcl-2蛋白的表达。结果与对照组相比,miR-200c 模拟物20、40、80 nmol／L 组的 Tca8113细胞生长受到明显抑制,差异有统计学意义（P ＜0．05）,miR-200c 模拟物的浓度越大,作用时间越长,抑制效果越明显（P ＜0．05）;转染 miR-200c 模拟物48 h 后,Tca8113细胞停滞于 G0／G1期,细胞凋亡率显著增加,差异有统计学意义（P ＜0．05）;Western blot 证明20、40、80 nmol／L 组 Bcl-2蛋白表达量明显低于对照组,而 Caspase-3蛋白表达量明显高于对照组（P ＜0．05）。结论miR-200c 过表达可抑制舌癌 Tca8113细胞增殖并诱导细胞凋亡。     

阿霉素诱导Tca8113细胞凋亡及其分子机制的研究

【目的】观察阿霉素诱导Tca8113细胞凋亡及其过程中某些凋亡相关分子表达的变化,探讨其诱导凋亡作用的分子机制。【方法】采用MTT法检测阿霉素对Tca8113细胞的增殖作用;以光镜、荧光纤维镜、流式细胞仪和Annexin V-FITC标记法检测细胞凋亡;以蛋白印迹法分析阿霉素对Bcl-2、Bax和Survivin蛋白表达的影响。【结果】阿霉素以剂量依赖方式抑制Tca8113细胞增殖;光镜及荧光显微镜下可见明显凋亡细胞;流式细胞仪检测显示细胞停滞于G1或S期,有明显凋亡峰出现;Annexin V-FITC标记法定量检测证实阿霉素可诱导细胞凋亡发生;蛋白印迹检测表明阿霉素可使Bax表达升高,Bcl-2和Survivin表达下降。【结论】阿霉素可显著抑制Tca8113细胞增殖,可通过调节Bcl-2、Bax和Survivin蛋白表达来实现致凋亡作用。     

姜黄素对口腔鳞状细胞癌Tca8113细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨姜黄素对口腔鳞状细胞癌（oral squamous cell carcinoma,OSCC）Tca8113细胞增殖及凋亡的影响,并研究其作用机制。方法体外培养Tca8113细胞,不同浓度姜黄素（0、25、50、100 μmol/L）处理24、48h;PI3K/AKT信号通路抑制剂LY294002、激动剂胰岛素样生长因子-1（IGF-1）姜黄素、IGF-1联合姜黄素处理24、48h。分别采用MTT法和流失细胞术检测细胞增殖和细胞凋亡情况;采用Western blot和RT-PCR法检测细胞PI3K、p-AKT及mTOR的蛋白及mRNA表达水平。结果姜黄素可显著抑制OSCCTca8113细胞的增殖并诱导凋亡,且具有一定的剂量和时间依赖性,与对照组相比差异有统计学意义（P<0.05）;同时,姜黄素下调Tca8113细胞中的PI3K、p-AKT及mTOR的蛋白及mRNA表达水平（P<0.05）。IGF-1处理促进了Tca8113细胞的增殖、降低了凋亡率,同时增加PI3K、p-AKT及mTOR的蛋白及mRNA表达水平,与对照组相比差异有统计学意义（P<0.05）;与IGF-1组相比,IGF-1联合姜黄素组可降低细胞的活性、提高细胞的凋亡率,降低PI3K、p-AKT及mTOR的蛋白及mRNA表达水平（P<0.05）。结论姜黄素可抑制OSCCTca8113细胞的增殖、诱导细胞凋亡,其作用机制可能与其抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路的表达有关。     

大蒜素对人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞凋亡及细胞周期的影响

[目的]研究大蒜素对人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞凋亡以及细胞周期的影响并初探其机制。[方法]取对数生长期Tca8113细胞设空白对照组、大蒜素（50、25、12.5 μg/mL）组和顺铂（40 μg/mL）组,给药48 h后流式细胞术分析细胞周期的改变并检测细胞凋亡状况,逆转录聚合酶链式反应法（RT-PCR）检测B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）mRNA、Bcl-2相关X蛋白（Bax）mRNA表达,蛋白免疫印迹法检测细胞周期相关调控蛋白周期蛋白（cyclin B1、cyclin D1）和周期蛋白依赖性激酶（CDK1、CDK2）表达。[结果]与空白对照组比较,大蒜素（50、25 μg/mL）组细胞周期G₂/M期比例显著提高（P<0.05）,细胞凋亡率显著升高（P<0.01）,Bcl-2 mRNA表达显著下调且Bax mRNA表达显著上调（P<0.05或P<0.01）,Bax/Bcl-2值显著提高（P<0.01）,cyclin B1蛋白和CDK1蛋白显著上调、cyclin D1蛋白和CDK2蛋白显著下调（P<0.05或P<0.01）。[结论]大蒜素具有促进人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞凋亡、阻滞细胞有丝分裂的作用,其机制可能与大蒜素影响凋亡相关调控基因及细胞周期相关调控蛋白表达有关。     

细胞自噬与凋亡关系的分子机制研究进展

自噬活跃在所有细胞中,在缺血缺氧状态或者营养缺乏条件下其表达上调.诱导的自噬不仅促进了受损细胞成分的降解,且为细胞提供了能量.凋亡和自噬均为程序性细胞死亡,现在已知自噬和凋亡在疾病病理进展过程中起着重要作用,包括神经退行性病变、老化、癌症、自身免疫疾病.本文就自噬与凋亡关系的分子机制研究进展做一综述.     

熊果酸对舌癌细胞Tca8113生长、迁移和凋亡的影响及机制研究*

目的 探究熊果酸对人舌癌细胞Tca8113体外生长、迁移和凋亡的影响及机制。方法 采用噻唑蓝（MTT）法及克隆形成实验检测熊果酸对Tca8113细胞活性的影响;采用划痕实验检测熊果酸在0、12及24?h对Tca8113细胞迁移能力的影响;通过Heochst33342染色和流式细胞术观察熊果酸对Tca8113细胞凋亡的影响;Western blotting检测熊果酸对细胞中磷酸化局部黏着斑激酶（p-Fak）、局部黏着斑激酶（Fak）、活化冬氨酸蛋白水解酶-3（Cleaved caspase-3）、Bcl-2-Associated X的蛋白质（Bax）、B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）蛋白表达的影响。结果 熊果酸能抑制Tca8113细胞的活性并促进其凋亡（P?<0.05）,并呈时间、浓度依赖性。熊果酸抑制Bcl-2,并促进Bax、Cleaved caspase-3表达,促进Tca8113细胞凋亡;能降低p-Fak、Fak的表达,抑制Tca8113细胞的迁移。结论 熊果酸能抑制Tca8113细胞的生长及迁移,其机制可能与调节Bcl-2/Bax凋亡通路和抑制Fak的激活相关。     

吉西他滨对人舌鳞癌Tca8113 细胞的放射增敏作用及其机制研究

目的 研究吉西他滨（GEM）对人舌鳞癌Tca8113 细胞的放射增敏作用及其相关机制。方法 用不同浓度GEM 处理人舌鳞癌Tca8113 细胞24 h,测定细胞存活率并确定后续实验浓度。对Tca8113细胞进行单独放疗或联合GEM 处理,MTT 法测定细胞存活率;平板克隆形成实验研究各组细胞集落形成的能力;流式细胞术验证Tca8113 细胞对放射的敏感性变化。Western blotting 检测Bcl-2、Bax、 CleavedCaspase-3 及Cleaved Caspase-9 蛋白的表达。结果 不同浓度GEM 作用时的细胞存活率比较,经方差分析,差异有统计学意义（P <0.05）。与0.00μmol/L 组比较,GEM 浓度为0.01、0.02、0.03、0.10 及1.00μmol/L时细胞存活率降低（P <0.05）。照射剂量为4 Gy 时,与单纯放疗组比较,GEM 联合放疗组细胞存活率降低（P <0.05）。克隆形成实验显示,GEM 联合放疗组集落形成能力最弱（P <0.05）;流式细胞术进一步证实,GEM 联合放疗组较单纯放疗组凋亡率升高（P <0.05）。GEM 联合放疗组Tca8113 细胞凋亡高于其他各组,且Tca8113 细胞中Bax、Cleaved Caspase-3 及Cleaved Caspase-9 蛋白表达水平高于其他组（P <0.05）;而Bcl-2蛋白表达则低于其他各组（P <0.05）。结论 GEM 对舌鳞癌Tca8113 细胞的增殖有抑制作用,联合放射治疗能有效提高放射敏感性;两者可能具有协同抗肿瘤作用。     

JSH-23对人舌鳞癌细胞Tca8113增殖和凋亡的影响

目的 探讨JSH-23阻断NF-κB信号通路后人舌鳞癌细胞Tca8113增殖和凋亡的情况及NF-κB信号通路相关凋亡抑制基因Bcl-2的表达变化,进而为临床舌鳞癌的干预和治疗寻找新的药物提供实验依据.方法 采用体外培养人舌癌Tca8113细胞的方法,经不同浓度JSH-23作用不同时间后,用MTT法、RT-PCR及Western blot等方法检测JSH-23对Tca8113细胞增殖、凋亡的影响.采用SPSS13.0统计软件对数据进行方差分析及t检验.结果 Tca8113细胞经JSH-23作用后,增殖受到明显抑制,20 μmol/L JSH-23作用48 h时,抑制作用最为显著,细胞生长抑制率达到60.45％.同时,Bcl-2凋亡抑制基因表达减少,与对照组相比,JSH-23作用48 h后,Bcl-2表达显著减少47.85％,差异有统计学意义（P＜0.05）;Bcl-2蛋白含量也明显减少,作用48 h后,Bcl-2蛋白表达相对光密度值分别下降50.93％ （P ＜0.01）.结论 JSH-23作为NF-κB信号通路抑制剂,可以明显抑制人舌鳞癌细胞的增殖,同时显著下调Bcl-2基因及蛋白的表达.     

Toll样受体2对口腔癌Tca8113细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨Toll样受体2(TLR2)在人舌鳞癌细胞Tca8113的表达情况及其对肿瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法通过流式细胞术检测人舌癌Tca8113细胞中TLR2的表达情况;实验细胞分为实验组(加入TLR2阻断剂)及对照组(加入IgG抗体),实验组及对照组细胞培养24 h及48 h后,应用MTT及Western blot方法检测其增殖及凋亡情况,采用SPSS13.0统计软件对数据进行方差分析及t检验。结果流式细胞检测Tca8113细胞可见TLR2的表达;实验组经TLR2阻断24 h、48 h后其增殖较之对照组明显增加(P<0.05),但24 h与48 h比较,其增殖的变化不明显(P>0.05);同时经Western blot检测抗凋亡蛋白Bcl-2表达明显增加(P<0.05)。结论人舌鳞癌细胞Tca8113细胞表达TLR2受体并对肿瘤细胞呈现明显的抑制作用。     

盐酸小檗碱作用于人舌癌Tca8113细胞的形态学研究

目的:观察盐酸小檗碱作用与体外培养人舌癌Tca8113细胞的形态学改变,探讨盐酸小檗碱对Tca8113细胞的杀伤作用。方法:利用体外培养技术,HE染色法,丫啶橙染色法,观察盐酸小檗碱对Tca8113细胞作用后的形态学改变。结果:盐酸小檗碱(4μg/ml)作用于Tca8113细胞48h后,细胞形态发生改变,大量细胞变圆,细胞出现出芽现象,并出现较多的悬浮死亡细胞。结论:盐酸小檗碱可使Tca8113。细胞膜表面结构发生改变,并具有明显的杀伤作用。     

盐酸埃克替尼对人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞增殖的影响

目的：研究表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂盐酸埃克替尼对体外培养的人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞增殖的抑制作用。方法：分别应用0（对照组）、5、10、20、40、80μmol/L的盐酸埃克替尼处理体外培养的人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞,分别作用12、24、48、72、96h后,倒置显微镜下观察细胞生长状态及形态学改变,用MTT法检测细胞增殖抑制率。结果：对照组细胞生长良好;盐酸埃克替尼作用后,Tca8113细胞体积变小,胞质皱缩,细胞间隙增大,细胞连接松散,胞内颗粒增多,贴壁细胞变圆,漂浮。不同浓度盐酸埃克替尼作用后,Tca8113细胞增殖抑制率随浓度的增加和作用时间的延长而增大,具有剂量和时间依赖性（P〈0.05）。结论：盐酸埃克替尼能有效抑制Tca-8113细胞增殖,是一种有效的靶向治疗人舌鳞状细胞癌的药物。