卡铂碳包铁纳米磁性微球对移植性肝癌热疗疗效机制的研究

目的 卡铂Fe@C纳米笼壳聚糖微球 (C-Fe@C-CN) 对移植性肝癌模型具有较好的热疗效果,探讨热疗对肿瘤细胞治疗的分子机制.方法 用制备好卡铂Ve@C纳米笼壳聚糖微球 (C-Fe@C-CN) ,对50只移植性肝癌大鼠模型 (随机分为5组,A组生理盐水组、B组卡铂组,C组微球组,微球热疗30min D组和微球热疗60min E组) ,经肝动脉注射给药24h后,免疫组织化学法观察热疗对肝癌肿瘤细胞HSP70表达的影响,流式细胞术检测对肝癌细胞凋亡率及Fas蛋白表达的影响.结果 HSP70蛋白表达,A、B、c组 (n=6) 均为阴性,E组明显高于D组[ (96.11%±15.40%) n=6) vs (74.71%±13.85%) (n=6) ,p<0.05].D、E组肝癌细胞凋亡率[ (58.37%±13.84%) 、 (64.87%±15.72%) ]和Fas蛋白表达[ (35.23%±15.72%) 、 (38.45%±5.64%) ]较其他组显著增高 (P<0.01) ,D组与E组比较差异无显著性 (P>0.05) .结论 C-Fe@C-CN具有良好的磁靶向力和感应产热性能,加热可以诱导HSP70蛋白的大量产生,可以激活Fas基因诱导肝癌细胞凋亡,是一种潜在的抗肿瘤磁性纳米靶向热疗药物栽体.     

磁性纳米颗粒靶向性肿瘤热疗的研究进展

介绍了磁性纳米颗粒用于靶向性肿瘤热疗的机制和研究进展,阐述了其优点和需要解决的问题,并展望了其发展前景。     

磁性纳米粒子在肝癌介入治疗中运用的实验研究进展

传统的肿瘤化疗中,因细胞毒性药物对癌组织细胞和正常组织细胞的非特异性,在治疗过程中不可避免产生毒副作用.治疗效果也不理想.载药磁性纳米粒子可借助于磁场聚集在肿瘤部位,平稳释放药物,提高靶部位药物浓度,增强治疗效果,同时减少其他部位的药物分布,降低药物的毒副作用.     

纳米磁诱导肝癌Hep-6细胞凋亡实验研究

目的　研究纳米磁诱导肝癌Hep -6细胞凋亡 ,提供肝肿瘤局部靶向消融新方法。方法　应用电泳 ,扫描电镜 ,透射电镜 ,流式细胞仪检测凋亡。该实验设空白对照组、药物对照组和纳米磁处理组 ,在不同剂量与时间点条件观察纳米磁诱导肝癌Hep -6细胞凋亡率。结果　纳米磁组细胞凋亡率 2 4h时由 2 5 %上升到 5 4% ;3 6h时 ,纳米磁组、表阿霉素组、空白对照组的凋亡率分别为 78% ,5 3 % ,2 % ,各组之间凋亡率差异有显著性 (t =3 0 5 ,P <0 0 5 ) ,凋亡率、药量、与时间呈正相关 (r=0 96,P <0 0 5 )。结论　纳米磁可诱导肝癌Hep -6细胞凋亡 ,可以提供肝肿瘤有效的靶向消融治疗。     

磁性纳米铁治疗大鼠胶质瘤的实验研究

目的:研究局部使用磁性纳米铁热疗对大鼠胶质瘤的治疗效果。方法:将传代培养的C6细胞立体定向接种于SD大鼠的尾状核,14 d后肿瘤生长至直径0.5～1.0 cm时随机分成对照组和3、5、8 mg磁性纳米铁热疗组,分别立体定向注入等体积的生理盐水及3、5、8 mg的磁性纳米铁,于交变磁场中连续热疗3次,每次30 min,观察大鼠的生存时间及肿瘤体积变化。免疫组织化学SP法检测bcl-2和bax蛋白表达。结果:肿瘤热疗3次后3、5、8 mg磁性纳米铁热疗组大鼠的生存时间分别为(19.60±1.43)、(18.90±1.75)、(20.40±2.26)d,明显长于对照组[(13.30±1.69)d,P<0.05],各剂量磁性纳米铁热疗组bax蛋白表达亦明显强于对照组,差异有统计学意义(均P<0.05);各剂量磁性纳米铁热疗组间bax蛋白表达、bcl-2蛋白表达及生存时间比较差异无统计学意义(均P>0.05)。结论:磁性纳米铁热疗能有效地促进大鼠胶质瘤细胞凋亡,抑制肿瘤增殖,延长荷瘤鼠的生存期。磁性纳米铁热疗能促进bax蛋白的表达,对bcl-2蛋白表达影响不明显。     

纳米三氧化二砷磁性脂质体对卵巢癌HO-8910细胞热化疗作用的研究

目的 研究纳米三氧化二砷磁性脂质体(NMLA)对卵巢癌HO-8910细胞的热化疗作用.方法 以培养液做对照,分别将空白脂质体、三氧化二砷(As2O3)溶液、纳米As2O3脂质体、纳米磁性脂质体(NML)、NMLA作用于人浆液性卵巢癌HO-8910细胞,并用高频交变磁场(AMF)对经过NML和NMLA处理的HO-8910细胞作进一步热疗处理,通过显微镜、MTT法、流式细胞仪观察治疗效果.结果 NMLA热疗组细胞的生长抑制率(63.15%)明显高于As2O3溶液组(31.71%)、纳米As2O3脂质体组(41.16%)和NML热疗组(54.61%)(均P＜0.05),该组细胞的凋亡率也高于其他各组.结论 NMLA可在高频AMF作用下升温控温,发挥热、化疗双重作用,强烈抑制人类卵巢癌HO-8910细胞的生长并诱导其凋亡,为临床卵巢癌的治疗提供了新的可能方法.     

不同粒径磁性纳米FeOx在外加磁场作用下对肝癌细胞生物学特性的影响

目的: 研究不同粒径磁性纳米FeOx在外加磁场作用下对肝癌细胞增殖、凋亡的影响.方法: 采用共沉淀法制备得到不同粒径FeOx,将不同粒径FeOx吸附于细胞表面,并加载静磁场(SMF)及100 Hz交变磁场(EMF)照射.运用CCK-8检测纳米粒子吸附后在外加磁场作用下Bel-7402细胞增殖情况,运用流式细胞仪检测细胞凋亡、死亡率及细胞周期变化.结果: 不同粒径磁性纳米FeOx在SMF照射时间低于72 h时能使Bel-7402细胞增殖速度增快,当照射时间大于72 h时,细胞增殖速度未发生明显变化但部分细胞发生凋亡,凋亡率为(3.1±0.78)%.而经EMF照射后37 nm FeOx吸附细胞增殖被抑制,细胞周期实验结果表明大部分细胞被阻滞在G0/G1期,细胞出现大量死亡与凋亡,凋亡率达到(23.34±3.6)%、死亡率达到(57.24±2.7)%.结论: 纳米粒子未有外加磁场照射时不能对细胞产生明显的影响,外加SMF照射时,细胞的增殖及DNA代谢未发生明显的变化,但细胞发生凋亡;外加EMF照射时,细胞增殖被抑制并发生明显的凋亡及死亡,细胞DNA代谢明显紊乱,且具有较小粒径的磁性纳米FeOx在EMF作用下对肝癌细胞影响最为显著.     

羟基磷灰石纳米粒子抑制结肠癌SW-480细胞生长的体外实验

目的:本研究旨在明确羟基磷灰石纳米粒子(HAP)在体外能否诱导人结肠癌SW-480细胞凋亡并从凋亡角度探讨其抑癌机制。方法:用HAP以不同浓度作用于人结肠癌SW-480细胞,以诱导其凋亡。用MTT比色法观察其细胞毒性,荧光显微镜、透射电镜、琼脂糖凝胶电泳法及流式细胞术(FCM)等方法来检测凋亡,观察其形态学和生化方面的变化。结果:HAP以剂量和时间依赖的方式抑制人结肠癌SW-480细胞的生长。25 mg/L,50mg/L HAP作用72 h细胞的生长抑制率分别是49.71%和61.03%。12.5-100 mg/L的HAP处理48 h后,结肠癌细胞表现为细胞皱缩、核质浓缩、核碎裂、细胞起泡以及凋亡小体形式等凋亡特征的形态学改变。流式细胞仪均能检测到凋亡峰,12.5,25,50,100 mg/L HAP作用48 h,凋亡率分别是3.57%,21.45%,37.10%和49.45%。结论:HAP在体外能抑制人结肠癌SW-480细胞增殖并诱导细胞凋亡。     

聚乙二醇修饰的可控温磁性纳米颗粒制备与表征研究

目的磁性纳米颗粒(MNPs)是当前重要的肿瘤诊断与治疗载体平台,可在交变磁场作用下产生热效应,从而杀死肿瘤细胞。调节MNPs的居里温度,可提高其在肿瘤磁感应热疗中的安全性。方法用水热法合成可控温的Zn_0.54Co_0.46Cr_0.6Fe_1.4O₄,用相对分子质量为20 000的聚乙二醇(PEG)修饰包被。用透射电子显微镜(TEM)观测MNPs的大小、形貌、分散性等,X射线衍射仪(XRD)表征其晶体结构,振动样品磁强仪(VSM)测试磁性特性。用CCK-8检测修饰和未修饰的MNPs对正常人肝外胆管上皮细胞(HEBEpiC)的毒性作用。结果TEM结果显示,PEG修饰前Zn_0.54Co_0.46Cr_0.6Fe_1.4O₄存在明显的聚集现象;PEG修饰后,Zn_0.54Co_0.46Cr_0.6Fe_1.4...     

DEAE-磁性纳米粒子提纯质粒的研究

目的应用纳米磁性粒子纯化质粒.方法将葡聚糖-DEAE通过共沉淀法包裹在纳米磁性粒子表面,利用带正电荷的DEAE与带负电荷的核酸之间的电荷吸附作用,通过离子交换,在细菌裂解上清液中提纯质粒.结果可以提纯出高纯度的质粒.结论在纳米磁性粒子外包裹上DEAE基团,可以提纯出高纯度的质粒.     

树突状细胞介导的肝癌免疫治疗实验研究

目的探讨以树突状细胞（DC）为介导的原发性肝癌免疫治疗新方法。方法采用肝癌细胞制备肿瘤细胞性抗原冲击致敏体外培养的DC,体外混合淋巴细胞反应检测抗原致敏DC;刺激同基因T淋巴细胞增殖的能力,观察负载肿瘤抗原的DC;体内外诱导产生肿瘤特异性细胞毒T淋巴细胞（CTL）及其抗肿瘤能力。结果经肝癌细胞抗原致敏的DC;能诱导较强的自体T细胞增殖,且诱导特异性CTL,该CTL对自体肝癌细胞具有很强的杀伤活性,杀伤率明显高于DC和未经肝癌细胞抗原致敏的DC;激活的CTL及T淋巴细胞的杀伤率,而对非同种肿瘤细胞无明显的杀伤作用,经BEL7402肿瘤细胞抗原致敏的DC;经皮下免疫小鼠可诱导有效的免疫保护作用,可抵抗野生型BEL7402细胞的再攻击,肿瘤生长受到明显抑制,瘤体出现延迟,生长减慢。结论DC具有强大的刺激T淋巴细胞增殖和诱导产生特异性CTL的能力,在体内外均能激发特异性抗肿瘤免疫应答。     

AURKA介导DNA损伤修复通路对肝癌细胞HepG2的影响

目的 通过体内和体外实验探讨Aurora A蛋白激酶(AURKA)介导DNA损伤修复通路对人肝癌细胞HepG2的影响.方法 用shRNA和AURKA过表达质粒转染人肝癌细胞HepG2,以获得稳定转染的细胞系;通过CCK8实验、细胞克隆形成实验和细胞划痕实验观察AURKA对细胞增殖及迁移侵袭能力的影响;使用α-微管蛋白(...     

苦参碱对乳腺癌细胞杀伤作用的体外实验研究

目的 研究苦参碱(matrine)对体外培养的人乳腺癌细胞MCF-7增殖的影响及相关机制.方法 采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测不同浓度的苦参碱对MCF-7细胞增殖的影响;采用流式细胞术(FCM)检测不同浓度的苦参碱作用于MCF-7细胞后细胞周期分布、凋亡率及Bax,Bcl-2蛋白的表达水平.结果 苦参碱对MCF-7细胞的增殖具有明显的抑制作用,与对照组相比具有显著性差异(P＜0.05),并呈现时间和剂量依赖性;细胞周期被阻滞于G0/G1期;苦参碱能够诱导细胞凋亡,并且上调Bax蛋白的表达,下调Bcl-2蛋白的表达.结论 苦参碱可显著抑制MCF-7细胞的增殖,且抑制作用呈剂量和时间依赖性.苦参碱对MCF-7细胞的增殖抑制作用可能与其诱导细胞周期阻滞及凋亡有关,诱导凋亡可能与其上调Bax蛋白表达、下调Bcl-2蛋白表达有关.     

鸢尾黄素体外对人宫颈癌Caski细胞增殖的影响

目的:探讨鸢尾黄素对人宫颈癌Caski细胞增殖的影响。方法:将人宫颈癌Caski细胞加入不同浓度的鸢尾黄素,用MTT比色法观察鸢尾黄素对人宫颈癌Caski细胞生长的影响,光镜观察细胞形态学变化,ELISA方法检测细胞中环氧合酶-2(COX-2)蛋白含量的变化,Western Blot方法检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的变化。结果:鸢尾黄素体外作用于人宫颈癌Caski细胞后可以抑制其增殖,且呈剂量依赖性,同时COX-2蛋白含量降低,bax蛋白表达增强、Bcl-2蛋白表达降低。结论:鸢尾黄素体外能抑制人宫颈癌Caski细胞的增殖。     

顺铂对肝癌HepG2细胞增殖抑制作用的实验研究

目的探讨顺铂对肝癌HepG2细胞增殖的影响。方法将肝癌细胞株传代培养至对数生长期,分组加入不同浓度的顺铂,并设空白对照组,用MTT比色法观察顺铂对体外培养的肝癌细胞生长的抑制作用,在光学显微镜下观察细胞形态学变化。结果 MTT比色法测定显示,顺铂作用于肝癌HepG2细胞后可以抑制其增殖且呈剂量依赖性。结论顺铂能抑制体外培养的肝癌Hepg2细胞的增殖。     

透明质酸合酶-2在癌相关成纤维细胞促进舌癌细胞侵袭中的作用

目的:检测透明质酸合酶2 (hyaluronan synthase 2,HAS2) 在正常成纤维细胞(normal zone fibroblasts,NFs)及癌相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)中的表达,并探讨其在CAFs介导的舌鳞癌细胞系Cal27侵袭行为中的作用?方法:分别从同一舌癌患者手术切除标本的癌组织及癌旁组织获取CAFs和NFs?免疫细胞化学?Western blot法鉴定细胞表型?实时定量RT-PCR及Western blot检测透明质酸合酶在两种细胞中的表达?利用Transwell小室共培养模型,观察CAFs及NFs对舌癌细胞系Cal27侵袭能力的影响?利用siRNA抑制CAFs 中的HAS2,并分析其对Cal27侵袭能力的影响?结果:α-SMA表达于CAFs,NFs中几乎无表达?Cal27在CAFs组中的侵袭力显著高于NFs组及空白对照组(P < 0.01)?实时定量RT-PCR结果显示HAS2在CAFs中的表达是NFs的7倍(P < 0.01),蛋白水平则为NFs的3倍(P < 0.01);Cal27在HAS2干扰组的侵袭力显著低于CAFs组及无关序列组(P < 0.01)?结论:CAFs具有促进舌癌细胞侵袭能力的作用,高表达HAS2可能是其作用机制之一,抑制肿瘤微环境中CAFs的HAS2功能可能是一条新的抗肿瘤侵袭转移的途径?     

消癌平联合X射线照射对人肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响

目的：通过检测消癌平（XAP）联合X射线照射后肝癌HepG₂细胞增殖、周期和凋亡的变化,阐明二者联合抗肿瘤作用的相关机制。方法：选取处于对数生长期的人肝癌HepG₂细胞,分为对照组、XAP组、2 Gy照射组和XAP+2 Gy照射组。采用75 mg·L^-1终浓度XAP注射液处理细胞,12 h后给予2 Gy X射线照射。采用CCK8试剂盒检测细胞增殖活性,采用PI单染和Annexin Ⅴ-FITC双染流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡率,采用Western blotting法检测凋亡蛋白caspase-3的表达。结果：经药物处理后,在12、24和48 h时,与对照组比较,XAP组、2 Gy照射组和XAP+2 Gy照射组细胞增殖活性明显降低（P<0.05或P<0.01）,S期和G₂/M期细胞周期百分率明显增加（P<0.05或P<0.01）,细胞凋亡率明显升高（P<0.05或P<0.01）;且与XAP组和2 Gy照射组比较,XAP+2 Gy照射组变化更明显（P<0.05或P<0.01）;Western blotting法检测,caspase-3被切割成相对分子质量为17000和19000的片段,与对照组比较其表达水平升高。结论：XAP联合X射线照射可以抑制肝癌细胞增殖、诱导G₂/M期细胞阻滞和凋亡,二者联合应用具有协同抗肿瘤作用。     

慢病毒介导FGFR1 沉默对肺癌细胞 增殖和凋亡的影响

目的 探讨慢病毒介导成纤维生长因子受体1（FGFR1）沉默对肺癌细胞增殖和凋亡的影响。 方法 构建慢病毒表达载体LV-shFGFR1,对其进行包装和病毒颗粒制备。将A549 肺癌细胞分为干扰组、 空载体组及对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应和Western blotting 检测各组细胞FGFR1 mRNA 和蛋白 相对表达量,MTT 比色法检测细胞增殖情况,流式细胞术和Hoechest 染色检测细胞凋亡情况。结果 ① 3 株 肺癌细胞中,A549 细胞的FGFR1 mRNA 相对表达量高于H3255 和A-427 细胞（P <0.05）。② 3 组A549 细 胞中FGFR1 mRNA 和蛋白的相对表达量比较,差异有统计学意义（P <0.05）;空载体组与对照组比较,差异 无统计学意义（P >0.05）;干扰组低于对照组（P <0.05）。③干扰组、空载体组、对照组0、12、24、48 和 72 h 的A549 细胞增殖情况比较,不同时间点、各组间、随时间变化趋势均有差异（P <0.05）。④ 3 组A549 细胞凋亡率比较,差异有统计学意义（P <0.05）;空载体组与对照组比较,差异无统计学意义（P >0.05）;干 扰组高于对照组（P <0.05）。结论 慢病毒介导FGFR1 沉默抑制A549 肺癌细胞增殖,同时促进肺癌细胞凋亡, 提示FGFR1 可能参与肺癌细胞的发生、发展过程。     

抑制USP22基因对人结直肠癌细胞增殖的影响

目的 利用RNA干扰技术探讨泛素特异性肽酶22（USP22）对人结直肠癌细胞增殖的影响。方法 免疫荧光检测结直肠癌组织中USP22的表达;Western blotting检测体外培养的HCT-116、SW480、HC-29结直肠癌细胞株中USP22的表达,筛选出表达量最高的细胞作为研究细胞。设计、合成针对USP22特异性siRNA,同时设置阴性对照siRNA,利用脂质体转染结直肠癌细胞后,Western blotting检测siRNA抑制效率;通过MTT法检测细胞的增殖能力;流式细胞术检测细胞的周期及凋亡;Western blotting检测周期相关蛋白CyclinB1、p21、p53、CDK2的表达。结果 结直肠癌组织中USP22表达量与癌旁组织比较,差异有统计学意义（P?<0.05）,结直肠癌组织中USP22表达量升高。SW480细胞中USP22的表达量最高,因此作为靶细胞进行后续研究。与对照组比较,USP22 siRNA能够降低USP22的表达（P?<0.05）。USP22抑制后,与对照组比较,能够抑制SW480细胞的增殖,促使SW480细胞停滞于G0/G1期,抑制细胞周期进程,增加细胞凋亡率（P?<0.05）,进而抑制细胞增殖（P?<0.05）;同时,与对照组比较,CyclinB1、CDK2的表达量降低（P?<0.05）,p53和p21的表达量升高（P?<0.05）。结论 USP22抑制后,能够抑制结直肠癌细胞的增殖,其机制可能与抑制细胞周期进程、促进细胞凋亡有关。     

泛素结合酶-10表达对结直肠癌细胞增殖的影响

目的 探讨泛素结合酶-10(Ubiquitin-conjugafing enzymes,UbcH10)表达对结直肠癌细胞增殖的影响.方法 采用脂质体LipofectamineTM 2000转染人UbcH10的真核表达载体pcDNA3.1-UbcH10及其对照载体pcDNA3.1至结直肠癌细胞LoVo,蛋白印迹(West...