Livin在肾细胞癌索拉菲尼耐药中的作用及相关机制

【摘要】 目的 研究凋亡抑制蛋白livin在肾细胞癌（RCC）索拉菲尼耐药中的作用以及相关机制。方法 通过免疫组织化学方法检测livin在人正常肾组织和RCC组织标本中的表达;通过载有livin过表达质粒的慢病毒感染RCC细 胞786-0细胞系,从而成功过表达livin,并通过MTT实验检测对照组（negative control,NC）和实验组（livin过表达）细 胞对不同浓度索拉菲尼的敏感性,最后通过Western blot的方法检测两组细胞内凋亡相关的指标Caspase3的表达情况以探究livin调控肾细胞癌对索拉菲尼耐药的相关机制。结果 与正常肾组织相比,livin在RCC组织中表达明显升高, 两组livin表达的差异有统计学意义（P＜0.0001）。体外细胞实验证实,与对照组相比,实验组86-O细胞系在48小时后 对不同浓度的索拉菲尼（3 μM, 6 μM, 9 μM）出现了耐受性。索拉菲尼（9 μM）处理786-O对照细胞48小时后,cleaved caspase3表达上调。索拉菲尼分别处理对照和过表达livin的786-0细胞48小时后,与对照组相比,livin过表达的786-O细胞的cleaved caspase3表达下调。结论 livin通过调节cleaved caspase 3的表达从而影响RCC对索拉菲尼的敏感性。     

索拉菲尼诱导的肝癌耐药细胞株的建立及其生物学特性

目的建立索拉菲尼诱导的PLC/PRF/5和Huh7耐药细胞株,并研究其耐药细胞的生物学特性。方法通过药物敏感性实验CCK8法测定索拉菲尼的半数抑制浓度IC50值;采用体外间歇诱导法,使用PLC/PRF/5和Huh7各自IC50值作为筛选浓度,建立索拉菲尼诱导的耐药细胞株模型;Real time-PCR检测5种耐药基因(GST-π、LRP、MDR1、MRP、TopoⅡ)在耐药组和对照组中的表达差异;Western blot检测MAPK信号通路中关键信号因子细胞外调节蛋白激酶(extra-cellular regulated protein kinases,ERK)ERK1/2在不同组别细胞中的磷酸化水平差异。结果所筛选的PLC/PRF/5和Huh7耐药组细胞与对照组细胞相比较,其细胞生存率有显著性提高(P<0.05);5种耐药基因中MDR1的表达有显著性上调(P<0.05);索拉菲尼作用靶点的下游信号因子ERK1/2的磷酸化水平上调。结论成功地在体外建立索拉菲尼诱导的PLC/PRF/5和Huh7耐药细胞株,其耐药机制可能与ERK1/2的磷酸化水平上调导致耐药基因MDR1高表达有关。     

索拉菲尼诱导的肝癌耐药细胞株的建立及基因表达分析

目的 建立索拉菲尼诱导的肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)耐药细胞株,筛选出耐药细胞株中的高表达基因,进一步探讨肝细胞癌中与索拉菲尼耐药的相关基因.方法: 选取人肝癌细胞株PLC及Huh7,采用药物间歇诱导法分别建立索拉菲尼诱导的耐药细胞株,运用高通量测序技术(RNA-Seq)测定两株耐药细胞株中高表达基因,运用生物信息学数据库分析高表达基因与肝癌临床生物学指标相关性,筛选出肝癌耐药机制中可能参与的基因.结果: 通过基因测序得到两株肝癌耐药细胞株中的高表达基因,在设定的限定条件下进行进一步筛选, 限定条件为两株耐药细胞中共同表达的基因且表达差异倍数大于4倍,差异具有统计学意义(P<0.05),发现两株耐药细胞共同表达前12位基因符合限定条件,进一步运用Ualcan数据库分析12个基因与肝癌组织表达水平,分期,分级及生存的关系,筛选出符合条件的基因CBX4.结论: 成功构建了索拉菲尼诱导的肝癌耐药细胞株,并筛选出与索拉菲尼耐药相关基因CBX4,为进一步耐药机制探讨提供依据.     

索拉菲尼诱导的肝癌耐药细胞株的建立及基因表达分析

目的 建立索拉菲尼诱导的肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)耐药细胞株,筛选出耐药细胞株中的高表达基因,进一步探讨肝细胞癌中与索拉菲尼耐药的相关基因.方法: 选取人肝癌细胞株PLC及Huh7,采用药物间歇诱导法分别建立索拉菲尼诱导的耐药细胞株,运用高通量测序技术(RNA-Seq)测定两株耐药细胞株中高表达基因,运用生物信息学数据库分析高表达基因与肝癌临床生物学指标相关性,筛选出肝癌耐药机制中可能参与的基因.结果: 通过基因测序得到两株肝癌耐药细胞株中的高表达基因,在设定的限定条件下进行进一步筛选, 限定条件为两株耐药细胞中共同表达的基因且表达差异倍数大于4倍,差异具有统计学意义(P<0.05),发现两株耐药细胞共同表达前12位基因符合限定条件,进一步运用Ualcan数据库分析12个基因与肝癌组织表达水平,分期,分级及生存的关系,筛选出符合条件的基因CBX4.结论: 成功构建了索拉菲尼诱导的肝癌耐药细胞株,并筛选出与索拉菲尼耐药相关基因CBX4,为进一步耐药机制探讨提供依据.     

长期索拉菲尼暴露促进Huh7肝癌细胞上皮间质变的实验研究

目的探讨索拉菲尼耐药肝癌细胞发生上皮间质变(EMT)及侵袭、转移能力增强的机制。方法通过药物连续诱导人肝癌细胞株Huh7建立索拉菲尼耐药肝癌细胞株Huh7R,显微镜下观察细胞形态学变化;CCK-8细胞增殖试验检测Huh7R细胞增殖能力;荧光定量PCR检测ABC家族耐药基因ABCB1、ABCC1、ABCG2及EMT相关调控锌指蛋白转录因子Snail、Slug基因表达水平;Westernblot检测耐药蛋白ABCG2,EMT标记分子E-cadherin、Vimentin及N-cadherin,转录因子Snail、Slug蛋白表达水平;Transwell小室侵袭试验检测Huh7R细胞迁移、侵袭能力。结果Huh7R细胞呈细长形,伴纤维状突起,形态学上符合EMT改变;CCK-8细胞增殖试验显示在索拉菲尼作用下,Huh7R细胞生存率高于Huh7细胞;荧光定量PCR结果显示,Huh7R细胞ABCB1、ABCC1、ABCG2及Snail、Slug基因表达水平均高于Huh7细胞（均P＜0.05）;Westernblot显示,Huh7R细胞上皮标记蛋白E-cadherin表达水平低于Huh7细胞（P＜0.05）,而间质标记蛋白Vimenti、N-cadherin及Snail、Slug蛋白表达水平均高于Huh7细胞（均P＜0.05）;Transwell小室侵袭试验显示Huh7R细胞迁移、侵袭能力均较Huh7细胞增强。结论长期低剂量索拉菲尼暴露会促进肝癌细胞Snail和Slug表达,诱导肿瘤细胞发生EMT,增强其侵袭、转移能力。     

细胞自噬在三氧化二砷诱导肝癌细胞凋亡中的作用研究

【摘要】 目的 研究细胞自噬在三氧化二砷（ATO）诱导的肝癌细胞死亡中的作用,观察调控细胞自噬对ATO诱导的细胞凋亡有何影响。方法 以人肝癌HepG2细胞为研究对象,在ATO作用于HepG2细胞的基础上,加入自噬激动剂〔雷帕霉素（Rap）〕和自噬抑制剂〔三甲基腺嘌呤（3-MA）〕进行调控。以MTT法检测细胞生存率,透射电镜观察自噬体结构,免疫印迹法分析自噬相关蛋白LC-3和Beclin1的表达;流式细胞术检测细胞凋亡。结果 5~20 μmol/L ATO与10 mmol/L 3-MA联用时HepG2细胞存活率比同剂量ATO单独作用时降低（P <0.05）,凋亡率增加（P <0.05）,细胞内呈现典型凋亡反应特征,自噬蛋白LC3和Beclin1表达低于ATO单独作用组（P <0.05）。相反,5~20 μmol/L ATO与0.25 μmol/L Rap联用时,HepG2细胞的存活率比ATO单独作用时显著增加（P <0.05）,凋亡率降低（P <0.05）,细胞内出现大量自噬体结构,自噬蛋白LC3和Beclin1的表达较ATO单独作用组有增加趋势,但差异无统计学意义（P >0.05）。结论 特异性自噬抑制剂能显著增强ATO杀伤肝癌细胞的敏感性,其机制与增强肝癌细胞凋亡有关。     

索拉菲尼治疗肝癌肝移植术后肿瘤复发患者的疗效及安全性分析

目的探讨索拉菲尼治疗原发性肝细胞癌肝移植术后肿瘤复发患者的临床疗效和安全性。方法 10例肝移植术后肿瘤复发患者,确诊复发后即口服索拉菲尼400 mg,每日两次治疗(A组);8例未接受索拉菲尼治疗的肝癌肝移植术后肿瘤复发患者(B组);同期接受相同剂量的索拉菲尼治疗的肝癌患者25例(C组)。比较3组患者的带瘤生存时间、索拉菲尼的毒副作用及其他不良反应发生情况。结果 3组患者的带瘤生存时间分别为5~22个月(中位数10个月)、1~8个月(中位数4个月)和2~21个月(中位数4个月),三组之间整体间差异有统计学意义(K-M法,以log-rank检验,P=0.045)。两组肝移植患者没有发生急性排斥反应,但服用索拉菲尼组有1例患者因上消化道出血而死亡,服用索拉菲尼的两组患者不良反应发生率差异无统计学意义(P>0.05)。结论索拉菲尼能明显延长肝癌肝移植术后肿瘤复发患者的生存期,并不增加排斥反应发生率。     

索拉菲尼相关的冠状动脉痉挛机制

依据临床报道及药物靶点研究的进展,索拉菲尼、舒尼替尼和帕唑帕尼这些小分子酪氨酸激酶抑制剂引起的高血压已众所周知,其引起的心肌缺血也已经有报道,对血管内皮生长因子信号通道阻滞剂相关缺血的机制进一步探讨以助于临床医生接受这一不良反应。     

顺铂通过诱导膀胱癌细胞自噬促进细胞凋亡

目的：研究自噬在顺铂引起膀胱癌细胞凋亡中的作用。方法：以膀胱癌细胞T24为细胞模型,利用透射电镜观察自噬泡形成,荧光显微镜观察转染绿色荧光蛋白和微管相关蛋白1轻链3融合蛋白（green fluorescent protein and microtubule associated protein 1 light chain 3 fusion protein,GFP-LC3）的质粒的荧光聚集情况。应用蛋白质免疫印迹检测LC3-Ⅱ的积累,检测顺铂能否诱导膀胱癌T24细胞发生自噬。此外,蛋白质免疫印迹还被用来检测自噬相关信号通路哺乳动物雷帕霉素受体（mammal target of rapamycin, mTOR）及其下游相对分子质量70 000的核糖体蛋白质S6激酶（70 000 ribosomal protein S6 kinase,P70S6K）的变化,以及凋亡标志蛋白聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(poly ADP-ribose polymerase,PARP)的切割,之后利用3-(4,5-二甲基)-5-(3-羧甲基苯环)-2-(4-硫基苯)-2H-四唑盐复合物检测法［ 3-( 4, 5-dimethylthiazol-2-yl)-5-( 3-carboxymethoxyphenyl)-2-( 4-sulfophenyl)-2H- tetrazolium, inner salt,MTS］观察在自噬促进剂雷帕霉素（rapamycin）存在与否的情况下顺铂引起的膀胱癌细胞活力变化。本实验还使用了RNA干扰技术敲降LC3表达。结果：电子显微镜显示相比对照组,顺铂可以引起膀胱癌细胞出现大量自噬泡。荧光显微镜观察GFP-LC3聚集程度,顺铂组也明显高于对照组。蛋白质免疫印迹检测LC3的结果发现顺铂组的LC3-Ⅱ含量随时间延长和顺铂浓度增加而明显增加,尤其是在48 h时,50与100 μmol/L顺铂处理下LC3-Ⅱ/Actin（%）的灰度值分别升高了30和44,而mTOR/P70S6K的磷酸化也受到顺铂处理的抑制,在48 h,100 μmol/L顺铂处理下其磷酸化条带几乎完全被抑制。MTS结果发现顺铂可导致细胞活力的丢失,在50和100 μmol/L顺铂处理24 h时分别下降了12%和35%,而且用自噬促进剂雷帕霉素和顺铂联合处理组的细胞活力丢失大于单用顺铂处理的对照组（F=74.890,P<0.01）。RNA干扰实验显示,敲降自噬相关基因LC3,可减少顺铂引起的PARP剪切,细胞凋亡减少。结论：发现顺铂可以引起膀胱癌细胞T24发生自噬,并发现该自噬的作用能促进顺铂诱导的细胞凋亡。     

索拉菲尼诱导大鼠肝细胞癌形成过程中巨噬细胞和自然杀伤细胞的聚集

目的 探讨多分子靶点药物索拉菲尼(Sorafenib)对肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)形成过程中巨噬细胞标记物CD68和自然杀伤细胞标记物CD57的分布、表达情况的影响.方法 改良法建立HCC模型,设立正常对照组(A组)、单纯模型组(B组)、早期单倍组(C组)、早期双倍组(D组)、晚期单倍组(E组)、晚期双倍组(F组),在HCC形成早期和晚期应用单、双倍剂量的索拉菲尼对C～F组进行干预,用免疫组织化学方法动态观察HCC组织中CD57、CD68和CD34的变化.结果 B组CD57、CD68阳性细胞的数目逐渐增加,各个实验组(C～F组)分别在第12、14周时出现峰值后不同程度的减少,而D、F组在第18周后两者数目减少不明显,其中第20、22周时D、F组分别与B组相比均显著增加(P＜0.05),同时D组比C组,F组比E组以及D组比F组亦显著增加(P＜0.01,P＜0.05),其余各组之间比较差异无统计学意义(P＞0.05).B组CD34阳性细胞数目逐渐增加,各个实验组(B～F组)在第16周后随诱癌时间延长有不同程度的减少,D组与C、E、F组相比亦显著减少(P＜0.05).结论 索拉菲尼不仅可以抑制HCC组织的血管生成,还可以诱导HCC组织中的巨噬细胞和自然杀伤细胞的聚集,以早期双倍剂量组更明显,提示索拉菲尼治疗HCC的分子机制可能存在一种新的免疫调节机制,并呈剂量依赖性.     

肿瘤相关巨噬细胞在多发性骨髓瘤发病机制中的作用

多发性骨髓瘸（multiple myeloma,MM）是一种起源于B细胞系的恶性单克隆性浆细胞疾病,临床主要表现为贫血、溶骨性病变、骨痛、免疫缺陷和肾功能不全等.MM的发病机制目前尚未明确,但其发生发展与骨髓微环境密切相关.肿瘤相关巨噬细胞（tumor-associated macrophages,TAMs）作为骨髓微环境的一类炎性细胞,对MM的发病起着重要作用.TAMs主要由循环中的单核细胞募集进入肿瘤组织中,在肿瘤细胞来源的一些细胞因子的刺激作用下,分化为成熟的巨噬细胞,具有不同于炎症环境中的巨噬细胞的特定表型及功能.TAMs可分泌多种细胞因子,促进肿瘤生长、侵袭、转移以及血管新生;TAMs也具有免疫抑制作用,抑制适应性免疫应答,促进肿瘤免疫逃逸;TAMs还可通过促进异常血管新生、影响药物在血液中的运输以及削弱肿瘤细胞凋亡信号等途径诱导肿瘤细胞耐药.因此,TAMs可能成为治疗MM的一个靶点.现就TAMs及其在MM发病机制中的作用作一述评.     

肿瘤相关巨噬细胞促进肿瘤血管生成和转移的研究进展

巨噬细胞起源于血液单核细胞,在不同的刺激因素作用下,巨噬细胞可分化为经典激活的巨噬细胞(M1型)和选择性激活的巨噬细胞(M2型).现在认为,肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages,TAM)具有M2型巨噬细胞表型.TAM在肿瘤中大量浸润被认为是肿瘤患者预后不良的重要标志.TAM通过多种...     

青蒿琥酯诱导人白血病细胞K562凋亡的实验研究

目的观察青蒿琥酯对人白血病细胞株K562抑制增殖和凋亡作用.方法通过MTT显色法观察不同浓度青蒿琥酯对K562的生长抑制作用,通过Annexin V/PI双标记法检测青蒿琥酯对K562细胞的凋亡诱导作用.结果青蒿琥酯在1～8μg/ml浓度范围内能分别明显抑制K562细胞的增殖,并具有时间和浓度的依赖性;在2～8μg/ml浓度范围内青蒿琥酯诱导K562细胞凋亡具有明显的量效关系;4μg/ml浓度组的青蒿琥酯在0～72h内,诱导K562凋亡具有明显的时效关系.结论青蒿琥酯在体外能抑制K562细胞的增殖,可能是通过诱导其发生凋亡而起作用.     

索拉菲尼联合三氧化二砷对肝癌细胞株的抑制作用

目的 检测索拉非尼单药、As2O3,单药以及两药联合对肝癌细胞株nepG2的作用.探讨两药联用的协同抗肿瘤机制.方法 以不同浓度的索拉非尼和不同浓度的As2O3分别组成单药组和索拉非尼 As2O3联合用药组,另设不加药的对照组,作用于HepG2细胞.MTT法检测索拉非尼、As2O3单药及联用对HepG2细胞的增殖抑制作用,Annexin V-FITC/PI双染检测肿瘤细胞凋亡,罗丹明123染色观察细胞线粒体膜电位.Westernblotting检测ERK、P-ERK蛋白表达.结果 索拉非尼、As2O3单药与联用均能抑制HepG2细胞增殖,呈剂量.时间依赖效应,两药联用有交互效应(P<0.05).索拉非尼、As2O3单药与联用均能诱导HepG2细胞凋亡,联合组更为明显(P<0.05).两药联用能使线粒体膜电位明显下降,较两药单用和对照组有统计学意义.用药后ERK蛋白表达无明显改变,而pERK表达下降,联合用药组尤显.结论 索拉非尼、As2O3单药及联用均能抑制HepG2细胞增殖,诱导其凋亡.索拉非尼与As2O3联合作用于人肝癌HepG2细胞具有协同作用,其机制可能是共同诱导线粒体膜电位下降及抑制Raf/MEK/ERK信号传导通路.     

Expression of TRAIL and its receptors in primary hepatic carcinoma and apoptosis-inducing effect of HrsTRAIL on hepatoma cell line HepG2

Objective： To investigate the expression of tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand（TRAIL） and its receptors in primary hepatic carcinoma （PHC） and the apoptosis-inducing effect on hepatoma cell line HepG2. Methods： TRAIL and its receptors were detected by semiquantitive RT-PCR in 30 PHC and para-carcinoma tissues and two hepatoma cell lines of HepG2 and SMMC-7721. HepG2 cells were treated with human recombinant soluble TRAIL protein （HrsTRAIL） and then the viability of HepG2 cells was measured by microculture tetrazolium dye（MTT） assay and apoptosis index was demonstrated by fluorescence-activated cell sorting （FACS）. Results：TRAIL and its receptors were detectable in all PHC and para-carcinoma tissues and hepatoma cell line HepG2. TRAIL, death receptor 4 （DR4）, DR5, and decoy receptor 2 （DcR2） but not DcR1 were detectable in hepatoma cell line SMMC-7721. The expression patterns of TRAIL receptors in HepG2 were quite similar to PHC specimens. The semiquantitive results showed that the expression level of TRAIL and DcR were lower but DR was higher in hepatoma tissues than in para-carcinoma tissues. In PHC tissues, the expressions of DR were higher than DcR, while there was no difference in para-carcinoma tissues. HrsTRAIL had potent antitumor activity in a time- and dose-dependent manner. After co-incubations of the HepG2 cells in the presence of HrsTRAIL at concentration 1 000 ng/ml for 24 hours, the viability of HepG2 cells decreased to 45% and the apoptosis index reached 51%. Conclusion ：TRAIL and its receptors were expressed in both PHC tissues and para-carcinoma tissues but the expression levels were different. The lower expression of TRAIL in PHC tissues suggested that insufficient apoptosis occured in the development of PHC. High expression of DR in PHC tissues may be a self-defense mech- anism and may afford a theory of HrsTRAIL therapy for PHC. HrsTRAIL may be a potential cytotoxic drug for PHC, and it can kill majority of HepG2 cells, but minority of HepG2 were resistant to TRAIL-inducing apoptosis.     

RNA干扰技术抑制EC-109细胞survivin基因表达及其促凋亡研究

目的:应用RNA干扰技术(RNAi)研究针对survivin基因的siRNA,抑制survivin基因的表达并诱导食管癌细胞系EC-109细胞的凋亡. 方法:构建针对survivin的siRNA表达质粒,转染至EC-109细胞,荧光显微镜判断转染效率,蛋白质印迹和半定量RT-PCR检测survivin蛋白表达及基因转录水平的变化,并在不同时间点收集转染细胞,利用流式细胞术及基因组DNA凋亡检测试剂盒,观察siRNA抑制survivin基因表达后诱导细胞凋亡的情况. 结果:荧光显微镜结果表明,重组质粒转染效率达46.70%. 半定量RT-PCR检测到pSIREN/S质粒在EC-109细胞内对survivin基因的转录抑制率为74.04%;蛋白质印迹结果表明,转染重组质粒pSIREN/S的EC-109细胞survivin蛋白表达量仅为正常组的41.64%,而对照质粒pSIREN/CN对survivin基因的蛋白表达及转录均没有抑制作用. 经pSIREN/S转染的EC-109细胞基因组DNA出现明显的DNA ladder,流式细胞仪分析结果也显示凋亡细胞为60.78%. 结论:survivin特异性siRNA可明显抑制survivin基因的转录和表达,并能有效地诱导EC-109细胞的凋亡,为下一步在体内利用pSIREN/S重组质粒沉寂survivin基因,促肿瘤细胞的凋亡提供实验基础.     

双特异单克隆抗体介导的人单核－巨噬细胞对肝癌细胞的杀伤作用

目的：证实双特异性单克隆抗体在肝癌导向治疗，尤其是细胞免疫治疗方面的作用．方法：用化学交联剂ＳＰＤＰ将抗肝癌单克隆抗体ＨＡｂ１８与抗单核－巨噬细胞单克隆抗体ＭＡｂ７联结成双特异抗体ＨＡｂ１８－ＭＡｂ７；用流式细胞仪证实其双特异性；软琼脂培养法证明其对肝癌细胞的导向杀伤作用．结果：ＨＡｂ１８－ＭＡｂ７具有特异性地结合肝癌细胞及单核－巨噬细胞的双重特性；软琼脂培养结果表明：ＨＡｂ１８－ＭＡｂ７实验组较对照组克隆形成率明显降低（Ｐ＜０．０１）．结论：ＨＡｂ１８－ＭＡｂ７可明显提高单核巨噬细胞对肝癌细胞的杀伤作用．     

过表达RIP140的肿瘤相关巨噬细胞抑制肝癌细胞的侵袭和增殖

目的探讨肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）中RIP140 的表达对肝癌细胞侵袭、增殖的影响。方法慢病毒介导小鼠腹腔巨 噬细胞（PMs）RIP140 的过表达,Western blot 和Real-time PCR（qRT-PCR）分别检测PMs中RIP140 蛋白以及核酸表达水平, 流式细胞仪分析慢病毒转染率;Western blot、细胞免疫荧光和qRT-PCR 检测肝癌条件培养基（HCM）刺激PMs 后TAMs中 RIP140 的表达变化;HCM刺激PMs以及HCM刺激过表达RIP140 的PMs,qRT-PCR检测TAMs极化指标以及NF-κB和IL-6 的表达;Transwell 实验和细胞流式凋亡实验检测肝癌细胞的侵袭和凋亡;肝癌细胞和PMs以4∶1 比例注射于BALB/c裸鼠皮 下,建立裸鼠皮下肝癌模型,成瘤癌组织HE染色和免疫组化评定肝癌组织大体生长情况和肝癌细胞增殖能力。结果慢病 毒介导PMs RIP140 的过表达,病毒转染效率高,RIP140 过表达明显;HCM刺激PMs后,TAMs中RIP140 呈低表达;HCM诱 导TAMs呈M2 型极化,并且与肿瘤生长密切相关的NF-κB-IL-6 轴处于活化状态;TAMs可促进肝癌细胞侵袭和增殖,抑制 肝癌细胞凋亡。TAMs过表达RIP140 可抑制HCM介导的TAMs M2 型极化并抑制NF-κB/IL-6 通路的激活,减少IL-6 的释 放;除此之外,TAMs过表达RIP140 可抑制肝癌细胞的侵袭和增殖,促进肝癌细胞的凋亡。结论过表达RIP140 的TAMs可 抑制肝癌细胞的侵袭和增殖。其机制可能与TAMs过表达RIP140后抑制TAMs M2型极化有关。     

白细胞介素-2增强肿瘤坏死因子对人肝癌细胞的细胞毒作用

为了观察白细胞介素－2（IL－2）增强肿瘤坏死因子（γTNF）对人肝癌细胞的细胞毒作用，采用四甲基偶氮唑盐（MTT）光比色法规定了IL－2、γTNF单用及IL－2与γTNF合用对原发性肝癌细胞系H7402的细胞毒作用。结果表明：γTNF对H7402有直接抑制作用，最大抑制率为35．2％，IL－2对H7402无直接细胞毒作用，但能明显增强γTNF对H7402的抑制作用，二者合用的最大抑制率达51．6％，与单纯应用γTNF对H7402抑制作用相比，差异显著（P＜0．01）。提示：IL－2有明显增强γTNF对肝癌细胞系的细胞毒作用。     

青蒿素对人肝癌HepG2细胞增殖的影响

目的：研究不同浓度和作用不同时间的青蒿素对人肝癌细胞HepG2生长的抑制作用。方法取对数生长期的细胞接种于96孔板,给予不同浓度的青蒿素0．10．20．40．60．81．01．2 mmol／L）处理,给药24 h后在倒置显微镜下观察细胞形态的改变,并用MTT法检测药物的细胞毒作用。结果倒置显微镜下,细胞随药物浓度和作用时间的增加对细胞的毒性作用增强,细胞数目均有所减少,多数细胞体积固缩变小,失去原有肿瘤细胞形态而略呈圆形。 MTT结果显示,不同浓度青蒿素对肿瘤细胞的抑制效果呈现出浓度和时间的依赖性。1．2 mmol／L的青蒿素,作用细胞24 h后的抑制率达到了81．33％。结论青蒿素在体外对肝HepG2细胞的增殖有明显的抑制作用,并呈现一定的时间和剂量依赖性。