基于Ngn3和Caspase-3探讨姜黄素对宫内发育迟缓仔鼠胰腺发育及糖脂代谢的影响

【目的】观察宫内发育迟缓（IUGR）仔鼠的胰腺发育及糖脂代谢情况及姜黄素的干预机制。【方法】采用日粮限饲的方法构建IUGR新生大鼠模型。将20只健康仔鼠分为健康组（健康仔鼠+基础饲料）、健康+姜黄素组（健康仔鼠+姜黄素+基础饲料）,20只IUGR仔鼠分为IUGR组（IUGR仔鼠+基础饲料）和IUGR+姜黄素组（IUGR仔鼠+姜黄素+基础饲料）。给药结束后,检查仔鼠血糖、血脂水平,采用苏木素-伊红（HE）染色法观察胰腺发育情况,末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记（TUNEL）法测定胰岛β细胞凋亡率,免疫组织化学法、蛋白免疫印迹（Western Blot）法分别检测胰腺组织中Ngn3、Caspase-3阳性细胞数、蛋白表达水平。【结果】（1）与健康组比较,IUGR组仔鼠空腹血糖、总胆固醇（TC）及低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）水平均升高,高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）水平降低（均P<0.05）;与IUGR组比较,IUGR+姜黄素组仔鼠空腹血糖、TC及LDL-C水平降低,HDL-C水平升高（均P<0.05）。（2）与健康组比较,IUGR组仔鼠胰腺发育不完善;与IU...     

肥胖与雌性幼龄SD大鼠青春期发育提前的相关性研究

【摘要】目的 探讨肥胖与雌性幼龄SD大鼠与青春发育提前之间的相关性。方法 将10只雌性SD大鼠与6只雄性SD大鼠随机分为两组,分别为亲代模型组（雌鼠n=5,雄鼠n=3）、亲代对照组（雌鼠n=5,雄鼠n=3）,造模筛选后保证雄雌谁昂比为2：1。模型组以高脂饲料饲喂8周造模,对照组用普通大鼠饲料饲喂,8周后筛选体质量大于对照组20%的模型组亲代大鼠体进行交配,繁殖的雌性仔鼠设定为模型组仔鼠,亲代对照组大鼠繁殖的雌性仔鼠作为对照组仔鼠。模型组仔鼠造模方法与模型组亲代大鼠相同,均为同配方高脂饲料饲喂,21日龄断乳后饲喂5周,对照组仔鼠则用普通饲料饲喂5周。自21日龄起每日观察仔鼠阴门开启情况,阴门开启后每日均进行阴道涂片检查,观察动情周期,并称量体重;体长及腹围的测量每两周进行一次;两组实验仔鼠均在56日龄时结束实验,腹主动脉取血,检测两组幼鼠56日龄血清胆固醇（CH）、甘油三酯（TG）、血清卵泡刺激素（FSH）、促黄体生成素（LH）、雌二醇（E2）。实验结束后解剖56日龄仔鼠,取材子宫、卵巢,计算卵巢指数、子宫指数,子宫、卵巢做病理切片HE染色,计数卵巢最大横截面黄体个数和成熟卵个泡数。结果 ①56日龄造模结束,模型组幼鼠体重、腹围均高于对照组幼鼠,P＜0.001;②模型组幼鼠血清TG、CH均高于对照组,P＜0.001;③模型组幼鼠血清LH、E2浓度高于对照组幼鼠,P＜0.001,血清FSH浓度低于对照组,P＜0.001;④模型组幼鼠卵巢病理切片中最大横截面黄体计数较对照组多,P＜0.001;成熟卵泡计数少于对照组,P＜0.001;⑤Pearson相关性分析结果为：幼龄SD大鼠体质量与第一次动情间期、阴门开启时间两项指标呈成负相关,与血清LH、卵巢最大横截面切片黄体计数两项指标成正相关;幼龄SD大鼠腹围与第一次动情间期出现时间、阴门开启时间两项指标成负相关,与血清LH、卵巢最大横截面切片黄体计数两项指标成正相关。结论 幼龄SD大鼠青春发育评判指标与肥胖指标具有相关性,呈正相关。即具有肥胖特征的幼龄SD大鼠青春发育较之正常对照组幼鼠提前。     

肥胖与雌性幼龄SD大鼠青春发育提前的相关性

目的 探讨肥胖与雌性幼龄SD大鼠与青春发育提前之间的相关性。方法 将10只雌性SD大鼠与6只雄性SD大鼠随机分为两组,分别为亲代模型组(雌鼠n=5,雄鼠n=3)、亲代对照组(雌鼠n=5,雄鼠n=3)。模型组以高脂饲料饲喂8周造模,对照组用普通大鼠饲料饲喂,8周后筛选体质量大于对照组20%的模型组亲代大鼠体进行交配,繁殖的雌性仔鼠设定为模型组仔鼠,亲代对照组大鼠繁殖的雌性仔鼠作为对照组仔鼠。模型组仔鼠造模方法与模型组亲代大鼠相同,均为同配方高脂饲料饲喂,21日龄断乳后饲喂5周,对照组仔鼠则用普通饲料饲喂5周。自21日龄起每日观察仔鼠阴门开启情况,阴门开启后每日均进行阴道涂片检查,观察动情周期,并称量体重;体长及腹围的测量每两周进行1次;两组实验仔鼠均在56日龄时结束实验,腹主动脉取血,检测两组幼鼠56日龄血清胆固醇(CH)、甘油三酯(TG)、血清卵泡刺激素(FSH)、促黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)。实验结束后解剖56日龄仔鼠,取材子宫、卵巢,计算卵巢指数、子宫指数,子宫、卵巢做病理切片HE染色,计数卵巢最大横截面黄体个数和成熟卵个泡数。结果 ①56日龄造模结束,模型组幼鼠体重、腹围均高于对照组幼鼠,P<0.001;②模型组幼鼠血清TG、CH均高于对照组,P<0.001;③模型组幼鼠血清LH、E2浓度高于对照组幼鼠,P<0.001,血清FSH浓度低于对照组,P<0.001;④模型组幼鼠卵巢病理切片中最大横截面黄体计数较对照组多,P<0.001;成熟卵泡计数少于对照组,P<0.001;⑤Pearson相关性分析结果为:幼龄SD大鼠体质量与第一次动情间期、阴门开启时间两项指标呈成负相关,与血清LH、卵巢最大横截面切片黄体计数两项指标成正相关;幼龄SD大鼠腹围与第一次动情间期出现时间、阴门开启时间两项指标成负相关,与血清LH、卵巢最大横截面切片黄体计数两项指标成正相关。结论 幼龄SD大鼠青春发育评判指标与肥胖指标具有相关性,呈正相关。即具有肥胖特征的幼龄SD大鼠青春发育较之正常对照组幼鼠提前。     

宫内发育迟缓对大鼠肝糖异生关键酶的影响

目的：通过检测宫内发育迟缓(IUGR)仔鼠肝组织中糖异生关键酶磷酸烯醇丙酮酸羧激酶(PEPCK)和葡萄
糖-6-磷酸酶(G-6-Pase)的mRNA表达变化,探讨IUGR个体发生胰岛素抵抗的机制。方法：通过孕期全程给予孕鼠10%
低蛋白饲料建立IUGR仔鼠模型,对照组给予孕鼠21%正常蛋白饲料建立正常出生体质量仔鼠模型。每组仔鼠出生1
周、3周、8周时测定其体质量、空腹血糖、血清胰岛素水平及胰岛素抵抗指数,并采用反转录-聚合酶链反应(RTPCR)
法检测仔鼠肝组织中PEPCK和G-6-Pase的mRNA表达。结果：IUGR组仔鼠出生体质量明显低于对照组(P<0.001),
1周、3周、8周时亦低于对照组(P<0.05)。各时间点IUGR仔鼠空腹血糖、血清胰岛素水平及胰岛素抵抗指数与对照组
无明显差异(P>0.05)。IUGR仔鼠各时间点肝组织PEPCK和G-6-Pase mRNA的表达水平均高于对照组(P<0.01)。结论：
IUGR仔鼠肝糖异生关键酶PEPCK和G-6-Pase的表达明显增高,可能增加肝糖异生,是IUGR个体发生胰岛素抵抗和糖
尿病的重要机制之一。     

甲状腺激素对仔鼠被膜下胸腺上皮细胞影响的超微结构观察

【目的】研究给予甲状腺激素后,仔鼠被膜下胸腺上皮细胞超微结构的变化。【方法】取300g左右的健康Wistar大鼠,交配后,雌性大鼠随机分为2组：对照组和实验组。各组均在发现阴栓后15d灌胃,直到仔鼠生后20d。实验组每只大鼠给予浓度为50g/L的甲状腺素混悬液1ml／d,对照组每天给予等量生理盐水。两组分别在仔鼠生后的1、10、20d处死,取胸腺,电镜观察被膜下胸腺上皮细胞的超微结构;采用放免法测定仔鼠血清FT3和FT4水平。【结果】与对照相比,实验组10d龄仔鼠的FT3显著升高,其余未见明显异常。实验组仔鼠胸腺上皮细胞发生了明显变化：细胞排列松散,间隙增宽;细胞水肿;凝固性坏死;胞膜溶解。【结论】在胸腺的发育过程中,过量的甲状腺激素会严重损伤胸腺上皮细胞。     

早期不同饮食干预IUGR大鼠胰岛素样生长因子与体格发育的关系

[目的]探讨生后初4周,分别予IUGR幼鼠不同蛋白质含量而热卡均等的饮食早期营养干预,对血清胰岛素样生长因子-1(IGF1)和其结合蛋白-3(IGFBP3)及生长追赶和最终体格发育的影响.[方法]采用孕母饥饿法建立IUGR模型.72只IUGR新生雌鼠和24只正常新生雌鼠随机分为4组①正常对照组(C组),②IUGR模型组(S组),③IUGR低蛋白组(SL组),④IUGR高蛋白组(SH组).动态观察各组IUGR大鼠在4周(婴幼年期)、8周(青春期)和12周(成年期)血清IGF1、IGFBP3和体质量、身长发育的变化及相关关系.[结果]SH组IUGR大鼠快速追赶生长伴血清IGF1、IGFBP3的水平明显升高;IUGR模型组呈相对较慢的生长追赶伴无明显升高的IGF1、IGFBP3水平;SL组IUGR大鼠IGF1、IGFBP3的水平低下,不出现生长追赶,呈现为持续小个体.[结论]IUGR早期高蛋白饮食4周后恢复正常饮食有利于IUGR的生长追赶,使体质量、身长迅速达到正常水平;而早期低蛋白饮食不利于IUGR的生长追赶,持续保持小个体.血清IGF1、IGFBP3水平可反映IUGR早期生长追赶的程度.     

儿童单纯性肥胖模型的制作

目的 通过调整窝仔数的方法建立幼儿单纯性肥胖模型，并与高脂饲料制备模型进行比较。方法 48只雌性KM小鼠产仔鼠后，一半仔鼠数目为14~16只，一半仔鼠调整为6只（雌雄各3只）。仔鼠断乳时或第9周时仔鼠分别饲喂普通饲料或高脂饲料。仔鼠在15周后处死，称重，测量体长、腰围，生殖器重、脂肪重（肾周和生殖器周脂肪），计算体脂比。结果 ①BD2组常规饲料饲喂至15周结束后，无论雌雄仔鼠，其体重与BD1组比较均显著性差异（P均<0.05），且BD2组体重超过BD1组体重雌性为26.3%，雄性为20.0%。同一处理方式，雌性仔鼠体脂比均高于雄性。②不同时间饲喂高脂饲料，无论调整窝仔数与否，高脂饲料各组仔鼠，无论雌雄，其各组仔鼠体重均比BD1组高（P均<0.05）；HFD4组雌性和雄性仔鼠体重与BD2组相比存在均显著差异（P均<0.05）。结论 通过调整窝仔数的方法可以成功制备儿童单纯性肥胖模型。在儿童早期肥胖的情况下，成年后过渡高脂饮食会导致机体储存更多的脂肪。     

早期营养干预改善 IUGR大鼠胰岛素抵抗及其与血清瘦素的关系

【目的】探讨生后早期不同饮食构成喂养对宫内生长迟缓(IUGR)大鼠胰岛素抵抗的远期影响及其与瘦素、腹部内脏脂肪的相关关系。【方法】IUGR新生雌鼠48只和正常新生雌鼠10只随机分为5组予下述相应饮食饲料喂养母鼠3周:①IUGR模型组(S/N组)予常规饮食,②IUGR高碳水化合物饮食组(A组),③IUGR高脂肪饮食组(B组),④IUGR高蛋白质饮食组(C组)⑤正常对照组(C/N组)予常规饮食。第4周起各组幼鼠断乳后均予常规饮食饲料喂养至实验结束。各组大鼠于12周(成年期)分别测定体质量、肾周脂肪质量(肾脂)、血清瘦素、血糖、胰岛素并计算胰岛素敏感指数(ISI)、胰岛素抵抗指数(IRI)。【结果】12周时IUGR模型组大鼠肾脂增多,血清瘦素和IRI升高、ISI下降(P<0.05)。IUGR高蛋白饮食组体质量(242.6±17.5)g虽高于C/N组(192.1±37.2)g,但与S/N组(213.4±27.3)g比较无显著性差异(P>0.05),且不伴肾脂(1.46±0.67)g增多,血清瘦素(0.43±0.26)μg/L、ISI(4.47±0.45)和IRI(0.78±0.45)也与正常对照组(1.41±0.42)g,(0.42±0.34)μg/L,4.46±0.42和0.77±0.31比较差异无统计学意义(P>0.05)。【结论】生后哺乳期给予高蛋白质饮食早期营养干预然后恢复正常饮食,可使IUGR大鼠既能达到体格追赶生长,又可避免其成年后胰岛素敏感性下降而产生I     

大鼠妊娠期肥胖对雌性子代发生PCOS的影响

目的探讨孕鼠肥胖对雌性子代大鼠发生多囊卵巢综合征(PCOS)的影响和可能机制。方法子代实验组为高能饲料喂养诱导的肥胖妊娠期大鼠与正常雄性大鼠合笼后出生的雌性仔鼠,子代对照组为普通的饲料喂养的雌性大鼠与正常雄性大鼠合笼后出生的雌性仔鼠。两组雌性仔鼠(子代对照组17只,子代实验组19只)生长至14~16周处死,取卵巢组织观察两组仔鼠卵巢大体形态并进行HE染色,取静脉血检测大鼠血清睾酮、胰岛素、空腹血糖和血脂水平。蛋白印记检测卵巢组织ERK1和ERK2的表达。结果高脂喂养3周后,母代实验组体重明显大于母代对照组(P0.05);子代实验组卵巢呈多囊性改变,子代实验组血糖和雄激素均高于子代对照组(P0.05)。与子代对照组相比,子代实验组ERK1和ERK2的表达均升高(P0.05)。结论母鼠妊娠期肥胖可能是子代成年期发生PCOS的一个高风险因素。     

青春期单纯性肥胖雄性大鼠模型的实验研究

目的：以高脂饲料配方建立青春期单纯性肥胖雄性大鼠模型。方法：21d龄雄性清洁级SD大鼠随机分为对照组（n=28只，喂普通饲料）和实验组（n=45只，喂高脂饲料）。观察比较3-6周末（即鼠龄函9周）大鼠的体质量、Lee＇s指数、体长和附睾周围脂肪重量。结果：喂养后第3-6周末实验组体质量、Lee’s指数和附睾周围脂肪重量均高于对照组（P〈0．01）；第3周末实验组体质量已明显超过对照组（超重23．0％），随着大鼠周龄的增加，肥胖程度也在逐渐加重，至第6周末时体质量进一步超过对照组（超重26．6％）；实验组肥胖鼠29只，非肥胖鼠16只。结论：以高脂饲料喂养的青春期大鼠可致单纯性肥胖。     

孕期至幼年期低水平铅暴露仔鼠海马锌离子平衡的变化及其发育期海马神经元的损伤

目的:探讨孕期至幼年期铅暴露对仔鼠发育期海马神经元的损伤及其与Zn2+平衡的相关机制。方法：25只母鼠随机分为对照组母鼠（n=10）和铅暴露组母鼠（n=15）。从受孕当天开始至仔鼠生后7、14和21　d时间点分别将对照组和铅暴露组仔鼠随机各分为3组(P7、P14和P21组),每小组仔鼠8只,铅暴露组母鼠按上述时间段给予0.2%醋酸铅饮水,对照组母鼠正常饮水。在仔鼠生后上述时间点分别测定仔鼠血铅和脑铅含量,Timm’s染色观察海马苔藓纤维(MF),并采用免疫组织化学法检测锌离子转运体-1（ZnT-1）的表达水平。结果：铅暴露组仔鼠血铅和脑铅含量显著高于对照组（P<0.01）。铅暴露组仔鼠海马CA2区、CA3区出现大量变性细胞,且细胞排列松散,细胞层数减少。Timm’s染色,正常组仔鼠生后21　d开始出现MF发芽,其吸光度(A)值为0.135　0±0.024　3;铅暴露组仔鼠生后21　d MF发芽的A值为0.096 7±0.024 2,较正常组显著降低(P<0.01)。铅暴露组生后7 d仔鼠海马ZnT-1表达水平显著低于对照组（P<0.01）,生后14和21 d与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论：孕期至幼年期低水平铅暴露可能导致仔鼠海马神经元Zn2+失衡和海马神经元胞内Zn2+水平降低,后者可能参与铅暴露导致发育期神经损伤。     

不同方法制备大鼠宫内发育迟缓模型的比较

目的宫内发育迟缓(intrauterine growth retardation,IUGR)是以新生儿出生体重低的方式表现出来。以实验中常用的三种方法建立IUGR模型,通过对实验数据比较分析,为科研工作中IUGR模型的建立提供参考依据。方法将20只妊娠第0天的孕鼠随机分为四组,每组5只,其中三组分别采用酒精干预法(A)、子宫动脉结扎法(U)、低蛋白饮食法(LP)等方法建立IUGR大鼠模型,第四组为正常对照组(CON),于大鼠孕期第20天剖宫产取胎鼠,称量胎鼠的体质量、脑质量、胎盘质量和双肾质量等,并测量身长及尾长,计算IUGR发生率、成活率和脑比重、胎盘比重等;各组随机将剖宫产的胎鼠继续饲养,在3周、6周、12周时测量其体质量、肾周脂肪质量及部分脏器质量。结果酒精干预法、子宫动脉结扎法、低蛋白饮食法中三组胎鼠平均体质量明显低于正常对照组(P0.05),同时胎鼠IUGR发生率明显高于正常对照组(P0.05),子宫动脉结扎组胎鼠成活率低于其他两组。大鼠饲养3周后,实验组大鼠平均体质量均明显低于正常对照组(P0.05);饲养6周后,实验组大鼠平均体质量仍低于正常对照组的水平,差异无显著性(P0.05);饲养12周后,酒精干预组和低蛋白饮食组大鼠平均体质量明显高于正常对照组(P0.05)。结论三种造模方法均可成功建立IUGR模型,其中低蛋白饮食组建立的IUGR动物模型发生率高,死胎率低,适用于模型研究;在追赶性生长这方面,酒精干预组及低蛋白饮食组在剖宫产大鼠产后及哺乳期时平均体质量均低于正常对照组,但哺乳期后生长速度远超过正常对照组,表明此两组实验组出现了追赶性生长。     

不同碘营养摄入对哺乳期子代大鼠小脑浦肯野细胞蛋白-2的影响

【目的】探讨不同碘营养摄人对哺乳期子代大鼠小脑浦肯野细胞蛋白-2的影响。【方法】按体质量将4～6周龄健康Wistar雌性大鼠随机分为4组：重度缺碘组、轻度缺碘组、正常碘组和碘过量组。每组大鼠食用低碘鼠粮,饮用含不同IK浓度的自来水,雄鼠按正常组条件饲养,8周后交配,取哺乳期14和28d的仔鼠作为研究对象。砷铈催化分光光度法检测仔鼠的尿碘水平,竞争结合放射免疫分析方法检测甲状腺激素水平,实时荧光定量PCR检测浦肯野细胞蛋白-2mRNA的表达水平,蛋白免疫印迹杂交和免疫组织化学方法检测其蛋白表达水平。【结果】2d龄的子鼠,在重度碘缺乏时,表现为低尿碘和甲状腺功能减退,血TF4水平明显低于正常组,浦肯野细胞蛋白-2的mRNA和蛋白表达也明显低于正常组（P〈0．05）;轻度碘缺乏和碘过量时,TT4水平接近于正常组,浦肯野细胞蛋白-2的mRNA和蛋白表达与正常组相比,有轻度落后趋势,但无显著差异。【结论】哺乳期母鼠严重碘缺乏时,严重影响仔鼠小脑浦肯野细胞蛋白-2的表达,轻度碘缺乏和碘过量影响程度较低,提示哺乳期妇女碘营养状况不可忽视。     

氯化甲基汞对发育阶段大鼠海马组织蛋白激酶C活性的影响

目的:阐明氯化甲基汞(MMC)致脑发育损伤与海马组织蛋白激酶C（PKC）活性变化之间的关系,探讨MMC致脑发育损伤机制。方法:选用Wistar雌性大鼠120只,随机分为3个MMC剂量实验组和1个对照组,每组30只,实验组母鼠从妊娠前90 d 至仔鼠出生后30 d 连续喂饲含有不同剂量MMC (0.75,1.50和3.00 mg/kg ) 的普通饲料,取其生后(PND) 3 、7 、14 、21 和30 d 仔鼠海马组织提取胞浆和胞膜PKC。采用改良Takai 法观察MMC 对发育大鼠海马PKC 活性的影响。结果:随着脑汞含量的增加,仔鼠实验组和对照组海马组织胞膜胞浆PKC的活性随仔鼠生后时间的延长,逐渐增高,生后30 d达峰值。1.50 mg/kg 剂量组生后21和30 d仔鼠以及3.00 mg?kg-1剂量组仔鼠海马组织胞膜和胞浆PKC活性较对照组明显增高（P<0.05）。结论:长期接触低剂量MMC可引起发育阶段大鼠海马组织胞浆及胞膜PKC活性升高。MMC可能通过影响大鼠脑发育过程中PKC 活性介导其神经毒性作用。     

小青春期的抑制对雄性大鼠性发育的影响

目的观察小青春期激素水平的抑制对雄性大鼠青春期及成年期性腺轴功能的影响。方法①观察正常雄性大鼠}Jl牛后不同时间点血清睾酮（T）、促黄体生成素（LH）、卵泡刺激素（FSH）浓度和双侧睾丸质量变化,以确立小青春期的存在;②对新生雄性大鼠出生后5min内即予乙醚吸人以建立“无小青春期”模型;③比较45和75d龄造模组和对照组大鼠双侧睾丸和附睾质量及睾丸组织的病理变化,采用ELISA法测血清T浓度,并以Real—TimePCR方法比较睾丸雄激素受体（AR）、胰岛素样因子3（INSL3）、抗苗氏管激素（AMH）和Ghrelin基因表达量在两组间的差异。结果①雄性大鼠血清T、LH浓度均在出生后2h达短暂的高峰,而FSH出生后30min内即出现高峰值,双侧睾丸质量也在出生后4h出现短暂的高峰;②造模组大鼠出生后2hm清T、LH和FSH均较对照组明显降低,成功建立了“无小青春期”模型;③45d龄造模组睾丸病理切片见受损表现,45d龄时ghrelin基因和75d龄时AR基因mRNA表达两组比较差异无统计学意义,但造模组较对照组有明显的下降趋势（P=0．055和P=0．050）;75d龄时造模组AMH基因mRNA的表达较对照组显著降低,差异有统计学意义（P=0．024）。结论雄性大鼠亦存在出生后持续约6h的小青春期;乙醚吸入抑制其小青春期后,可对大鼠青春期和性成熟期的性腺功能造成不同程度的影响。     

高脂饮食对营养性肥胖大鼠模型建立的影响

【目的】观察实验用高脂饲料配方对建立营养性肥胖动物模型成功率的影响。【方法】用改进的高脂饲料喂养大鼠8周,观察体质量、Lees指数及其他指标,并与普食组进行比较。【结果】喂养8周后,高脂组大鼠体质量为（395．50±23．80）g,普食组大鼠体质量为（307．70±8．07）g,两者比较差异有显著性（P〈o．05）;造模成功后,高脂组大鼠的Lees指数、睾丸周围脂肪量、。肾周同脂肪量及肝、肾重量均大于普食组,两组比较差异有显著性（P〈0．05）。【结论】高脂饮食可以引起大鼠营养性肥胖,猪油含量为15％的高脂饲料配方组成较为合理,致肥效果明显。     

D-半乳糖对仔鼠脂质过氧化、听力和耳蜗毛细胞的损伤及其机制

目的：观察孕期和哺乳期D-半乳糖暴露对仔鼠脂质过氧化、听力功能和耳蜗毛细胞形态结构的影响，阐明其与仔鼠听力障碍-机体脂质过氧化增强之间的关系。方法： 12只成功受孕大鼠随机分为D-半乳糖组和对照组，每组6只。自妊娠6 d起，对照组孕鼠给予普通饲料，D-半乳糖组孕鼠给予普通饲料配30% D-半乳糖的混合饲料。仔鼠出生后21 d，检测仔鼠血清D-半乳糖、全血超氧化物歧化酶（SOD）、还原型谷胱甘肽（GSH）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）和血浆丙二醛（MDA）含量变化，检测畸变产物耳声发射(DPOAE)情况，应用硝酸银染色全耳蜗铺片观察仔鼠毛细胞形态学变化。结果：孕期和哺乳期D-半乳糖暴露致仔鼠全血SOD、GSH-Px和GSH水平明显低于对照组（P<0.05），D-半乳糖组仔鼠血浆MDA水平高于对照组（P<0.05）；D-半乳糖组仔鼠在各频率上DPOAE幅值均低于对照组（P<0.05）；D-半乳糖组仔鼠耳蜗外毛细胞结构受损，且数目缺失。结论：Ｄ-半乳糖可诱导仔鼠氧化损伤和听觉发育损伤。     

孕早、晚期接受七氟醚麻醉对大鼠子代大脑神经发育的影响

目的 研究孕早、晚期Wistar大鼠母体接受七氟醚吸入麻醉对子代大脑神经发育的影响。方法 将12只孕鼠按随机数字表法分为孕6d用药组（A组）、孕19d用药组（B组）和对照组（C组）,每组各4只。A、B组分别于孕6d、孕19d时吸入2.4%七氟醚6h,C组饲养于空气条件下。应用Nissl染色法观察仔鼠在出生后第1、14、21天脑组织海马CA1区神经元尼氏体的表达情况。在仔鼠出生后第32天采用Morris水迷宫实验对各组仔鼠学习记忆功能进行测定。结果出生后第1天,B组仔鼠海马CA1区神经元损伤程度明显高于A组及C组仔鼠;出生后第14天,B组仔鼠神经损伤减轻,A组仔鼠神经损伤加重;出生后第21天,B组仔鼠神经损伤程度较轻,A组仔鼠神经损伤较重。出生后第32天,A组和B组仔鼠逃避潜伏期、穿越目标象限次数、穿越平台次数与对照组仔鼠相比均无统计学差异（均P＞0.05）。结论在本实验条件下,孕早、晚期母体接受2.4%七氟醚麻醉对Wistar大鼠子代大脑神经发育的影响随时间变化而改变,并不造成子代远期学习记忆功能异常。     

宫内生长迟缓大鼠成年期胰岛β细胞功能受损和胰岛素抵抗

目的:研究子宫胎盘功能不足所致宫内生长迟缓(intrauterine growth retardation,IUGR)大鼠成年期胰岛β细胞功能及外周组织胰岛素敏感性,初步探讨IUGR大鼠发生2型糖尿病的机制.方法:结扎妊娠17 d孕鼠(n=14)双侧子宫动脉(uterine artery ligation,UAL)建立IUGR大鼠模型,对照组(n=8)行平行开腹术.以UAL组新生鼠出生体重低于对照组均值的2个标准差为IUGR.选取两组子代成年雄鼠为研究对象进行葡萄糖耐量实验和高胰岛素正常血糖钳夹实验,计算胰岛β细胞功能指数(modified beta-cell function index,MBCI)和稳态葡萄糖输注率(glucose intake rate,GIR),对大鼠胰岛β细胞分泌功能及外周组织胰岛素敏感性进行评价.结果:(1)UAL组仔鼠平均出生体重(4.49±0.56)g明显低于对照组仔鼠体重均值(6.16±0.30)g的2个标准差以下,P＜0.001;UAL组仔鼠成年后(12周)体重(382±37.51)g已显著超过对照组(339±24.06)g,P＜0.01;(2)UAL组雄仔鼠12周时糖耐量实验各时点血糖水平[0 min,(3.96±0.25)mmol/L;30 min,(6.61±0.57)mmol/L;60 min,(7.34±0.47)mmol/L;120 min,(6.27±0.37)mmol/L]明显高于对照组[0 min,(3.56±0.22)mmol/L;30 min,(5.74±0.32)mmol/L;60 min,(5.89±0.29)mmol/L;120 min,(3.89±0.25)mmol/L],P＜0.05,糖负荷后胰岛素分泌高峰延迟,120 min胰岛素值(84.65±11.79)mU/L明显高于对照组(50.01±7.43)mU/L,P＜0.05;UAL组雄仔鼠MBCI值(26.42±5.59)较对照组(55.88±10.20)明显降低,P＜0.001;(3)高胰岛素正常血糖钳夹实验结果示UAL组雄仔鼠GIR值[16.86±1.59 mg/(kg·min)]明显低于对照组[20.35±2.38 mg/(kg·min)],P＜0.05.结论:子宫胎盘功能不足所致IUGR雄鼠成年期出现肥胖趋势,并发生胰岛细胞功能受损和胰岛素抵抗,是其发生2型糖尿病的危险因素.     

长期高蛋白饮食对营养性肥胖大鼠胰岛素分泌和血浆Ghrelin水平的影响

目的  观察长期高蛋白饮食对营养性肥胖大鼠胰岛素分泌和血浆Ghrelin水平的影响。  方法    采用高脂饲料喂养,建立营养性肥胖大鼠模型。将肥胖大鼠分为高蛋白饲料组(HP组,n=12,36.7%蛋白质)和普通饲料组(NC组,n=11,22.4%蛋白质),正常等热量饲养24周。观察饲养期间大鼠体质量、空腹血糖的变化。至24周,测定内脏脂肪、空腹血浆Ghrelin（酶联免疫法）和空腹胰岛素（放射免疫法）等指标含量,并行静脉葡萄糖耐量试验(IVGTT),观察两组大鼠葡萄糖刺激下的胰岛素分泌状况。  结果   与NC组相比,HP组体质量明显减轻［(490.92±39.47)g vs（545.55±31.08）g,P＜0.01］,内脏脂肪含量明显减少［（22.42±7.04）g vs（32.33±9.27）g,P＜0.05］;IVGTT结果显示,HP组5、10min血清胰岛素含量显著降低［(91.56±21.72)μIU/mL vs（121.29±34.03）μIU/mL,P＜0.05;（58.62±15.80）μIU/mL vs（81.12±24.36）μIU/mL,P＜0.05］;HP组空腹血浆Ghrelin浓度有升高趋势［（2.36±0.82）ng/mL vs（1.95±0.64）ng/mL,P=0.20］。血浆Ghrelin浓度与体质量(r=-0.373,P＜0.05)、内脏脂肪含量(r=-0.454, P＜0.01)、空腹胰岛素含量(r=-0.390,P＜0.05)呈负相关。  结论   长期等热量高蛋白饮食可降低肥胖大鼠胰岛素的第一时相分泌,并可导致空腹Ghrelin升高。这种胰岛素分泌的减少可能系Ghrelin升高、体质量减轻所致。