TGF-β1和PLGF在不同类型妊娠滋养细胞疾病患者病变组织中的表达及其意义

目的：检测不同类型妊娠滋养细胞疾病患者病变组织中转化生长因子β1（TGF-β1）和胎盘生长因子（PLGF）的表达,阐明其在不同妊娠滋养细胞疾病中意义。方法：收集葡萄胎组织40例（葡萄胎组）、妊娠滋养细胞肿瘤组织26例（GTN组,包括侵蚀性葡萄胎22例和绒毛膜癌4例）和正常早孕绒毛组织40例（正常对照组）作为研究对象。采用免疫组织化学法检测不同组织中TGF-β1和PLGF的阳性表达率,分析TGF-β1和PLGF在正常对照组、葡萄胎组和GTN组患者中的表达差异以及其与患者临床高危因素（年龄>40岁、子宫体积>孕周和卵巢黄素化囊肿直径>6 cm）的关联性。结果：与正常对照组（87.5%）比较,葡萄胎组（62.5%）和GTN组（30.8%）TGF-β1阳性表达率明显降低（P<0.05）;且葡萄胎组TGF-β1阳性表达率高于GTN组（P<0.05）。与正常对照组（22.5%）比较,葡萄胎组（50.0%）和GTN组（80.8%）PLGF阳性表达率明显升高（P<0.05）,且葡萄胎组PLGF阳性表达率低于GTN组（P<0.05）。与正常对照组比较,葡萄胎组患者中年龄>40岁、子宫体积>孕周、卵巢黄素化囊肿直径>6 cm者TGF-β1阳性表达率明显降低（P<0.05）,而PLGF阳性表达率明显升高（P<0.05）。在GTN组中并发高危因素者较无高危因素者TGF-β1阳性表达率明显降低（P<0.05）,而PLGF阳性表达率明显升高（P<0.05）。葡萄胎组和GTN组患者TGF-β1与PLGF阳性表达水平均呈负相关关系（r=-0.585,P<0.05;r=-0.479,P<0.05）。结论：TGF-β1在葡萄胎和妊娠滋养细胞肿瘤组织中阳性表达逐渐降低,PLGF表达率逐渐升高,可能与妊娠滋养细胞疾病患者的不同类型及预后有关。     

整合素α5β1、HPA在PSTT和绒癌中的表达及意义

目的:探讨胎盘原位滋养细胞肿瘤(PSTT)和绒癌组织中整合素α5β1和乙酰肝素酶(HPA)的表达及意义.方法:采用Western blot法检测20例绒癌组织、15例PSTT组织和40例正常绒毛组织中整合素α5β1和HPA蛋白的表达情况.结果:绒癌组织中整合素α5β1、HPA蛋白的相对表达量明显高于正常绒毛组织和PSTT组织(P＜0.05);PSTT组织中整合素G5β1、HPA蛋白的相对表达量明显高于正常绒毛组织(P＜0.05).结论:整合素α5β1和HPA表达异常可能与绒癌、PSTT的发生发展密切相关.     

大黄素对大鼠局灶性脑缺血的保护作用及其机制

目的：探讨大黄素对大鼠局灶性脑缺血的保护作用,阐明其作用机制。方法：将60只健康雄性SD大鼠随机分为假手术组（给予生理盐水）,模型组（给予生理盐水,建模）,阳性对照组（给予5mg·kg^-1地塞米松,建模）,低、中和高剂量大黄素组（给予10、20和40 mg·kg^-1大黄素,建模）（n=10）。采用大脑中动脉阻断法（MCAO）建立局灶性脑缺血大鼠模型。检测各组大鼠行为学评分,采用TTC染色法检测各组大鼠脑梗死体积百分比,ELISA法检测各组大鼠缺血侧海马组织中肿瘤坏死因子（TNF-α）、白细胞介素1β（IL-1β）和白细胞介素6（IL-6）水平,Western blotting法检测各组大鼠缺血侧海马组织中核转录因子κB （NF-κB） p65和核转录因子κB抑制蛋白α（IκBα）蛋白表达水平。结果：假手术组大鼠未发现神经功能缺损症状和脑梗死;与假手术组比较,模型组大鼠缺血侧海马组织中IL-6、IL-1β和TNF-α水平明显升高（P<0.05）,NF-κB p65蛋白表达水平明显升高（P<0.05）,IκBα蛋白表达水平明显降低（P<0.05）。与模型组比较,阳性对照组,中和高剂量大黄素组大鼠行为学评分降低（P<0.05）,脑梗死体积百分比明显减小（P<0.05）,缺血侧海马组织中IL-6、IL-1β和TNF-α水平明显降低（P<0.05）,NF-κB p65蛋白表达水平明显降低（P<0.05）,IκBα蛋白表达水平明显升高（P<0.05）。与低剂量大黄素组比较,中和高剂量大黄素组大鼠行为学评分降低（P<0.05）、脑梗死体积百分比明显减小（P<0.05）,缺血侧海马组织中IL-6、IL-1β和TNF-α水平明显降低（P<0.05）,NF-κB p65蛋白表达水平明显降低（P<0.05）,IκBα蛋白表达水平明显升高（P<0.05）。结论：大黄素对大鼠局灶性脑缺血损伤有一定的保护作用,其机制可能与抑制NF-κB信号通路和降低炎症因子分泌有关。     

米非司酮对稽留流产患者血清和绒毛组织中Ang-1、Ang-2、VEGF、TNF-α和IL-6表达水平的影响

目的：检测稽留流产患者服用米非司酮前后血清和绒毛组织中血管生成素1（Ang-1）、血管生成素2（Ang-2）、血管内皮生长因子（VEGF）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）和白细胞介素6（IL-6）表达水平,阐明米非司酮对稽留流产的作用机制。方法：选取确诊为稽留流产患者68例作为药流组,另选取同期自愿要求终止妊娠的正常孕妇51例作为对照组。应用酶联免疫吸附法检测2组研究对象引产前后血清中Ang-1、Ang-2、VEGF、TNF-α和IL-6水平,采用免疫组织化学染色法检测绒毛组织中Ang-1、Ang-2、VEGF、TNF-α和IL-6表达水平。结果：与引产前比较,药流组患者引产后血清中Ang-1、Ang-2、VEGF、TNF-α和IL-6水平明显升高（P<0.05）。与对照组比较,药流组患者引产后绒毛组织中Ang-1、Ang-2、VEGF和TNF-α表达水平明显升高（P<0.05）,IL-6表达水平明显降低（P<0.05）。药流组患者血清和绒毛组织中Ang-1、Ang-2与VEGF水平呈正相关关系（r=0.849,r=0.721,r=0.590,r=0.532,P<0.05）。结论：米非司酮通过提高稽留流产患者血清和绒毛组织中Ang-1、Ang-2、VEGF和TNF-α水平,降低IL-6水平,促进血管生成,对终止稽留流产起促进作用。     

骨膜蛋白在慢性牙周炎患者牙龈组织中的表达及其临床意义

目的：检测慢性牙周炎患者牙龈组织中骨膜蛋白、基质金属蛋白酶8（MMP-8）和基质金属蛋白酶组织抑制剂2（TIMP-2）的表达情况，探讨骨膜蛋白在慢性牙周炎发生发展中的可能作用及其相关生物学机制。方法：选择23例正常牙龈组织（对照组）和19例炎症牙龈组织（病例组）。采用免疫组织化学SP法检测2组患者牙龈组织中骨膜蛋白、MMP-8和TIMP-2表达情况，采用Spearman分析法检测2组患者牙龈组织中骨膜蛋白表达与MMP-8和TIMP-2表达的相关性。结果：病例组患者牙龈组织中骨膜蛋白阳性表达率低于对照组（P<0.05）。相关性分析，对照组患者牙龈组织中骨膜蛋白表达与MMP-8表达呈负相关关系（r=-0.51，P<0.05），骨膜蛋白表达与TIMP-2表达呈正相关关系（r=0.50，P<0.05）；病例组患者牙龈组织中骨膜蛋白表达与MMP-8表达呈负相关关系（r=-0.482，P<0.05），骨膜蛋白表达与TIMP-2表达呈正相关关系（r=0.655，P<0.05）。结论：骨膜蛋白可以作为维持牙龈组织结构稳定性的初步指标，成为牙周组织再生方面的研究靶点。     

整合素连接激酶在子宫内膜癌组织中的表达及其对细胞迁移和侵袭能力的影响

目的：观察子宫内膜癌患者癌组织中整合素连接激酶（ILK）的表达水平,通过体外细胞实验探讨其对子宫内膜癌细胞迁移和侵袭能力的影响,并阐明其作用机制。方法：采用免疫组织化学SP法检测29例子宫内膜癌患者癌组织和癌旁组织细胞中ILK阳性表达率。分别将ILK siRNA和siRNA control转染至子宫内膜癌HEC-1B细胞作为干扰组和空载组,以不作处理的细胞作为对照组;采用Western blotting法检测HEC-1B细胞中ILK、蛋白激酶B（Akt）、磷酸化Akt（p-Akt）、糖原合成酶激酶3β（GSK-3β）和磷酸化GSK-3β（p-GSK-3β）蛋白表达水平,细胞划痕实验检测细胞迁移距离,Transwell小室法检测侵袭细胞数。结果：29例子宫内膜癌患者癌组织中ILK阳性表达率为79.3%,癌旁组织中ILK阳性表达率为10.3%,子宫内膜癌组织中ILK阳性表达率明显高于癌旁组织（P<0.05）。与对照组和空载组比较,干扰组HEC-1B细胞中ILK、p-Akt和p-GSK-3β蛋白表达水平明显降低（P<0.05）,Akt和GSK-3β蛋白表达水平差异无统计学意义（P>0.05）;细胞划痕实验,与对照组和空载组比较,干扰组HEC-1B细胞迁移距离明显缩短（P<0.05）,侵袭细胞数明显减少（P<0.05）。结论：ILK在子宫内膜癌组织中呈高水平表达,干扰ILK表达能够降低子宫内膜癌细胞的迁移和侵袭能力,其作用机制可能与其抑制Akt和GSK-3β蛋白磷酸化有关。     

NRP1基因敲除对放射性肺纤维化进程的影响及其作用机制

目的：观察神经菌毛蛋白1（NRP1）基因对放射性肺纤维化（RIPF）进程的影响,并探讨其在Wnt/β-连环蛋白（β-catenin）信号通路和转化生长因子β1（TGF-β1）/Smads通路介导的上皮间质转化（EMT）发生发展过程和细胞外基质（ECM）沉积中的作用。方法：利用Cre-LoxP重组酶系统构建肺泡Ⅱ型上皮细胞（AT-Ⅱ）特异性敲除NRP1基因的转基因C57BL/6J小鼠并进行鼠尾鉴定,将160只小鼠按照射后不同时间点随机分为4周组、8周组、16周组和24周组,每组小鼠按随机数字表法分为野生型（Con）组、野生型单纯照射（IR）组、NRP1基因特异性敲除（KO-Con）组和NRP1基因特异性敲除+照射（KO+IR）组,每亚组10只。KO-Con和KO+IR组小鼠腹腔注射他莫昔芬特异性敲除AT-Ⅱ细胞NRP1基因,IR组和KO+IR组小鼠采用20 Gy全胸照射建立RIPF小鼠模型。模型构建完成后,利用HE染色法和Masson染色法验证模型是否构建成功;利用免疫组织化学（IHC）法检测小鼠肺组织中Ⅰ型胶原（Col Ⅰ）和α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的蛋白表达水平;Western blotting法检测小鼠肺组织中NRP1、β-catenin、TGF-β1和Smad2蛋白表达水平;实时荧光定量-聚合酶链反应（qRT-PCR）法检测小鼠肺组织中NRP1、Col Ⅰ、α-SMA、β-catenin、TGF-β1、Smad2、上皮型钙黏蛋白（E-cadherin）、神经型钙黏蛋白（N-cadherin）和波形蛋白（Vimentin）mRNA表达水平。结果：HE染色和Masson染色显示RIPF小鼠模型构建成功,IR组小鼠肺部主要为放射性肺炎病理形态表现。与Con组比较,随时间的延长,IR组小鼠肺组织中NRP1蛋白和mRNA表达水平逐渐升高（P<0.05）,24周时达到最高（P<0.01）。与Con组比较,随时间的延长IR组和KO+IR组小鼠肺组织中Col Ⅰ、α-SMA、β-catenin、TGF-β1和Smad2蛋白及mRNA表达水平逐渐升高（P<0.05或P<0.01）;与IR组比较,随时间的延长,KO+IR组小鼠肺组织中Col Ⅰ、α-SMA、β-catenin、TGF-β1和Smad2蛋白和mRNA表达水平均明显降低（P<0.05或P<0.01）,但仍高于Con组（P<0.05或P<0.01）。与Con组比较,随时间的延长,IR组和KO+IR组小鼠肺组织中上皮细胞标志物E-Cadherin mRNA表达水平逐渐降低（P<0.05）,间质细胞标志物N-Cadherin和Vimentin蛋白表达水平升高（P<0.05或P<0.01）,但KO+IR组小鼠肺组织中E-CadherinmRNA表达水平明显高于IR组（P<0.05或P<0.01）,N-Cadherin和Vimentin mRNA表达水平均明显低于IR组（P<0.05或P<0.01）。结论：NRP1基因敲除可抑制RIPF的发生发展,其机制可能与调节小鼠肺组织中Wnt/β-catenin和TGF-β1/Smads信号通路的表达进而抑制EMT进程有关。     

移植Toll样受体3处理脐带间充质干细胞对小鼠狼疮性肾炎的治疗效果及其机制

目的 探讨Toll样受体3（TLR3）激活对人脐带间充质干细胞（hUC-MSCs）移植治疗狼疮性肾炎（LN）的效果,并初步阐明其作用机制。 方法 培养hUC-MSCs并鉴定,10 mg·L^－1聚肌胞苷酸处理hUC-MSCs。45只MRL/Lpr雌性小鼠随机分为模型组、hUC-MSCs组和TLR3+hUC-MSCs组,另取15只C57BL/6C雌性小鼠作为对照组;小鼠尾静脉注射hUC-MSCs或聚肌胞苷酸处理的hUC-MSCs。给药后,每2周测定1次小鼠24 h尿蛋白水平;8周后采血并取肾组织,酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测各组小鼠血清中抗双链DNA（dsDNA）抗体水平和肾组织中肿瘤坏死因子α（TNF?α）、白细胞介素1β（IL-1β）、白细胞介素6（IL-6）和白细胞介素17（IL-17）水平。HE染色和PAS染色观察各组小鼠肾组织病理形态表现,免疫荧光染色检测各组小鼠肾组织中IgG和补体C3沉积。Western blotting法检测各组小鼠肾组织中蛋白激酶B（Akt）、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）和自噬相关蛋白表达水平。 结果 hUC-MSCs具有典型的间充质干细胞特征。与对照组比较,模型组小鼠血清中抗dsDNA抗体水平明显升高（P<0.05）,肾组织中TNF?α、IL-1β、IL-6和IL-17水平明显升高（P<0.05）,肾组织中出现肾小球系膜细胞增生、肾小管萎缩坏死和炎症细胞浸润现象,肾组织中IgG和C3沉积明显（P<0.05）,肾组织中Akt和mTOR蛋白表达水平明显升高（P<0.05）,而微管相关蛋白1轻链3Ⅱ（LC3Ⅱ）和酵母ATG6的同系物（Beclin1）蛋白表达水平明显降低（P<0.05）。与模型组比较,给药4周时TLR3+hUC-MSCs组小鼠24 h尿蛋白水平降低（P<0.05）,6和8周时hUC-MSCs组和TLR3+hUC-MSCs组小鼠24 h尿蛋白水平均明显降低（P<0.05）,血清中抗dsDNA抗体水平降低（P<0.05）,肾组织中TNF?α、IL-1β、IL-6和IL-17水平明显降低（P<0.05）,肾组织病变有一定程度的改善,肾组织中IgG和C3沉积减少（P<0.05）,且TLR3+hUC-MSCs组小鼠肾组织改善更为明显;hUC-MSCs组和TLR3+hUC-MSCs组小鼠肾组织中Akt和mTOR蛋白表达水平明显降低（P<0.05）,LC3Ⅱ和Beclin1蛋白表达水平明显升高（P<0.05）。与hUC-MSCs组比较,TLR3+hUC-MSCs组小鼠肾组织中LC3Ⅱ和Beclin1蛋白表达水平明显升高（P<0.05）。 结论 TLR3能够增强hUC-MSCs移植治疗小鼠LN的作用,可抑制肾组织炎症反应并调节细胞自噬水平。     

癫痫持续状态后小鼠海马组织神经元中微管蛋白和内体-溶酶体系统表达的变化及其意义

目的：探讨癫痫持续状态（SE）后小鼠海马组织神经元中微管蛋白β-tubulin和内体-溶酶体系统表达的变化，阐明神经元迟发性死亡过程中微管和内体-溶酶体系统的变化规律。方法：40只雄性ICR小鼠分为对照组（n=7，给予生理盐水）和实验组（n=33，给予匹鲁卡品），实验组中达到SE标准的SE小鼠根据SE后时间分为SE1d、SE2d、SE3d和SE7d组（n=5）。Nissl和Fluoro-Jade B （F-JB）染色检测各组小鼠海马组织神经元损伤情况，免疫荧光法检测各组小鼠海马组织神经元中微管蛋白β-tubulin、内体蛋白Rab5和溶酶体结构蛋白LAMP1表达强度及β-tubulin、Rab5和LAMP1阳性面积百分比；双重荧光法检测各组小鼠海马组织CA1区β-tubulin与Rab5和LAMP1表达的关系。结果：与对照组比较，SE1d组小鼠海马CA1和CA3区神经元数减少（P<0.01），F-JB阳性细胞数增加（P<0.01）；SE2d、SE3d和SE7d组小鼠海马组织中Nissl阳性神经元数明显减少（P<0.01）。与对照组比较，SE2d、SE3d和SE7d组小鼠海马组织中F-JB阳性神经元数增加（P<0.01）。与对照组比较，SE2d、SE3d和SE7d组小鼠海马CA1和CA3区神经元树突中β-tubulin阳性面积百分比明显降低（P<0.05），其变化趋势与神经元损伤相似。与对照组比较，SE1d、SE 2d、SE 3d和SE 7d组小鼠海马组织神经元中Rab5和LAMP1表达强度随着时间延长呈下降趋势；Rab5阳性面积百分比明显降低（P<0.05或P<0.01）；LAMP1阳性面积百分比在SE后第1天出现一过性增多，之后逐渐减少（P<0.05或P<0.01）。双重荧光染色检测，SE后1 d是早期内体减少和溶酶体一过性增多的关键点，并与神经元微管损伤的出现时间极为一致。结论：SE引起神经元迟发性死亡的同时神经元微管骨架受损，内体-溶酶体系统的定位和功能也发生异常改变。     

形觉剥夺性近视模型大鼠巩膜成纤维细胞中TGF-β1表达及Wnt/β-catenin信号通路的调控作用

目的：构建形觉剥夺性近视（FDM）大鼠模型,阐明FDM大鼠巩膜成纤维细胞中转化生长因子β1（TGF-β1）的表达及其与Wnt/β-连环蛋白（β-catenin）信号通路的关系。方法：40只大鼠随机分为对照组和FDM模型组,每组20只,FDM模型组大鼠建立FDM模型。测定大鼠眼轴长度;取大鼠眼球分离巩膜组织,采用Western blotting法和逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法测定大鼠巩膜组织中TGF-β1蛋白和mNRA表达水平。分离培养对照组和FDM模型组大鼠巩膜成纤维细胞,对照组大鼠巩膜成纤维细胞作为对照组,FDM模型组大鼠巩膜成纤维细胞分为FDM组和FDM+Dickkopf相关蛋白1（DDK1）组（加入DDK1培养）,采用Western blotting法和RT-PCR法测定各组大鼠巩膜成纤维细胞中TGF-β1、3型核糖核酸酶（DCL3）、结肠腺瘤样息肉蛋白（APC）、糖原合成酶激酶3β（GSK3β）、p21-GSK3β和β-catenin蛋白及mRNA表达水平。结果：与对照组比较,FDM组大鼠眼轴长度均明显增加（P<0.05）,巩膜组织中TGF-β1蛋白和mRNA表达水平均明显降低（P<0.01）。对照组、FDM组和FDM+DDK1组大鼠巩膜成纤维细胞中GSK3β蛋白和mRNA表达水平比较差异无统计学意义（P>0.05）,TGF-β1、DCL3、APC、p21-GSK3β和β-catenin蛋白及mRNA表达水平比较差异有统计学意义（P<0.01）;与对照组比较,FDM组大鼠巩膜成纤维细胞中TGF-β1、APC蛋白和mRNA表达水平降低（P<0.05）,DCL3、p21-GSK3β、β-catenin蛋白和mRNA表达水平升高（P<0.05）;与FDM组比较,FDM+DDK1组大鼠巩膜成纤维细胞中TGF-β1、APC蛋白和mRNA表达水平升高（P<0.05）,DCL3、p21-GSK3β、β-catenin蛋白和mRNA表达水平降低（P<0.05）。结论：FDM模型大鼠巩膜成纤维细胞中TGF-β1表达水平降低,其水平受Wnt/β-catenin信号通路调控。     

毛樱桃总黄酮对RAW264.7细胞中炎症因子水平的影响及其机制

目的：探讨毛樱桃总黄酮（PTTTF）对脂多糖（LPS）诱导的细胞炎症模型中炎症因子的影响,阐明其作用机制。方法：通过LPS诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7和人中性粒细胞（PMN）建立细胞炎症模型,将细胞分为对照组、模型组、地塞米松（DXM）组和不同剂量（0.4、4.0和40.0 mg·L^-1）PTTTF组。采用RT-PCR法检测RAW264.7细胞中白细胞介素1β（IL-1β）、白细胞介素6（IL-6）、诱导性一氧化氮合酶（iNOS）、肿瘤坏死因子（TNF-α）和高迁移率族蛋白B1（HMGB1）mRNA表达水平;采用Western blotting法检测RAW264.7细胞中核转录因子κB（NF-κB）及信号通路关键分子细胞外调节蛋白激酶（ERK1/2）、C-Jun氨基末端激酶1/2（JNK）和磷酸化JNK（p-JNK）蛋白表达水平;采用流式细胞术检测RAW264.7细胞S期细胞百分率和PMN细胞凋亡率。结果：与对照组比较,模型组RAW264.7细胞中IL-1β、IL-6、iNOS、TNF-α和HMGB1 mRNA表达水平明显升高（P<0.05或P<0.01）,NF-κB、ERK1/2和p-JNK蛋白表达水平明显升高（P<0.01）,S期细胞百分率明显升高（P<0.05）,PMN细胞凋亡百分率明显降低（P<0.05）。与模型组比较,4.0及40.0 mg·L^-1PTTTF组和DXM组RAW264.7细胞中IL-1β、iNOS、TNF-α和HMGB1 mRNA表达水平明显降低（P<0.05或P<0.01）,NF-κB、ERK1/2和p-JNK蛋白表达水平明显降低（P<0.05）,S期细胞百分率明显降低（P<0.05或P<0.01）,PMN细胞凋亡率明显升高（P<0.05或P<0.01）。结论：PTTTF能够下调LPS诱导的细胞炎症模型中炎症因子表达水平,该作用可能与其降低S期细胞百分率,促进其凋亡,并下调NF-κB、ERK1/2和p-JNK蛋白表达有关。     

白头翁皂苷B4对慢性肾功能衰竭大鼠肾组织的保护作用及其机制

目的：探讨白头翁皂苷B4对慢性肾功能衰竭（CRF）大鼠氧化应激、炎症状态和肾组织中细胞凋亡相关蛋白表达的影响,阐明白头翁皂苷B4保护CRF大鼠肾组织的作用机制。方法：75只雄性SD大鼠分为对照组、模型组、阳性对照组、低剂量白头翁皂苷B4组和高剂量白头翁皂苷B4组。采用腺嘌呤连续灌胃21 d建立CRF大鼠模型。造模成功后,阳性对照组大鼠给予0.5 mg·kg^-1地塞米松,低和高剂量白头翁皂苷B4组大鼠分别灌胃给予1和2 mg·kg^-1白头翁皂苷B4,连续给药28 d,对照组和模型组大鼠灌胃给予等量生理盐水。采用生化分析仪检测大鼠血清中血肌酐（Scr）和尿素氮（BUN）水平,试剂盒法检测大鼠肾组织中超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）水平,ELISA法检测大鼠肾组织中白细胞介素1β（IL-1β）、白细胞介素6（IL-6）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平,Western blotting法检测肾组织中磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B（PI3K/Akt）通路的激活及凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤2（Bcl-2）、B淋巴细胞瘤2相关X蛋白（Bax）和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（Caspase-3）蛋白表达水平。结果：与对照组比较,模型组大鼠血清中Scr和BUN水平明显升高（P<0.01）,正常肾小球和肾小体数量明显减少,肾组织中SOD活性降低（P<0.01）,MDA、IL-1β、IL-6和TNF-α水平明显升高（P<0.01）,Bax和Caspase-3蛋白表达水平明显升高（P<0.01）,磷酸化Akt（p-Akt）和Bcl-2蛋白表达水平明显降低（P<0.01）。与模型组比较,阳性对照组、低和高剂量白头翁皂苷B4组大鼠血清中Scr和BUN水平降低（P<0.01）,正常肾小球和肾小体数量明显增加,肾组织中SOD活性升高（P<0.01）,MDA、IL-1β、IL-6和TNF-α水平明显降低（P<0.01）,Bax和Caspase-3蛋白表达水平明显降低（P<0.01）,p-Akt和Bcl-2蛋白表达水平明显升高（P<0.01）。结论：白头翁皂苷B4可通过降低血清中Scr和BUN水平,降低氧化应激反应,减少炎症因子的释放,激活肾组织PI3K/Akt通路,对肾组织损伤起到保护作用。     

戊酸雌二醇联合阿司匹林对大鼠宫腔黏连的改善作用

目的：探讨戊酸雌二醇联合阿司匹林对大鼠宫腔黏连（IUA）的改善作用,阐明两者联用治疗的作用机制。方法：50只健康雌性SD大鼠随机分为对照组、模型组、戊酸雌二醇组、阿司匹林组和戊酸雌二醇联合阿司匹林组（联合组）,每组10只,除对照组外其余各组大鼠采用刮宫加感染双重损伤法建立IUA模型,连续给药24 h后取各组大鼠血清和子宫组织,采用ELISA法检测大鼠血清雌二醇水平,HE染色观察大鼠宫腔组织病理形态表现及腺体数量,采用Masson染色观察大鼠子宫内膜纤维化面积比,采用免疫组织化学法检测子宫内膜组织中转化生长因子β1（TGF-β1）、纤溶酶原激活物抑制剂1（PAI-1）和基质金属蛋白酶9（MMP-9）蛋白表达水平。结果：ELISA法检测,与对照组比较,模型组大鼠血清雌二醇水平明显降低（P<0.05）;与模型组比较,戊酸雌二醇组、阿司匹林组和联合组大鼠血清雌二醇水平明显升高（P<0.05）。HE和Masson染色检测,与对照组比较,模型组大鼠宫腔发生黏连、扩大,腔内有积液,宫腔壁细胞排列紊乱,炎性细胞浸润明显,子宫内膜间质纤维化,胶原纤维排列紊乱,子宫内膜腺体数量明显减少（P<0.05）,纤维化面积比明显增加（P<0.05）;与模型组比较,戊酸雌二醇组、阿司匹林组和联合组大鼠宫腔黏连、积液、炎性细胞浸润和子宫内膜间质纤维化明显减轻,宫腔壁细胞排列整齐,有少量胶原纤维,子宫内膜腺体数明显增加（P<0.05）,纤维化面积比明显降低（P<0.01）;与阿司匹林组比较,联合组大鼠子宫内膜腺体数明显增加（P<0.05）,子宫内膜纤维化面积比明显降低（P<0.05）。与模型组比较,戊酸雌二醇组、阿司匹林组和联合组大鼠子宫内膜组织中TGF-β1和PAI-1蛋白表达水平明显降低（P<0.05或P<0.01）,MMP-9蛋白表达水平明显升高（P<0.05或P<0.01）;与阿司匹林组比较,联合组大鼠子宫内膜组织中TGF-β1和PAI-1蛋白表达水平明显降低（P<0.05）,MMP-9蛋白表达水平明显升高（P<0.05）。结论：戊酸雌二醇与阿司匹林联合应用可降低大鼠子宫内膜组织中TGF-β1和PAI-1表达,上调MMP-9表达,对大鼠IUA具有改善作用。     

含缬酪肽蛋白在上皮性卵巢癌组织中的表达及其临床意义

目的：观察上皮性卵巢癌（EOC）组织中含缬酪肽蛋白（VCP）的表达情况及其与EOC患者临床病理特征的关系,为EOC的分子治疗提供依据。方法：采用免疫组织化学法检测94例EOC组织标本、13例卵巢交界性肿瘤组织标本、36例卵巢良性肿瘤组织标本和8例正常卵巢组织标本中VCP的表达情况。分析VCP阳性表达率与EOC患者各临床病理参数（年龄、FIGO分期、病理类型、组织学分级、是否有淋巴结转移、是否有腹水和术前CA125水平）的关系。采用免疫荧光技术和Western blotting法检测人卵巢上皮HOSEpiC细胞和人EOCSKOV-3细胞中VCP表达;将SKOV-3细胞分为对照组（未经CB-5083处理）和处理组（经CB-5083处理）,划痕实验分析2组SKOV-3细胞迁移率,平板克隆形成实验分析2组SKOV-3细胞克隆形成率,免疫荧光法分析2组SKOV-3细胞中VCP表达情况,Western blotting法检测2组SKOV-3细胞中VCP、NF-κB/P65、IκBα和p-IκBα蛋白表达水平。结果：EOC、交界性卵巢肿瘤、良性卵巢肿瘤和正常卵巢组织中VCP阳性表达率组间比较差异有统计学意义（P<0.05）;VCP表达与患者FIGO分期、组织学分级和是否有淋巴结转移有关联（P<0.05）,而与患者年龄、病理类型、是否有腹水及术前CA125水平无关联（P>0.05）。SKOV-3细胞中VCP表达水平高于HOSEpiC细胞（P<0.05）,处理组SKOV-3细胞迁移率低于对照组（P<0.05）,处理组克隆形成率低于对照组（P<0.05）,处理组SKOV-3细胞中VCP和NF-κB/P65蛋白表达水平低于对照组（P<0.05）,p-IκBα蛋白表达水平高于对照组（P<0.05）。结论：VCP在EOC组织和细胞中呈高表达,VCP高表达可促进肿瘤的迁移和增殖。     

小檗碱联合辛伐他汀对动脉粥样硬化模型大鼠的抗动脉粥样硬化作用及其机制

目的：探讨小檗碱联合辛伐他汀对动脉粥样硬化（AS）模型大鼠胸主动脉组织中血管内皮生长因子（VEGF）、转化生长因子β1（TGF-β1）、白细胞介素18（IL-18）和白细胞介素10（IL-10）表达的影响,阐明小檗碱联合辛伐他汀抗动脉硬化的作用机制。方法：48只大鼠随机分为对照组,模型组,辛伐他汀组,低、中和高剂量小檗碱联合辛伐他汀组,每组8只。给药4周后取大鼠血清和胸主动脉组织,HE染色法观察各组大鼠胸主动脉组织病理形态表现,双抗体夹心ABC-ELISA法检测各组大鼠血清中VEGF、TGF-β1、IL-18和IL-10水平,全自动生物化学分析仪测定各组大鼠血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL-C）和高密度脂蛋白（HDL-C）水平,免疫组织化学法检测各组大鼠胸主动脉组织中VEGF、TGF-β1、IL-18和IL-10蛋白表达水平。结果：HE染色,与对照组比较,模型组大鼠主动脉内膜明显增厚、细胞内外有脂质沉积,内膜下可见坏死物沉积,内壁出现斑块、不平整,血管腔狭窄;与模型组比较,高剂量小檗碱联合辛伐他汀组大鼠动脉血管壁无明显斑块出现,内膜增厚不平整明显改善。与模型组比较,辛伐他汀组和不同剂量小檗碱联合辛伐他汀组大鼠血清中TC、TG和LDL-C水平明显降低（P<0.05或P<0.01）,HDL-C水平明显升高（P<0.05）。ABC-ELISA法检测,与模型组比较,辛伐他汀组和不同剂量小檗碱联合辛伐他汀组大鼠血清中VEGF和IL-18水平均降低（P<0.05或P<0.01）,TGF-β1和IL-10水平升高（P<0.05）。免疫组织化学法检测,与模型组比较,辛伐他汀组大鼠胸主动脉组织中IL-18蛋白表达水平明显降低（P<0.05）,TGF-β1蛋白表达水平明显升高（P<0.05）;不同剂量小檗碱联合辛伐他汀组大鼠胸主动脉组织中VEGF和IL-18蛋白表达水平均明显降低（P<0.05）,TGF-β1和IL-10蛋白表达水平明显升高（P<0.05）。结论：小檗碱联合辛伐他汀能通过下调小鼠血清和胸主动脉组织中VEGF和IL-18蛋白表达水平,上调TGF-β1和IL-10蛋白表达水平,发挥抗AS作用。     

Krüppel样转录因子12在结直肠癌患者肿瘤组织和血清中的表达及其意义

目的：检测Krüppel样转录因子12（KLF12）蛋白在结直肠癌患者肿瘤组织和血清中的表达,并探讨其临床价值。方法：选择120例结直肠癌手术患者作为研究对象（病例组）,收集结直肠癌组织和癌旁组织的石蜡标本,选择体检正常者100人作为对照组。免疫组织化学染色检测结直肠癌组织和癌旁肠组织中KLF12、nm23、周期素E1（CyclinE1）、基质金属蛋白酶2（MMP-2）和MMP-9蛋白的表达情况;ELISA法检测手术前和术后1个月时患者血清中KLF12水平并检测对照组受试者血清中KLF12水平。结果：结直肠癌组织中KLF12、CyclinE1、MMP-2和MMP-9蛋白阳性表达率高于癌旁组织（χ²=66.155,52.795,64.515,52.632;P<0.001）,nm23蛋白阳性表达率低于癌旁组织（χ²=13.019,P<0.001）。Spearman相关分析,结直肠癌组织中KLF12蛋白与MMP-2和MMP-9蛋白表达水平呈正相关关系（r=0.396 3,P<0.001;r=0.326 4,P<0.001）,与nm23蛋白表达水平呈负相关关系（r=-0.227 3,P=0.013）。病例组结直肠癌患者手术前血清中KLF12蛋白表达水平高于对照组,血清中KLF12蛋白表达水平受试者工作特征曲线（ROC）的最佳cut-off值为3.795 μg·L^-1,曲线下面积为0.834,其对诊断结直肠癌的敏感度和特异度分别为60.8%和94.0%。病例组结直肠癌患者手术后血清中KLF12蛋白表达水平降低,但仍高于对照组（t=2.708,P=0.007）;结直肠癌组织中KLF12蛋白表达水平与血清中KLF12蛋白表达水平呈正相关关系（r=0.406 9,P<0.001）。淋巴结转移程度为N3的（N3组）患者血清中KLF12水平最高,N0组患者最低（F=21.731,P<0.001）。结论：KLF12蛋白可能参与了结直肠癌的侵袭转移,检测患者血清中KLF12蛋白表达水平可能对判断病情和预测淋巴结转移有价值。     

不同糖代谢状态人群血清CTRP3和25(OH)D水平及其与胰岛素抵抗的关系

目的：测定不同糖代谢状态人群血清中C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白3（CTRP3）和25羟维生素D[25（OH）D]的水平,探讨其影响因素并分析其与胰岛素抵抗（IR）的关系。方法：选择初诊2型糖尿病（T2DM）患者44例（T2DM组）、糖耐量减低（IGT）患者42例（IGT组）和体检健康者54人（正常对照组）,测定各组受试者血清中CTRP3、空腹静脉血糖（FPG）、糖化血红蛋白（HbA1c）、甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、空腹胰岛素（FIns）和25（OH）D水平,计算体质量指数（BMI）、稳态模型IR指数（HOMA-IR）、稳态模型胰岛素分泌指数（HOMA-β）,两因素之间相关性分析采用Pearson相关分析法,采用多元逐步回归分析法分析HOMA-IR和HOMA-β的影响因素。结果：与正常对照组比较,IGT组患者血清中HDL-C、25（OH）D水平和HOMA-β值明显降低（P<0.05）,T2DM组患者血清中FPG、HbA1c、TG、TC、FIns水平和BMI、HOMA-IR值明显升高（P<0.05）,而血清中CTRP3、HDL-C、25（OH）D水平和HOMA-β值明显降低（P<0.05）;与IGT组比较,T2DM组患者血清中FPG、HbA1c、TG、FIns水平和HOMA-IR值明显升高（P<0.05）,血清中HDL-C水平和HOMA-β值明显降低（P<0.05）。不同糖代谢状态人群血清中CTRP3水平与HbA1c、FIns水平和HOMA-IR呈负相关关系（r=-0.391,P<0.05;r=-0.198,P<0.05;r=-0.481,P<0.05）;25（OH）D水平与TG、FPG和HOMA-IR呈负相关关系（r=-0.209,P<0.05;r=-0.406,P<0.05;r=-0.306,P<0.05）,与HOMA-β呈正相关关系（r=0.329,P<0.05）。HbA1c和CTRP3为HOMA-IR的独立影响因素,25（OH）D、FPG和HbA1c为HOMA-β的独立影响因素。结论：血清CTRP3和25（OH）D水平与IR呈负相关关系,在糖尿病发生发展过程中起抑制作用。     

芪参益气滴丸对慢性心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡的抑制作用及其机制

目的：探讨芪参益气滴丸（QSYQ）对慢性心力衰竭（CHF）大鼠心肌细胞凋亡的影响,并阐明其可能的作用机制。方法：60只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、阳性药对照组（6.75 mg·kg^-1·d^-1卡托普利）、低剂量（135 mg·kg^-1·d^-1）QSYQ组和高剂量（270 mg·kg^-1·d^-1）QSYQ组,每组12只。采用冠状动脉前降支结扎法建立CHF模型,造模成功后连续灌胃给药4周,超声心动图检测大鼠心功能,采用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标志法（TUNEL）检测大鼠心肌细胞凋亡率,比色法测定大鼠血清中乳酸脱氢酶（LDH）和超氧化物歧化酶（SOD）活性及丙二醛（MDA）水平,流式细胞术检测大鼠心肌组织中活性氧（ROS）水平,Western blotting法检测大鼠心肌组织中凋亡相关蛋白和核因子E2相关因子2（Nrf2）及血红素氧化酶1（HO-1）蛋白表达水平。结果：与假手术组比较,模型组大鼠左室收缩末期内径（LVSD）和左室舒张末期内径（LVDD）明显增加（P<0.05）,左室射血分数（EF）和左室短轴缩短率（FS）明显降低（P<0.05）,棕黄色心肌细胞数明显增多（P<0.05）,细胞凋亡率明显升高（P<0.05）,血清中LDH活性及ROS和MDA水平明显升高（P<0.05）,SOD活性明显降低（P<0.05）,心肌组织中活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（Cleaved-Caspase-3）和B淋巴细胞瘤2（Bcl-2）相关X蛋白（Bax）表达水平明显升高（P<0.05）,Bcl-2、Nrf2和HO-1蛋白水平明显降低（P<0.05）;与模型组比较,高剂量QSYQ组和阳性药对照组大鼠LVSD和LVDD明显降低（P<0.05）,EF和FS明显升高（P<0.05）,棕黄色心肌细胞数明显减少（P<0.05）,细胞凋亡率明显降低（P<0.05）,血清中LDH活性及ROS和MDA水平明显降低（P<0.05）,SOD活性明显升高（P<0.05）,心肌组织中Cleaved-Caspase-3和Bax蛋白表达水平明显降低（P<0.05）,Bcl-2蛋白表达水平明显升高（P<0.05）,而低剂量QSYQ组大鼠上述各相关指标差异无统计学意义（P>0.05）。与模型组比较,高剂量QSYQ组大鼠心肌组织中Nrf2和HO-1蛋白表达水平明显升高（P<0.05）,阳性药对照组和低剂量QSYQ组大鼠心肌组织中Nrf2和HO-1蛋白表达水平差异无统计学意义（P>0.05）。结论：QSYQ可抑制CHF大鼠心肌细胞凋亡,其作用机制可能与激活Nrf2/HO-1信号通路、降低氧化损伤有关。     

丹参酮ⅡA对过敏性紫癜肾炎小鼠肾组织中Cosmc和AOPP表达的影响及其治疗作用

目的：探讨丹参酮ⅡA对过敏性紫癜肾炎小鼠肾组织中半乳糖基转移酶伴侣蛋白（Cosmc）、晚期氧化蛋白终末产物（AOPP）表达及胞外信号调节激酶/丝裂原活化蛋白激酶（ERK/MAPK）信号通路蛋白水平的影响,阐明丹参酮ⅡA对过敏性紫癜肾炎的治疗机制。方法：38只小鼠随机分为对照组、模型组（建立过敏性紫癜肾炎模型）和丹参酮ⅡA组（建立过敏性紫癜肾炎模型+丹参酮ⅡA治疗）,其中2只小鼠用于验证造模是否成功,其余每组12只。测定各组小鼠尿红细胞计数和尿蛋白水平,采用过碘酸希夫反应（PAS）染色观察各组小鼠肾组织病理形态表现,采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定小鼠肾组织中AOPP蛋白水平,采用Western blotting法测定小鼠肾组织中ERK和磷酸化ERK（p-ERK）蛋白表达水平。采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法测定各组小鼠肾组织中ERK、p-ERK和Cosmc mRNA表达水平。结果：对照组小鼠肾小球基底膜无增生,无肾小球硬化;模型组小鼠肾小球基底膜增生明显,可见炎症细胞浸润,出现肾小球硬化;丹参酮ⅡA组小鼠肾小球基底膜增生和炎症浸润不明显,少量炎症细胞浸润。与对照组比较,模型组和丹参酮ⅡA组小鼠尿红细胞计数、24 h尿蛋白水平及肾组织中AOPP蛋白水平和p-ERK mRNA表达水平升高（P<0.05或P<0.01）,Cosmc mRNA表达水平降低（P<0.01）;与模型组比较,丹参酮ⅡA组小鼠尿红细胞计数、24 h尿蛋白水平及肾组织中AOPP蛋白水平和p-ERK蛋白表达水平降低（P<0.05或P<0.01）,Cosmc mRNA表达水平升高（P<0.01）。模型组小鼠肾组织中Cosmc mRNA表达水平与AOPP蛋白水平及p-ERK蛋白表达水平呈负相关关系（r=-0.573,P<0.01;r=-0.602,P<0.01）,AOPP蛋白水平与p-ERK蛋白表达水平呈正相关关系（r=0.614,P<0.01）。结论：丹参酮ⅡA可能通过降低肾组织Cosmc水平、升高肾组织中AOPP水平以及激活ERK/MAPK信号通路对过敏性紫癜肾炎小鼠发挥治疗作用。     

肾元颗粒对db/db糖尿病肾病小鼠血管钙化的改善作用及其机制

目的：通过高磷诱导db/db糖尿病肾病（DN）小鼠血管钙化,探讨肾元颗粒对db/db DN小鼠血管钙化的改善作用及其可能机制。方法：将20只SPF级db/db小鼠随机分为模型组和肾元颗粒组（n=10）,同系背景野生型（WT）小鼠作为空白组（n=10）。给药12周后,取各组小鼠血清、肾脏和胸主动脉组织。ELISA法检测各组小鼠血清FGF23水平,HE和von Kossa法检测各组小鼠胸主动脉病理形态表现以及钙盐沉积情况,实时荧光定量PCR （Real-time PCR）法检测各组小鼠肾脏组织中KlothomRNA和胸主动脉组织中Pit-1、Runx2及SM22α mRNA表达水平,Western blotting法检测各组小鼠肾脏组织中Klotho蛋白和胸主动脉组织中Pit-1、Runx2及SM22α蛋白表达水平,免疫组织化学法检测各组小鼠胸主动脉组织中Pit-1蛋白表达水平,免疫荧光法检测各组小鼠胸主动脉组织中SM22α和Runx2蛋白表达水平。结果：与空白组比较,模型组小鼠血清FGF23水平明显升高（P<0.05）,肾脏组织中Klotho mRNA和蛋白表达水平明显降低（P<0.01）,胸主动脉组织中Pit-1和Runx2 mRNA及蛋白表达水平明显升高（P<0.01）,SM22α mRNA和蛋白表达水平明显降低（P<0.01）,胸主动脉组织中Pit-1和Runx2蛋白表达水平明显升高（P<0.01）,SM22α蛋白表达水平明显降低（P<0.01）。与模型组比较,肾元颗粒组小鼠血清FGF23水平降低（P<0.05）,肾脏组织中Klotho mRNA和蛋白表达水平明显升高（P<0.01）,胸主动脉组织中Pit-1和Runx2 mRNA及蛋白表达水平明显降低（P<0.01）,胸主动脉组织中SM22α mRNA和蛋白表达水平明显升高（P<0.01）。结论：肾元颗粒可通过上调小鼠肾脏组织中Klotho蛋白表达水平,减少Pit-1表达水平,抑制FGF23/Pit-1信号通路,调节血管平滑肌细胞（VSMC）的表型转化,达到血管保护作用。