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1.
目的研究单向免疫扩散法测定流感病毒亚单位疫苗不同生产阶段中间产品的血凝素含量实验中,去垢剂对检测结果的影响,寻找最佳裂解条件。方法以不同的去垢剂浓度和不同裂解时间分别对完整病毒和亚单位疫苗样本进行处理后,利用单向免疫扩散实验测定样本的血凝素含量,并对测定结果进行比较和分析。结果亚单位疫苗的单向免疫扩散沉淀圈在去垢剂Zwittergent浓度小于0.125%时随去垢剂浓度的增加而增大,当去垢剂浓度达到0.125%后不再继续增大:而完整病毒的沉淀圈在去垢剂浓度达到1%后才不再增大。以终浓度1%的去垢剂对完整病毒和亚单位疫苗分别处理30、60、120min后进行单向免疫扩散,测定结果比较差异无统计学意义。结论以终浓度1%的去垢剂Zwittergent对完整病毒或亚单位疫苗样本裂解30min后进行单向免疫扩散测定血凝素含量,均可得到稳定准确的结果,有利于提高工作效率、缩小实验间误差、节约实验成本。 相似文献
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陈绍恒 《国际生物制品学杂志》2015,38(3)
目前使用的流感疫苗都是针对现行流行株设计的,因此难以有效应对病毒快速变异出现的新病毒株,而开发能同时抵抗多个流感病毒株感染的具有交叉保护作用的通用疫苗是今后流感疫苗研发的趋势.随着对流感病毒研究的深入,人们发现将传统认为具有高度变异性的流感病毒血凝素蛋白合理设计成疫苗靶抗原,也可以在一定程度上起到抗多个流感病毒株感染的保护作用,这表明流感病毒血凝素也具有作为通用流感疫苗候选抗原的潜力.此文对近年来基于血凝素构建的通用流感疫苗的研究进行综述. 相似文献
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目的 构建表达甲型H1N1流感病毒血凝素(hemagglutinin,HA)抗原的DNA疫苗,并在小鼠中测试其免疫原性.方法 运用人密码子优化技术合成甲型H1N1流感病毒HA序列,并转移至DNA疫苗载体,用Western blotting检测其表达效率.采用单纯随机抽样方法把BALB/c小鼠分成DNA疫苗组和对照组.用... 相似文献
5.
目的 通过对连续三年生产的流行性感冒(流感)病毒裂解疫苗成品和单价病毒液(MVP)血凝素(HA)的定期检测,了解成品和MVP的HA含量的变化情况,以便更准确、有效地配制半成品. 方法 2003-2005年,每年选择一定数量的成品和MVP,按一定时间间隔抽样,采用单向免疫扩散法检测成品和MVP的HA含量.观察期至少为1年. 结果 成品存放至半年,HA含量都在控制范围之内.但存放至1年,个别毒株HA含量降至低于控制范围.MVP的HA稳定性因毒株的不同而异. 结论 一般情况下,流感疫苗在成品检定合格后7个月内完成使用,因此,在此期间,成品的HA含量在合格范围之内.不同毒株的MVP,HA降幅不同,可能是由于编码HA蛋白的RNA4节段的核苷酸序列在不同亚型,甚至在同一亚型不同变异株间的差异所造成的. 相似文献
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近年来流感频发,针对传统靶点抗流感药物(如扎那米韦和奥司他韦)的耐药病毒大量出现,迫切需求开发新靶点、新作用机制的抗流感药物。本研究针对流感病毒血凝素(HA)底物结合位点附近的赖氨酸(Lys133和Lys222),设计了系列具有共价结合潜力的唾液酸类化合物(1a–1h)。活性研究表明该系列化合物对两种流感病毒HA蛋白的结合力较母体化合物唾液酸(SA)有明显提升,其中化合物1d与阳性化合物2,6-唾液酸乳糖胺(2,6-SLN)持平(KD=38.2和39.6μM);该系列化合物安全无毒(对MDCK细胞CC50>1 m M),其中化合物1d可有效抑制流感病毒在MDCK细胞中的复制。本研究提出了基于流感病毒HA的共价抑制新策略,深入发掘有望获得新型强效HA抑制剂。 相似文献
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通过近年来对禽流感病毒血凝素基因及该基因编码的血凝素蛋白的结构和功能的研究,进一步明确了禽流感病毒血凝素基因的特点以及血凝素蛋白的裂解效力与禽流感病毒致病性的关系.本文着重就血凝素蛋白及其裂解位点与禽流感病毒致病力的关系进行综述,并对禽流感病毒血凝素基因工程疫苗的研究与开发近况作一介绍. 相似文献
8.
抗流感病毒药物的研究进展 总被引:2,自引:0,他引:2
流感是严重危害人类健康的急性病毒性呼吸道传染病。由于流感病毒抗原变异,常规疫苗目前尚不能有效预防流感的暴发与流行,因此抗流感病毒药物的研究在流感治疗中具有重要的意义。本文介绍了国内外抗流感病毒药物研究的最新进展。 相似文献
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目的 评价流感病毒H7N9血凝素(hemagglutinin,HA)亚单位疫苗在动物中的免疫效果。方法 利用杆状病毒表达系统表达分泌型的HA片段,单独或联合Al(OH)3佐剂腹腔注射免疫BALB/c小鼠后,对小鼠进行H7N9毒株的攻击。分析重组H7N9 HA(rH7HA)的免疫保护效果。结果 rH7HA 加Al(OH)3佐剂与rH7HA单独免疫相比,在血清中诱导了更高的IgG滴度。最高剂量(1.500 μg)rH7HA加佐剂组诱导IgG滴度达215,单独诱导IgG滴度达213,但两者之间差异无统计学意义,说明免疫小鼠的rH7HA量达到1.5 μg即能够对同源病毒的感染提供保护。结论 杆状病毒系统表达的分泌型HA通过腹腔注射能够保护小鼠抵抗致死性剂量的同源病毒的感染。 相似文献
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周祖木 《国际生物制品学杂志》2012,35(1)
流感是重大的公共卫生问题,可发生全球大流行.研制安全有效的流感疫苗对控制流感至关重要.然而,由于流感病毒的交叉免疫及其机制尚未完全阐明,对研制疫苗带来不利影响.对甲型流感病毒交叉免疫的深入研究必将有助于更好地研制流感疫苗,对预防和控制甲型流感具有重要意义.此文对甲型流感病毒交叉免疫、免疫机制、不同亚型免疫的评价等研究进展进行综述. 相似文献
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流感疫苗生产主要采用鸡胚病毒培养的方式,而提高流感病毒在鸡胚中的复制能力将能增加疫苗的产量和可靠性.影响病毒在鸡胚中繁殖的重要因素包括:流感病毒血凝素部分位点的氮基酸变异、血凝素与神经氨酸酶之间的作用平衡、病毒其他蛋白的作用及8个基因节段的重配比例.疫苗株制备方法瓶颈的突破和乙型流感病毒重配株的研究也将帮助疫苗生产商选择合适的候选疫苗株. 相似文献
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目的 了解2013年流感疫苗生产用乙型病毒株NYMC BX-51B主要抗原血凝素(hemagglutinin,HA)和神经氨酸酶(neuraminidase,NA)的基因特征,并研究该疫苗株的传代稳定性.方法 对制备的乙型流感病毒株主种子批、工作种子批及收获液病毒进行全面的生物学特性检定.采用逆转录-PCR法从主种子批、工作种子批及疫苗病毒收获液中扩增HA及NA基因片段,并进行全基因序列测定及分析.对7株不同年份的乙型疫苗株及野毒株的HA氨基酸序列进行比对,绘制氨基酸种系发生树.结果 该毒株主种子批和工作种子批的抗原性与WHO2013年推荐的毒株一致,种子批和收获液病毒的生物学特性均符合我国2010年版药典标准.HA基因序列长度为1 755 bp,编码584个氨基酸;NA基因序列长度为1 401 bp,编码466个氨基酸.各代次流感病毒HA和NA的基因核苷酸和氨基酸序列均相同,与GenBank发布的序列完全一致,同源性为100%.2013年乙型疫苗株的HA氨基酸序列与2010和2012年相比,同源性分别为94.3%和98.4%.结论 2013年乙型流感疫苗株NYMCBX-51B主要抗原基因传代稳定,一般生物学特性符合我国药典要求.2013年疫苗株的HA氨基酸序列与2010年相比进化距离较远. 相似文献
15.
目的 研究四价流感病毒裂解疫苗生产用毒种的传代稳定性,确保毒种适用于疫苗生产。方法 将WHO推荐的季节性流感疫苗甲型H1N1和H3N2、乙型BV和BY病毒株(原始种子批)在鸡胚中传代扩增,制备生产用主种子批和工作种子批毒种。按中国药典2015年版三部的要求对毒种进行检定,包括鉴别试验、病毒滴度和血凝滴度测定、外源微生物检查等。将毒种连续传10代,用反转录PCR扩增第2、3、4、5、10代病毒鸡胚尿囊液中的血凝素(hemagglutinin,HA)和神经氨酸酶(neuraminidase,NA)基因片段,并进行序列测定,分析传代过程中HA和NA的核苷酸和氨基酸序列同源性。结果 主种子批和工作种子批毒种的抗原性均与推荐的病毒株一致。各型病毒滴度均>6.5 lg半数鸡胚感染量/ml,血凝滴度均≥1:160。2个种子批的支原体和无菌检查结果均为阴性,主种子批外源性禽白血病病毒和禽腺病毒检查结果亦为阴性。毒种在鸡胚中连续传代后,各型病毒株HA和NA的核苷酸序列同源性均>99%,氨基酸序列同源性均为100%。结论 本研究的四价流感病毒裂解疫苗生产用毒种具有良好的传代稳定性,可用于疫苗生产。 相似文献
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郑眉 《国际生物制品学杂志》2019,42(4):198-202
流感是由流感病毒感染引起的严重急性呼吸道传染病,接种流感疫苗是预防流感最经济、安全且有效的措施。目前广泛应用的传统流感疫苗的保护效果受到疫苗株与流行株表面抗原匹配程度的明显影响,难以有效应对因流感病毒发生抗原漂移或抗原转换而产生的无法预料的流行或大流行。因而开发能够诱导广谱和持久免疫的广谱流感疫苗是新型流感疫苗研发的重要方向。流感病毒基质、核蛋白和血凝素茎部结构域作为流感病毒的保守抗原,是当前广谱流感疫苗的主要靶抗原。此文就近年来基于流感病毒保守抗原的广谱流感疫苗的抗原选择、免疫保护制剂、临床研究进展做一综述。 相似文献
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细胞因子是一大类可溶性的小分子多肽或蛋白质,成员包括IFN、生长因子、IL和趋化因子等。它们都是体内重要的免疫调节分子,参与固有免疫和适应性免疫的激活和调节,因而作为内源性佐剂有很大的应用前景,近年一直是研究热点。此文就细胞因子佐剂在流感疫苗领域应用的研究进展做一综述。 相似文献
18.
李树香 《国际生物制品学杂志》2017,40(4)
当前流感疫苗主要为肌内注射灭活疫苗和滴鼻减毒活疫苗.对于预防呼吸道传播的流感,抗原特异性黏膜免疫应答非常重要.现有资料显示,两种疫苗都存在不可避免的局限性,为解决这个问题,需要对黏膜佐剂流感疫苗进行深入的研究.此文对进入临床试验的流感疫苗黏膜佐剂进行综述. 相似文献