白喉-破伤风-无细胞百日咳-灭活脊髓灰质炎灭活疫苗的临床免疫原性研究进展（待续）

目前，国内许多疫苗生产厂家都在致力于研制以无细胞组分百日咳-白喉-破伤风疫苗（diphtheria，tetanus，acelluar component pertussis vaccine，DTacP）为基础的联合疫苗，而国外不同厂家该类联合疫苗的临床试验，其免疫后抗体检测方法和保护性评判标准有较大差异。此文旨在通过比较不同DTacP-灭活脊髓灰质炎病毒疫苗的临床免疫原性结果，包括血清保护率/血清转换率和不同方法测定的抗体几何平均滴度，为临床试验方案设计提供依据和思路。     

甲-乙型肝炎疫苗与麻-腮-风疫苗或DTPa-灭活脊灰和Hib疫苗同时免疫12-18月龄幼儿的安全性及免疫原性

比利时Vilnius大学Usonis等将甲-乙型肝炎疫苗与白喉-破伤风-无细胞百日咳-灭活脊灰疫苗和b型流感杆菌结合疫苗（DTPa—IPV／Hib）同时免疫15～18月龄儿童（实验1），或与麻疹-腮腺炎-风疹疫苗（MMR）同时免疫11～15月龄儿童（实验2）。两实验组均在首次免疫6个月后进行甲-乙型肝炎疫苗加强免疫，并于免疫前及每次免疫一个月后采血，检查各疫苗相应的抗体滴度。实验1组中男性32名，女性21名，实验2组中男性17名，女性20名，进行免疫前后对比。     

评价与批准新型婴儿用肺炎球菌结合疫苗的血清学标准

世界卫生组织(WHO)正在对评价和批准新型肺炎球菌结合疫苗／联合疫苗或不同免疫程序的血清学标准进行一系列评议。由于缺乏明确的保护作用血清学相关物及疫苗中含有多个抗原，尤其是唯一获得批准的疫苗所含各血清型大多未建立临床效力数据，从而阻碍了批准新疫苗或联合疫苗的标准的制订。本文对各种观点进行了分析，并向管理当局提供评价这些待批准疫苗的初步指南性建议。关于肺炎球菌结合疫苗生产与质控更详细的建议，包括评价和审批标准正在拟定中。     

注射免疫接种疫苗致婴儿死亡1例

患儿，男，1岁，既往体健，按免疫接种程序需注射吸附无细胞百白破联合疫苗和重组乙型肝炎疫苗（酵母）。2006年5月28日在镇卫生院门诊注射疫苗（这两种疫苗均系第3次注射，每次间隔1月），右上臂皮下注射无细胞百白破联合疫苗0．5mL（武汉生物制品研究所，批号为20050521-3，有效期至2007年5月），     

狂犬疫苗接种五针免疫程序与2-1-1四针免疫程序的对比观察

目的了解狂犬疫苗2-1-1四针免疫程序的不良反应、血清抗体阳转率以及患者的依从性,为其在临床的推广应用提供数据支持。方法将856名犬伤门诊患者按照就诊时间随机分为两组,对照组患者给予传统五针程序免疫,实验组患者给予2-1-1四针程序免疫。随访、监测两组患者的抗体阳转率、不良反应发生率以及免疫依从性。结果两组患者不良反应发生率以及全程接种30d后血清抗体阳转率差异无统计学意义,(P>0.05),接受2-1-1四针程序患者的免疫依从性明显高于传统五针程序的患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论狂犬疫苗2-1-1四针免疫程序安全、经济、简便,患者依从性好,值得推广和普及。     

新型乙型肝炎疫苗

联合疫苗是简化婴儿乙型肝炎疫苗接种的重要步骤，目前正在进行临床评估。为减少注射次数，正在对大剂量疫苗两剂免疫程序进行评价，包裹于可降解的生物多聚体微粒的疫苗（缓释疫苗）单剂接种已在动物中作了检测。目前正在研究增强现有疫苗的免疫原性。一种方法是研制含ＨＢｓＡｇ完整前Ｓ１和前Ｓ２区或这些区中免疫原位表位以及小表面蛋白的重组疫苗，几种疫苗已在进行临床试验。今后的研究包括在细菌（如沙门菌）中表达ＨＢｓＡｇ     

联合疫苗接种与儿童疫苗计划

将多剂单价疫苗改为同样有效的单剂联合疫苗，是儿童疫苗计划的重要内容，本文简介了ＣＶＩ及其目标，回顾了联合疫苗的历史，介绍了ＣＶＩ推荐的未来联合疫苗的组成和优先发展顺序，阐明了联合疫苗接种对降低免疫接种费用和提高免疫接种覆盖率的意义，并分析了联合疫苗研制面临的一些特殊问题。     

可卡因-苯丙胺调节转录肽DNA疫苗在阿片依赖和复发中的作用

目的：研究可卡因-苯阿胺调节转录肽（CART）DNA疫苗在阿片依赖和复发中的作用。方法：制备CARTDNA疫苗，观察其对吗啡诱导的小鼠与大鼠条件性位置偏爱、对海洛因诱导的大鼠自身给药行为以及对小鼠身体依赖的影响。结果：成功制备CARTDNA疫苗，该重组质粒不仅可在体外哺乳细胞中表达，动物免疫后血清中还可检测到抗CART的抗体，并且这种抗体可维持相当长的时间（〉60天）。CARTDNA疫苗不仅可以抑制吗啡诱导的小鼠及大鼠位置偏爱的形成，而且对吗啡点燃的位置偏爱再现具有抑制作用。CARTDNA疫苗可明显抑制环境刺激和条件刺激诱导的大鼠海洛因自身给药行为。CARTDNA疫苗对Mor诱导的身体依赖小鼠的戒断症状无显影响。结论：CARTDNA疫苗可以影响阿片依赖的形成与复发，对抗动物的觅药行为，表明CARTDNA疫苗具有防治精神活性物质依赖和复发的潜力。     

联合疫苗展望

新疫苗的迅速发展增加了对联合疫苗的需要，但是联合疫苗的开发许多问题，本文介绍了可能限制联合疫苗开发的生物学因素和经济因素。     

粉碎疫苗接种的谣言

谣言1:已经接种过,没有必要进行第2剂次疫苗接种在实际的疫苗接种,过程中,为了延长抗体的存在时间,一般会进行多剂次接种。比如乙肝疫苗、破伤风-白喉-百日咳联合疫苗和脊髓灰质炎疫苗等,至少需要完成3剂次接种才能使身体产生足够的免疫力。此外,随着时间延长,抗体的浓度会逐渐降低,所以有些疫苗还要进行再次接种以加强效果。     

测定脊髓灰质炎病毒滴度的结晶紫染色法的建立及验证

目的 建立测定脊髓灰质炎病毒(poliovirus,PV)滴度的结晶紫染色法,并对该法进行验证。方法 基于PV的半数细胞培养感染量(50% cell culture infective dose,CCID50),用结晶紫染色和酶标仪确定PV的致细胞病变效应(cytopathic effect,CPE),并验证该法的准确度、精密度、线性范围和耐用性。分别采用建立的结晶紫染色法和传统的显微镜观察法测定66批口服Ⅰ型Ⅲ型脊髓灰质炎减毒活疫苗的病毒滴度,通过Pearson相关分析评价2种检测方法的相关性。将细胞板浸泡液盲传3代,观察培养物的CPE,并通过逆转录PCR确定病毒灭活情况。结果 用建立的方法测定理论滴度8.00、6.00和4.00 lgCCID50/ml的PV样品,回收率为98%~104%。细胞板内和板间测定结果的变异系数(coefficient of variation,CV)为0%~7.85%,同一工作日和不同工作日测定结果的CV分别不超过6.44%和5.27%,不同实验人员测定结果的CV不超过5.10%。该法测定PV滴度的线性范围为2.00~8.00 lgCCID50/ml。该法具有较好的耐用性,以不同细胞浓度(F=1.624,P=0.215)或不同培养时间(F=2.731,P=0.055)培养对PV滴度的测定结果没有影响。该法与显微镜观察法的检测结果具有相关性,Pearson相关系数0.918。实验用细胞板的浸泡液在Hep-2细胞上盲传3代后,培养物未观察到CPE,逆转录PCR测定结果为阴性。结论 建立的结晶紫染色法具有较好的安全性、准确度、精密度和耐用性,适用于口服脊髓灰质炎减毒活疫苗的病毒滴度测定。     

疫苗生产企业GMP现场检查中一些不足之处的商榷

就疫苗生产企业GMP检查时遇到的一些问题,如:在检查过程中过于注重硬件而相对轻视软件建设和执行的检查;关注产品的成品质量而对生产过程的检查相对较松;对疫苗的固有特性、生物安全、原辅材料的质量检查不严;检查员欠缺对生物制品生产和检定的专业知识等,与同行讨论商榷。     

疫苗生产企业派驻检查工作机制的思考

目的 建立疫苗生产企业派驻检查的日常工作机制。方法 通过疫苗检查制度梳理和派驻检查工作实践相结合的方法建立有效的派驻检查机制。结果 从派驻检查工作方法、派驻检查沟通机制2个方面建立了检查员在疫苗生产企业派驻检查的工作机制，并对检查工作中遇到的问题进行了讨论。结论 建立的派驻检查机制在实际检查工作中得到有效运用，为后续开展疫苗生产企业派驻检查工作提供参考。     

用双抗夹心ELISA法快速检测灭活乙型脑炎疫苗的效价

目的：用单克隆抗体制备的双抗夹心ELISA法快速检测灭活乙型脑炎疫苗中的乙型脑炎病毒包膜蛋白（E）的含量,并探讨其替代蚀斑减少中和试验法的可行性。方法：将疫苗样品用蚀斑减少中和试验法测定,同时选定一批疫苗为参考疫苗,用双抗夹心ELISA法检测。结果：用双抗夹心ELISA法测得的中和指数（TE）为1.595-1.655。用蚀斑减少中和试验法测得的中和指数（TP）为1.367-1.932。经F检测,两种检测方法的灵敏度有极显著差异（F=56.25,P〈0.01）,用t检验法对这两种检测方法进行统计分析,表明两组测定值的差异无统计学意义（t=0.079 3,P〉0.05）。结论：双抗夹心ELISA法与蚀斑减少中和试验法测得的中和指数（T）呈正相关性;与蚀斑减少中和试验法比,双抗夹心ELISA法具有重复性好、成本低、快速等优点。用双抗夹心ELISA法取代蚀斑减少中和试验法测灭活乙型脑炎疫苗效价是可行的。     

MDCK细胞基质与鸡胚基质单价流感疫苗在小鼠中诱导的免疫反应的比较研究

目的:比较鸡胚基质和细胞基质的H1N1单价流感疫苗在小鼠体内诱导的免疫反应的差异.方法:分别采用鸡胚基质和MDCK细胞基质H1N1流感疫苗注射C57BL/6小鼠,通过体外中和实验,胞内细胞因子染色及多细胞因子检测比较2种基质生产的单价流感疫苗诱导的体液及细胞免疫反应的差异.结果:体液免疫方面,细胞基质疫苗组血清滴度与鸡...     

肿瘤的多肽疫苗

肿瘤疫苗是目前肿瘤生物治疗的有效方法之一,用肿瘤抗原多肽作为肿瘤疫苗具有一定的优越性。多肽疫苗在临床试验中已取得了一定的效果,如和树突状细胞联合应用可以提高其免疫效果,但在临床应用中也应注意避免自身免疫的发生。     

麻疹减毒活疫苗细胞工厂多次收获工艺探索

目的:建立麻疹减毒活疫苗细胞工厂多次收获工艺。方法:采用细胞工厂培养2BS细胞,以不同感染复数接种麻疹病毒,绘制病毒生长曲线以确定适宜感染复数。在感染后不同时间点,微量滴定法比较仅收获胞外病毒与收获胞内外病毒的滴度。比较单次收获与多次收获病毒的滴度,并对原液和冻干成品进行稳定性试验。结果:确定细胞工厂培养麻疹病毒的适宜...     

我国新型冠状病毒疫苗研发进展及思考

新型冠状病毒(SARS-CoV-2)是继SARS冠状病毒(SARS-CoV)和中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)之后又一严重危害人类的病毒。SARS-CoV-2引起的疾病被世界卫生组织命名为COVID-19,具有较高的传染性和病死率。为控制疫情蔓延,我国正应急开展多种技术路线的COVID-19疫苗研发,包括灭活疫苗、重组蛋白疫苗、病毒载体疫苗和核酸疫苗(DNA和mRNA)等,在加快疫苗研发进程的同时把握应急研发进度和科学性之间的平衡,并行解决相关科学问题,在满足安全性的前提下保证疫苗的有效性和质量可控。目前我国研发的腺病毒载体疫苗已率先进入Ⅰ期临床试验,多家企业进入注册检验和滚动提交审评资料阶段。本文对COVID-19疫苗研究进展进行综述,并提出现阶段对此种新疫苗研发的考虑。     

冠状病毒疫苗全球相关专利分析

基于以往涉及冠状病毒疫苗的相关专利信息,对其现状和发展趋势进行分析。自从2002年严重急性呼吸道系统综合征（SARS）暴发以来,冠状病毒疫苗专利申请量在2003年达到高峰;自从2012年中东呼吸综合征暴发以来,冠状病毒疫苗专利申请量在2012~2015年有小幅增长。从重点申请人和疫苗类型的分析得出,目前针对冠状病毒以核酸疫苗、灭活疫苗和病毒载体疫苗为主,这也与我国和美国已经进入临床试验的新型冠状病毒（SARS-CoV-2）3类疫苗类型相吻合。