先天性视锥视杆细胞营养不良症患者血清脂质浓度的变化

目的　分析先天性视锥视杆细胞营养不良症（cone-rod dystrophy,CORD）患者血清脂质浓度变化情况。方法　采用回顾性序列病例研究方法,选取临床诊断为CORD的患者50例作为CORD组,选取52位正常人作为正常对照组,按盲法由专业技术人员测量两组血清中低密度脂蛋白胆固醇（low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C）、甘油三酯（triglycerides,TG）、总胆固醇（total cholesterol,TC）含量,并对两组测量结果进行比较,分析CORD患者体内血清脂质浓度的变化情况。结果　50例CORD患者中血脂水平异常者占48.00%,其中高TG血症者占54.17%,高TC血症者占12.50%,混合型高脂血症者占25.00%,低HDL-C血症者占8.33%。CORD患者中血清TG浓度［（1.874±1.745）mmol·L^-1］和TC浓度［（4.719±0.746）mmol·L^-1］与正常对照组［（0.848±0.316）mmol·L^-1］和［（4.098±0.596）mmol·L^-1］相比均显著升高,差异均有统计学意义（t=-4.171、-4.657,均为P=0.000）;HDL-C浓度［（1.138±0.290）mmol·L^-1］与正常对照组［（1.386±0.226）mmol·L^-1］相比显著下降,差异均有统计学意义（t=4.817,P=0.000）;LDL-C浓度［（2.579±0.541）mmol·L^-1］与正常对照组［（2.408±0.551）mmol·L^-1］相比差异无统计学意义（t=-1.584,P=0.116）。结论　CORD患者血清TG和TC浓度升高、HDL-C浓度降低,这可能与CORD的发病相关。     

Usher综合征患者血清离子浓度的变化

目的　探讨Usher综合征(Usher syndrome,USH)患者血清离子浓度的变化情况。方法　选取2015年9月至2018年9月北京同仁医院眼科中心的46例临床诊断为USH患者作为USH组；同时选取同期于北京同仁医院体检中心体检的90例正常人为对照组。检测各组受试者血清离子浓度。将USH组与对照组的各血清离子浓度进行比较。结果　USH组患者血清钙离子浓度为（2.364±0.101）mmol·L^-1，高于对照组的血清钙离子浓度（2.304±0.082）mmol·L^-1，差异有统计学意义（P=0.000）；USH组患者钾离子浓度为（4.124±0.360）mmol·L^-1，高于对照组的钾离子浓度（3.965±0.288）mmol·L^-1，差异有统计学意义(P=0.006)；两组间的钠离子、氯离子、无机磷离子浓度相比，差异均无统计学意义（均为P>0.05）。结论　USH患者的钙离子与钾离子浓度异常，这种异常可能与其发病有关。     

原发性视网膜色素变性患者五种血清离子浓度的变化

目的分析原发性视网膜色素变性(primary retinitis pigmentosa,PRP)患者血清中镁、钙、钾、钠及氯离子浓度的变化情况。设计回顾性病例系列。研究对象 2013年4月至2014年4月于北京同仁医院就诊的PRP患者82例,同期体检中心正常个体99例。方法取患者静脉血,按临床常规血清检测技术,测量PRP患者血清中镁、钙、钾、钠及氯离子的浓度,并按疾病严重程度对PRP进行临床分期,通过与正常对照组的比较,分析PRP患者血清中五种离子浓度的变化情况。主要指标血清镁、钙、钾、钠及氯离子浓度。结果与正常组(0.874±0.076 mmol/L)相比,PRP患者血清镁离子浓度(0.845±0.067 mmol/L)明显降低(t=-2.688,P=0.008);而钙离子浓度(PRP患者:2.331±0.086 mmol/L,正常组:2.225±0.092mmol/L)和钾离子浓度(PRP患者:4.104±0.347 mmol/L,正常组:3.897±0.310 mmol/L)明显升高(t=5.672、4.225;P=0.000、0.000)。与正常组相比,早期PRP患者血清中,镁离子浓度(0.830±0.070 mmol/L)明显较低(P=0.001),而钙离子浓度(2.325±0.087 mmol/L)和钾离子浓度(4.040±0.265 mmol/L)明显较高(P=0.000,0.017)。与正常组相比,晚期患者血清中,钙离子浓度(2.337±0.086 mmol/L)和钾离子浓度(4.174±0.411mmol/L)明显较高(P=0.000、0.000)。早期患者血清镁离子浓度较晚期患者明显较低(P=0.044)。结论 PRP患者血清镁、钙、钾离子浓度明显异于正常组,其可能与PRP发病有关。     

氧化损伤对视网膜色素上皮细胞三联组氨酸核苷结合蛋白1（HINT1）表达的影响

目的　探讨过氧化氢（hydrogen peroxide,H₂O₂）诱导人视网膜色素上皮（retinal pigment epithelium,RPE）细胞氧化损伤对三联组氨酸核苷结合蛋白1（histidine triad nucleotide binding protein 1,HINT1）表达的影响。方法　将人ARPE-19细胞系分别用0 μmol·L^-1 H₂O₂（对照组）、50 μmol·L^-1 H₂O₂、100 μmol·L^-1 H₂O₂、200 μmol·L^-1 H₂O₂、400 μmol·L^-1 H₂O₂、600 μmol·L^-1 H₂O₂ 6个浓度梯度处理。采用Live/Dead荧光双染法和MTT法分别检测细胞活力和增殖能力;采用Western blot检测RPE细胞内BAX、BCL-2以及HINT1的表达水平。结果　H₂O₂处理6 h后,对照组及50 μmol·L^-1、100 μmol·L^-1、200 μmol·L^-1、400 μmol·L^-1及600 μmol·L^-1 H₂O₂组RPE细胞死亡率分别为（0.35±0.11）%、（2.03±0.87）%、（3.76±1.41）%、（12.17±1.26）%、（17.69±2.24）%、（25.22±0.59）%,RPE细胞死亡率呈剂量依赖性升高（P<0.05）。H₂O₂作用后对照组及50 μmol·L^-1、100 μmol·L^-1、200 μmol·L^-1、400 μmol·L^-1、600 μmol·L^-1 H₂O₂组RPE细胞生存率分别为（40.72±2.71）%、（37.75±0.62）%、（35.30±0.68）%、（34.10±0.74）%、（33.61±0.71）%、（31.05±1.41）%,RPE细胞增殖明显减少（P<0.05）,具有剂量-效应关系。随着H₂O₂浓度的增加,BAX蛋白表达逐渐上升（P<0.01）,而抗凋亡BCL-2蛋白表达则逐渐下降（P<0.01）,BAX/BCL-2比值相比对照组分别升高1.85倍（50 μmol·L^-1 H₂O₂组）、2.35倍（100 μmol·L^-1 H₂O₂组）、2.86倍（200 μmol·L^-1 H₂O₂组）、3.97倍（400 μmol·L^-1 H₂O₂组）、8.50倍（600 μmol·L^-1 H₂O₂组）;HINT1在H₂O₂处理的RPE细胞中以剂量依赖性方式逐渐下降（P<0.01）,分别下降0.78倍（50 μmol·L^-1 H₂O₂组）、0.59倍（100 μmol·L^-1 H₂O₂组）、0.45倍（200 μmol·L^-1 H₂O₂组）、0.42倍（400 μmol·L^-1 H₂O₂组）、0.38倍（600 μmol·L^-1 H₂O₂组）。结论　H₂O₂氧化损伤诱导RPE细胞活力显著减弱,细胞凋亡相关蛋白BAX表达升高;同时,细胞中HINT1表达下调,表明HINT1可能通过影响细胞凋亡参与年龄相关性黄斑变性的发生,为其药物作用的潜在靶点。     

糖尿病视网膜病变患者广泛视网膜光凝术后黄斑色素光密度的变化

目的　探讨糖尿病视网膜病变（DR）患者行广泛视网膜光凝术（PRP）后黄斑色素光密度（MPOD）的变化。方法　纳入我院2018年8月至2020年10月收治的DR患者74例（98眼）,所有患者均行PRP治疗,记录PRP的激光斑点总面积、激光能量,分别在术前及术后1周、3个月、6个月检测MPOD值,包括黄斑区平均光密度（D_Mean）、黄斑区光密度最大值（D_Max）,同时检测患者的黄斑中心凹视网膜厚度（CRT）、黄斑中心凹下脉络膜厚度（SFCT）。观察患者术后MPOD与患者临床资料及CRT、SFCT的关系。结果　DR患者PRP后1周、3个月、6个月黄斑区D_Mean［（0.25±0.08）du、（0.20±0.08）du、（0.19±0.06）du］、D_Max［（0.38±0.06）du、（0.34±0.05）du、（0.33±0.07）du］均低于术前D_Mean［（0.30±0.09）du］、D_Max［（0.48±0.07）du］,术后1周的CRT、SFCT分别为（266.53±47.51）μm、（361.92±64.28）μm,均高于术前CRT［（240.51±43.62）μm］、SFCT［（326.49±76.43）μm］,但术后3个月、6个月的CRT［（241.92±45.89）μm、（239.84±48.82）μm］、SFCT［（328.17±70.56）μm、（325.31±68.72）μm］均低于术后1周（均为P<0.05）。年龄≥50岁、术前低密度脂蛋白胆固醇≥4.12 mmol·L^-1、PRP激光能量≥283.39 mW患者术后黄斑区D_Mean、D_Max均低于年龄＜50岁、术前低密度脂蛋白胆固醇＜4.12 mmol·L^-1、PRP激光能量＜283.39 mW的患者,且术前甘油三酯≥2.17 mmol·L^-1患者术后黄斑区D_Max［（0.33±0.06）du］低于术前甘油三酯＜2.17 mmol·L^-1患者术后D_Max［（0.38±0.05）du］（P<0.05）。患者术后黄斑区D_Mean、D_Max与激光能量均呈负相关（均为P<0.05）。结论　DR患者术后的MPOD较术前下降,MPOD变化与PRP术中激光能量密切相关,而术前血脂紊乱、患者年龄可能是混杂因素。     

miR-140-5p靶向Nrf2对高糖诱导的视网膜色素上皮细胞氧化应激的调节作用

目的　探讨miR-140-5p靶向核因子-类胡萝卜素2相关因子2（nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2）对高糖诱导的视网膜色素上皮（retinal pigment epithelial,RPE）细胞氧化应激的调节作用及对应的分子生物学机制。方法　使用5 mmol·L^-1、10 mmol·L^-1、20 mmol·L^-1、30 mmol·L^-1、50 mmol·L^-1的葡萄糖分别处理ARPE-19细胞。利用CCK-8法及RT-qPCR检测各葡萄糖浓度下ARPE-19细胞的活力及miR-140-5p、Nrf2 mRNA表达情况。将miR-140-5p inhibitor、miR-140-5p-NC、miR-140-5p-mimic、si-Con或si-Nrf2转染入ARPE-19细胞,根据转染物和葡萄糖浓度不同分组,使用DCFH-DA荧光探针检测各组细胞内活性氧（reactive oxygen species,ROS）水平,使用超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活性试剂盒检测SOD活性;使用RT-qPCR检测不同处理的ARPE-19细胞Nrf2 mRNA表达情况,并通过荧光素酶报告基因实验对靶点进行验证。结果　与葡萄糖浓度为5 mmol·L^-1 时相比,30 mmol·L^-1、50 mmol·L^-1葡萄糖作用下ARPE-19细胞存活率显著降低（P<0.05、P<0.001）,而miR-140-5p相对表达量则明显升高（P<0.05、P<0.001）。与50 mmol·L^-1葡萄糖+miR-140-5p-NC处理组相比,50 mmol·L^-1葡萄糖+miR-140-5p inhibitor处理组细胞存活率显著增加,ROS含量显著降低,SOD活性显著增加（均为P<0.01）。与葡萄糖浓度为5 mmol·L^-1 时相比,30 mmol·L^-1、50 mmol·L^-1葡萄糖作用下ARPE-19细胞Nrf2 mRNA相对表达量均显著降低（P<0.01、P<0.001）。荧光素酶报告基因实验结果显示,与转染miR-140-5p-NC组相比,转染miR-140-5p-mimic组Nrf2相对荧光素酶活性显著降低,转染miR-140-5p-inhibitor组Nrf2相对荧光素酶活性显著增多,差异均有统计学意义（均为P<0.001）。在50 mmol·L^-1葡萄糖浓度下,与转染miR-140-5p-inhibitor+si-Con的ARPE-19细胞比较,转染miR-140-5p inhibitor+si-Nrf2后ARPE-19细胞存活率降低,细胞内ROS含量增高,SOD活性下降（均为P<0.01）。结论　miR-140-5p可能通过靶向Nrf2调节高糖诱导的RPE细胞氧化应激作用。     

氧化应激诱导视网膜色素上皮细胞中钙蛋白酶激活作用研究

目的　观察一定浓度H₂O₂氧化应激体外培养人视网膜色素上皮（retinal pigment epithelium,RPE） 细胞中钙蛋白酶（Calpain）含量及细胞活性改变。方法　常规培养商品化人RPE细胞系ARPE-19作为对照组,培养基内加入终浓度为10 μmol·L^-1 及 100 μmol·L^-1的H₂O₂作为实验组,培养4 h、8 h、16 h及32 h进行测定。MTT法测定不同浓度H₂O₂刺激下RPE细胞不同检测时间点细胞增殖率的变化;Fluo-3/AM、ester钙离子荧光探针标记细胞内钙离子,激光共聚焦显微镜及流式细胞仪检测RPE细胞内钙离子荧光值,间接观察钙离子浓度变化。10 μmol·L^-1 H₂O₂氧化刺激RPE细胞8 h,用Western-Blot法及实时荧光定量PCR法检测细胞内Calpain蛋白及RNA含量的变化。结果　与对照组相比,10 μmol·L^-1 H₂O₂刺激RPE细胞4 h、8 h、16 h及100 μmol·L^-1 H₂O₂刺激RPE细胞4 h及8 h后增殖率（r值） 升高差异均具有显著统计学意义（均为P<0.01）。100 μmol·L^-1 H₂O₂刺激16 h及32 h细胞增殖率均较对照组下降（均为P<0.01）。10 μmol·L^-1 H₂O₂刺激RPE细胞8 h后胞内钙离子荧光强度（563.27±77.10）U较对照组（170.77±20.11）U显著升高（P<0.01）、Calpain在mRNA和蛋白水平均较对照组显著升高（均为P<0.05）,而在同时使用Calpain抑制剂SNJ-1945（SNJ）的实验组这些变化可被有效抑制。结论　RPE细胞中钙超载激活Calpain参与H₂O₂氧化刺激RPE细胞的氧化应激改变。     

转化生长因子-β诱导视网膜色素上皮细胞增殖中NLRP3炎症小体的表达及意义

目的　探讨转化生长因子-β（transforming growth factor-β，TGF-β）刺激下Nod样受体蛋白3（nod-like receptor protein 3，NLRP3）炎症小体在视网膜色素上皮细胞（retinal pigment epithelium，RPE）增殖中的表达变化及意义。方法　利用TGF-β刺激RPE细胞增殖模拟增生性玻璃体视网膜病变模型，随机分为空白对照组（Sham组）和TGF-β诱导RPE细胞增殖组（TGF-β组），TGF-β组再根据浓度（0.5 μg·L^-1、2.5 μg·L^-1、10.0 μg·L^-1、12.5 μg·L^-1）分组。利用MTT 微量酶比色法检测RPE细胞增殖情况；Western blot观察NLRP3蛋白的表达变化；利用标准ELISA试剂盒检测白细胞介素（interleukin，IL)-1β和 IL-18表达情况。结果　与Sham组比较，0.5 μg·L^-1 TGF-β组RPE细胞增殖不明显，差异无统计学意义（P>0.05），但NLRP3、IL-1β和 IL-18表达明显提高（均为P<0.01）；2.5 μg·L^-1、10.0 μg·L^-1和12.5 μg·L^-1TGF-β组RPE细胞增殖明显，NLRP3、IL-1β和 IL-18表达均提高（均为P<0.05）；与0.5 μg·L^-1 TGF-β组相比，2.5 μg·L^-1、10.0 μg·L^-1和12.5 μg·L^-1TGF-β组RPE细胞增殖显著增加，NLRP3、IL-1β和 IL-18表达均下降，差异均有统计学意义（均为P<0.05）。结论　不同浓度TGF-β诱导RPE细胞增殖中NLRP3炎症小体表达变化不同，两者可能相互调控影响RPE细胞增殖，在增生性玻璃体视网膜疾病发生发展中具有重要的作用。     

木犀草素对碘酸钠诱导的视网膜色素上皮细胞及视网膜损伤的保护作用

目的　探讨木犀草素对碘酸钠诱导的视网膜色素上皮（retinal pigment epithelial，RPE）细胞及视网膜损伤的保护作用。方法　体外实验选择人RPE细胞（ARPE-19），先将细胞分为对照组、碘酸钠模型组（1 g·L^-1碘酸钠）、木犀草素浓度梯度治疗组（10 μmol·L^-1、25 μmol·L^-1、50 μmol·L^-1、100 μmol·L^-1），MTT法分别检测各组细胞活力。随后将细胞分为对照组，碘酸钠模型组（1 g·L^-1碘酸钠），木犀草素治疗组（50 μmol·L^-1木犀草素），Hoechst33342染色和流式细胞仪检测细胞凋亡情况，Western blotting检测高迁移率族蛋白B1(high mobility group box l，HMGB1)、核因子-κB(nuclear factor kappa B，NF-κB)、cleaved caspase-3相对表达量的变化。体内实验:将30只C57BL/6J雄性小鼠随机分为对照组、碘酸钠模型组和木犀草素治疗组，木犀草素治疗组给予木犀草素预处理1周后，碘酸钠模型组与木犀草素治疗组鼠尾静脉给予碘酸钠造模，木犀草素治疗组继续如前给药4周，光学相干断层扫描 (optical coherence tomography，OCT)测量视网膜厚度，HE染色观察形态学变化并统计玻璃膜疣数量。结果　体外实验:MTT显示，碘酸钠模型组吸光度(A)值低于对照组（P<0.05），木犀草素浓度梯度治疗组A值均高于碘酸钠模型组（P<0.05）。Hoechst33342染色显示，碘酸钠模型组细胞凋亡率高于对照组（P<0.05），木犀草素治疗组细胞凋亡率低于碘酸钠模型组（P<0.05）。流式细胞计数显示，碘酸钠模型组细胞凋亡率高于对照组（P<0.05），木犀草素治疗组细胞凋亡率低于碘酸钠模型组（P<0.05）。Western blotting检测显示，碘酸钠模型组HMGB1、NF-κB、cleaved caspase-3相对表达量均高于对照组（均为P<0.05），木犀草素治疗组HMGB1、NF-κB、cleaved caspase-3相对表达量均低于碘酸钠模型组（均为P<0.05）。体内实验:OCT显示，对照组各层结构排列均一整齐，与碘酸钠模型组相比，木犀草素治疗组RPE层高反射点减少，光感受器和外核层排列紊乱程度减轻，视网膜相对厚度增加（P<0.05）。HE染色显示，对照组各层细胞排列整齐，密度均匀；与碘酸钠模型组相比，木犀草素治疗组外核层褶皱程度减轻，RPE层连续性增加，棕黑色颗粒（玻璃膜疣）沉积数量减少（P<0.05）。结论　木犀草素通过降低HMGB1表达减轻NF-κB介导的炎症抑制碘酸钠诱导的RPE细胞凋亡并保护视网膜免受损伤。     

全反式视黄酸诱导人视网膜色素上皮细胞凋亡的实验研究

目的　探讨梯度浓度全反式视黄酸（all-trans retinoic acid,ATRA）诱导人视网膜色素上皮细胞凋亡的作用。方法　采用流式细胞术检测视网膜色素上皮细胞凋亡、活性氧（ROS）活性。采用实时定量聚合酶链反应和Western blot，从蛋白水平检测梯度浓度ATRA对ARPE-19细胞内质网应激（endoplasmic reticulum stress，ERS）标记蛋白表达的影响。观察抗氧化剂NAC及ERS抑制剂Salubrinal抑制ARPE-19细胞诱导ROS和ERS的作用。结果　CCK-8检测结果显示:ATRA处理ARPE-19细胞24 h和48 h后的半抑制浓度（IC₅₀）分别为13.88 μmol?L^-1和11.99 μmol?L^-1。流式细胞术检测结果显示，10.0 μmol?L^-1、15.0 μmol?L^-1、20.0 μmol?L^-1ATRA处理后细胞凋亡水平均较对照组显著上升，差异均有统计学意义（均为P<0.001）；2.5 μmol?L^-1、5.0 μmol?L^-1、10.0 μmol?L^-1、20.0 μmol?L^-1ATRA处理后细胞的ROS水平均较对照组显著增加，差异均有统计学意义（均为P<0.001）。Western blot检测结果显示，ERS标记蛋白C/EBP同源蛋白（C/EBPhomologous protein,CHOP）、结合免疫球蛋白（binding immunoglobulin protein，BIP）的蛋白表达水平与对照组差异均有统计学意义（均为P<0.05）；经ATRA处理的模型组较对照组的血管内皮生长因子A(VEGF-A)、CHOP蛋白表达水平均显著上升，NAC-ARTA处理组、Salubrinal-ARTA处理组及NAC-Salubrinal-ARTA联合处理组较模型组的VEGF-A、CHOP蛋白表达水平均显著下降，差异均有统计学意义（均为P<0.05）。结论　ATRA通过激活ROS和ERS信号通路诱导ARPE-19细胞凋亡。     

飞秒激光辅助的白内障手术对2型糖尿病患者术中房水细胞因子表达的影响

目的　检测合并2型糖尿病的白内障患者行飞秒辅助的白内障手术时术中房水中前列腺素E₂（prostaglandin E₂,PGE₂）、白细胞介素6（interleukin 6,IL-6）、白细胞介素1β（interleukin 1β,IL-1β）、肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor α,TNF-α）及血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）的浓度,并探讨其和术后糖尿病黄斑水肿（diabetes macular edema,DME）的关系。方法　前瞻性队列研究。将在武汉爱尔眼科医院接受飞秒激光辅助的白内障手术112例（112眼）患者纳入本研究,并按是否合并2型糖尿病分成两组:糖尿病组61例（61眼）,对照组51例（51眼）。在飞秒激光步骤完成之后立即收集2组房水样本。采用酶联免疫吸附方法检测房水样本中PGE₂、IL-6、IL-1β、TNF-α及VEGF的浓度。术前及术后均使用OCT检测并比较2组患者的黄斑中央区厚度。结果　糖尿病组房水样本中PGE₂浓度为（87.4±12.1）ng·L^-1、IL-6浓度为（39.7±6.6）ng·L^-1、IL-1β浓度为（59.2±7.2）ng·L^-1、TNF-α浓度（6.3±1.0）ng·L^-1、VEGF浓度为（274.1±40.4）ng·L^-1;对照组房水样本中PGE₂浓度为（67.6±9.4）ng·L^-1、IL-6浓度为（24.8±5.7）ng·L^-1、IL-1β浓度为（27.1±5.3）ng·L^-1、TNF-α浓度（3.1±0.5）ng·L^-1、VEGF浓度为（189.7±17.6）ng·L^-1。糖尿病组房水样本中的PGE₂、IL-6、IL-1β、TNF-α及VEGF的浓度均明显高于对照组（均为P<0.01）。房水样本中PGE₂、IL-6、IL-1β、TNF-α及VEGF的浓度释放与年龄、性别、激光固定时间及激光作用时间均无相关性（均为P>0.05）。糖尿病组术前黄斑中央区厚度为（142.5±7.6）μm,术后为（166.5±13.6）μm,术前术后无明显差异（P>0.05）。对照组术前黄斑中央区厚度为（139.4±10.2）μm,术后为（156.2±7.0）μm,术前术后差异无统计学意义（P>0.05）。结论　飞秒激光辅助的白内障手术中糖尿病患者术前术后黄斑中央区厚度均未发现明显差异,且所有患者均未出现术后黄斑水肿。     

磷酸果糖激酶-2/果糖-2，6-二磷酸酶3在增生型糖尿病性视网膜病变患者玻璃体和血清中的表达及其相关性分析

目的　定量检测增生型糖尿病性视网膜病变（proliferative diabetic retinopathy,PDR）患者玻璃体和血清中磷酸果糖激酶-2/果糖-2,6-二磷酸酶3（phospofructokinase-2/fructose-2,6-bisphosphatase 3,PFKFB3）和血管内皮细胞生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）的表达水平,探讨PFKFB3在PDR患者中可能的作用机制。方法　纳入确诊为PDR拟行单眼玻璃体切割术的患者42例（42眼）作为试验组,并根据术前是否行玻璃体内注射抗VEGF药物进一步将试验组分为非注药组和注药组,纳入同期诊断为全层黄斑裂孔（full thickness macular hole,FTMH）及黄斑前膜（preretinal membrane of the macula,PRMM）的20例（20眼）患者作为对照组。收集各组患者的玻璃体和血清标本,定量检测各组标本中的PFKFB3和VEGF表达水平,并进行统计学分析。结果　试验组患者玻璃体中PFKFB3水平为（463.17±381.28）ng·L^-1,明显高于对照组［（158.43±86.88）ng·L^-1］（t=4.919,P＜0.001）,试验组血清中PFKFB3水平为（153.45±83.78）ng·L^-1,明显高于对照组［（92.72±32.42）ng·L^-1］（t=4.098,P＜0.001）。非注药组患者玻璃体中PFKFB3水平为（797.29±387.44）ng·L^-1,明显高于注药组［（257.56±181.49）ng·L^-1］（t=5.230,P＜0.001）,而非注药组血清中PFKFB3水平与注药组差异无统计学意义（t=0.679,P=0.501）。非注药、注药组和对照组患者玻璃体与血清中的PFKFB3水平无相关性（非注药组:r=0.194,P=0.471;注药组:r=0.071,P=0.731;对照组:r=0.254,P=0.279）。试验组患者玻璃体中VEGF水平为（1713.50±1386.90）ng·L^-1,明显高于对照组［（205.52±92.93）ng·L^-1］（t=7.014,P＜0.001）;试验组血清中VEGF水平为（224.98±168.08）ng·L^-1,明显高于对照组［（86.80±36.51）ng·L^-1］（t=5.082,P＜0.001）。非注药组患者玻璃体中VEGF水平为（3399.72±510.06）ng·L^-1,明显高于注药组［（675.82±242.57）ng·L^-1］（t=20.014,P＜0.001）,非注药组血清中VEGF水平为（373.40±174.23）ng·L^-1,明显高于注药组［（133.65±73.10）ng·L^-1］（t=5.228,P＜0.001）。非注药、注药组和对照组患者玻璃体与血清中的VEGF水平均存在正相关关系（非注药组:r=0.952,P＜0.001;注药组:r=0.423,P=0.031;对照组:r=0.776,P＜0.001）。非注药组、注药组和对照组患者玻璃体中PFKFB3与VEGF水平均存在正相关关系（非注药组:r=0.865,P＜0.001;注药组:r=0.587,P=0.002;对照组:r=0.807,P＜0.001）,而在血清中仅注药组的PFKFB3与VEGF水平存在正相关关系（r=0.444,P=0.023）。结论　PFKFB3可能参与了PDR的发生发展过程;VEGF可能通过上调PFKFB3的表达而参与PDR的发生发展。     

高糖对人晶状体上皮细胞沉默信号调节蛋白6（SIRT6）表达的影响

目的　观察高浓度葡萄糖对人晶状体上皮细胞(SRA01/04)活性及沉默信号调节蛋白6（SIRT6）表达的影响。方法　将SRA01/04细胞在不同葡萄糖浓度（5.5 mmol·L^-1、15.5 mmol·L^-1、25.5 mmol·L^-1、35.5 mmol·L^-1、45.5 mmol·L^-1、55.5 mmol·L^-1、75.5 mmol·L^-1）培养基中培养48 h后,用光镜观察SRA01/04细胞形态;CCK-8试剂盒检测各组细胞的活性;Western blot检测各组细胞SIRT6蛋白的表达水平。然后将SRA01/04细胞用55.5 mmol·L^-1葡萄糖干预,培养不同时间（0 h、6 h、12 h、24 h、48 h、72 h）后,Western blot检测不同时间SRA01/04细胞SIRT6蛋白表达水平。免疫荧光技术检测对照组（5.5 mmol·L^-1葡萄糖）和高糖组（55.5 mmol·L^-1葡萄糖）细胞的SIRT6蛋白表达情况。结果　随着葡萄糖浓度增加,SRA01/04细胞的数量逐渐降低。CCK-8检测结果显示,与5.5 mmol·L^-1葡萄糖组相比,随着葡萄糖浓度增加,SRA01/04细胞的活性逐渐降低,差异均有统计学意义（均为P<0.05）。Western blot检测结果显示,SRA01/04细胞的SIRT6蛋白表达与葡萄糖呈浓度和时间依赖性,45.5 mmol·L^-1、55.5 mmol·L^-1、75.5 mmol·L^-1葡萄糖组与5.5 mmol·L^-1葡萄糖组比较,以及24 h组、48 h组和72 h组与0 h组比较,差异均有统计学意义（均为P<0.05）。细胞免疫荧光结果显示,SRA01/04细胞中的SIRT6蛋白主要在细胞核表达,高糖组SRA01/04细胞中SIRT6蛋白表达较对照组显著降低（P<0.05),且高糖组细胞核出现明显的核固缩和核碎裂现象。结论　高浓度葡萄糖可以降低SRA01/04细胞的增殖活性,降低SIRT6蛋白的表达水平。     

2型糖尿病患者糖尿病视网膜病变程度与肾功能指标的相关性

目的　观察2型糖尿病患者糖尿病视网膜病变（diabetic retinopathy,DR）程度与肾功能相关指标间的关系。方法　回顾性分析2016年1月至10月来本院眼科就诊的189例（189眼）2型糖尿病患者,根据DR诊断标准将其分为无视网膜病变组（NDR组101眼）和视网膜病变组（DR组88眼）。DR组根据病变程度分为轻度非增生型DR组（轻度NPDR组31眼）、中度NPDR组（26眼）、重度NPDR组（19眼）和增生型DR组（PDR组12眼）,检测患者肾功能相关指标,分析2型糖尿病患者DR病变程度与肾功能相关指标的关系。结果　DR组患者尿白蛋白/尿肌酐比值（urinary albumin/creatinine,UACR）、血清肌酐（serum creatinine,Scr）、胱抑素C（serum cystatin C,sCys-C）表达水平［（281.36±98.37）mg·g^-1、（78.31±16.08）μmol·L^-1、（1.17±0.32）mmol·L^-1］显著高于NDR组［（183.16±84.17）mg·g^-1、（62.47±15.21）μmol·L^-1、（0.83±0.21）mmol·L^-1］,差异均有统计学意义（均为P＜0.05）;而DR组患者肾小球滤过率（glomerular filtration rate,GFR）表达水平（80.81±23.21）mL·min^-1显著低于NDR组（89.83±20.13）mL·min^-1,差异有统计学意义（P＜0.05）。随着病情加重DR患者UACR、Scr和sCys-C表达水平逐渐增加,而GFR表达水平逐渐降低,四组间差异有统计学意义（P＜0.05）。PDR组患者各指标与轻度NPDR组和中度NPDR组差异均有统计学意义（均为P<0.05）。DR病变程度与UACR、Scr和sCys-C均呈正相关（均为P＜0.05）,与GFR呈负相关（P＜0.05）。结论　2型糖尿病患者DR的病变程度与肾功能指标密切相关,UACR、Scr和sCys-C升高及GFR降低是DR发生的危险因素。     

携带丙型肝炎病毒的白内障患者房水中炎症因子的表达分析

目的　对比分析携带丙型肝炎病毒［HCV(+)］的白内障患者和正常白内障患者房水中炎症因子表达的差异。方法　纳入17例HCV(+)的白内障患者及17例正常白内障患者,术前均抽取空腹静脉血行HCV抗体及肝功能、肾功能检查,在进行白内障手术时,从前房内釆集房水样本,采用人类细胞因子抗体阵列检测技术对房水中40种炎症因子含量进行检测并对比分析。结果　HCV(+)白内障患者与正常白内障患者间血液中肝功能和肾功能各项指标的差异均无统计学意义（均为P>0.05）。在检测的40种炎症因子中, HCV(+)白内障患者与正常白内障患者的肿瘤坏死因子-β含量分别为(1.18±2.47) ng·L^-1和(3.74±3.04）ng·L^-1,巨噬细胞集落刺激因子含量分别为(0.27±0.42) ng·L^-1和（0.05±0.10）ng·L^-1,重组人趋化因子CCL1含量分别为(2.62±1.50) ng·L^-1和（1.62±1.25）ng·L^-1,单核细胞趋化蛋白1含量分别为(753.36±159.51) ng·L^-1和（668.34±55.93）ng·L^-1,两组相比差异均有统计学意义（均为P<0.05）;房水中其余36种炎症因子含量两组间相比差异均无统计学意义（均为P>0.05）。结论　相对于正常白内障患者,房水中肿瘤坏死因子-β、巨噬细胞集落刺激因子、重组人趋化因子CCL1、单核细胞趋化蛋白1的表达差异可能与HCV(+)白内障患者术中疼痛更敏感有关。     

石蒜碱对葡萄膜黑色素瘤细胞的作用及其可能机制

目的 探讨石蒜碱对葡萄膜黑色素瘤细胞的作用,并分析其可能机制。方法 取B16F10葡萄膜黑色素瘤细胞株,按石蒜碱浓度为0μmol·L^-1(对照组)、1.560μmol·L^-1、3.125μmol·L^-1、6.250μmol·L^-1、12.500μmol·L^-1、25.000μmol·L^-1进行分组培养,24 h后,CCK-8法检测各组B16F10细胞的存活率;RT-PCR分析各组B16F10细胞VEGF-A mRNA的表达,ELISA检测各组B16F10细胞VEGF-A蛋白表达;流式细胞仪检测各组B16F10细胞的细胞周期及凋亡情况。结果 与对照组相比,1.560μmol·L^-1、3.125μmol·L^-1、6.250μmol·L^-1、12.500μmol·L^-1、25.000μmol·L^-1石蒜碱作用于B16F10细胞24 h后,能够呈浓度依赖性...     

α-硫辛酸对高糖条件下培养的人晶状体上皮细胞的保护作用

目的　探讨α-硫辛酸（alpha-lipoic acid,ALA）对高糖条件下培养的人晶状体上皮细胞系HLEC-B3的保护作用。方法　将传代培养的HLEC-B3细胞分为正常对照组、高糖组、ALA组。正常对照组不做任何处理,ALA组HLEC-B3经过不同浓度ALA（25 μmol·L^-1、50 μmol·L^-1、100 μmol·L^-1）预处理1 h后,与高糖组一同置于高糖条件下培养48 h。经上述处理后,即刻采用MTT检测各组晶状体上皮细胞的活性,流式细胞仪检测各组细胞内线粒体活性氧（reactive oxygen species,ROS）的变化,Western blot和RT-PCR检测各组细胞内锰超氧化物歧化酶（manganese superoxide dismutase,MnSOD）的表达。结果　高糖组HLEC-B3细胞活性为53.60%±4.10%,较正常对照组显著降低,差异有统计学意义（P<0.01）,25 μmol·L^-1、50 μmol·L^-1、100 μmol·L^-1 ALA组细胞活性分别为65.30%±3.70%、72.70%±4.90%、83.40%±3.60%,均较高糖组显著增高（均为P<0.05）;流式细胞仪检测结果显示,高糖组细胞内ROS水平较正常对照组明显增高（P<0.01）,各浓度ALA组ROS水平分别降低为14.70%±0.70%、8.70%±0.87%、5.20%±0.53%,差异均有统计学意义（均为P<0.01）。RT-PCR及Western blot检测结果显示,高糖培养后细胞内MnSOD mRNA和蛋白相对表达量均较正常对照组显著降低（均为P<0.01）;与高糖组相比,不同浓度ALA组细胞内MnSOD mRNA相对表达量分别增高为0.63±0.06、0.71±0.06、0.84±0.04;MnSOD蛋白相对表达量分别增高为0.25±0.03、0.31±0.02、0.45±0.04,差异均有统计学意义（均为P<0.05）。ALA对高糖诱导的HLEC-B3细胞损伤的保护作用呈一定的浓度依赖性。结论　ALA对高糖条件下培养的HLEC-B3具有一定的保护作用,且该保护作用可能是通过提高细胞内MnSOD的表达水平实现的。