基于BDNF/TrkB/CREB通路研究六味地黄丸对丙戊酸钠诱导的孤独症谱系障碍模型仔鼠的作用机制

目的 基于脑源性神经营养因子（brain-derived neurotrophic factor, BDNF）/酪氨酸激酶受体B(tyrosine kinase receptor B,TrkB)/cAMP反应元件结合蛋白（cAMP response element binding protein, CREB）通路,探讨六味地黄丸对丙戊酸钠（sodium valproate, VPA）诱导的孤独症谱系障碍（autism spectrum disorder, ASD）仔鼠的作用机制。方法 将13只SD孕鼠随机分为两组,其中10只孕鼠在第12.5天时腹腔注射VPA溶液（600 mg·kg-1）为VPA组,另外3只孕鼠注射等体积生理盐水为对照组。第21天对两组雄性仔鼠开展行为学检测,筛选出符合ASD疾病模型的仔鼠30只,随机分为模型组（等体积生理盐水）,维生素D组（1 480 IU·kg-1）,六味地黄丸高（3 g·kg-1）、中（1.5 g·kg-1）、低（0.75 g·kg-1）剂量组,每组6只。正常雄性仔鼠6只,设为空白组（等体积生理盐水）。各组仔鼠连续灌胃14 d,1次/d,给药后再次...     

Sprague-Dawley大鼠孤独症模型的建立及行为学特点分析

目的建立孕期丙戊酸钠注射致Sprague-Dawley子代大鼠孤独症的模型,探讨模型的神经行为学特点。方法随机选择孕12.5 d SD大鼠8只,随机分组,VPA组(4只)腹腔注射丙戌酸钠(VPA)(600 mg/kg),Con组(4只)腹腔注射等量的生理盐水。分别对两组的子代大鼠进行水迷宫、旷场试验和自发运动等神经行为学检测。结果 VPA组仔鼠病死率9%、畸形率4.6%,畸形仔鼠出现尾部弯折,Con组死亡1只、无畸形。与Con组相比较,VPA组仔鼠显示低体质量(P0.05)、睁眼时间延长(P0.05)、重复行为增多,修饰行为、群集性活动减少,攻击性行为增加。仔鼠生后45 d水迷宫VPA组结果显示:到达平台潜伏期及正确穿越平台象限次数均略少于Con组,但无明显差别。旷场试验中VPA组站立次数(13.50±10.65)次、跨格子数(48.420±4.037)个均显著低于Con组(26.125±9.701,91.571±4.080)个(P0.05)。自发运动中,VPA组仔鼠表现出典型的活动过多或者活动过少的极端规律,活动过多组11只自发运动次数为(168.33±15.38)次,活动过少组5只自发运动次数为(31.85±3.66)次,与Con组自发运动次数(59.110±3.007)次比较,三组比较差异存在统计学意义(P0.05)。结论丙戊酸钠孕中期注射可以导致子代Sprague-Dawley大鼠出现典型的孤独症症状,且出现典型的自发运动过多、过少等更为复杂的孤独症症状。     

孕鼠腹腔注射脂多糖致新生鼠肺损伤模型的构建

目的:探讨孕鼠腹腔注射脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)致新生鼠肺损伤模型的构建方法?方法: 孕18 d SD大鼠随机分为生理盐水对照组(control组)和LPS组,观察腹腔注射不同剂量LPS(2.5?2.0?1.5?1.0?0.5 mg/kg)与等量灭菌生理盐水后的孕鼠反应并统计孕鼠死亡率及流产率,依上述实验结果选定较低死亡率的LPS剂量?分别予孕鼠腹腔注射LPS(0.9?0.8?0.7?0.6?0.5 mg/kg)及等量灭菌生理盐水后记录各组新生鼠肺的病理评分?湿/干重比值(W/D)及肺组织中肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α mRNA?白细胞介素(interleukin,IL)-1β mRNA和TNF-α蛋白的表达量?进一步研究LPS 0.7 mg/kg组中孕19 d胎盘?胎肺及新生鼠生后第1?4?7 d肺组织中炎症因子(TNF-α?IL-1β)mRNA表达量变化与组织病理改变?结果:①LPS组中随着药物剂量递减,孕鼠死亡率及流产率逐渐降低,当LPS剂量小于1.0 mg/kg时孕鼠死亡率及流产率降低至25%以下;②LPS 0.5~1.0 mg/kg时,与对照组比较,LPS< 0.7 mg/kg时新生鼠肺病理评分?W/D?组织TNF-α及IL-1β mRNA表达差异无统计学意义(P均> 0.05),LPS≥0.7 mg/kg时上述指标均显著升高,且差异有统计学意义(P均< 0.05);③孕鼠腹腔注射LPS 0.7 mg/kg时,胎盘?胎肺炎症因子较对照组显著升高,且LPS组新生鼠生后第1?4?7天肺组织中TNF-α?IL-1β mRNA表达水平均显著高于对照组(P均< 0.05)?结论: SD大鼠孕18 d腹腔注射0.7 mg/kg LPS可导致新生鼠肺病理损害?肺水肿,炎症因子TNF-α?IL-1β增高,并延续到生后7 d,是制备宫内感染新生鼠肺损伤模型稳定?可靠的方法?     

当归补血汤注射液对妊娠小白鼠的影响

作者以当归补血汤注射液腹腔注妊娠小白鼠,以观察其对孕鼠及仔鼠的影响,并另设生理盐水组和MMC组进行对照。结果:①实验组孕鼠体重明显重于两对照组(P<0.01);②实验组仔鼠的发育和形态均正常(P>0.05);③实验组流产率最高(P<0.01):④实验组流产母鼠的子宫明显增生增大(P<0.05)。提示:本方剂对孕鼠具有补益增体重作用;对仔鼠发育及形态均无不良影响;但对孕鼠有流产作用。     

两种孤独症谱系障碍大鼠模型的构建及比较

目的：构建并比较丙戊酸钠（valproic acid,VPA）或脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导的孤独症大鼠模型,为孤独症研究中动物模型的选择提供科学依据。方法：采用孕中期腹腔注射VPA（G12.5）及LPS（G9.5）的方法分别构建VPA或LPS诱导的子代孤独症大鼠模型（n=28）;监测子代生长发育情况;行为学检测子代大鼠孤独症样行为;ELISA检测LPS模型组子代大鼠血浆炎性细胞因子的表达;Western blot检测VPA模型组子代大鼠前额叶皮质PTEN、p-AKT及p-mTOR蛋白表达水平;高效液相色谱法检测VPA模型组子代大鼠前额叶皮质中5-HT的浓度。结果：2种动物模型均表现出一定程度的发育迟缓,并出现孤独症相关的行为改变。其中,VPA模型组孕鼠生育率有所降低,但无统计学差异（ χ2=3.352,P=0.067）,仔鼠死亡率明显升高（χ2=5.561,P=0.018）,仔鼠尾部畸形率高达87.8%,明显高于对照组（ χ2=79.109,P=0.000）。LPS处理组子代大鼠血浆白细胞介素（interleukin,IL）-6、IL-1β、干扰素（interferon,IFN）-γ及肿瘤坏死因子（tumour necrosis factor,TNF）-α浓度均明显升高（t=2.108,P=0.049;t=2.312,P=0.033;t=2.809,P=0.016;t=2.110,P=0.049）。VPA处理组子代大鼠前额叶皮质PTEN蛋白表达水平下调（t=13.320,P=0.006）,p-AKT、p-mTOR蛋白表达水平增加（t=4.633,P=0.044;t=7.984,P=0.015）,5-HT浓度较未处理组明显降低（t=2.145,P=0.049）。结论：2种不同处理大鼠模型均可诱导孤独症样行为,但诱导机制可能存在差异,在科学研究中需要根据研究目的作出适当选择。     

皮质发育障碍伴癫痫发作动物模型的制作

 目的建立X线—匹罗卡品双重干预的皮质发育障碍（DCDs）鼠伴癫痫发作模型。方法将6只SD孕鼠随机分为实验组和正常对照组,实验组孕鼠给予X线照射,正常对照组不做任何处理。待仔鼠出生后60 d观察雄性仔鼠行为、脑电图、大脑形态及皮质和海马的病理改变。60 d的雄性仔鼠腹腔注射氯化锂—匹罗卡品诱发癫痫,比较潜伏期、注射药物总剂量、Ⅴ级癫痫发作率以及行为学和自发性癫痫发作情况。结果与正常对照组雄性仔鼠比较,实验组DCDs雄性仔鼠大脑体积变小,可见明显畸形;HE染色显示皮层变薄,神经元排列紊乱,海马CA1、CA2中断,可见团块状结构;未发现自发性癫痫发作,脑电图无异常放电,有活动增多等表现。注射氯化锂—匹罗卡品后实验组DCDs雄性仔鼠癫痫发作潜伏期缩短（P<0.05）,用药剂量减少（P<0.05）,Ⅴ级发作率增高（P<0.05）;癫痫持续发作后易激惹,具有攻击行为,并在静止期及慢性期出现自发性癫痫发作;HE显示皮层厚度减小。结论X线—匹罗卡品双重干预能成功建立弥漫性DCDs模型,并产生自发性癫痫发作。     

7,8-二羟基黄酮对小鼠新生期七氟烷暴露所致自闭症样行为的影响

目的：探讨7,8-二羟基黄酮（7,8-DHF）对发育早期反复七氟烷暴露所导致小鼠成年期自闭症样行为的影响。方法：将74只7日龄SPF级C57BL/6品系小鼠随机分为对照组（Con组）、七氟烷组（Sev组）、七氟烷+vehicle组（vehicle组）、七氟烷+7,8-DHF(7,8-DHF组)。Sev组小鼠7日龄起连续3 d每天暴露于3%七氟烷及30%的氧气中2 h;Con组小鼠仅暴露于30%的氧气中2 h;7,8-DHF组和vehicle组小鼠接受与Sev组相同七氟烷暴露,并在3周后分别腹腔注射5 mg/kg的7,8-DHF或同等体积的溶剂,每天一次,共持续21 d。7周龄时对小鼠进行社交等行为学测试及取材（背侧海马组织）。结果：与Con组相比,Sev组小鼠社交新颖性偏好缺陷,自我理毛时间增加,背侧海马组织脑源性神经营养因子（BDNF）蛋白及mRNA表达减少;与vehicle组相比,7,8-DHF组小鼠社交新颖性偏好缺陷和机械样重复性行为得到改善。结论：发育早期重复暴露于七氟烷可导致成年后自闭症样行为和背侧海马BDNF表达降低,7,8-DHF可有效改善新生期七氟烷暴露所致自闭症样行为...     

电针对先天性脑损伤仔鼠脑白质神经髓鞘修复的影响

目的观察和探讨电针对宫内感染致脑损伤仔鼠脑白质神经髓鞘修复的影响和机制。方法连续两天对孕第17天的孕鼠腹腔注射脂多糖（LPS）[450μg/（kg.d）],制备先天性脑损伤仔鼠模型;对照组孕鼠腹腔注射等量无菌生理盐水,随机选取对照组仔鼠22只;随机选取LPS组仔鼠40只,随机分为非干预组22只和电针组18只,电针组电针组于第7天开始进行干预,分别于第14天、第28天用电子显微镜观察各组仔鼠脑白质神经髓鞘,并应用体视学技术测量和计算出脑白质神经髓鞘厚度平均值。结果非干预组、电针组仔鼠脑白质神经髓鞘厚度平均值均明显低于对照组（P﹤0.01）,电针组仔鼠脑白质神经髓鞘厚度平均值高于非干预组（P﹤0.01）。结论电针干预可促进脑损伤仔鼠脑白质神经髓鞘修复。     

宫内感染中TNF-α的作用及对新生鼠脑髓鞘碱性蛋白表达变化的影响

目的:研究妊娠18 d孕鼠腹腔注射脂多糖(LPS)致胎鼠损伤中肿瘤坏死因子α(TNF-α)作用及新生鼠脑髓鞘碱性蛋白(MBP)表达的变化.方法:孕18 d大鼠随机分为盐水对照组、LPS组,观察孕鼠腹腔注射LPS(0.1,0.2,0.3,0.4 mg/kg)后胎盘病理变化,免疫组化技术检测胎盘TNF-α表达并统计胎鼠死亡率;免疫组化技术检测孕鼠注射LPS0.2 mg/kg后两组新生鼠生后1,3,7,14 d脑组织MBP表达的变化.结果:LPS组胎盘组织炎性病理改变及TNF-α表达明显增强.LPS组药物剂量越大,胎鼠死亡率越高.新生鼠生后7 d有MBP表达,14 dMBP表达增多.LPS组脑组织内MBP表达与同日龄对照组比较减弱,灰度值明显高于对照组(P＜0.01).结论:TNF-α可能是致胎鼠损伤的关键细胞因子;母体注射LPS可对新生鼠髓鞘发育产生重要影晌,导致新生鼠脑损伤.     

维生素A对孤独症模型大鼠行为学的影响

目的：探讨维生素A（vitamin A,VA）对丙戊酸钠（sodium valproate acid,VPA）诱导的孤独症模型大鼠行为学的影响。方法：对孕12.5 d Wistar大鼠进行单次腹腔注射,注射物分别为VPA（600 mg/kg）和等量生理盐水,将出生雄性子鼠分为3组：对照组（VPA组,n=11）、维生素A治疗组（VPA+VA组,n=12）以及生理盐水组（SAL组,n=11）。从生后第7天开始对VPA+VA组大鼠以50 000 U/2.5 kg剂量的VA（豆油溶解）灌胃,其余两组予以等量的豆油灌胃,持续7 d。3组大鼠在生后第21天和第49天时进行眶静脉采血,比较3组血清VA浓度变化;3组大鼠生后第35天开始按序进行开场实验、三室实验、埋珠实验和水迷宫实验,比较3组的行为表现。结果：与SAL组相比,VPA组重复刻板行为增加、社会交往能力下降、自发活动水平增强、空间学习记忆能力减弱（P＜0.05）;②经VA治疗后,VPA+VA组与VPA组相比,社交能力增强、自发活动水平减轻、空间学习记忆能力增强（P＜0.05）,重复刻板行为无明显改善（P＞0.05）。结论：维生素A能够改善VPA诱导的孤独症模型大鼠的行为学表现。     

白藜芦醇对孤独症大鼠病症行为的改善作用

目的 探讨白藜芦醇(resveratrol)改善孤独症大鼠病症行为的作用及可能机制.方法 于大鼠孕12.5 d丙戊酸钠(sodium valproate,VPA)腹腔一次性注射制备孤独症幼鼠模型.白藜芦醇处理组从母鼠怀孕后第6天开始按照3.6 mg/kg体质量在孕鼠皮下注射白藜芦醇,持续注射13 d.将幼鼠分为4组:对照组、白藜芦醇处理组、VPA处理组、VPA联合白藜芦醇处理组,每组3只.出生后35 d对幼鼠进行重复行为、神经行为与社会交往行为检测,通过Western blot检测脑组织中自噬标志蛋白LC3及SIRT1表达变化.结果 成功获得孤独症模型大鼠.与对照组相比,VPA组重复行为增强、社会交往能力下降、中央区活动时间与距离增加、站立次数减少(P＜0.05),符合孤独症行为特征;白藜芦醇组无明显行为学变化;但白藜芦醇联合处理可显著改善VPA处理引起的孤独症行为症状(P＜0.05),包括重复行为减弱,社会交往能力增强,中央区活动时间与距离减少、站立次数增加.Western blot检测结果显示,与对照组相比,VPA处理可降低大鼠脑组织中SIRT1表达,并抑制LC3-Ⅱ表达水平;而白藜芦醇联合处理则可增强大脑组织中SIRT1与LC3-Ⅱ的表达.结论 白藜芦醇能改善孤独症模型大鼠的病症行为,机制可能与增强细胞自噬及SIRT1表达相关.     

孕期限食对子代生长发育及卵母细胞印记基因H19甲基化的影响

目的 建立孕期限食的小鼠模型,探究宫内营养不良对子代生长发育及卵母细胞印记基因H19甲基化水平的影响。方法 正常交配见栓的雌鼠随机分为实验组和对照组,d_0.5~d_12.5监测孕鼠每日消耗食物量。实验组小鼠自d_12.5到分娩,给予日常消耗食量的一半食物量,对照组不做任何处理。两组孕鼠在分娩后给予正常食物量。观测子代小鼠的出生数量、出生体重、性别比,同时监测子代小鼠在不同生长时期的体重。子代小鼠性成熟后,取雌鼠的卵母细胞,检测印记基因H19的甲基化水平。结果 （1）孕期限食的母鼠状态差,体型偏小,活动量极少,个别孕鼠在分娩前死亡,早产发生率明显增加（P<0.05）。（2）限食孕鼠的子代小鼠出生体重明显低于正常孕鼠的子代（P<0.05）,低体重现象持续至3周龄。3周龄时,限食孕鼠的子代开始了追赶式生长,并在8周龄时,体重明显高于正常子代小鼠（P<0.05）。（3）重亚硫酸盐处理结合限制性内切酶反应结果显示,孕期限食的子代卵母细胞印记基因H19的甲基化水平与对照组一致,未见异常。结论 孕期限食明显增加早产率,并且造成子代低出生体重。在性成熟后,子代有明显的肥胖趋势,但子代卵母细胞印记基因H19甲基化水平正常。     

舒林酸对孤独症模型大鼠病症行为的改善作用

目的探讨舒林酸对孤独症模型大鼠病症行为的改善作用。方法在大鼠怀孕12.5 d 后采用一次性腹腔注射丙戊酸钠
（VPA）制备孤独症大鼠模型。针对舒林酸处理组,于VPA注射后每天给大鼠口服20 mg/kg舒林酸直至断奶。将出生幼鼠分为
4组：对照组,VPA处理组,舒林酸处理组及VPA联合舒林酸处理组。出生后35 d对幼鼠进行社会交往行为检测、敞箱焦虑样行
为检测,并分离提取脑组织蛋白利用Western blot分析Wnt信号通路关键蛋白β-catenin与Gsk3β表达情况。结果成功制备孤独
症大鼠模型。与对照组相比,VPA处理组社会交往能力下降、在中央区活动时间增加、站立次数减少,符合孤独症行为特征;舒
林酸单独处理组无明显行为学变化;但舒林酸联合处理能明显改善VPA处理导致的孤独症行为症状。Western blot结果显示,
与对照组相比,VPA处理可增强大鼠前额叶、海马及小脑组织中β-catenin表达水平并降低Gsk3β第9位丝氨酸磷酸化水平;而舒
林酸联合处理则能抑制上述脑组织中β-catenin表达水平并增加Gsk3β第9位丝氨酸磷酸化水平。结论舒林酸可改善孤独症模
型大鼠的病症行为,机制可能与抑制脑组织中Wnt信号通路相关。
     

树突棘及突触发育障碍诱发自闭症小鼠核心症状的机制

目的 探讨前额叶皮层（PFC）树突棘及突触发育障碍,诱发自闭症（ASD）小鼠核心症状的机制。方法 将C57小鼠按照完全随机设计,分为正常对照组（CON组）,ASD模型组（VPA组）,溶剂对照组（DMSO组）和Wortmannin抑制剂组（Wortmannin组）,10只/组。旷场实验,青年玩耍实验和三箱社交实验评价小鼠的ASD样行为;高尔基染色观察小鼠PFC树突棘密度的变化;Western blot检测小鼠PFC信号通路相关蛋白p-PI3K、PI3K、p-AKT、AKT、p-mTOR、mTOR以及突触相关蛋白PSD95、p-Syn、Syn的表达;免疫荧光染色观察PSD95、p-Syn的变化。结果 与CON组相比,VPA组小鼠出现了ASD样表型,PFC总的、成熟型树突棘密度减少（P<0.05）,未成熟型树突棘密度增加（P<0.01）,信号通路相关蛋白p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT和p-mTOR/mTOR表达上调（P<0.05）,突触相关蛋白PSD95和p-Syn/Syn表达下调（P<0.01或P<0.001）。Wortmannin能改善小鼠ASD样表型,改善树突棘发育,下调PI3K/Akt/mTOR信号通路及上调突触相关蛋白的表达。结论 PI3K/Akt/mTOR信号通路的过度激活和突触相关蛋白PSD95、p-Syn表达降低可能导致VPA诱导的ASD小鼠PFC树突棘损伤和突触发育障碍,最终导致ASD样表型。     

Long-term impact of intrauterine MCMV infection on development of offspring nervous system

This study examined the impacts of intrauterine murine cytomegalovirus(MCMV) infection on the long-term learning and memory of offspring.Sexually matured male and female BALB/C mice without MCMV infection were identified by ELISA and then mated.Seventy pregnant mice were randomly divided into the virus group(n=40) and the control group(n=30),in which the pregnant mice were subjected to placenta inoculation of MCMV suspension(1 μL,1×106 PFU) or the same amount of cell culture medium,respectively,at gestational age of 12.5 days.Some pregnant mice [virus group(n=20),control group(n=15)] were sacrificed by cervical dislocation at gestational age of 18.5 days,and the head circumference and brain weight of the mouse fetuses were measured,and the MCMV infection in their brain tissues was detected by PCR.The other pregnant mice [virus group(n=20),control group(n=15)] delivered naturally,and the learning and memory capability of the offspring at 70-day-old was analyzed by Morris water maze test.The results showed that 28.57% mouse fetuses in the virus group developed viral infection in the brain.Their head circumference and brain weight were significantly reduced as compared with those in the control group(P<0.01).The Morris water maze test revealed that the mouse offspring in the control group found the platform with straight-line trajectories after training.In contrast,the counterparts in the virus group intended to enter the central area,but looked for the platform with a circular trajectory.And the infected mice exhibited prolonged swimming distance and swimming latency(P<0.01).It was concluded that:(1) placenta inoculation of MCMV can cause fetal brain infection and intrauterine development retardation;(2) the offspring of MCMV placenta inoculation mice showed a long-term decline in learning and memory capability.     

丙戊酸钠对APP/PS1转基因小鼠自主活动及脑形态结构的影响

目的研究丙戊酸钠(valproic acid,VPA)对APP/PS1双转基因阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)模型小鼠自主活动及脑组织形态结构的影响,探讨VPA对AD的保护作用及可能机制。方法将3月龄APP/PS1双转基因小鼠及同窝野生型小鼠分为VPA处理组和生理盐水对照组,运用VPA[30 mg/(kg.d)]和等量生理盐水腹腔注射4周。旷场实验观察各组小鼠的自主活动能力;尼氏染色、透射电镜观察各组小鼠脑组织的病理改变。结果行为学结果显示:与野生型小鼠相比,AD模型小鼠自主活动明显减少(P<0.05);野生型小鼠VPA处理组与对照组自主活动无明显差异(P>0.05);而AD模型小鼠VPA处理组比对照组的自主活动明显减少(P<0.05)。尼氏染色显示:AD模型小鼠脑内神经元密度显著低于野生型小鼠。AD模型小鼠中,对照组脑内神经细胞明显肿胀,尼氏小体明显减少而致细胞质淡染,神经细胞密度降低(85.2±13.3);而VPA处理组脑内神经元肿胀程度明显减轻,神经元数量显著回升(116.9±16.2,P<0.05),但VPA不影响野生型小鼠脑内的神经元数量及形态(VPA处理组:142.2±24.4 vs生理盐水对照组:136.7±23.1,P>0.05)。电镜结果显示AD模型小鼠对照组脑内神经元细胞核、线粒体及神经毡肿胀明显,突触结构稀松;而AD模型小鼠VPA处理组脑内神经元细胞核、线粒体及神经毡的水肿明显减轻,突触结构清晰。结论 VPA可显著减少APP/PS1双转基因AD模型小鼠的自主行为,显著减轻躁狂症状;VPA可改善APP/PS1双转基因小鼠脑内神经细胞的形态结构,减少肿胀的神经元并抑制神经元数量的减少。     

孤独症幼儿的情绪行为问题研究

背景　情绪行为问题是孤独症最常见的伴发精神症状。目前我国关于孤独症幼儿伴发的情绪行为问题的研究较少。目的　利用Achenbach儿童行为量表（CBCL）（2~3岁版）评估孤独症幼儿的情绪行为问题。方法　选择在2016年2月—2017年2月于北京大学第六医院课题组专家门诊连续就诊且符合美国精神障碍诊断与统计手册第4版（DSM-Ⅳ）孤独症诊断标准的孤独症幼儿116例为孤独症组;2016年6月—2017年2月,按照1∶1.5的比例,选择性别、年龄与孤独症组相匹配的北京市幼儿园健康幼儿174例为正常对照组。由两组幼儿的父母或主要抚养人填写CBCL（2~3岁版）。对比两组CBCL（2~3岁版）评分及CBCL（2~3岁版）各因子评定阳性率。结果　孤独症组CBCL（2~3岁版）总分和内化分量表、外化分量表评分及各因子（社会退缩、抑郁、躯体主诉、睡眠问题、攻击行为、破坏行为）评分高于正常对照组（P<0.05）。孤独症组社会退缩、抑郁、躯体主诉、攻击行为、破坏行为因子评定阳性率高于正常对照组（P<0.05）;孤独症组睡眠问题因子评定阳性率与正常对照组比较,差异无统计学意义（P>0.05）。结论　与正常幼儿相比,孤独症幼儿存在较多的情绪行为问题,主要为社会退缩、抑郁、攻击行为等。应对孤独症幼儿的情绪行为问题予以关注。     

丙戊酸钠对APP/PS1双重转基因小鼠脑组织Tau蛋白的影响

目的探讨丙戊酸钠(valproic acid,VPA)对APP/PS1双转基因阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)模型小鼠丝氨酸262位点Tau蛋白过度磷酸化(p-Tau-ser262)及神经细胞内神经原纤维缠结(neurofibrillary tangles,NFTs)的影响。方法 3月龄APP/PS1双重转基因AD模型小鼠20只,均分为VPA治疗组和生理盐水对照组(每组10只)。腹腔注射VPA和等量生理盐水4周后取材,应用免疫组化方法检测各组AD模型鼠脑内p-Tau-ser262阳性细胞表达,HE染色显示NFTs的数量及分布变化;Western blot分析各组AD模型鼠脑内糖原合成酶激酶-3β(glycogen synthase kinase3β,GSK-3β)ser9位点磷酸化水平。结果免疫组化结果显示,VPA治疗组AD模型小鼠p-Tau-ser262阳性细胞数皮质(5.01±0.71)、海马(5.29±1.32)、嗅球(10.06±3.36)、小脑(13.54±1.51),与生理盐水对照组[分别为(8.60±1.82)、(9.00±1.87)、(56.00±6.67)、(22.02±1.98)]相比明显减少(P<0.05,P<0.01);HE染色结果显示:VPA治疗组小鼠海马(1.33±0.71)和大脑皮质区内(1.90±0.88)NFTs数量与生理盐水对照组[分别为(5.89±0.92)、(6.08±1.61)]相比明显减少(P<0.01);Western blot检测结果显示:VPA治疗组AD模型鼠脑内GSK-3β蛋白ser9磷酸化水平(126.88±5.61)明显高于生理盐水对照组(73.34±3.61)(P<0.01)。结论 VPA可明显减少AD模型小鼠脑内Tau蛋白的过度磷酸化及NFTs的形成;VPA发挥保护作用的机制可能与下调GSK-3β活性有关。     

逍遥散对妊娠期抑郁小鼠子代抑郁的效应及其作用机制研究

目的研究逍遥散对妊娠期抑郁小鼠子代抑郁的效应及作用机制。方法采用慢性应激方法刺激妊娠期孕鼠,建立妊娠期抑郁小鼠子代抑郁模型。实验设空白对照组、应激模型组、氟西汀阳性药组、逍遥散低剂量组和逍遥散高剂量组,采用糖水偏好实验、悬尾实验、强迫游泳实验和旷场实验检测妊娠期抑郁小鼠子代抑郁模型,ELISA试剂盒检测子代小鼠血清和海马组织中5-羟色胺水平,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测子代小鼠海马组织中脑源性神经营养因子(BDNF)、酪氨酸激酶受体B(Trk B)蛋白表达水平及cAMP反应元件结合蛋白(CREB)的磷酸化水平。结果与空白对照组比较,应激模型组子代小鼠糖水偏好度显著降低(P<0.01),悬尾不动时间和强迫游泳不动时间显著增加(P<0.01),旷场试验小鼠探索能力显著降低显著降低(P<0.01),血清和海马组织中5-羟色胺的水平显著降低(P<0.05),BDNF、Trk B蛋白表达和CREB磷酸化水平显著降低(P<0.05);与应激模型组比较,氟西汀和逍遥散高剂量组可明显增加子代小鼠糖水偏好度(P<0.05),减少悬尾不动时间和强迫游泳不动时间(P<0.05),改善旷场试验小鼠探索能力(P<0.05),增加子代小鼠血清和海马组织中5-羟色胺水平(P<0.05),上调BDNF、Trk B蛋白表达和CREB磷酸化水平(P<0.05)。结论逍遥散可改善妊娠期抑郁小鼠子代抑郁模型,其机制可能是通过BDNF/Trk B/CREB信号通路实现的。