BHMT对同型半胱氨酸诱导的人晶状体上皮细胞氧化损伤的保护作用

目的：观察甜菜碱高半胱氨酸甲基转移酶(BHMT)在同型半胱氨酸(Hcy)环境下对人晶状体上皮细胞(HLEC)的保护作用。

方法：构建BHMT基因过表达慢病毒载体,将体外培养的HLEC随机分为3组：正常组：正常培养的HLEC; 对照组：感染了空载体的HLEC-B3,BHMT过表达组(OE)：感染了过表达BHMT基因载体的HLEC-B3,均培养于10% FBS(胎牛血清)培养基+5mmol/L Hcy培养液中。应用EdU(5-乙炔基-2''脱氧尿嘧啶核苷)试剂盒检测细胞的增殖能力,流式细胞仪检测活性氧(ROS)含量,可见分光光度计测算谷胱甘肽(GSH)活性,Western blotting检测内质网应激相关蛋白(GPR78,Nrf2)及凋亡相关酶Caspase-12的表达。

结果：BHMT过表达组较对照组细胞增殖能力增长约30.0%(P<0.05)。ROS检测显示,正常组、对照组、过表达组荧光强度分别为(89.2043±0.3511)%、(91.4502±0.0606)%、(49.5625±0.4502)%,过表达组与正常组有差异(P<0.05); GSH活性检测显示：相比于正常组与对照组,BHMT高表达组GSH活性明显上升(P<0.05); Western blotting结果显示：GRP78的相对表达量在正常组及对照组中明显高于过表达组,Nrf2的相对表达量在正常组与对照组中明显低于过表达组。凋亡相关酶Caspase-12的相对表达量在过表达组中明显低于对照组。

结论：BHMT可以抑制Hcy对HLEC的氧化损伤作用,降低ROS水平,升高GSH活性,减轻内质网应激反应,抑制细胞凋亡。BHMT对Hcy诱导的HLEC氧化损伤有重要的保护作用。     

4-苯基丁酸对高糖诱导的人晶状体上皮细胞发生上皮间质转化的影响

目的　探讨4-苯基丁酸（4-PBA）对高糖诱导的人晶状体上皮细胞发生上皮间质转化（EMT）的影响。方法　体外培养人晶状体上皮细胞系HLE-B3细胞,将培养的HLE-B3细胞分为正常对照组、高糖组和4-PBA预处理+高糖组。利用流式细胞术检测各组细胞内活性氧（ROS）的含量;利用Western blot检测各组细胞中内质网应激（ERS）相关通路分子的蛋白表达;采用免疫荧光染色观察各组细胞中上皮因子E-cadherin和间质因子α-SMA的表达;分别采用实时荧光定量PCR和Western blot检测各组细胞中EMT标志分子E-cadherin、α-SMA、Snail的 mRNA及蛋白表达。结果　高糖组细胞呈长梭形改变,丢失上皮细胞特性,类似纤维细胞的表型;4-PBA预处理+高糖组细胞形态不规则,相对于高糖组细胞,长梭形细胞数量较少。流式细胞术检测结果显示,高糖组细胞内ROS含量高于正常对照组,4-PBA预处理后ROS含量降低,差异均有统计学意义（均为P<0.01）。Western blot检测结果显示,高糖组细胞中ERS相关通路分子GRP78、CHOP、p-eIF2α的蛋白相对表达水平均高于正常对照组（均为P<0.05）;4-PBA预处理+高糖组细胞中GRP78、CHOP、p-eIF2α的蛋白相对表达水平均明显低于高糖组（均为P<0.05）。实时荧光定量PCR和Western blot检测结果显示,与正常对照组相比,高糖组细胞中E-cadherin mRNA及蛋白表达下调,α-SMA和Snail的mRNA及蛋白表达均上调（均为P<0.05）;与高糖组相比,4-PBA预处理+高糖组细胞中E-cadherin mRNA及蛋白的相对表达量均明显上调,α-SMA和Snail的mRNA及蛋白的相对表达量则与之相反（均为 P<0.05）。免疫荧光染色结果显示,高糖组细胞中E-cadherin荧光表达明显弱于正常对照组,4-PBA 预处理后荧光增强;α-SMA荧光表达则与之相反。结论　4-PBA通过抑制ERS相关通路分子的表达、减少ROS产生来抑制高糖诱导的晶状体上皮细胞发生EMT,从而对晶状体上皮细胞起到一定的保护作用。     

葛花总黄酮对糖尿病视网膜病变大鼠视网膜Müller细胞的保护作用

目的　探讨葛花总黄酮（total flavonoids of pueraria，TFP）对糖尿病大鼠视网膜Müller细胞的保护作用。方法　取SPF级雄性SD大鼠60只，采用单次腹腔注射链脲佐菌素（55 mg·kg^-1）制作大鼠糖尿病模型。将造模成功的糖尿病大鼠随机分成糖尿病组、TFP组及TFP+Brusatol组（Brusatol为核因子NF-E2相关因子信号通路抑制剂），每组15只。另取15只正常大鼠作为对照组。造模12周后，检测各组大鼠血糖浓度、体质量、视网膜谷氨酸含量、丙二醛（MDA）及超氧化物歧化酶（SOD）含量；采用免疫组织化学法检测视网膜神经胶质纤维酸性蛋白（GFAP）的表达，免疫荧光染色检测大鼠视网膜Nrf2表达，Western blot检测大鼠视网膜Nrf2、血红素氧合酶-1（HO-1）及谷氨酰胺合成酶（GS）蛋白表达。结果　造模12周后， 糖尿病组大鼠血糖浓度高于对照组，且均大于16.7 mmol·L^-1；TFP组及TFP+Brusatol组血糖浓度均低于糖尿病组（均为P<0.05）；糖尿病组、TFP组及TFP+Brusatol组大鼠体质量均低于对照组（均为P<0.05）。糖尿病组和TFP+Brusatol组大鼠视网膜谷氨酸含量高于对照组（均为P<0.05）；TFP组谷氨酸含量低于糖尿病组（P<0.05）。糖尿病组和TFP+Brusatol组MDA含量均高于对照组，SOD活性均低于对照组（均为P<0.05）。TFP组MDA含量低于糖尿病组，SOD活性高于糖尿病组（P<0.05）。糖尿病组和TFP+Brusatol组大鼠视网膜GFAP蛋白表达阳性率均高于对照组（均为P<0.05）；TFP组GFAP蛋白表达阳性率低于糖尿病组（P<0.05）。将对照组Nrf2蛋白免疫荧光强度设定为100.00%，糖尿病组Nrf2蛋白免疫荧光强度高于对照组（P<0.05）。TFP组Nrf2蛋白免疫荧光强度高于糖尿病组（P<0.05），而TFP+Brusatol组与对照组相比差异无统计学意义（P>0.05）。糖尿病组大鼠视网膜Nrf2蛋白表达高于对照组，糖尿病组和TFP+Brusatol组大鼠视网膜HO-1和GS蛋白表达均低于对照组（均为P<0.05）。TFP组大鼠视网膜Nrf2、HO-1及GS蛋白表达均高于糖尿病组（均为P<0.05），而TFP+Brusatol组与对照组大鼠视网膜Nrf2蛋白表达差异无统计学意义（P>0.05）。结论　TFP可通过降低血糖浓度，增强大鼠视网膜的抗氧化能力，进而保护糖尿病状态下受损的Müller细胞，其机制与激活Nrf2/HO-1信号通路有关。     

miR-34a-5p通过调节Nrf2-Keap1信号通路介导年龄相关性白内障氧化应激的实验研究

目的　探讨miR-34a-5p通过调节Nrf2-Keap1信号通路介导年龄相关性白内障的氧化应激。方法　检测年龄相关性白内障患者和正常透明晶状体前囊组织及人晶状体上皮细胞氧化应激模型中miR-34a-5p和预测靶基因Nrf2表达及人晶状体上皮细胞内活性氧（reactive oxygen species，ROS）活性。将miR-34a-5p模拟物、模拟物对照、miR-34a-5p抑制剂和抑制剂对照分别转染人晶状体上皮细胞，然后用400 μmol·L^-1 H₂O₂作用8 h后检测miR-34a-5p、Nrf2 mRNA和Nrf2蛋白表达，并检测人晶状体上皮细胞增殖活性。结果　正常晶状体前囊组织中miR-34a-5p的相对表达量为1.03±0.29，Nrf2 mRNA的相对表达量为1.31±0.39；年龄相关性白内障组织中miR-34a-5p的相对表达量为2.69±0.99，Nrf2 mRNA的相对表达量为0.64±0.25。与正常组织相比，年龄相关性白内障晶状体组织中miR-34a-5p表达显著升高，Nrf2表达显著降低。Nrf2蛋白在年龄相关性白内障晶状体组织中表达也显著降低（均为P<0.001）。在人晶状体上皮细胞氧化应激模型中，miR-34a-5p表达显著升高，靶基因Nrf2表达显著降低，内源性ROS水平显著升高（均为P<0.001）。miR-34a-5p模拟物转染人晶状体上皮细胞后，miR-34a-5p表达显著升高，Nrf2表达显著降低，内源性ROS水平显著升高，细胞增殖活性显著降低（均为P<0.001），然而，miR-34a-5p抑制剂转染人晶状体上皮细胞后，miR-34a-5p表达显著降低，Nrf2表达显著升高，内源性ROS水平显著降低，细胞增殖活性显著升高（均为P<0.001）。双荧光素酶报告分析证实，Nrf2是miR-34a-5p的直接靶点。结论　MiR-34a-5p通过调节Nrf2-Keap1信号通路增加晶状体上皮细胞氧化应激，抑制晶状体上皮细胞的增殖，从而参与年龄相关性白内障的发生发展过程。     

阿柏西普对碱烧伤大鼠角膜新生血管的抑制作用

目的　探讨阿柏西普对大鼠角膜碱烧伤后新生血管的抑制作用。方法　制备SD大鼠角膜碱烧伤动物模型,随机分成4组,每组各9只,A组、B组与C组分别给予20 g·L^-1、25 g·L^-1、30 g·L^-1的阿柏西普滴眼液,D组为生理盐水组（给予生理盐水）,每组每天2次滴眼治疗,共14 d。分别于碱烧伤后第3天、7天、14天,观察角膜新生血管（corneal neovascularization,CNV)情况并计算CNV面积。碱烧伤后第14天,处死全部小鼠,进行组织学和免疫组织化学检测各组CD34、VEGF蛋白表达情况。结果　碱烧伤后第 3天、7天和14天,A组、B组与C组的CNV面积均小于D组,差异均有统计学意义（均为P<0.05）;B组与C组在各时间点上CNV面积差异均无统计学意义（均为P>0.05）;但B组和C组与A组相比,差异均有统计学意义（均为P<0.05）。HE 染色及免疫组织化学染色结果显示:角膜碱烧伤后第14天,各组角膜CD34和VEGF蛋白表达增强,与A组、B组、C组比较,D组CNV旺盛致密,CD34和VEGF蛋白表达较强。A组CNV较B组和C组多,CD34和VEGF蛋白表达增强;B组和C组棕黄色颗粒分布无明显差异。碱烧伤后第14天,酶联免疫吸附试验测定结果显示:A组、B组和C组房水中TNF-α蛋白表达水平均低于D组,差异均有统计学意义（均为P<0.05）,B组、C组与A组比较,房水中TNF-α蛋白表达水平差异均有统计学意义（均为P<0.05）,但是B组和C组间差异无统计学意义（P>0.05）。结论　阿柏西普对碱烧伤后大鼠CNV形成具有抑制作用,且25 g·L^-1阿柏西普的治疗效果最佳。     

未折叠蛋白应答在晶状体上皮细胞凋亡中作用的研究

目的 探讨内质网应激中未折叠蛋白应答在晶状体上皮细胞凋亡中的作用及其与白内障发病机制的关系.方法 将hLECs分为对照组和实验组A、B、C、D组,分别用0、1、2、5、10mmol/L的同型半胱氨酸(Hey)作用细胞24h,应用MTT法检测不同浓度药物对细胞增殖抑制率:应用Hoechst33258荧光染色检测细胞凋亡率;应刚活性氧荧光探针DCFH-DA检测刺激后细胞中活性氧产物(R0s);应川GSH检测试剂盒检测刺激后细胞中还原型谷胱甘肽(GSH)的含量;应用Westernblot技术检测刺激后细胞中的GRP78,caspase-12的表达.结果 不同浓度的Hey刺激晶体上皮细胞后,细胞活力呈浓度依赖性下降,其中5mmol/L,10mmol/LHey可使细胞活性下降48.3%.57.7%.与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.01),并且能诱导细胞的明显凋亡;细胞中ROS水平呈浓度依赖性升高,GSH减少,C、D组与对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.05);Western bolt技术检测显示刺激后细胞中GRP78,emspase-12表达升高,C、D组与对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 高浓度的内质网刺激因子可刺激晶体上皮细胞产生内质网应激,并通过未折叠蛋白反应导致晶体-亡皮细胞凋亡,产生白内障.     

间充质干细胞外泌体治疗小鼠干眼的疗效评价

目的　探讨人脐带血间充质干细胞外泌体（mesenchymal stem cells derived exosomes,MSC-Exo）治疗小鼠干眼的效果。方法　选取32只（64眼）雄性6～8周龄BALB/c小鼠，随机分为A、B、C、D组，每组各8只。除D组不予处理外，其余24只均给予2 g·L^-1苯扎氯铵滴双眼，连续14 d，各建立中重度干眼模型。造模结束后，A组用25 g·L^-1MSC-Exo滴眼液点眼，B组用磷酸盐缓冲液点眼，C组为阴性对照组，造模后不予处理。分别在治疗前和治疗后第1、4、7天进行小鼠泪膜功能相关检查，包括泪液分泌实验（SchirmerⅠtest，S Ⅰ T）、泪膜破裂时间（tear break-up time,BUT）、荧光素染色评分（corneal fluorescein staining,FL）测定。于相应时间点收集其角膜组织，行苏木精-伊红染色及透射电子显微镜下观察角膜上皮组织结构变化。结果　治疗前及治疗后第1天，A、B、C三组S Ⅰ T、BUT及FL（FL仅A、B组比较）差异均无统计学意义（均为P＞0.05），各时间点S Ⅰ T、BUT A、B、C组与D组差异均有统计学意义（均为P<0.05）。治疗后第4天、第7天，A组S Ⅰ T较B组、C组明显增加，A组BUT较B组、C组明显延长，差异均有统计学意义（均为P<0.05）。治疗后第4天、第7天，A组S Ⅰ T较B组，C组明显增加，A组BUT较B组、C组明显延长，差异均有统计学意义（均为P<0.05）。治疗后第4天和第7天，A组S Ⅰ T、BUT均较治疗前明显增加（均为P<0.05），FL评分较治疗前降低（P<0.05）；而B组S Ⅰ T、BUT与治疗前差异均无统计学意义（均为P＞0.05），FL差异无统计学意义（P>0.05）；C组造模后未行治疗；D组未行任何处理，两组各项检测指标均未见明显变化（均为P>0.05）。电镜观察可见:A组角膜上皮微绒毛呈指状突起，微绒毛数量多，排列整齐；B组角膜上皮微绒毛减少、变短、排列紊乱；C组角膜上皮微绒毛可见明显减少、脱落、缺失，排列紊乱；D组角膜上皮微绒毛形态呈指状突起，排列整齐，数量多；C组与A组和D组有很大差异。结论　MSC-Exo滴眼液对小鼠干眼有明显的治疗作用，有望为临床干眼的治疗带来新方法。     

丹皮酚磺酸钠对免疫性结膜炎的治疗作用及机制

目的：探讨丹皮酚磺酸钠对小鼠实验性免疫性结膜炎的治疗作用及机制。方法：实验研究。采用随机数字表法将36只（72眼）Balb/c小鼠平均分为正常对照组（A组）、模型组（B组）、1%丹皮酚磺酸钠组（C组）、2%丹皮酚磺酸钠组（D组）、色甘酸钠滴眼液对照组（E组）、奥洛他定滴眼液对照组（F组），每组6只。以鸡卵白蛋白（OVA）腹腔注射免疫B、C、D、E、F组建立免疫性结膜炎动物模型；7 d后，A组和B组予磷酸缓冲盐溶液（PBS）滴眼，C、D组分别予1%、2%丹皮酚磺酸钠滴眼治疗，E、F组分别予色甘酸钠、奥洛他定滴眼液治疗。用药5 d，最后1次用药后进行眼部临床症状评分。以甲苯胺蓝染色观察检测结膜组织切片肥大细胞脱颗粒（MCD）情况，酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测各组小鼠血清的卵蛋白特异性免疫球蛋白E（OVA-s IgE）、干扰素γ（IFN-γ）及白介素4（IL-4）水平。所得数据组间比较采用单因素方差分析。结果：各组间症状评分差异具有统计学意义（F=38.72，P<0.001），其中B组症状评分明显高于A组（P<0.001），C、D、E、F组的症状评分均低于B组（均P<0.05）。各组间肥大细胞计数差异具有统计学意义（F=15.28，P<0.001），B组及各用药组肥大细胞脱颗粒计数均明显高于A组（均P<0.05）。C、D、E、F组小鼠血清中OVA-s IgE水平明显低于B组（P<0.05）；A、C、D、E、F组小鼠血清中IFN-γ水平均明显高于B组（P<0.05），IL-4水平均明显低于B组（P<0.05）。结论：丹皮酚磺酸钠对实验性免疫性结膜炎具有治疗作用，能够稳定实验性免疫性结膜炎小鼠眼结膜组织中肥大细胞，抑制活化脱颗粒，下调小鼠血清中OVA-sIgE、IL-4水平及上调IFN-γ水平。     

丹参酮IIA对过氧化氢诱导的人晶状体上皮细胞凋亡和氧化应激的影响

目的　探讨丹参酮IIA（Tan IIA）对过氧化氢（H₂O₂）诱导的人晶状体上皮细胞凋亡和氧化应激的调控作用及可能的机制。方法　以人晶状体上皮细胞SRA01/04为研究对象,分为空白组、H₂O₂组（H₂O₂处理细胞建立氧化损伤模型）、Tan IIA组（Tan IIA溶液预处理24 h后,H₂O₂作用24 h）、Tan IIA+siNC组（转染阴性对照,其他处理方式同Tan IIA组）和Tan IIA+siNrf2组［转染核因子E2相关因子2（Nrf2） siRNA(siNrf2),其他处理方式同Tan IIA组］。CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术分别检测细胞凋亡率和活性氧簇（ROS）水平,酶联免疫吸附试验测定细胞中过氧化氢酶（CAT）活性、超氧化物歧化酶（SOD）含量、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）含量,Western blot检测细胞总蛋白中Nrf2、血红素氧合酶-1（HO-1）表达及核蛋白中Nrf2表达情况。结果　通过CCK-8法确定H₂O₂和Tan IIA最佳实验浓度为300 μmol·L^-1和20 μmol·L^-1。与空白组相比,H₂O₂组SRA01/04细胞活力及细胞中CAT活性、SOD含量、GSH-Px含量均降低,凋亡率和ROS水平均增加,同时总蛋白中Nrf2和HO-1蛋白相对表达量及核蛋白中Nrf2蛋白相对表达量均下调（均为P<0.05）。与H₂O₂组相比,Tan IIA组SRA01/04细胞活力及细胞中CAT活性、SOD含量、GSH-Px含量均增加,凋亡率和ROS水平均降低,总蛋白中Nrf2和HO-1蛋白相对表达量及核蛋白中Nrf2蛋白相对表达量均上调（均为P<0.05）。而沉默Nrf2基因后,Tan IIA对SRA01/04细胞的保护作用被逆转。结论　Tan IIA能够抑制H₂O₂诱导的人晶状体上皮细胞氧化应激性损伤和凋亡,其机制与Nrf2/HO-1通路的激活有关。     

黄芩苷对高糖诱导的人晶状体上皮细胞凋亡和氧化应激的影响及其可能机制

目的　探讨黄芩苷对高糖诱导的人晶状体上皮细胞凋亡和氧化应激的影响,并探讨其可能机制。方法　以人晶状体上皮细胞系HLE-B3为研究对象,用不同浓度黄芩苷处理后,采用CCK-8法检测细胞活力以筛选黄芩苷最佳作用浓度用于后续实验。将细胞随机分为正常组、高糖组、黄芩苷组,采用CCK-8法检测各组细胞活力,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,RT-PCR检测Kelch样ECH相关蛋白1 (Keap1)、NQO1、核因子红细胞2相关因子2 (Nrf2)、HO-1、Bax、Bcl-2的mRNA相对表达量,Western blot检测Keap1、Nrf2、NQO1、HO-1、Bax、Bcl-2的蛋白表达水平,酶标法检测各组细胞超氧化物歧化酶（SOD）活力和丙二醛（MDA）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）含量。结果　CCK-8法检测结果显示,5 μmol·L^-1黄芩苷可以显著增强HLE-B3细胞活力,随着黄芩苷浓度升高,细胞活力下降,故以5 μmol·L^-1黄芩苷进行后续实验。与正常组HLE-B3细胞活力［（100.00±0.00)%］相比,高糖组细胞活力［（73.52±1.71)%］显著降低（P<0.01);与高糖组相比,黄芩苷组细胞活力［（92.36±3.61)%］显著升高（P<0.01）。流式细胞术检测结果显示,与正常组HLE-B3细胞凋亡率［（7.93±0.22）%］相比,高糖组细胞凋亡率［（57.12±2.63）%］显著升高（P<0.01）;与高糖组相比,黄芩苷组细胞凋亡率［（42.09±1.04）%］显著降低（P<0.01）。RT-PCR检测结果显示,与正常组相比,高糖组HLE-B3细胞中Nrf2、HO-1、NQO1、Bcl-2 mRNA相对表达量均显著降低,Keap1、Bax mRNA相对表达量均显著升高（均为P<0.05）;与高糖组相比,黄芩苷组HLE-B3细胞中Nrf2、NQO1、HO-1、Bcl-2 mRNA相对表达量均显著升高,Keap1、Bax mRNA相对表达量均显著降低（均为P<0.05）。Western blot检测结果显示,高糖组HLE-B3细胞中Keap1、Bax蛋白相对表达量均较正常组显著升高,黄芩苷组Keap1、Bax蛋白相对表达量均较高糖组显著降低（均为P<0.05）;高糖组HLE-B3细胞中Nrf2、HO-1、NQO1、Bcl-2蛋白相对表达量均较正常组显著降低,而黄芩苷组Nrf2、HO-1、NQO1、Bcl-2蛋白相对表达量均较高糖组显著升高（均为P<0.05）。酶标法检测结果显示,高糖组HLE-B3细胞中SOD活力、GSH-Px含量均较正常组降低,MDA含量较正常组升高（均为P<0.05）;黄芩苷组HLE-B3细胞中SOD活力、GSH-Px含量均较高糖组明显升高,MDA含量较高糖组降低（均为P<0.05）。结论　低浓度黄芩苷可抑制高糖诱导的人晶状体上皮细胞凋亡和氧化应激,其作用机制可能与Keap1-Nrf2-ARE信号通路有关。     

特发性黄斑裂孔患者术后黄斑区视网膜微结构修复与视功能恢复关系研究

目的　观察特发性黄斑裂孔(IMH)患者术后黄斑区视网膜各层微结构解剖修复过程与视功能恢复的关系。方法　回顾性研究。选取手术治疗的IMH患者40例40眼,根据患眼术后1周~1个月光学相干断层扫描（OCT）图像微结构连续变化的愈合特征分为3组,其中,A组:裂孔缺损组织及黄斑中心凹曲线完全或部分修复,且已修复部分为椭圆体带先愈合者;B组:裂孔缺损组织及黄斑中心凹曲线完全或部分修复,且已修复部分为除椭圆体带外的其他视网膜层先愈合者;C组:裂孔缺损组织及黄斑中心凹曲线未修复者。对比并观察3组患眼最佳矫正视力（BCVA）、微视野光敏度（MS）及OCT和多焦视网膜电图（mfERG）检查结果。结果　40例（40眼）患者中术后黄斑裂孔愈合的34例（34眼）裂孔愈合时间为术后1~10（5.42±3.16）d,椭圆体带完全对接时间为术后2~12（5.57±3.69）d。术后1周,A组较B组有更高的全层愈合率（P=0.038）。3组患眼术后1周BCVA均较术前提高（均为P<0.05）。术后1周,A组BCVA优于B组、C组,差异均有统计学意义（均为P<0.05）;术后1个月、3个月、6个月时,A组、B组BCVA均较C组提高,差异均有统计学意义（均为P<0.05）,但A组与B组BCVA间差异均无统计学意义（均为P>0.05）。术后1个月,A组、B组MS与术前相比差异均无统计学意义（均为P>0.05）,但A组MS优于B组、B组优于C组（均为P<0.05）;术后3个月、6个月,A组、B组MS均较C组提高（均为P<0.05）,但A组与B组MS相比差异均无统计学意义（均为P>0.05）。术后6个月,A组、B组黄斑中心1环、2环N1、P1波振幅密度及潜伏期均较术前明显改善（均为P<0.05）,C组与术前相比差异均无统计学意义（均为P>0.05）;A组、B组黄斑中心1环、2环N1、P1波振幅密度及潜伏期与C组相比差异均有统计学意义（均为P<0.05）,但A组与B组间相比差异均无统计学意义（均为P>0.05）。结论　IMH患眼术后初期椭圆体带先愈合者黄斑区视网膜微结构具有更高的全层愈合率,且视功能恢复效果更佳。     

苯扎溴铵和西酞普兰对小鼠角膜上皮和角膜全层厚度的影响

目的　通过对光学相干断层扫描血管造影技术（optical coherence tomography angiography,OCTA）的应用,探究苯扎溴铵和西酞普兰对小鼠角膜上皮和角膜全层厚度的影响。方法　选取60只小鼠随机均分为5组,其中A组为阴性对照组,B组用PBS眼液滴眼;C组用苯扎溴铵眼液滴眼;D组腹腔注射西酞普兰混悬液;E组苯扎溴铵眼液滴眼联合腹腔注射西酞普兰混悬液。在注射（滴眼）后2周,利用OCTA进行角膜分区,分别测量5组小鼠角膜各区域的角膜上皮和角膜全层厚度,并计算平均值。结果　A组角膜上皮及角膜全层厚度分别为（66±7）μm、（141±11）μm,B、D两组角膜上皮均为（66±8）μm,角膜全层厚度均为（140±12）μm,C组分别为（73±10）μm、（141±14）μm,E组分别为（76±12）μm、（141±15）μm。注射（滴眼）后2周,与注射（滴眼）前相比,A组、B组及D组角膜上皮厚度及角膜全层厚度略有变化,差异均无统计学意义（均为P＞0.05）,而C组和E组各区域角膜上皮厚度及角膜全层厚度明显增厚,差异均有统计学意义（均为P＜0.05）。注射（滴眼）后2周,E组较C组相比,角膜上皮厚度及角膜全层厚度增厚更为显著,差异有统计学意义（P＜0.05）。各组注射后与注射前相比,C组和E组角膜上皮厚度和角膜全层厚度平均值明显增大,差异有统计学意义（均为P＜0.05）;与A组相比,C组和E组角膜上皮厚度和角膜全层厚度平均值明显增大,差异均有统计学意义（均为P＜0.05）。结论　应用OCTA测量发现,单独使用西酞普兰对角膜厚度无明显影响,苯扎溴铵可使角膜上皮及角膜全层厚度增厚,且西酞普兰对其增厚具有协同作用。     

体外模拟532 nm激光通过多焦点人工晶状体进行激光光凝的效果

目的　体外模拟532 nm激光通过多焦点人工晶状体（MIOL）进行光凝，比较激光通过MIOL和单焦点IOL进行光凝时产生的激光斑差异，为临床MIOL植入术后患者的眼底激光治疗提供理论依据。方法　根据IOL的不同分为三组，A组为对照组，应用单焦点IOL；B组与C组分别应用区域折射型MIOL和衍射型MIOL。采用化学涂层热敏纸模拟人眼视网膜。在无IOL的条件下进行光凝，参考人眼视网膜激光斑的分级标准将热敏纸激光斑分为Ⅰ~Ⅳ级。应用532 nm激光通过三组IOL进行光凝，比较三组间各级激光斑数量。若三组的激光斑分布存在差异，则逐步提高激光斑分级较低一组的激光功率后再比较。结果　在相同激光功率条件下，三组的各级激光斑数量比较，差异有统计学意义（P<0.05）。两两比较结果显示，C组与A组激光斑数量差异均有统计学意义（均为P<0.05），B组与A组激光斑数量差异均无统计学意义（均为P>0.05）。少量提高C组的激光功率后再次与A组比较，各级激光斑数量差异均无统计学意义（均为P>0.05）。结论　应用532 nm激光进行激光光凝时，衍射型MIOL对激光斑有一定影响，但少量提高激光功率后，也可以达到单焦点IOL在原激光功率下的效果。通过区域折射型MIOL进行光凝与单焦点IOL相比无明显差异。     

微脉冲超声能量模式在白内障超声乳化吸出术中的应用效果

目的　观察微脉冲超声能量模式在白内障超声乳化吸出术中应用的临床效果。方法　选择2018年9月至2019年2月于我院就诊并行白内障超声乳化吸出联合人工晶状体植入术的患者146例（178眼）进行前瞻性随机对照研究。将患者分为2组,微脉冲模式组（A组,88眼）、脉冲模式组（B组,90眼）。再根据Emery核硬度分级标准将2组患者各分为1（Ⅱ级核,59眼）、2（Ⅲ级核,86眼）、3（Ⅳ级核,33眼）小组。记录术前视力、白内障核硬度分级;比较2组术中所用的实际超声能量（actual power,AP）、有效超声时间(effective phaco time,EPT);术后1 d和7 d最佳矫正视力（best corrected visual acuity,BCVA）;术后1 d、7 d和30 d的中央区角膜内皮细胞密度（corneal endothelial cell density,CECD）、六角形细胞比率和术后30 d的角膜内皮细胞损失率。结果　A组和B组的AP、EPT比较:各组间比较AP均减少、EPT均缩短。A1、B1组比较差异无统计学意义(P＞0.05);A2、B2组及A3、B3组之间比较差异均有统计学意义(均为P＜0.05)。中央区CECD、PHC比较:术后1 d、7 d、30 d分别与术前比较,差异均有统计学意义（均为P＜0.05）。中央区CECD术后不同时间点比较:A1组与B1组差异均无统计学意义（均为P＞0.05）,A2组与B2组、A3组与B3组之间差异均有统计学意义（均为P＜0.05）。术后1 d、7 d A3组与B3组PHC比较差异均有统计学意义（均为P＜0.05）,术后30 d各组间比较差异均无统计学意义（均为P＞0.05）。角膜内皮细胞损失率比较:术后30 d A组与B组差异有统计学意义（P＜0.05）。术后BCVA:术后1 d、7 d A组及B组比较差异有统计学意义(P＜0.05),而术后30 d A、B组差异无统计学意义(P＞0.05)。结论　微脉冲超声能量模式可使白内障超声乳化吸出术的超声时间缩短、超声能量降低,可减少对眼内组织特别是对角膜内皮细胞的损伤,其安全性、有效性值得在临床上推广使用。     

Indicating and predicting role of the horizontal C/D ratio in preclinical diabetic retinopathy associated with chronic angle-closure glaucoma

AIM: To observe morphological optic disc characteristics in patients with preclinical diabetic retinopathy (DR) associated with chronic angle-closure glaucoma (CACG). METHODS: Twenty-two cases (43 eyes) of preclinical DR associated with CACG were enrolled in group A; 24 preclinical DR cases (46 eyes) were enrolled in group B; 26 CACG cases (51 eyes) were enrolled in group C; and 49 normal controls (49 eyes) were enrolled in group D. All underwent optical coherence tomography to measure the horizontal C/D ratio (HCDR), C/D area ratio (CDaR), vertical C/D ratio (VCDR), rim area (RA), cup volume (CV), disc area (DA) and average retinal nerve fiber layer (RNFL) thickness. RESULTS: The ages of groups A, B, C, and D were 67.60±3.36, 66.78±3.33, 65.98±3.83, and 67.54±3.17y, respectively. The HCDR values in groups A, B, and C were distinct relative to those in group D (P<0.0001, P<0.01, and P<0.05, respectively). The HCDR values in group A were higher compared with those in groups B (P<0.0001) and D (P<0.0001); while these values were virtually identical statistically between groups A and C (P>0.05). The CDaR values in group A were higher in comparison to those in groups B and D (P<0.0001 in both groups); while these values were virtually identical statistically between groups A and C (P>0.05). The RA values in group A were smaller relative to those in groups B and D (P<0.0001 in both groups); while groups A and C were not distinct statistically (P>0.05). The CV values in group A were greater in comparison to those in groups B and D (P<0.0001 in both groups); while groups A and C were not distinct statistically (P>0.05). DA was not distinct for comparisons of two groups among the four groups (P>0.05). HCDR value correlated with mean nasal RNFL thickness (r=-0.909, P<0.0001), mean superior RNFL thickness (r=-0.866, P<0.0001), mean inferior RNFL thickness (r=-0.650, P<0.001) and mean temporal RNFL thickness (r=-0.562, P<0.01) in group A. CONCLUSION: The HCDR was a sensitive morphological parameter in detecting structural visual disc changes in preclinical DR associated with CACG, which can reflect optic nerve damage caused jointly by CACG and diabetes. A higher HCDR may predict optic nerve atrophy.     

区域折射型多焦点人工晶状体植入术后白内障患者视觉质量初步评价

目的　对区域折射型多焦点人工晶状体（IOL）Lentis MPlus LS-313 MF30植入术后白内障患者的视觉质量进行临床初步评价。方法　选取2018年5月至2019年3月在锦州医科大学附属第三医院眼病中心行晶状体超声乳化联合IOL植入术患者共60例（60眼）的临床资料进行研究,其中植入Lentis Mplus LS-313 MF30 IOL者30例30眼为试验组,植入Tecnis ZCB00单焦点IOL者30例30眼为对照组。术后1 d、7 d、1个月分别对患者进行随访,对比两组患眼视力、眼压、角膜内皮细胞数、离焦曲线,同时对患者进行问卷调查,对比观察两组患者术后满意度、脱镜率及光学副作用等。结果　术后1 d、7 d、1个月,试验组与对照组裸眼远视力和矫正远视力比较差异均无统计学意义（均为P>0.05）,但试验组患眼中、近视力均明显好于对照组,差异均有统计学意义（均为P<0.05）。术后1个月离焦曲线试验组大约在0.00 D和-3.00 D有明显的波峰,中间是较为平缓的低谷,对照组仅有一个波峰,位于0.00 D。术后1个月,试验组从未出现光晕者占66.7%,低于对照组的 90.0%,差异有统计学意义（P<0.05）;但两组患眼间出现眩光、星曝、复视的比例差异均无统计学意义（均为P>0.05）。术后1个月,近距离使用时试验组患眼完全脱镜率为90.00%,显著高于对照组的13.33%（P<0.05）;试验组患者非常满意者占90.0%,显著高于对照组的 20.0%（P<0.05）。结论　区域折射型多焦点IOL Lentis Mplus LS-313 MF30可以为患者提供良好的全程视力,患者术后脱镜率和满意度均较高。     

缺氧对巩膜成纤维细胞内质网应激反应的激活作用及其对巩膜重塑的影响

目的　探讨缺氧对巩膜成纤维细胞（HFSF）内质网应激反应的激活作用及其对巩膜重塑的影响。方法　取HFSF随机分为缺氧0 h组、缺氧12 h组、缺氧48 h组。缺氧0 h组细胞正常培养,缺氧12 h组及48 h组细胞分别在含氧体积分数2%的三气培养箱中缺氧处理12 h及48 h。采用Western blot 检测肌醇需求酶l (IRE1α)、P-IRE1α、COL1A1、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、BAX及BCL-2蛋白表达情况,免疫荧光染色检测HFSF中α-SMA蛋白含量,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,CCK-8检测细胞增殖情况。结果　Western blot检测结果显示:与缺氧0 h组相比,缺氧12 h组IRE1α、α-SMA蛋白表达均升高,COL1A1蛋白表达降低,差异均有统计学意义（均为P<0.05）,其余蛋白表达变化不明显,差异均无统计学意义（均为P>0.05）;与缺氧0 h组相比,缺氧48 h组IRE1α、P-IRE1α、MMP-2、α-SMA、BAX蛋白表达均升高,COL1A1、BCL-2蛋白表达均降低,差异均有统计学意义（均为P<0.05）;与缺氧12 h组相比,缺氧48 h组COL1A1、BCL-2蛋白表达降低,BAX蛋白表达升高,差异均有统计学意义（均为P<0.05）,其余蛋白表达变化不明显,差异均无统计学意义（均为P>0.05）。免疫荧光染色结果显示:缺氧12 h组及缺氧48 h组α-SMA蛋白荧光强度均较缺氧0 h组增高,且缺氧48 h组较缺氧12 h组α-SMA蛋白荧光强度升高更明显。流式细胞仪检测结果显示:缺氧0 h组、缺氧12 h组、缺氧48 h组细胞凋亡率分别为（0.617±0.032）%、（2.187±0.212）%、（4.130±0.395）%;缺氧12 h组及缺氧48 h组细胞凋亡率均高于缺氧0 h组,差异均有统计学意义（均为P<0.05）,且缺氧48 h组细胞凋亡率高于缺氧12 h组,差异有统计学意义（P<0.05）。CCK-8检测结果显示:缺氧12 h组及缺氧48 h组D₄₅₀均低于缺氧0 h组,差异均有统计学意义（均为P<0.05）;缺氧48 h组与缺氧12 h组相比,差异无统计学意义（P>0.05）。结论　缺氧激活HFSF内质网应激反应,并且可能通过调节胶原代谢、促进细胞转分化及凋亡来参与巩膜重塑。     

生姜提取物对链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠晶状体的保护作用

目的　探讨生姜提取物对链脲佐菌素（streptozotocin,STZ）诱导的糖尿病大鼠晶状体的保护作用。方法　60只SD大鼠随机分为A组（正常对照组）、B组（糖尿病组）、C1组（糖尿病+生姜灌胃50 mg·kg^-1组）、C2组（糖尿病+生姜灌胃100 mg·kg^-1组）、C3组（糖尿病+生姜灌胃300 mg·kg^-1组）,每组各12只。除A组腹腔注射等体积生理盐水外,其余各组均一次性腹腔注射STZ 65 mg·kg^-1。动物模型建立成功后,立即予以C1、C2、C3组大鼠生姜提取物灌胃,A、B组给予等量生理盐水灌胃。观察大鼠成模前与成模后4周、8周、12周时血糖、晶状体变化情况。成模后4周、8周、12周分批处死大鼠并立即取出晶状体,ELISA检测晶状体醛糖还原酶（aldose reductase,AR）含量;Western blot检测糖基化终末产物（glycosylation end products,AGEs）的表达;超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活性测定试剂盒检测SOD活性,丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量测定试剂盒检测MDA含量;TUNEL法检测晶状体上皮细胞（lens epithelial cells,LECs）凋亡率,扫描电镜观察晶状体超微结构变化。结果　糖尿病大鼠晶状体SOD活性呈下降趋势,差异均有统计学意义（均为P<0.05）。除A、C3组外,其余各组大鼠晶状体MDA含量变化在成模后4周、8周、12周时差异均有统计学意义（P=0.003、0.000、0.017）。B组大鼠AR持续性增高（P=0.003）。C1、C2、C3组大鼠晶状体AR含量呈下降趋势,差异均有统计学意义（P=0.007、0.000、0.000）。C1、C2、C3组大鼠晶状体AGEs表达情况差异均有统计学意义（均为P<0.05）。扫描电镜发现,B组大鼠晶状体皮质纤维破坏程度呈进行性加重,C1、C2、C3组大鼠皮质破坏程度随灌胃浓度的增加而呈减轻趋势。A组大鼠LECs凋亡率无明显差异性变化（P=0.191）,其余大鼠LECs的凋亡呈现上升趋势,差异均有统计学意义 （均为P<0.05）。结论　生姜提取物灌胃可延迟糖尿病大鼠晶状体混浊时间并减慢其进展速度,并有一定的浓度依赖性,这可能是通过抑制醛糖还原酶活性、氧化应激反应、AGEs的产生以及晶状体上皮细胞凋亡等途径实现的。