萎缩性骨不连中miRNAs的异常表达与其靶基因的初步预测

目的筛选研究萎缩性骨不连断段修复组织中异常表达的microRNAs（miRNAs）,并对其可能的功能性靶基因进行预测分析。方法以萎缩性骨不连患者断端瘢痕组织（AN,3例）与正常骨折愈合后内固定钢板取出时钢板周围的骨痂组织（B组,3例）作为研究对象,采用Exiqon miRCURY^TM LNA microRNA芯片（11．0版）进行筛选分析,比较A组组织中是否存在异常表达的miRNAs,并采用浏览计算机预测数据库等生物信息学的方法预测其可能的靶基因,探寻miRNAs可能参与的萎缩性骨不连相关病理生理过程。结果A组相对B组有9种miRNAs发生1．5倍以上表达上调（hsa—miR-149,hsa—miR-221,hsa—miR-628—3p,hsa-miR-54—5p,以及5种hsa—miRPlus）,9种miRNAs发生1．5倍以上表达下调（hsa—let-7b＊,hsa—miR-220b,hsa—miR-513a-3p,hsa—miR-551a,hsa—miR-576-5p,hsa—miR-1236,kshv—miR—K12—6—5p,以及2种hsa—miRPlus）。生物信息学分析发现,表达异常的miRNAs与多数成骨基因存在作用靶点。结论萎缩性骨不连的断端修复组织存在miRNAs的异常表达,其靶基因包括BMP家族在内的众多成骨性基因。数种miRNAs,特别是4种上调的miRNAs（hsa-miR-149＊、hsa-miR-221、hsa-miR-628—3p和hsa—miR-654—5p）有可能在调控骨折向不愈合发展中具有重要作用。     

新疆哈萨克族食管癌与正常组织间差异表达miRNA的筛查及验证

目的：筛查并验证新疆哈萨克族食管癌组织与正常组织间差异表达的miRNAs,并初步探讨这些miRNAs在食管癌发生演进中的作用。方法：采用miRNA表达谱基因芯片分析系统筛查哈萨克族食管癌组织及远端正常食管组织中差异表达的miRNAs,实时荧光定量PCR检测验证差异显著miRNA的表达情况,分析miRNAs表达与食管癌临床病理指标的关系。结果：与远端正常组织相比较,miR-21、miR-132、miR-130b在哈萨克族食管癌组织中表达上调（P < 0.05）,miR-141、miR-143、miR-133b、miR-195表达下调（P < 0.05）;miR-140表达变化无统计学意义;miR-21、miR-132、miR-143与食管癌临床分期有关,miR-21、miR-132、miR-143、miR-133b与淋巴结转移有关,miR-21、miR-141、miR-143、miR-133b与食管癌组织分化程度有关（P < 0.05）。结论：本研究采用基因芯片筛查出新疆哈萨克族食管癌组织与远端正常组织中差异表达的miRNAs,实时荧光定量PCR结果与基因芯片检测结果基本一致,miRNA表达的变化与新疆哈萨克族食管癌的发生发展有关。     

大规模平行测序技术筛选人肾细胞癌组织中差异表达microRNAs及其验证

目的:以大规模平行测序技术(massively parallel signature sequencing,MPSS)筛选人肾细胞癌(renal cell carcinoma,RCC)和癌旁组织中差异表达的microRNAs(miRNAs),并验证差异表达miRNAs之一的miR-660在人RCC中的表达。方法:MPSS检测10例RCC组织及相应癌旁组织中miRNAs的表达,筛选RCC组织中差异表达miRNAs。RT-PCR检测5例RCC与癌旁组织中miR-660的表达,qPCR检测40例RCC与癌旁组织中miR-660的表达。结果:MPSS结果显示,RCC组织中283个miRNAs表达下调,187个表达上调,其中miR-660在RCC组织中表达量是癌旁组织的17.5%。RT-PCR初步验证了此结果;qPCR验证结果显示,40例RCC组织中33例miR-660表达显著低于癌旁组织,RCC组织中miR-660平均表达量是癌旁的19.5%。结论:人RCC组织中283个miRNAs表达下调、187个上调。miR-660在RCC组织中低表达,有可能成为RCC诊断及治疗的新靶点。     

胃癌miRNAs表达谱及胃癌组织miR-21表达临床意义探讨

目的:筛选胃癌miRNAs表达谱,探讨miR-21在胃癌组织中的表达情况及其临床病理意义.方法:收集手术切除新鲜胃癌标本共65例,包括胃癌组织及相应胃正常上皮组织,随机选取其中6例,应用miRNA芯片技术研究胃癌的miRNAs表达谱.采用实时定量PCR验证芯片结果并检测miR-21在65例胃癌组织标本及相应胃正常上皮组织的表达水平,探讨其表达与胃癌临床病理参数间的关系.结果:与胃正常上皮组织相比,胃癌组织中表达上调超过2倍的miRNAs有7个(miR-374b*、miRPlus-E1212、miR-338-5p、miR-297、miR-21、miR-135b和miR-18a),表达下调超过2倍的miRNAs有9个(miR-29b-2*、miR-1260、miRPlus-E1241、miR-S1-5p、miR-148a、miR-29c、miR-647、miR-196b×和ebv-miR-BART5).46例(70.8％)胃癌组织中miR-21表达水平明显高于胃正常上皮组织,且与肿瘤的分化程度(x2=6.257,P=0.012)、浸润深度(x =5.705,P=0.017)和有无淋巴结转移(x2=7.107,P=0.008)有关.结论:筛选出的差异表达miRNAs可能参与胃癌的发病;miR-21与胃癌生物学行为密切相关,可能成为胃癌诊断和治疗的潜在生物学指标.     

miRNA在有无淋巴结转移结肠癌中的表达

[目的]分析miRNA在有无淋巴结转移的结肠癌中的差异表达,筛选出与结肠癌淋巴结转移有关miRNA。[方法]选取6例结肠癌患者的冰冻组织标本,其中3例有淋巴结转移,3例无淋巴结转移。提取肿瘤组织标本的miRNAs,采用微阵列法分析有无淋巴结转移结肠癌的miRNAs表达谱。为验证微阵列表达谱的结果,选择miR-142-3p做qRT-PCR。[结果]有淋巴结转移结肠癌与无淋巴结转移的结肠癌相比,上调表达的miRNA有4个,为miR-21＊,miR-212,miR-33b＊和miR-886-3p;下调表达的miRNA有3个,为miR-142-3p,miR-142-5p和miR-362-5p。qRT-PCR结果显示miR-142-3p在有淋巴结转移的结肠癌组织中表达明显下降,与miRNAs微阵列检测结果一致。[结论]有无淋巴结转移的结肠癌具有不同的miRNAs表达谱。     

miR-485-5p在恶性肿瘤中的研究进展

MicroRNAs(miRNAs)是一类长度约22个核苷酸的非编码RNA,在基因表达调控中,参与多种重要的生理和病理过程。miRNAs能够特异性结合靶基因序列,抑制基因的转录或翻译,从而抑制基因在转录或转录后水平上的表达。miRNAs作为肿瘤抑制因子或促进因子在癌症发生发展中经常失调。最近的研究发现miR-485-5p在多种癌症中表达下调,并调控肿瘤细胞生长、增殖、侵袭和迁移。miR-485-5p在肿瘤诊断、治疗及预后相关方面可作为具有潜在价值的肿瘤标志物,并有望成为临床肿瘤靶向治疗的新的治疗靶点。本文围绕miR-485-5p在肝癌、胃癌、乳腺癌及其他恶性肿瘤中的研究进展展开综述并对其未来应用和发展进行展望。     

微小RNA-320在肿瘤中的研究进展

微小RNA（miRNAs）是一类细胞内源性表达的小分子非编码RNA,具有转录后调控基因表达的作用。近年来,在结肠癌、乳腺癌和胆管癌等多种肿瘤中发现miR-320表达下调,提示miR-320可通过抑制细胞增殖和侵袭等方式抑制肿瘤进展。对于miR-320调控的靶基因及相关信号通路的深入研究,有助于阐明肿瘤发生发展的分子机制,并有望为临床肿瘤治疗提供新的靶点。本文就miR-320在肿瘤中的研究进展作一综述。     

miR-149-3p通过靶向S100A4抑制膀胱癌细胞的增殖、迁移和侵袭

目的:探讨miR-149-3p通过靶向S100A4抑制膀胱癌细胞的增殖、迁移和侵袭行为及其作用机制。方法:qPCR检测miR-149-3p的过表达情况;CCK-8细胞增殖实验检测miR-149-3p对膀胱癌细胞的增殖能力的影响;划痕愈合实验和Transwell侵袭实验检测miR-149-3p对膀胱癌细胞迁移和侵袭能力的影响;双荧光素酶报告基因检测miR-149-3p与S100A4的相互作用;Transwell侵袭实验检测S100A4的异位表达逆转miR-149-3p的抗肿瘤作用。结果:miR-149-3p过表达显著抑制培养的膀胱癌细胞48小时的生长能力;过表达miR-149-3p后在膀胱癌细胞中具有抗迁移和侵袭作用;miR-149-3p能与S100A4的3' UTR特异性结合,调控S100A4的表达活性;S100A4的过表达可以逆转由miR-149-3p引起的细胞迁移和侵袭能力的抑制。结论:miR-149-3p在膀胱癌的发生发展过程中起重要作用,可以通过靶向调节S100A4的表达影响膀胱癌细胞的增殖和迁移。     

人肝细胞肝癌和癌旁正常组织microRNA表达差异的分析

目的比较肝细胞肝癌和癌旁正常组织microRNA的表达差异,为研究肝癌的发病机理提供理论依据。方法用microRNA 微阵列芯片技术研究肝细胞肝癌细胞474种miRNAs表达谱,对比癌旁正常组织筛选差异表达miRNAs。结果获得213个差异表达（P<0.01）的miRNAs分子数据,与配对癌旁正常组织相比,其中上调表达的有116个,如miR-181,miR-21,let-7e等;下调表达的有97个,如miR-199,miR-451,miR-122等。结论miRNA可能成为肝癌的诊断工具,并对研究肝癌的致病机理提供新的理论依据。     

胃癌发生过程中风险miRNAs筛选及其诊断效能评价的多中心研究

目的 探索胃癌发生过程的风险miRNAs,为上消化道机会性筛查中早期胃癌识别提供依据。方法 纳入2021年6月至2023年8月在广西医科大学附属肿瘤医院、右江民族医学院附属医院、桂林市人民医院3个中心进行上消化道癌机会性筛查的人群。选取健康体检者107例、早期胃癌患者71例、进展期胃癌患者97例。首先采用转录组测序筛选差异表达miRNAs,然后在3组前瞻性人群的血浆样本中通过RT-qPCR验证差异表达的miRNAs,最后采用受试者工作特征（receiver operating characteristic,ROC）曲线评估miRNAs的诊断效能。结果 转录组测序的差异基因分析共筛选出胃癌发生过程中的6个差异表达miRNAs,包括miR-3176、miR-885-5p、miR-203a-3p、miR-452-5p、miR-223-3p、miR-219a-2-3p。RT-qPCR结果显示,miR-452-5p在早期胃癌及进展期胃癌患者中表达上调（均P<0.001）。ROC曲线显示,miR-452-5p诊断早期胃癌和进展期胃癌的曲线下面积（area under the curve,AU...     

miR-25在非小细胞肺癌中的研究进展

microRNA(微小RNA,miRNA)是小的非编码RNA,能够通过靶向信使RNA进行翻译抑制或在较小程度上降解来抑制基因表达。miRNA不受控制的表达与癌症进展相关,并且miRNA上调或下调与癌症中的致癌和肿瘤抑制作用相关。 miR-25是miRNA的一员,研究表明miR-25参与非小细胞肺癌的发生、转移侵袭、诊断、介导铂耐药及预后过程。本文主要综述了近年来非小细胞肺癌与miR-25相关研究取得的最新进展。     

延龄草总皂苷调控hsa_circ_0025033/miR-149对非小细胞肺癌细胞生物学行为的影响

目的:研究延龄草总皂苷对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞A549增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。方法:将不同浓度的延龄草总皂苷作用于A549细胞,应用实时定量PCR检测hsa_circ_0025033和miR-149的表达,应用双荧光素酶基因系统验证hsa_circ_0025033与miR-149的靶向关系。分析干扰hsa_circ_0025033表达对A549细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。结果:延龄草总皂苷可抑制A549细胞增殖、迁移和侵袭,诱导细胞凋亡,下调hsa_circ_0025033表达,上调miR-149表达(P＜0.05)。干扰hsa_circ_0025033可抑制A549细胞增殖、迁移和侵袭,诱导细胞凋亡(P＜0.05)。hsa_circ_0025033可靶向结合miR-149,干扰hsa_circ_0025033表达可上调miR-149表达(P＜0.05)。过表达hsa_circ_0025033逆转延龄草总皂苷对A549细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响(P＜0.05)。结论:延龄草总皂苷能够抑制NSCLC细胞A549增殖、迁移和侵袭,诱导细胞凋亡,可能与调节hsa_circ_0025033/miR-149通路有关。     

Screening key microRNAs for castration-resistant prostate cancer based on miRNA/mRNA functional synergistic network

High-throughput methods have been used to explore the mechanisms by which androgen-sensitive prostate cancer (ASPC) develops into castration-resistant prostate cancer (CRPC). However, it is difficult to interpret cryptic results by routine experimental methods. In this study, we performed systematic and integrative analysis to detect key miRNAs that contribute to CRPC development. From three DNA microarray datasets, we retrieved 11 outlier microRNAs (miRNAs) that had expression discrepancies between ASPC and CRPC using a specific algorithm. Two of the miRNAs (miR-125b and miR-124) have previously been shown to be related to CRPC. Seven out of the other nine miRNAs were confirmed by quantitative PCR (Q-PCR) analysis. MiR-210, miR-218, miR-346, miR-197, and miR-149 were found to be over-expressed, while miR-122, miR-145, and let-7b were under-expressed in CRPC cell lines. GO and KEGG pathway analyses revealed that miR-218, miR-197, miR-145, miR-122, and let-7b, along with their target genes, were found to be involved in the PI3K and AKT3 signaling network, which is known to contribute to CRPC development. We then chose five miRNAs to verify the accuracy of the analysis. The target genes of each miRNA were altered significantly upon transfection of specific miRNA mimics in the C4–2 CRPC cell line, which was consistent with our pathway analysis results. Finally, we hypothesized that miR-218, miR-145, miR-197, miR-149, miR-122, and let-7b may contribute to the development of CRPC through the influence of Ras, Rho proteins, and the SCF complex. Further investigation is needed to verify the functions of the identified novel pathways in CRPC development.     

miR-6883-3p靶向CHD1L抑制肝癌细胞的恶性表型

目的:寻找可靶向调控恶性肿瘤相关染色质解旋因子CHD1L的miRNAs分子,确证该调控模式对肝癌细胞恶性表型的影响。方法:通过生物信息学分析预测并筛选可靶向结合CHD1L的miRNAs,实时荧光定量PCR（qRT-PCR）及蛋白印迹分析（Western Blot）方法验证所筛选的miRNAs 对肝癌细胞CHD1L表达的影响,明确可转录后调控CHD1L表达的关键miRNA分子;qRT-PCR检测肝癌组织中miRNAs和CHD1L的表达,并对其表达进行相关性分析;MTS、细胞划痕、Transwell迁移实验验证目标miRNA分子对肝癌细胞恶性表型的影响。结果:生物信息学分析结果显示miR-6883-3p可显著下调肝癌细胞CHD1L表达。双荧光素酶报告实验检测结果证明miR-6883-3p可直接靶向结合CHD1L 3' UTR端。临床肝癌组织样本qRT-PCR检测及统计学分析结果显示CHD1L高表达于肝癌组织,而miR-6883-3p则高表达于癌旁组织,二者表达呈负相关。miR-6883-3p 模拟物（mimic）可明显抑制肝癌细胞增殖、促进细胞凋亡、抑制细胞迁移;而miR-6883-3p抑制剂（inhibitor）可显著促进肝癌细胞增殖、促进细胞迁移。 与对照组（Mock）相比,miR-6883-3p mimic组肝癌细胞内ALB表达则随着CHD1L表达的下调而增加,HNF-4α及AFP随着CHD1L表达的下调而减少,反之亦然。结论:miR-6883-3p通过靶向调控CHD1L表达,抑制肝癌细胞的恶性表型。     

血清和尿液中外泌体miRNAs的表达水平对肾细胞癌的诊断价值

目的:研究血清和尿液中外泌体miRNAs的表达水平对肾细胞癌(RCC)的诊断价值。方法:选择本院2018年11月至2020年08月诊治的68例RCC患者（RCC组）进行前瞻性分析，并将RCC患者根据临床分期进行分组，以本院同期收治的60例肾脏良性病变患者作为对照组。检测患者血清和尿液中外泌体miRNAs相对表达量，分析血清和尿液中外泌体miRNAs在肾细胞癌中的诊断价值。结果:RCC组患者血清、尿液中miR-210、miR-21、miR-153、miR-1233和miR-221表达量均明显高于对照组，miR-34a表达量均明显低于对照组（P＜0.05）；血清中ROC曲线显示AUC最大的为miR-221，其诊断敏感度为79.40%，特异度为95.00%；尿液中最大的为miR-34a，其敏感度为85.30%，特异度为88.30%；不同临床分期RCC患者的血清miR-210、miR-153表达量以及尿液miR-153表达量无显著差异（P＞0.05），但血清和尿液中的miR-21、miR-34a、miR-1233、miR-221表达量以及尿液miR-210表达量在不同分期RCC患者中存在显著差异（P＜0.05）；血清中，miR-210、miR-153与临床分期无相关性（P＞0.05），miR-21、miR-1233、miR-221与临床分期呈正相关，miR-34a与临床分期呈负相关（P＜0.05）；尿液中，miR-210、miR-153与临床分期无相关性（P＞0.05），miR-21、miR-1233、miR-221与临床分期呈正相关，miR-34a与临床分期呈负相关（P＜0.05）。结论:RCC患者血清、尿液外泌体miR-210、miR-21、miR-34a、miR-153、miR-1233和miR-221表达量较良性肾脏病变患者存在显著差异，同时miR-21、miR-34a、miR-1233、miR-221表达量均与RCC患者病理分期存在显著相关性，可为疾病进展评估提供参考。     

miR-590在恶性肿瘤中的研究进展

微小RNA（microRNA,miRNA,miR）是一类小的单链非编码RNA,长度为18~25个核苷酸,通过与mRNA的3' 非翻译区（3' untranslated region,3' UTR）中不完全匹配的序列来沉默基因表达,具有高度保守的序列。越来越多的研究已经在各种类型的恶性肿瘤中观察到miRNA,并且发现miRNA参与调节癌细胞行为,包括细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭。miR-590的表达和功能在不同类型的肿瘤中并不相同,其表达的失调与恶性肿瘤的发生发展、治疗及预后密切相关。本文就miR-590在各种恶性肿瘤中的最新研究进展作一综述。     

miR-126在急性髓系白血病中的研究进展

急性髓系白血病（acute myeloid leukemia, AML）是血液系统恶性肿瘤中常见的疾病,尽管化学治疗可以清除骨髓中白血病细胞,多数患者的最终结局仍是复发,甚至死亡。miRNAs对急性髓系白血病的诊断、分型及预后往往有指导性意义,其表达水平对化疗敏感性的影响可以提示是否存在化疗耐药。其中,miR-126作为在造血干细胞及内皮细胞均有特异性表达的miRNA,虽然在干细胞中已有详尽的研究,但在AML分化细胞水平尚无完整和确切定论。本文讨论目前miR-126在急性髓系白血病中研究进展及其对干细胞功能的调控。     

Breast Cancer Stem Cells-derived Extracellular Vesicles Affect PPARG Expression by Delivering MicroRNA-197 in Breast Cancer Cells

Background: Breast cancer (BC) is the most frequently diagnosed cancer in women, and over 90% of BC-related deaths are associated with metastasis. The effects of BC stem cells-derived extracellular vesicles (BCSCs-EVs) have been implicated in cancer control. This work aims to probe to the relevance of BCSCs-EVs to liver metastases of BC cells and the molecules involved.Methods: First, EVs were extracted from BCSCs for MDA-MB-231 and SUM149PT cell co-culture. The effects of BCSCs-EVs on the proliferation of BC cells in vitro and in vivo as well as liver metastasis were evaluated. Subsequently, we analyzed differentially expressed microRNAs (miRNAs) after BCSCs-EVs by microRNA microarray and had them verified by RT-qPCR. Bioinformatics analysis was conducted to analyze target mRNAs of miR-197. The binding relationship of miR-197 to PPARG mRNA was examined. Finally, MDA-MB-231 and SUM149PT cells co-cultured with BCSCs-EVs were treated with miR-197 inhibitor or a PPARG-specific agonist.Results: BCSCs-EVs promoted the growth of MDA-MB-231 and SUM149PT cells in vitro and in vivo as well as liver metastasis. BCSCs-EVs increased the expression of miR-197 in MDA-MB-231 and SUM149PT cells, and miR-197 could target PPARG mRNA. BCSCs-EVs treatment inhibited the mRNA and protein expression of PPARG in cells, thereby activating epithelial-mesenchymal transition (EMT). Knockdown of miR-197 or activation of PPARG in BCSCs-EVs-treated cells significantly counteracted the promoting effect of BCSCs-EVs on BC cell growth and metastasis.Conclusion: BCSCs-EVs facilitated EMT of BC cells by delivering miR-197 to BC cells and inhibiting PPARG expression, thereby promoting growth and metastasis of BC cells.