不同fimA基因型牙龈卟啉单胞菌刺激中性粒细胞产生基质金属蛋白酶8和9的比较

目的比较不同fimA基因型牙龈卟啉单胞菌（P.gingivalis）刺激下人外周血中性粒细胞（PMNs）产生基质金属蛋白酶8、9（MMP-8、MMP-9）的差异。方法采用密度梯度离心分离法分离纯化培养PMNs,P.gingivalis ATCC33277（ⅠfimA）、WCSP 115（ⅡfimA）、WCSP 1.5（ⅢfimA）、W83（ⅣfimA）、WCSP 559（ⅣfimA）菌悬液与新鲜分离的PMNs悬液共孵育2 h,于5 min、30 min、1 h、2 h收集上清液,用ELISA方法检测MMP-8、MMP-9的表达。结果不同fimA基因型P.gingivalis刺激PMNs产生MMP-8、MMP-9的能力都显著高于未受刺激组;ⅡfimA、ⅣfimA（W83）型P.gingivalis刺激PMNs分泌MMP-8在速度及量上均高于ⅢfimA、ⅣfimA（WCSP 559）型P.gingivalis;ⅠfimA、ⅡfimA、ⅣfimA（W83）型P.gingivalis刺激PMNs分泌MMP-9能力高于ⅢfimA、ⅣfimA（WCSP 559）型P.gingivalis。结论ⅡfimA、ⅣfimA型P.gingivalis的致病能力相对较强,提示P.gingivalis的毒力和致病性与fimA基因型存在相关性。     

Ⅰ、ⅣfimA型牙龈卟啉单胞菌对内皮细胞与平滑肌细胞共培养体系产生内皮素-1及一氧化氮的影响

［摘要］ 目的 研究不同fimA基因型牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis,P.gingivalis）刺激人脐静脉血管内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells,HUVECs）及人脐动脉血管平滑肌细胞（human umbilical artery smooth muscle cells,HUASMCs）共培养体系产生内皮素-1（endothelin-1,ET-1）和一氧化氮（NO）的水平。方法 用ⅠfimA型P.gingivalis（ATCC 33277）和ⅣfimA型P.gingivalis（W83）分别刺激HUVECs-HUASMCs共培养体系,于2、8、24、48 h时收集细胞培养上清液,酶联免疫反应检测ET-1的含量,硝酸还原酶法测定NO的含量。各组均设阴性对照组（纯培养基）及阳性对照组（1 μg/mL E.coli-LPS）。结果 HUVECs-HUASMCs共培养体系在Ⅰ、ⅣfimA型P.gingivalis刺激作用下产生ET-1和NO的量以及ET-1/NO水平,与阴性及阳性对照组比较存在差异。ⅠfimA型P.gingivalis刺激细胞共培养模型分泌ET-1和NO情况的总趋势与阴性对照组相似、而ⅣfimA型P.gingivalis的刺激作用总趋势则与阳性对照组相似,ⅣfimA型P.gingivalis较ⅠfimA型P.gingivalis刺激共培养细胞可分泌更多的ET-1、而NO量减少,ⅣfimA型P.gingivalis感染48 h的细胞共培养模型表现出明显的ET-1/NO的失衡。结论 不同fimA型P.gingivalis刺激共培养模型后产生ET-1及NO的情况及ET-1/NO的水平有明显差异,可能与其本身毒力相关,ⅣfimA型P.gingivalis比ⅠfimA型P.gingivalis更易引起内皮功能紊乱。     

不同fimA基因型牙龈卟啉单胞菌刺激口腔上皮细胞白细胞介素-8的表达

目的比较不同fimA基因型牙龈卟啉单胞菌（P.gingivalis）刺激下口腔上皮细胞白细胞介素-8（IL-8）的表达水平,初步探讨P.gingivalis致病性与其fimA基因型的关系。方法P.gingivalis ATCC 33277（Ⅰ型fimA）、W83、47A-1（Ⅳ型fimA）和KB细胞ATCC CCL-17共同孵育24 h,以未受刺激的KB细胞作为对照组,分别在1、3、6、24 h收集细胞和培养上清液。RT-PCR检测KB细胞IL-8 mRNA的动态表达,酶联免疫反应检测培养上清液中IL-8的动态变化。结果2种fimA基因型菌株刺激1 h,KB细胞IL-8 mRNA的表达上调至峰值,高于对照组,3~24 h IL-8 mRNA的表达水平接近对照组;P.gingivalis感染细胞后3~24 h,上清液中的IL-8水平低于对照组,Ⅳ型菌株低于Ⅰ型菌株;IL-8 mRNA及其蛋白表达不完全一致,提示IL-8的表达存在转录后水平的调节。结论fimA基因型与口腔上皮细胞IL-8的表达水平相关,提示P.gingivalis致病性与其fimA基因型相关。     

两种fimA基因型牙龈卟啉单胞菌刺激下口腔上皮细胞ICAM-1的表达

目的比较2种fimA基因型牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis,P．gingivalis）刺激下口腔上皮细胞ICAM-1的表达水平。方法实验组用P．gingivalis ATCC 33277（Ⅰ型菌毛组）,W83（Ⅳ型菌毛组）,47A-1（Ⅳ型菌毛组）分别与KB细胞（ATCC CCL17）共同孵育24h;对照组为未受P.gingivalis刺激的KB细胞。分别在1h、3h、6h和24h收集细胞,运用流式细胞仪检测KB细胞膜上ICAM-1的动态表达。结果P．gingivalis刺激细胞后3h、6h和24h,实验组ICAM-1的表达水平均高于对照组;2种fimA基因型P．gingivalis调节KB细胞表达ICAM-1的方式相似,Ⅳ型菌毛组的调节作用强于Ⅰ型菌毛组。结论P.gingivalis上调口腔上皮细胞表达ICAM-1的水平与其fimA基因型相关,提示P.gingivalis致病性与其fimA基因型相关。     

不同fimA基因型牙龈卟啉单胞菌刺激上皮细胞表达细胞因子的比较

目的比较不同fimA基因型牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis,P.gingivalis）刺激下口腔上皮细胞表达细胞因子的水平。方法P.gingivalis ATCC33277（IfimA）,W83（ⅣfimA）,47A-1（ⅣfimA）分别与KB细胞ATCCCCL17共同孵育6h,在3h和6h收集细胞和培养上清液。逆转录-聚合酶链式反应检测KB细胞IL-8,IL-6,IL-1βmRNA的表达,酶联免疫反应检测培养上清液中IL-8,IL-6,IL-1β的变化。结果3h时,ⅣfimA组IL-6蛋白水平低于IfimA组（P〈0.05）,6h时,ⅣfimA组IL-6和IL-8蛋白水平均低于ⅠfimA组（P〈0.05）;IL-8,IL-6mRNA和蛋白水平表达不一致,提示存在转录后水平的调节。3h,6h时,IL-1β对P.gingvalis刺激不敏感,mRNA和蛋白表达水平都很低。结论P.gingivalis fimA基因型与上皮细胞表达细胞因子的水平相关,提示P.gingivalis致病性与其fimA基因型相关。     

成人牙周健康状况与fimA基因型牙龈卟啉单胞菌的相关性

目的分析不同fimA基因型牙龈卟啉单胞菌（P.gingivalis）在牙周健康人群和慢性牙周炎人群中的分布,探讨不同fimA基因型P.gingivalis与成人牙周状况的相关关系。方法收集牙周健康组（136例）和慢性牙周炎组（115例）的龈下菌斑样本,采用16S rRNA PCR法检测P.gingivalis,并根据各fimA基因型（Ⅰ～Ⅴ和Ⅰb）的特异性引物检测不同fimA基因型P.gingivalis菌株的分布,计算OR值和95%可信区间。结果牙周健康组和慢性牙周炎组龈下菌斑样本中P.gingivalis阳性率分别为22.1%和81.7%,多数样本中只检测到1种fimA基因型。牙周健康组中ⅠfimA型的检出率最高（占66.7%）;慢性牙周炎组中则为ⅡfimA基因型（占43.6%）,其次为Ⅳ和Ⅰb fimA基因型。慢性牙周炎的发生与P.gingivalis的关系密切（OR=16.36）,Ⅰ、Ⅰb、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、ⅤfimA基因型P.gingivalis与慢性牙周炎相关性的OR值分别为0.97、13.26、36.62、4.57、22.86、1.19;ⅡfimA基因型P.gingivalis与慢性牙周炎的相关性最强,其次为Ⅳ和Ⅰb型。结论P.gingivalis菌株的fimA基因型存在差异,特异性fimA基因型P.gingivalis可能与成人慢性牙周炎的发生关系密切。     

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目的研究抗菌肽RISE—AP12对体外培养的牙龈91、啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis,P.g）的抗菌活性。方法本研究于2012年10月至2013年1月在中国医科大学附属口腔医院中心实验室进行。以P．g W83为实验菌株,采用麦氏比浊法配制P.g W83混悬液（10^6 CFU／mL）备用,微量液体稀释法测定抗菌肽RISE—AP12对P．g W83的最小抑菌浓度（minimal inhibitory concentration,MIC）和最小杀菌浓度（minimal bactericidal concentration,MBC）。结果抗菌肽RISE—AP12对10^6 CFU／mL P．g W83的MIC为0．01 mg／mL,MBC为0．02mg／mL。结论抗菌肽RISE—AP12对浮游状态下的P譬有抑菌（MIC为0,01 mg／mL）和杀菌（MBC为0．02 mg／mL）作用。     

P. gingivalis感染对血管内皮细胞VCAM-1表达的影响

目的:观察牙龈卟啉单胞菌(P. gingivalis)ATCC 33277和W83感染对血管内皮细胞血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)转录和翻译的影响.方法:建立体外P. gingivalis感染血管内皮细胞模型,反转录-聚合酶链式反应检测VCAM-1基因表达;蛋白质印迹技术检测VCAM-1膜蛋白表达变化.采用SAS 8.12软件包,多组均数之间的比较采用重复测量资料的方差分析.结果:P. gingivalis感染后4 h即诱导VCAM-1mRNA表达(与对照组比较,P<0.05),8 h达高峰,24 h有持续的高表达;P.gingivalis感染后4 h即诱导VCAM-1蛋白表达(P<0.05),8 h有持续的高表达,24 h表达到达高峰(P<0.05).P.gingivalis W83诱导VCAM-1表达的能力强于ATCC 33277(P<0.05).结论:P.gingivalis感染可引起血管内皮细胞VCAM-1高表达,提示P.gingivalis可能在动脉粥样硬化炎症病理反应中有重要的意义.     

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目的 探讨牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.gingivalis)W83、ATCC33277刺激人牙周膜成纤维细胞(HPDLFs)分泌基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)的变化.方法 本研究于2010年9月至2011年6月在中国医科大学口腔医学院中心实验室进行.将P.gingivalis W83、ATCC33277作用于HPDLFs0、6、12、24、48h后,运用酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞上清液中MMP-1、TIMP-1质量浓度变化,并计算MMP-1/TIMP-1值.结果 P.gingivalis感染HPDLFs的MMP-1和TIMP-1表达均增强,并呈时间依赖性;且MMP-1/TIMP-1值明显高于未感染的对照组(P＜0.05).P.gingivalis W83感染后MMP-1/TIMP-1值明显高于P.gingivalis ATCC33277(P＜ 0.05).结论 P.gingivalis具有促进HPDLFs分泌MMP-1、TIMP-1的作用,且可造成牙周组织破坏;P.gingivalis W83降解细胞外基质的能力高于P.gingivalisATCC33277.     

氯已定在大鼠牙周炎模型建立过程中的抑制作用

目的：探讨不同浓度的氯已定在牙龈卟啉单胞菌 W83（P．gingivalis W83）引起的大鼠牙周炎模型中的抑制作用。方法：采用 P．gingivalis W83灌饲和钢丝结扎牙颈部的方法建立大鼠牙周炎模型,在建立模型的过程中,采用0．05％、0．1％、0．2％和0．5％的氯已定冲洗大鼠牙周袋及口腔黏膜,4周后,绝对实时定量 PCR 检测各组大鼠牙周袋内的 P．gingivalis W83拷贝数,扫描电镜观察各组大鼠牙齿表面的 P．gingivalis W83定植情况。免疫组织化学技术检测大鼠牙龈组织中 TNF-α的表达（P ＜0．05）。结果：0．2％和0．5％的氯已定能够有效减少大鼠牙周袋内及牙齿表面的 P．gingivalis W83数量（P＜0．05）;0．1％～0．5％的氯已定能够减少大鼠牙龈组织中 TNF-α的表达（P ＜0．05）结论：0．1％～0．2％的氯已定能够抑制大鼠慢性牙周炎的进展。     

半导体激光对牙龈卟啉单胞菌抗菌作用实验研究

目的    评价半导体激光照射对牙龈卟啉单胞菌（P. gingivalis）的抗菌作用。方法    研究于2016年3—5月在中国医科大学附属口腔医院中心实验室进行。应用半导体激光对接种在钛片表面的P. gingivalis进行照射,功率参数分别为1.5、2.0、3.0 W,照射时间分别为40 s和80 s,间断照射,照射后通过扫描电镜和平板菌落计数法观察细菌的形态和数量变化。结果    通过激光照射,细菌数量大幅下降,细菌出现溶解、破裂,随着照射功率的增加和照射时间的延长,抗菌作用逐渐增强。结论    半导体激光对P. gingivalis有很好的抗菌作用,增加照射功率和时间有助于抗菌效果增强。     

内毒素耐受对共培养的中性粒细胞和单核细胞分泌TNF-α和IL-8的影响

目的 观察脂多糖（lipopolysaccharides,LPS）诱导的耐受对共培养的中性粒细胞和人单核细胞株THP-1细胞表达抗炎因子肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）和趋化因子白介素-8（Inter leukin-8, IL-8)水平的影响。 方法 采用1 μg/mL牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis, P. gingivalis）LPS 或1 μg /mL大肠杆菌（Escherichia coli,E.coli）LPS分别刺激共培养的中性粒细胞和THP-1细胞24 h,洗脱后,再次刺激24 h,诱导细胞产生耐受。采用ELISA技术检测细胞条件培养液中 TNF-α 和 IL-8 表达水平的变化。 结果 P.gingivalis LPS或E.coli LPS单次刺激后,共培养的中性粒细胞和THP-1细胞分泌TNF-α和IL-8的水平均较刺激前明显增高（P＜0.05）;P.gingivalis LPS和E.coli LPS重复刺激后,共培养的中性粒细胞和THP-1细胞分泌的TNF-α水平较单次刺激后明显降低（P＜0.05）,但IL-8水平较单次刺激后明显增高（P＜0.05）。 结论 共培养的中性粒细胞和单核细胞产生的内毒素耐受可能抑制TNF-α表达,促进IL-8表达,进而可能影响牙周组织的炎症和免疫反应。     

不同fimA型牙龈卟啉单胞菌降解上皮细胞间连接蛋白能力的初步研究

目的:研究不同fimA型牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.g)破坏上皮细胞间连接能力,探讨fimA基因型与致病力差异之间的关系。方法:应用不同fimA型P.g菌株ATCC 33277(Ⅰ型),WCSP115(Ⅱ型),WCSP1.5(Ⅲ型),W83(Ⅳ型),3501(Ⅴ型),4702(Ib型)分别与口腔上皮细胞系KB细胞在标准条件下共同孵育,于孵育后0.5、1和3 h,收集细胞蛋白,应用Westen-blot检测N-钙粘素(N-cadherin)和β-连环素(β-Catenin)的动态表达。结果:与对照组比较,各fimA型P.g对KB细胞N-cadherin和β-Catenin蛋白的表达均有明显的降解作用;其中ⅡfimA型组N-cadherin和β-Catenin蛋白的表达量低于其它fimA型组。结论:P.g可破坏上皮细胞间连接成分,破坏上皮细胞的完整性,而Ⅱ型fimA型P.g水解上皮细胞间粘合连接蛋白的能力强于其它fimA型。提示fimA基因型的不同可能是P.g的致病力差异的基因基础。     

牙龈卟啉单胞菌脂多糖对共培养体系中人脐动脉平滑肌细胞增殖及迁移能力的影响

目的研究Ⅰ、Ⅳ fimA型牙龈卟啉单胞菌脂多糖(Porphyromonas gingivalis lipopolysaccharide,Pg-LPS)对共培养条件下人脐动脉平滑肌细胞(human umbilical artery smooth muscle cell,HUASMC)增殖和迁移能力的影响,探讨牙周炎与动脉粥样硬化(atherosclerosis,As)相关的生物学基础和机制。方法厌氧培养Ⅰ、Ⅳ fimA型Pg,分别提取、纯化并鉴定两型Pg-LPS;体外原代培养人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)和HUASMC,并采用鼠尾Ⅰ型胶原建立HUVEC-HUASMC共培养细胞模型;实验分为T1组(质量浓度为0.5、1.0、2.0、5.0、10.0 mg/L的ⅠfimA型Pg-LPS刺激共培养细胞)和T2组(质量浓度为0.5、1.0、2.0、5.0、10.0 mg/L的ⅣfimA型Pg-LPS刺激共培养细胞),以及阴性对照组(不加LPS组);细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)法检测...     

牙周炎对动脉粥样硬化影响的动物实验研究

目的建立牙周炎和动脉粥样硬化（AS）动物复合模型,探讨牙周炎对AS的影响。方法36只日本大耳白兔随机分为4组,包括单纯牙周炎（CP）组、牙周炎合并AS（CP+AS）组、单纯AS组和对照组,采用结扎结合涂牙龈卟啉单胞菌（P. gingivalis）的方法建立牙周炎动物模型,单侧髂动脉球囊内皮损伤术建立AS模型。建模成功后,采用苏木精-伊红（HE）染色观察样本的组织病理学改变;Elastica van Gieson（EVG）弹力纤维染色进行形态分析,计算髂动脉横断面内膜与中膜面积的比值。采用巢氏聚合酶链反应（PCR）法检测受损动脉壁中P.gingivalis 16S rDNA。酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测系统炎性因子的表达,包括C反应蛋白（CRP）、白细胞介素-6（IL-6）和白细胞介素-1β（IL-1β）。结果CP+AS组的CRP、IL-6及IL-1β表达水平较其他组明显升高（P<0.01）,血管的内膜与中膜面积比均较其余组大（P<0.01）。在CP和CP+AS组的髂动脉中检出有P. gingivalis 16S rDNA存在。结论牙周炎对患AS
的动脉内膜的增厚可能起促进作用,其作用主要通过系统炎性因子的上调和细菌局部感染的作用来实现。     

骨化三醇对牙龈卟啉单胞菌脂多糖诱导的人牙周膜细胞IL-8、IL-6表达的影响研究

目的    观察活性形式的维生素D——骨化三醇（1,25D）对牙龈卟啉单胞菌脂多糖（Pg-LPS）诱导的人牙周膜细胞（hPDLCs）白细胞介素（IL）-8、IL-6表达的影响。方法    取3例患者因正畸需要拔除的前磨牙牙周膜,组织块法原代培养hPDLCs,分别用0.1%无水乙醇（对照组）、10 μg/mL Pg-LPS（单纯Pg-LPS组）、10-10 mol/L 1,25D（低浓度1,25D组）、10-8 mol/L 1,25D（高浓度1,25D组）、10-10mol/L 1,25D+ 10 μg/mL Pg-LPS（低浓度1,25D联合Pg-LPS组）、10-8mol/L 1,25D+ 10 μg/mL Pg-LPS（高浓度1,25D联合Pg-LPS组）处理第5代细胞。24和48 h后收集培养基上清液,酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测hPDLCs IL-8和IL-6的表达水平。结果    （1）10 μg/mL Pg-LPS处理hPDLCs 48 h时,其IL-8表达水平最高,为对照组的38.86倍（P＜0.001）;处理hPDLCs 24 h时,其IL-6表达水平最高,为对照组的 6.19倍（P＜0.001）。（2）1,25D 以剂量和时间依赖方式抑制hPDLCs IL-8的内源性表达。10-8 mol/L 1,25D 处理hPDLCs 48 h时,其IL-8表达水平为对照组的49.94%（P＜0.001）。（3）1,25D 显著抑制Pg-LPS诱导的hPDLCs IL-8和IL-6的表达。处理48 h时,高浓度1,25D联合Pg-LPS组hPDLCs IL-8的表达水平为单纯Pg-LPS组的71.98%（P＜0.001）;处理24 h时,高浓度1,25D联合Pg-LPS组hPDLCs IL-6的表达水平为单纯Pg-LPS组的84.51%（P = 0.003）。结论    1,25D可以抑制hPDLCs IL-8的内源性表达,并抑制Pg-LPS诱导的hPDLCs IL-8和IL-6的表达,从而可能抑制牙周炎症反应。     

牙龈卟啉单胞菌感染对人主动脉内皮细胞炎症反应的影响研究

目的　研究牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis，P.gingivalis）感染对人主动脉内皮细胞（human aortic endothelial cells，HAECs）表达炎症因子的影响并探讨其可能的分子机制。方法　在体外以感染复数（multiplicity of infection，MOI）分别为0、25∶1、100∶1和200：1的P.gingivalis刺激HAECs 24 h后，分别采用实时荧光定量PCR、酶联免疫吸附试验和免疫印迹试验检测单核细胞趋化因子-1（monocyte chemotactic protein 1，MCP-1）、白细胞介素-1β（interleukin 1β，IL-1β）、Toll样受体（Toll like receptor，TLR）-2和TLR-4的表达水平；在体外以MOI分别为0和200∶1的P.gingivalis刺激HAECs 30 min后，采用凝胶迁移实验检测核因子κB（nuclear factor κB，NF-κB）的活化水平。结果　P.gingivalis刺激组（MOI分别为25∶1、100∶1和200∶1）的HAECs中MCP-1、IL-1β、TLR-2和TLR-4的表达均显著高于未刺激组（MOI为0）（均P < 0.05），且提示这种上调作用呈P.gingivalis刺激剂量依赖性；P.gingivalis刺激组（MOI为200∶1）的HAECs中NF-κB活化水平显著高于未刺激组（MOI为0）（P < 0.05）。结论　P.gingivalis可能通过TLRs-NF-κB信号通路上调HAECs中炎症因子的表达，导致血管内皮功能紊乱，提示P. gingivalis可能促进动脉粥样硬化的发生和发展。     

IFN-γ对牙龈卟啉单胞菌内毒素诱导的细胞耐受的影响

目的：观察IFN-γ对牙龈卟啉单胞菌（porphyromonasgin givalis,P．gingivalis）脂多糖（1ipopolysaccharides,LPS）诱导人单核细胞株THP-1细胞耐受后,炎症因子IL-1β和趋化因子IL-8分泌水平的影响。方法：将THP-1细胞用1mg／LIFN-γ预先处理24h,同时采用1mg／L P．gingivalisLPS刺激该细胞24h,洗脱后,采用P．gingivalis LPS再刺激24h,构建内毒素耐受模型。采用大肠杆菌（escherichiacoli,E．coli）LPS作为阳性对照。运用ELISA技术检测细胞条件培养液中IL-1β和IL-8分泌水平的变化。结果：P．gingivalis LPS重复刺激THP-1细胞后,IL-1β分泌水平较第-次刺激后明显降低（P〈0．05）,IL-8分泌水平与第-次刺激后差别不大。经过IFN-γ预先处理的细胞,P．gingivalis LPS重复刺激诱导细胞耐受后,IL-1β分泌水平较无预处理的细胞明显增高（P〈0．05）,IL-8分泌水平无明显变化。结论：IFN-丫能够促进P．gingivalisLPS诱导的耐受细胞分泌IL-1β,进而可能影响牙周组织的炎症和免疫反应。     

不同fimA基因型牙龈卟啉单胞菌刺激牙龈成纤维细胞后单核细胞趋化蛋白1的表达

目的 比较不同fimA基因型牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)刺激下人牙龈成纤维细胞单核细胞趋化蛋白1 mRNA和蛋白的表达水平,比较不同fimA基因型Pg毒力和致病性的差异.方法 Pg ATCC 33277(Ⅰ型,T1组),WCSP115(Ⅱ型,T2组),WCSP1.5(Ⅲ型,T3组),W83(Ⅳ型,T4组)分别与牙龈成纤维细胞在标准条件下共同孵育,对照组加入2 ml达尔伯克氏改良伊格尔培养基,每组3孔.分别于孵育后1、3、6和12 h收集细胞和上清液,应用实时荧光定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和ELISA法分别检测牙龈成纤维细胞单核细胞趋化蛋白1 mRNA和蛋白的动态表达.结果 与对照组比较,各fimA型Pg刺激下牙龈成纤维细胞单核细胞趋化蛋白1 mRNA和蛋白水平的表达量均明显上调(P<0.05);其中T2组Pg的刺激作用强于其他各型,不同时间点单核细胞趋化蛋白1 mRNA相对表达量分别为(25.75±3.12)～(326.69±35.35),蛋白分泌水平为(178.20±46.20)～(443.46±82.19)ng/L;而T3组Pg弱于其他各型,单核细胞趋化蛋白1 mRNA相对表达量为(4.16±0.82)±(94.17±18.56),蛋白分泌水平为(86.95±23.90)～(264.01±28.59)ng/L,差异有统计学意义(P<0.05).结论 Pg可诱导牙龈成纤维细胞mRNA和蛋白水平过表达单核细胞趋化蛋白1,提示fimA基因型的不同可能与Pg的毒力和致病性存在相关性.