黄芪甲苷对人结肠癌SW480细胞系增殖和凋亡的影响

目的 探讨黄芪甲苷对人结直肠癌SW480细胞系增殖和凋亡的影响。方法 药物细胞毒性实验检测黄芪甲苷对SW480细胞存活率的影响，测得IC50为168 μmol/L；以不同浓度黄芪甲苷处理SW480细胞。细胞计数试剂盒检测细胞增殖倍数；蛋白质印迹法检测细胞中Ki67、PCNA、bcl-2、Bax、cleaved caspase-3和cleaved caspase-9的表达水平；Hoechst染色法检测细胞凋亡情况。结果 黄芪甲苷浓度大于20 μmol/L时，细胞存活率明显降低。与对照组相比，黄芪甲苷加药组细胞增殖倍数明显降低，黄芪甲苷低剂量组Ki67的表达量没有显著变化，黄芪甲苷中、高剂量组细胞中Ki67和PCNA的表达量显著降低；黄芪甲苷干预后，凋亡细胞比率显著升高，bcl-2的表达水平显著降低，而bax、cleaved caspase-3和cleaved caspase-9的表达量显著上升；且随着黄芪甲苷浓度的增加，效果越明显。结论 黄芪甲苷能抑制人结肠癌SW480细胞增殖，诱导细胞凋亡。     

香加皮宝藿苷-Ⅰ抑制结肠癌细胞株SW480 和RKO的恶性表型及其作用机制

目的：探讨香加皮宝藿苷-Ⅰ对人结肠癌细胞株SW480 和RKO增殖、侵袭、迁移和凋亡的影响,并对其机制进行初步的探讨。方法：用不同质量浓度（0、5、10、20 μg/ml）的香加皮宝藿苷-Ⅰ溶液分别处理结肠癌细胞株SW480 和RKO,采用MTT法检测细胞的增殖情况,通过细胞克隆形成实验检测细胞克隆形成能力,通过Transwell 方法检测细胞的迁移和侵袭能力,通过流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期。通过Western blotting 检测C-PARP、Bcl-2 与caspase-3 蛋白的表达水平,通过RNA-seq 检测分析香加皮宝藿苷-Ⅰ对SW480 细胞转录组的影响及其可能影响的信号通路。结果：香加皮宝藿苷-Ⅰ能抑制SW480 和RKO细胞的增殖、侵袭和迁移,并且能够诱导细胞凋亡和阻滞于细胞G0/G1期。香加皮宝藿苷-Ⅰ处理可上调SW480 和RKO 细胞株中C-PARP与caspase-3 蛋白的表达水平、下调Bcl-2 蛋白的表达水平;RNA-seq数据分析显示,SW480 细胞DNA复制及ERBB信号通路等相关基因的转录都受到香加皮宝藿苷-Ⅰ的影响。结论：香加皮宝藿苷-Ⅰ通过影响凋亡相关蛋白的表达、细胞DNA复制和ERBB信号通路来诱导细胞凋亡和细胞G0/G1期阻滞,进而抑制人结肠癌细胞株SW480和RKO的恶性表型。     

槲皮素对结肠癌细胞SW480增殖、细胞周期和cyclin B1蛋白表达的影响

背景与目的:探讨槲皮素对人结肠癌细胞SW480增殖、凋亡、细胞周期及CyclinB1蛋白表达的影响,并探讨其抗肿瘤机制.材料与方法:以10、20、40、60、80、160 μmol/L的槲皮素处理SW480细胞,采用MTT比色法、流式细胞技术、Western blot方法分析槲皮素对细胞增殖、凋亡、细胞周期及cyclin B1蛋白表达的影响.结果:与对照组相比,20μmol/L槲皮素可促进SW480细胞增殖(P＜0.05),但40、80、160μmol/L的槲皮素可明显抑制SW480细胞的增殖(P＜0.01),抑制作用呈剂量和时间依赖性.20、40、60、80μmol/L的槲皮素作用SW480细胞48 h,G0/G1期和S期细胞减少,G2/M期细胞显著增多(P＜0.01).80μmol/L的槲皮素作用48 h后细胞凋亡率(13.32±4.62)%,较对照组(2.68±1.04)%显著升高(P＜0.01);40、60、80μmol/L的槲皮素作用SW480细胞48 h后,cyclin B1蛋白表达降低(P＜0.05).结论:槲皮素对结肠癌细胞SW480的增殖有一定的调节作用,低浓度可促进其增殖,而高浓度则可抑制其增殖,其抑制作用机制可能与影响细胞周期分布、诱导细胞调亡、调节cyclin B1蛋白表达有关.     

牛蒡子苷元调控Notch/Hes-1信号通路对口腔鳞状细胞癌HSC-3细胞增殖、凋亡和侵袭的影响

目的：探究牛蒡子苷元（ARC）通过调控Notch/Hes-1信号通路对口腔鳞状细胞癌（OSCC）HSC-3细胞增殖、凋亡和侵袭的影响及其机制。方法：使用不同质量浓度的ARC处理人HSC-3细胞,CCK-8法检测ARC对细胞增殖活力的影响,以选择适宜的药物浓度。将HSC-3细胞分为对照组、ARC-L组（10 mg/L ARC）、ARC-M组（20 mg/L ARC）、ARC-H组（40 mg/L ARC）和ARC-H+Jagged1/FC组（40 mg/L ARC+1.2μg/mL Jagged1/FC）。采用EdU法检测细胞增殖能力,划痕愈合实验、Transwell实验和流式细胞术分别检测细胞的迁移、侵袭能力及细胞周期和细胞凋亡率,WB法检测增殖（c-Myc、cyclin D1）、凋亡（BAX、Bcl-2、survivin）、EMT(E-cadherin、vimentin、Snail)及Notch/Hes-1通路（Notch 1、Hes-1、NICD）相关蛋白的表达水平。结果：与0 mg/L相比,10～80 mg/L的ARC均能显著降低HSC-3细胞增殖活力（均P<0.05）。与...     

甲磺酸阿帕替尼联合放疗协同诱导结直肠癌细胞凋亡的体外研究及机制探讨

摘 要：［目的］ 探究甲磺酸阿帕替尼联合放疗对结直肠癌细胞体外抑制作用。［方法］ 体外培养结直肠癌细胞株HCT116、SW480和HT29，采用MTT法检测HCT116、SW480和HT29细胞株对甲磺酸阿帕替尼的敏感性，以药物敏感性最高的细胞进行后续联合治疗，分为对照组、药物组、放疗组和联合组，应用MTT检测不同处理组细胞的增殖抑制能力，筛选最强联合抑制效果时的药物浓度作为后续试验；Annexin Ⅴ-FITC/PI联合流式细胞术分析不同处理组对HCT116细胞凋亡和细胞周期的影响；ELISA分析不同处理组上清中VEGF分泌水平；Western blot 试验检测VEGFR2、VEGFA、ERK/p-ERK、STAT3/p-STAT3、BAX和BCL2蛋白的表达。［结果］ 甲磺酸阿帕替尼抑制结直肠癌细胞HCT116、SW480和HT29体外增殖且具有剂量依赖性，半数致死浓度(IC50)分别为14.90 μmol/L、25.99 μmol/L和24.19 μmol/L，HCT116细胞药物敏感性显著高于SW480和HT29细胞（P均<0.05），以敏感性最高的HCT116细胞进行不同分组，结果显示甲磺酸阿帕替尼浓度为8 μmol/L时，联合组对比药物组和放疗组显示更强的增殖抑制能力（65.97% vs 25.83% vs 21.97%，P均<0.001）；不同处理组细胞凋亡率有差异（F=237.930，P=0.000），对比药物组（8 μmol/L）和放疗组，联合组细胞凋亡率显著增加［（6.55±0.58）% vs （12.69±0.71）% vs （29.11±2.08）%，P均<0.001］；联合组未能增强阿帕替尼（8 μmol/L）对细胞周期的阻滞（P=0.09）；细胞上清中VEGF分泌水平在4组间无差异（P>0.05），联合组VEGFA蛋白的表达显著下调；但放疗未增加阿帕替尼（8 μmol/L）对VEGFR2的抑制作用；对比药物组（8 μmol/L）和放疗组，联合组增加了促凋亡基因BAX蛋白表达，并抑制抗凋亡基因BCL2蛋白表达，此外联合组处理后p-STAT3蛋白的磷酸化水平显著降低，STAT3和ERK总蛋白水平无改变。［结论］ 甲磺酸阿帕替尼联合放疗可能通过抑制STAT3通路诱导细胞凋亡，从而抑制HCT116细胞的增殖。     

槲皮素抗肿瘤作用与Wnt/β-catenin信号转导关系的研究

目的:探讨槲皮素对人结肠癌细胞SW480增殖的影响及对细胞Wnt/β-catenin信号转导的调控作用。方法:以不同浓度的槲皮素处理SW480细胞,采用MTT比色法分析槲皮素对细胞增殖的抑制作用,利用报告基因方法研究槲皮素对Wnt/β-catenin信号转导的影响,用RT-PCR及蛋白质印迹法观察槲皮素对Wnt/β-catenin信号转导通路的下游关键因子Cyclin D1和Survivin转录水平和蛋白表达水平的影响。结果:(40～160)×10-6mol/L的槲皮素可明显抑制SW480细胞的增殖,P<0.01,抑制作用呈剂量依赖性和时间依赖性;(10～160)×10-6mol/L的槲皮素可明显抑制SW480细胞TCF-4报告基因TOPflash活性,P<0.05,抑制作用呈剂量依赖性。槲皮素可显著下调β-catenin/TCF下游靶基因CyclinD1和Survivin的mRNA表达和蛋白表达水平,呈剂量依赖性。结论:槲皮素可抑制人结肠癌细胞SW480的增殖,其抗肿瘤机制可能与其抑制Wnt/β-catenin信号转导通路有关。     

番茄红素诱导人结肠癌SW480细胞凋亡的作用机制

目的探讨番茄红素诱导人结肠癌SW480细胞凋亡的分子机制。方法体外培养SW480细胞,采用MTT比色实验、流式细胞术、RT-PCR和Westernblot方法,分析番茄红素对SW480细胞的生长增殖作用、对细胞凋亡率的影响及对细胞凋亡相关分子Bcl-2、Bax、Caspase-9和Caspase-3表达的影响。结果MTT法显示,番茄红素能显著抑制SW480细胞的生长增殖能力,且呈一定的量效与时效关系,24 h的半数抑制浓度(IC50)为1.0 μmol/L;流式细胞仪分析表明,番茄红素呈浓度依赖性诱导SW480细胞凋亡;RT-PCR或Western blot分析表明,SW480细胞经不同浓度番茄红素诱导后,与溶媒组相比,Bcl-2表达逐渐减弱,而Bax,Caspase-9和Caspase-3表达逐渐增强,Bcl-2/Bax比值降低。结论番茄红素对SW480细胞的抑制增殖作用,可能与降低Bcl-2/Bax比值、增加Caspase-9和Caspase-3蛋白表达、诱导细胞凋亡有关。     

Genistein联合5-FU对人结肠癌细胞株SW480增殖与凋亡的影响

目的:研究金雀异黄素(genistein)与5-FU对人结肠癌细胞株SW480增殖、凋亡的影响.方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测不同浓度genistein和5-FU单用或联用对结肠癌细胞株SW480的抑制作用;脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡情况,并在透射电镜下观察凋亡细胞超微结构的改变;流式细胞术(FCM)分析药物作用后细胞周期的改变.结果:1)genistein与5-FU单用均能抑制SW480细胞的增殖,存在浓度依赖性和时间依赖性.2)genistein与5-FU联合作用时对抑制SW480细胞增殖有协同相加效应,在两者联合作用48 h,浓度分别为80 μmol/L和30 μg/mL时协同作用最明显(CI=0.51).3)TUNEL技术观察到genistein与5-FU单用或双用均可引起SW480细胞凋亡,且以双药效果为著.4)电镜观察到凋亡细胞核电子密度增加,核碎裂,可见凋亡小体,以双药联用最为显著.5)FCM分析SW480细胞经genistein处理后细胞生长阻断于G2期,与5-FU作用机制不同.结论:genistein可通过诱导细胞凋亡协同5-FU对大肠癌细胞株SW480的杀伤作用,为提高化疗药对结肠癌的治疗疗效提供新思路.     

TRPV5 TRPV6对结肠癌SW480细胞生物学行为的影响

  目的  观察TRPV5和TRPV6蛋白表达水平对结肠癌SW480细胞内Ca2+水平及细胞增殖、凋亡、迁移等生物学行为的影响。  方法  给予TRPV5、TRPV6通道激动剂1-25（OH）₂D₃及抑制剂CuCl₂作用结肠癌SW480细胞后,采用免疫组织化学法、Western blot及实时荧光定量PCR技术检测TRPV5、TRPV6蛋白及TRPV5、TRPV6 mRNA表达的变化。使用高速离子成像系统观察结肠癌SW480细胞内Ca2+水平的变化;通过MTT法、TUNEL法及划痕修复法观察结肠癌SW480细胞增殖凋亡及迁移的变化。  结果  1-25（OH）₂D₃明显上调结肠癌SW480细胞TRPV5、TRPV6 mRNA及蛋白表达水平,使结肠癌SW480细胞内Ca2+水平增加,促进结肠癌SW480细胞增殖、迁移及抑制其凋亡（P＜0.05）。CuCl₂明显下调结肠癌SW480细胞中TRPV5、TRPV6蛋白及mRNA表达,使结肠癌SW480细胞内Ca2+水平降低（P＜0.05）,抑制结肠癌SW480细胞的增殖、迁移及促进细胞的凋亡（P＜0.05）。  结论  结肠癌SW480细胞中TRPV5和TRPV6蛋白表达水平的变化,能通过调控细胞内Ca2+水平影响细胞的增殖、迁移和凋亡等生物学行为。      

姜黄素诱导人结肠癌细胞株SW480凋亡及其bcl-2表达相关性研究

目的探讨姜黄素对人结肠癌细胞株SW480诱导凋亡的影响及其作用机制。方法5～50μM姜黄素分别处理SW480细胞6～48h后,MTT法检测细胞的生长活性,流式细胞仪检测细胞周期,TUNEL法检测细胞凋亡,免疫组化法检测细胞内bcl2蛋白表达水平。结果MTT显示姜黄素对SW480细胞具有细胞毒作用,呈时间浓度依赖性。FCM结果显示细胞周期中G0/G1期细胞比例增加,S期、G2/M期比例下降。TUNEL法显示凋亡细胞数增加,免疫组化结果显示bcl2基因表达明显减弱。结论姜黄素能抑制结肠癌SW480细胞的增殖并诱导细胞凋亡。其机制可能与干扰细胞周期及下调bcl2基因表达有关。     

miR-340通过下调 CCND1 表达增加结直肠癌细胞对5-Fu的耐药

目的:探讨细胞周期蛋白D1(cyclin D1)的编码基因CCND1 miR-340介导的逆转结直肠癌细胞对5-氟尿嘧啶(5-Fu)耐药的机制.方法:采用瞬时转染技术将结直肠癌细胞HCT116、SW480株分别转染si-CCND1和miR340-mimic.应用MTT法检测转染后的结直肠癌细胞对5-Fu敏感性的变化,应用双荧光素酶试验验证CCND1对miR340参与的影响结直肠癌细胞对5-Fu敏感性的影响.结果:瞬时转染siCCND1和过表达miR-340后,结直肠癌HCT116和SW480细胞的IC50值均显著低于对照组(10,10 vs 20 μmol/L和20,20 vs 40 μmol/L,均P＜0.05).共转染CCND1 3'UTR野生质粒和miR-340 inhibitor的结直肠癌HCT116和SW48细胞荧光素酶的活性显著高于共转染空载体和mimic细胞(P＜0.01).结论:CCND1作为不良因子通过抑制miR340的表达进而发挥增加结直肠癌细胞对5-Fu耐药的作用.     

阿托伐他汀调控上皮间质转化抑制结肠癌细胞生长的机制研究

目的:探讨阿托伐他汀调控上皮间质转化（EMT）对人结肠癌SW480细胞侵袭和迁移的影响。方法:0.1、1、10、100 μmol/L的阿托伐他汀处理SW480细胞24 h、48 h和72 h,MTT检测细胞活力。100 μmol/L的阿托伐他汀处理细胞48 h,Transwell小室检测细胞侵袭能力及迁移能力,Western blotting检测EMT相关蛋白E-cadherin、β-catenin和Twist及PI3K/AKT信号通路PI3K、AKT和p-AKT蛋白表达。结果:随着阿托伐他汀浓度升高,作用时间延长,对SW480细胞活力抑制越明显,各浓度阿托伐他汀组与对照组比较差异具有统计学意义（P<0.05）,同一实验组不同时间点间比较差异具有统计学意义（P<0.05）。与对照组比较,阿托伐他汀组细胞侵袭及迁移能力均明显降低,E-cadherin蛋白表达明显升高,β-catenin、Twist、PI3K和p-AKT蛋白表达明显降低（P<0.05）。结论:阿托伐他汀可抑制结肠癌细胞的侵袭和迁移能力,机制可能与抑制EMT及PI3K/AKT信号通路有关。     

DCLK1 对结直肠癌细胞化疗敏感性的影响及机制

目的:探讨双肾上腺皮质激素样激酶1（DCLK1）对结直肠癌耐药细胞化疗敏感性的影响及机制。方法:采用实时定量PCR和Western blot方法检测人结直肠癌细胞系HT29、SW480及其奥沙利铂（OXA）耐药株HT29/OXA和SW480/OXA中DCLK1的表达。采用siRNA干扰HT29/OXA和SW480/OXA细胞中DCLK1的表达,并用不同浓度OXA干预细胞,CCK-8法检测细胞增殖及其对OXA的敏感性,Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡,Caspase-3活性检测试剂盒检测细胞的Caspase-3活性,Western blot检测细胞中DCLK1、Bax、Bcl-2、多药耐药蛋白1（MDR1）、P-糖蛋白（P-gp）等蛋白的表达。结果:与亲本细胞系比较,DCLK1在HT29/OXA和SW480/OXA细胞中的mRNA和蛋白表达水平均显著上调（P<0.05）。转染DCLK1 siRNA（si-DCLK1）后,HT29/OXA和SW480/OXA细胞的增殖活性均显著降低（P<0.05）,且它们对OXA的敏感性显著增加（P<0.05）;转染si-DCLK1后,HT29/OXA和SW480/OXA细胞的凋亡显著增加（P<0.05）,伴随Caspase-3活性上调（P<0.05）,Bax蛋白表达上调（P<0.05）,Bcl-2蛋白表达下调（P<0.05）;转染si-DCLK1后,HT29/OXA和SW480/OXA细胞中MDR1和P-gp的蛋白表达均显著下调（P<0.05）。结论:DCLK1可能通过调控Bax/Bcl-2以及MDR1和P-gp的表达影响结直肠癌细胞的化疗敏感性。     

CDX1对结直肠癌细胞增殖凋亡及p38MAPK磷酸化水平的影响

目的:探讨尾侧同源盒转录因子1（CDX1）对结直肠癌细胞增殖凋亡及p38MAPK磷酸化水平的影响。方法:用荧光定量PCR和Western blot检测正常肠上皮细胞FHC和结直肠癌细胞SW480、HCT116、Caco2中CDX1 mRNA和蛋白表达水平。在SW480细胞中转染pIRES-CDX1和pIRES记为CDX1组和载体组,以不做转染的细胞为对照组,荧光定量PCR和Western blot测定CDX1 mRNA和蛋白表达水平,MTT检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot测定细胞中活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（Cleaved Caspase-3）、B细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2）、信号转导与转录因子3(STAT3)、磷酸化的STAT3（p-STAT3）、p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）、磷酸化的p38MAPK（p-p38MAPK）蛋白水平。结果:结直肠癌细胞SW480、HCT116、Caco2中CDX1 mRNA和蛋白表达水平均明显低于正常肠上皮细胞FHC（P<0.05）,SW480细胞中CDX1 mRNA和蛋白表达水平明显低于HCT116、Caco2（P<0.05）。CDX1组细胞中CDX1 mRNA和蛋白水平明显高于对照组（P<0.05）,载体组细胞中CDX1 mRNA和蛋白水平与对照组相比没有统计学差异（P>0.05）。CDX1组细胞存活率明显降低,细胞凋亡率明显升高,细胞中Cleaved Caspase-3、p-p38MAPK水平升高,细胞中Bcl-2、p-STAT3水平降低,与对照组相比差异具有统计学意义（P<0.05）。载体组细胞存活率、凋亡率及细胞中Cleaved Caspase-3、Bcl-2、STAT3、p-STAT3、p38MAPK、p-p38MAPK蛋白水平与对照组相比没有明显变化（P>0.05）。结论:CDX1抑制结直肠癌细胞增殖,诱导Caspase-3介导的细胞凋亡,促进细胞中p38MAPK磷酸化,抑制细胞中STAT3磷酸化。     

GNA对人宫颈癌细胞增殖抑制、凋亡、迁移及细胞周期分布的影响

目的:研究新藤黄酸（gambogic acid,GNA）对人宫颈癌细胞的增殖抑制、凋亡、迁移以及细胞周期分布的影响。方法:将人宫颈癌Hela细胞分为空白对照组、25 μmol/L浓度组、50 μmol/L浓度组和100 μmol/L浓度组,进行细胞培养后采用MTT法和流式细胞术检测细胞24 h、48 h和72 h时间段的增殖抑制和凋亡情况,Transwell实验检测细胞迁移情况,流式细胞仪检测细胞周期分布,Western blot检测Bcl-2、Bax、E-cadherin和NF-κB蛋白相对表达量。结果:25 μmol/L浓度组、50 μmol/L浓度组和100 μmol/L浓度组对宫颈癌细胞的抑制增殖率在不同时间段均显著高于空白对照组,增殖抑制率随着浓度和时间的增加而升高（P＜0.05）;25 μmol/L浓度组、50 μmol/L浓度组和100 μmol/L浓度组宫颈癌细胞凋亡率在各时间段均显著高于空白对照组,凋亡率随着浓度和时间的增加而升高（P＜0.05）;25 μmol/L浓度组、50 μmol/L浓度组和100 μmol/L浓度组宫颈癌细胞的细胞迁移数量相比对照组均显著减少,细胞迁移数量随着浓度的增加而减少（P＜0.05）;GNA浓度越高,处于G0/G1期的细胞比例越高,处于G2/M和S期的细胞比例越低;25 μmol/L浓度组、50 μmol/L浓度组和100 μmol/L浓度组Bcl-2、NF-κB均低于空白对照组（P＜0.05）;25 μmol/L浓度组、50 μmol/L浓度组和100 μmol/L浓度组Bax、E-cadherin表达均高于空白对照组。结论:GNA能够促进宫颈癌细胞的凋亡,抑制细胞的增殖和迁移能力,通过改变癌细胞的周期分布降低癌细胞的增长,其能力呈现浓度依赖性。     

沉默ACY-1基因表达对结直肠癌细胞增殖、凋亡及侵袭的影响

目的:初步探索氨基酰化酶1（ACY-1）与结直肠癌SW480细胞增殖、凋亡、侵袭的关系以及作用机制。方法:小干扰RNA（siRNA）技术沉默结直肠癌细胞中ACY-1基因的表达,转染至SW480细胞中,分为对照组、si-NC组、si-ACY-1组,荧光实时定量PCR（qRT-PCR）和免疫印迹试验（Western Blot）检测转染效果;用四甲基偶氮唑盐微量（MTT）实验检测干扰ACY-1基因表达对细胞增殖的影响,流式细胞术检测细胞的凋亡率,Transwell法检测细胞的侵袭,Western Blot检测Ki-67、Caspase-3、β-连环蛋白（β-catenin）、c-Myc、细胞周期蛋白D1（Cyclin D1）的蛋白水平。结果:Western Blot检测结果显示si-ACY-1组细胞中ACY-1蛋白的表达量显著低于对照组（P<0.05）。干扰ACY-1表达显著抑制细胞的增殖（P<0.05）和Ki-67蛋白水平,促进其凋亡（P<0.05）,增加Caspase-3蛋白水平,降低细胞的侵袭能力（P<0.05）。si-ACY-1组细胞中β-catenin、c-Myc、Cyclin D1的蛋白水平显著降低（P<0.05）。结论:沉默ACY-1抑制结直肠癌细胞的增殖、侵袭,诱导其凋亡,其作用与Wnt/β-catenin信号通路及其下游靶基因的激活有关,为结直肠癌的治疗提供新的治疗靶点。     

香加皮杠柳苷对结肠癌细胞SW480体内外生长的影响

背景与目的： 观察香加皮杠柳苷(periplocin extracted from cortex periplocae, CPP)对人结肠癌细胞SW480体内外生长的抑制作用。 材料与方法： 应用MTT法检测CPP不同浓度(0.125、0.25、0.5、1.0、2.0 μg/ml)处理SW480细胞后,对细胞增殖的影响;并于CPP (0.5 μg/ml)处理SW480细胞24 h 后用光学显微镜及透射电镜观察细胞凋亡形态学变化;免疫细胞化学检测细胞Survivin蛋白表达变化。采用裸鼠移植瘤模型进行体内移植瘤抑制实验。以上各实验均设立对照组。 结果： 与对照组比较,CPP对SW480细胞增殖具有明显的抑制作用(P<0.01),并呈剂量和时间依赖效应;CPP 处理SW480细胞后,细胞出现典型的细胞凋亡形态学改变;CPP可明显下调SW480细胞survivin蛋白表达阳性率和表达水平(P<0.01);以30 mg/kg CPP对SW480细胞裸鼠移植瘤进行治疗后,荷瘤小鼠的肿瘤重量和体积均被明显抑制,抑瘤率为61.41％(P<0.01)。CPP治疗组小鼠的移植瘤组织出现明显炎性细胞浸润和坏死性变化。 结论： CPP对人结肠癌细胞SW480的体内外生长均具有明显抑制作用,其作用机制可能与抑制细胞survivin蛋白表达、诱导细胞凋亡有关。     

姜黄素对人甲状腺癌B-CPAP细胞生物学行为的影响

目的:探讨姜黄素对人甲状腺癌B-CPAP细胞生长、凋亡的影响及可能的作用机制。方法:采用含有不同浓度（10 μmol/L、20 μmol/L、40 μmol/L）姜黄素的培养基培养人甲状腺癌B-CPAP细胞12 h、24 h、36 h、48 h、72 h、96 h，应用MTT实验观察姜黄素对B-CPAP细胞生长的影响；采用含有不同浓度姜黄素的培养基培养人甲状腺癌B-CPAP细胞36 h、48 h、72 h、96 h，应用Annexin V/PI染色评价姜黄素诱导B-CPAP细胞凋亡的作用；应用蛋白印迹法检测姜黄素对ERK通路、Bax、Bcl-2表达的影响。结果:浓度为10 μmol/L、20 μmol/L、40 μmol/L的姜黄素培养甲状腺癌B-CPAP细胞，随着培养时间延长，各浓度下细胞生长抑制率、细胞凋亡率均逐渐增高（P＜0.05）；且随着浓度增加，相同时间点的细胞生长抑制率、细胞凋亡率亦逐渐增高（P＜0.05）。与空白组比较，姜黄素培养72 h后，B-CPAP细胞的H-Ras、p-Raf-B、p-ERK1/2、Bcl-2蛋白表达水平明显降低（P＜0.05），Bax蛋白表达水平水平明显升高（P＜0.05）。结论:姜黄素能够抑制人甲状腺癌B-CPAP细胞生长，诱导细胞凋亡，其机制可能与抑制H-Ras蛋白、ERK信号通路蛋白表达及上调Bax表达、下调Bcl-2表达有关。     

紫甘蓝提取物对X线照射后舌癌细胞双向作用的实验研究

目的:探讨紫甘蓝提取物（purple cabbage extract,PCE）对X线照射后舌癌细胞的双向作用。方法:将对数生长期的人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞及人正常口腔黏膜HOK细胞分为Tca8113细胞对照组（Tca CON）、Tca8113细胞10 μmol/L PCE组（Tca PCE-10 μmol/L）、Tca8113细胞50 μmol/L PCE组（Tca PCE-50 μmol/L）、Tca8113细胞照射组（Tca IR）、Tca8113细胞照射加10 μmol/L PCE组（Tca IR+PCE-10 μmol/L）、Tca8113细胞照射加50 μmol/L PCE组（Tca IR+PCE-50 μmol/L）及HOK细胞对照组（HOK CON）、HOK细胞10 μmol/L PCE组（HOK PCE-10 μmol/L）、HOK细胞50 μmol/L PCE组（HOK PCE-50 μmol/L）、HOK细胞照射组（HOK IR）、HOK细胞照射加10 μmol/L PCE组（HOK IR+PCE-10 μmol/L）、HOK细胞照射加50 μmol/L PCE组（HOK IR+PCE-50 μmol/L）。MTT实验检测加入不同浓度PCE对舌癌细胞Tca8113及正常口腔黏膜HOK细胞增殖的影响;流式细胞术检测6 MeV X 线直线加速器照射后（6 Gy）PCE对Tca8113及HOK细胞凋亡的影响;qRT-PCR实验检测在加入不同浓度PCE作用下对照射后Caspase 3及Caspase 9表达的影响。结果:MTT结果显示,PCE可明显抑制Tca8113细胞的增殖,其增殖抑制率随药物浓度的增加而升高,PCE对正常口腔黏膜HOK细胞增殖无明显的抑制率。流式细胞术结果显示,对于Tca8113细胞,PCE显著提高了照射后Tca8113细胞凋亡率（P＜0.05）;但对于HOK细胞,PCE显著降低了照射后HOK细胞凋亡率（P＜0.05）。qRT-PCR结果显示,对于Tca8113细胞,照射给药组（加10 μmol/L PCE组、加50 μmol/L PCE组）Caspase 3及Caspase 9的表达较单纯照射组明显上调（P＜0.05）;对于HOK细胞,照射给药组（加10 μmol/L PCE组、加50 μmol/L PCE组）Caspase 3及Caspase 9的表达较单纯照射组明显下调（P＜0.05）。结论:PCE通过调节凋亡通路对舌癌Tca8113细胞起到放射增敏的作用,对正常口腔黏膜细胞起到放射防护作用,即PCE对X线照射后舌癌细胞起到双向作用。