LncRNA-AK058003在缺氧诱导胃癌侵袭转移中的作用

目的:探讨lncRNA-AK058003在缺氧诱导胃癌侵袭和转移中的作用。方法:SGC7901、MKN45、MKN28三个胃癌细胞系,分别经常氧/缺氧孵育24h后,Trizol法提取3例配对的胃癌细胞总RNA,利用高通量lncRNA芯片比较它们之间的表达谱差异。通过差异倍数、邻近编码基因信息分析、长度特征分析等策略初步筛选与缺氧诱导胃癌侵袭转移相关的关键分子。RT-PCR法检测lncRNA-AK058003在缺氧诱导的胃癌细胞中相对于常氧条件下的表达水平,进一步检测其在20例胃癌临床标本中相对于癌旁组织的表达水平。构建小干扰RNA慢病毒,稳定下调AK058003在SGC7901及MKN45中的表达。Transwell、划痕实验、裸鼠尾静脉注入不同胃癌细胞等体外和体内实验检测抑制AK058003后对常氧和缺氧条件下胃癌侵袭转移的影响。结果:高通量lncRNA 芯片比较发现:缺氧诱导的胃癌细胞SGC7901、MKN45和MKN28与常氧条件下的细胞相比,有84个分子的表达在缺氧诱导的胃癌细胞中显著上调(P<0.05),其中差异倍数在3倍以上的共有5个。多重筛选策略提示AK058003可能是缺氧诱导胃癌侵袭转移的关键lncRNA分子之一。RT-PCR结果显示: AK058003在缺氧诱导的胃癌细胞中显著上调,其分别在SGC7901缺氧16h,MKN45缺氧24h,MKN28缺氧48h时达到峰值。进一步RT-PCR结果发现,AK058003在胃癌组织中的表达水平显著高于癌旁组织。缺氧条件下的Transwell实验结果显示缺氧能够显著增加SGC7901和MKN45的侵袭转移力,而抑制AK058003的表达后,胃癌细胞侵袭转移力明显下降。结论:通过高通量 lncRNA芯片比较,首次发现了一系列胃癌细胞中缺氧相关的lncRNAs 分子。通过临床标本验证以及功能缺失试验证实lnc-AK058003是系列分子中影响缺氧诱导胃癌侵袭转移的关键lncRNAs分子之一。     

LncRNA在缺氧诱导的胃癌细胞中表达谱的变化

目的:观察长链非编码RNA(lncRNA)在常氧条件下的胃癌细胞及缺氧诱导的胃癌细胞中表达谱的变化。方法:利用lncRNA芯片技术检测常氧条件下的胃癌细胞,缺氧诱导的胃癌细胞中lncRNA表达谱的变异,经对原始数据进行预处理达到均一化后,筛选出差异表达lncRNA,进行分析。结果:与常氧条件下的胃癌细胞相比较,缺氧诱导胃癌细胞中1.5倍以上变化并有显著差异(P<0.05)的lncRNA,确定为差异表达lncRNA。其中在三种胃癌细胞中的变化均在1.5倍以上的共254条,占所有lncRNA的3.6%;大于1.5倍上调的共136条,1.5倍以上降低的共118条;2倍以上上调的共30条;2倍以上降低的共25条;3倍以上升高的共5条;3倍以上降低的共5条。结论:缺氧诱导的胃癌细胞与常氧的胃癌细胞比较,lncRNA表达谱发生显著变化。提示差异性表达的lncRNAs可能参与了缺氧环境下胃癌细胞多种恶性表型的变化。     

LncRNA-MALAT1在缺氧诱导胃癌侵袭转移中的作用

目的:探讨LncRNA-MALAT1对缺氧诱导胃癌侵袭转移的影响。方法:RT-PCR检测胃癌组织标本和胃癌细胞株中MALAT1的表达;通过基因重组方法构建MALAT1的siRNA载体,并感染人SGC7901及MKN45胃癌细胞,RT-PCR验证siRNA干扰有效;Transwell实验研究其对胃癌细胞SGC7901及MKN45侵袭转移能力的影响。结果:MALAT1在胃癌组织和胃癌细胞株中的表达高于癌旁组织和胃正常上皮细胞;缺氧能够促进SGC7901及MKN45细胞的侵袭转移能力,而下调MALAT1能够明显抑制缺氧条件下SGC7901及MKN45细胞的侵袭转移能力。结论:MALAT1在促进胃癌细胞的侵袭转移中发挥重要作用,为胃癌靶向治疗提供理论依据。     

LncRNA在胃癌中的作用及机制研究进展

胃癌（gastric cancer,GC）是我国最常见的恶性肿瘤之一,进展期胃癌的侵袭转移是其预后效果不好、长期存活率极低的重要原因。胃癌是由环境、遗传等多因素引起的复杂疾病,基因突变、表观遗传学改变以及细胞生长信号通路的异常调控等都与胃癌的发生发展有关。目前大量研究表明,非编码长链RNA（lncRNA）的异常表达在胃癌的发生以及侵袭转移过程中起着重要作用。本文对lncRNA在胃癌侵袭转移中的机制、应用及目前研究进展进行了综述,希望为寻找新的胃癌预后监测及靶向治疗的分子标志物提供理论基础。     

缺氧在诱导胃癌细胞上皮间质转化及侵袭中的作用

目的:研究常氧及缺氧对胃癌细胞侵袭性的影响以及上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transi-tion,EMT)在其中起的作用。方法:常氧条件下常规培养胃癌细胞SGC7901;缺氧条件下用二氧化碳/氧气/氮气三气培养箱培养胃癌细胞SGC7901 24h。分别用蛋白质免疫印迹(Western blot)和实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)法在蛋白水平和mRNA水平测定与EMT有关的指标E-cadherin及β-catenin的表达,以明确缺氧诱导胃癌细胞EMT的能力。同时以Transwell侵袭实验验证EMT对胃癌细胞侵袭性的作用。结果:缺氧条件下刺激胃癌细胞24h后,细胞发生EMT,其中无论是在蛋白水平还是mRNA水平,E-cadherin表达下降,而β-catenin表达升高;Transwell侵袭实验也证实胃癌细胞接受缺氧刺激后其侵袭能力明显增强。结论:缺氧有增加胃癌细胞侵袭的作用,该作用机制可能与胃癌细胞的EMT改变有关。     

LncRNA在肿瘤侵袭转移中的研究进展与临床展望

肿瘤转移是影响肿瘤患者预后的重要因素,但其作用机制复杂,涉及多个生物学过程。长链非编码RNA(Lnc RNA)作为人类基因组重要的调控分子,可以通过多种作用机制在肿瘤的转移过程中发挥重要的调控功能。并且Lnc RNA的异常表达与肿瘤患者临床因素密切相关,有望成为新型肿瘤标志物在临床治疗中发挥重要的作用。文章主要综述Lnc RNA在肿瘤转移中的分子作用机制及相关临床应用。     

长链非编码RNA在胃癌中的作用机制

长链非编码RNA(long chain non-coding RNA,lncRNA)的表达具有组织特异性和时空特异性,许多lncRNA具有保守的二级结构,提示lncRNAs具有重要的生物学功能.近些年来研究发现,超过80％的肿瘤相关单核苷酸多态性位点在基因组的非编码区域,lncRNA具有功能蛋白质的信号、引导、诱饵或支架分子等多种功能.目前在胃癌组织中发现了较多的基因在肿瘤发生、发展、转移及预后中起到了重要的作用,但仍有许多的lncRNA功能并不清楚,需要大量的研究来探明其结构、作用方式、机制及对胃癌的作用和影响.而在lncRNA中去发现胃癌有效的肿瘤标志物及治疗靶点将是今后研究的热点,同时lncRNA具有直接、特定的调节功能,也极有可能成为胃癌的肿瘤标志物和治疗靶点.     

lncRNA在食管鳞癌转移中的作用及机制

食管鳞状细胞癌(ESCC)具有高度侵袭性和转移性,早期易发生转移,预后差,是世界范围内常见的癌症之一。长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)作为转录调控因子,可以调控多种基因组过程和细胞过程,如细胞增殖、迁移和侵袭等。lncRNA也被证明参与调节与肿瘤转移相关的信号通路。已有大量研究试图揭示lncRNA在食管癌发生和转移中的重要作用。本文着重强调lncRNA在表观遗传学、基因表达水平以及作为竞争性内源性RNA途径的作用,综述lncRNA在ESCC转移中的研究进展,对于ESCC患者的预后监测和靶向治疗具有重要意义。     

lncRNA SNHG5在缺氧诱导肝细胞癌细胞侵袭及迁移中的作用

目的：探讨长链非编码RNA（long non-coding RNA, lncRNA）SNHG5在缺氧诱导肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）细胞侵袭及迁移中的作用。方法：收集2017年1月至2018年6月西安交通大学第一附属医院手术切除的20例HCC患者的癌与癌旁组织标本,以及人HCC细胞系HepG2、MHCC-97L、MHCC-97H、Huh7和永生化人肝细胞LO2。利用生物信息学方法分析缺氧诱导因子1α（hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α）与SNHG5的结合位点,将pCMV-HIF-1α、shRNA-SNHG5（sh-SNHG5）质粒转染进HCC细胞,用qPCR法检测HCC组织和缺氧条件下HCC细胞中SNHG5的表达水平,用Western botting检测HCC细胞中HIF-1α蛋白的表达水平,用Transwell小室法检测沉默SNHG5后常氧和缺氧条件下对HCC细胞侵袭及迁移能力的影响。结果：分别与癌旁组织和LO2细胞比较,HCC组织和各细胞系中SNHG5表达水平显著上调（均P<0.01）。缺氧可上调HCC细胞中SNHG5的表达水平,其机制可能与缺氧活化HIF-1α 与 SNHG5 启动子结合从而促进其转录有关 ;缺氧能够增强 HepG2和 MHCC-97L 细胞的侵袭及迁移能力（均P<0.01）,沉默SNHG5表达能够显著抑制缺氧条件下HepG2和MHCC-97L细胞的侵袭及迁移能力（均 P<0.01）。结论：SNHG5在HCC组织及细胞系中高表达,并在缺氧诱导的HCC细胞侵袭及迁移中发挥重要作用。     

长链非编码RNA在胃癌中的研究进展

胃癌的发生涉及多步骤、多基因的相互作用等复杂过程。长链非编码RNA（long non-coding RNA,lncRNA）是一类长度超过200个核苷酸的无蛋白质编码功能却被证明具有广泛的基因表达调控作用的RNA分子。许多研究已经证实,lncRNA在多种类型肿瘤中存在异常表达,且在肿瘤发生、发展的过程中具有重要的作用。目前,研究证实lncRNA 在胃癌中异常表达,发挥潜在的促癌和抑癌的作用。本文就在胃癌中lncRNA表达的最新研究进展作一综述。     

谷氨酸在调控胃癌细胞侵袭转移中的作用

目的:探讨谷氨酸受体NR1亚基在胃癌中的表达及谷氨酸对胃癌侵袭转移的调控作用。方法:运用Real-time PCR方法检测人胃癌高低转移细胞系中NR1亚基的表达情况;体外侵袭实验检测谷氨酸对胃癌细胞侵袭能力的影响及N-甲基-D-天冬氨酸受体（NMDA）的特异性阻断剂对胃癌细胞侵袭能力的阻断作用;全细胞膜片钳技术检测胃癌细胞上的谷氨酸受体诱发电流。结果:人胃癌细胞可表达NR1亚基,且NR1亚基在胃癌高转移细胞系中的表达量高于其在低转移细胞系中的表达量（P<0.05）;谷氨酸可增强胃癌细胞的侵袭能力,而阻断剂MK801可降低胃癌细胞的侵袭能力（P<0.05）;谷氨酸刺激后,胃癌细胞可产生谷氨酸受体诱发电流,MK801可部分有效阻断谷氨酸受体诱发电流。结论:谷氨酸受体NR1亚基在胃癌细胞中表达明显升高,谷氨酸与其结合可促进胃癌侵袭转移的发生,而特异性受体阻断剂可部分阻断其作用。     

膜联蛋白Ⅱ在胃癌组织中的表达及其在胃癌转移中的作用

目的：探讨膜联蛋白Ⅱ（AnnexinⅡ）在胃癌组织中的表达及其在胃癌转移中的作用。方法采用免疫组织化学法检测AnnexinⅡ在51例胃癌组织和24例癌旁组织中的表达,并统计AnnexinⅡ阳性表达与胃癌患者临床特征的关系。用AnnexinⅡ特异性siRNA在胃癌HGC-27细胞抑制AnnexinⅡ的表达,应用黏附实验、侵袭实验检测抑制AnnexinⅡ表达后对胃癌细胞的黏附、侵袭能力的影响。结果 AnnexinⅡ蛋白在胃癌组织中阳性率为82.4%,在癌旁组织中阳性率为37.5%,两组比较差异有统计学意义（P﹤0.01）;并且AnnexinⅡ阳性表达与患者的性别与年龄无关（P﹥0.05）,而与肿瘤大小、组织分化程度、临床分期、淋巴结转移临床特征有关,差异具有统计学意义（P﹤0.05）。在胃癌HGC-27细胞转染AnnexinⅡsiRNA后,细胞中AnnexinⅡ的蛋白和mRNA水平均下降,差异有统计学意义（P﹤0.05）。并且抑制AnnexinⅡ表达后,胃癌HGC-27细胞的黏附、侵袭能力下降,差异有统计学意义（P﹤0.05）。结论 AnnexinⅡ在胃癌组织中高表达,AnnexinⅡ蛋白表达与肿瘤大小、组织分化程度、临床分期、淋巴结转移临床特征有关,并且AnnexinⅡ高表达可促进胃癌转移。因此,AnnexinⅡ可以作为抑制胃癌转移的潜在靶点,开发靶向AnnexinⅡ的药物可能成为治疗胃癌转移的新方法。     

miR-340与远端胃癌淋巴结转移的相关性及其对胃癌细胞迁移、侵袭的影响北大核心

目的:分析miR-340与远端胃癌患者淋巴结转移的相关性及其对胃癌细胞迁移、侵袭的影响。方法:采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测远端胃癌组织及胃癌细胞系中miR-340的水平,分析miR-340与胃癌患者临床病理特征的相关性,应用受试者工作特征(ROC)曲线及Logistic回归分析探讨miR-340诊断淋巴结转移的性能;通过转染miR-340模拟物(mimic)上调胃癌细胞HGC-27和MGC-803中miR-340的表达,划痕实验和Transwell实验检测miR-340对胃癌细胞迁移、侵袭的影响。结果:miR-340在远端胃癌组织中低表达,且与淋巴结转移、浸润深度、分化程度及TNM分期相关(P<0.05)。miR-340诊断胃癌淋巴结转移的曲线下面积(AUC)为0.737,敏感性为76.32%,特异性为79.41%。低水平miR-340是胃癌淋巴结转移的独立危险因素。与正常胃黏膜上皮细胞相比,胃癌细胞中miR-340的表达水平下调。上调miR-340的表达能够抑制胃癌细胞的迁移、侵袭。结论:miR-340在胃癌组织和细胞中表达下调,能够调控胃癌细胞的迁移、侵袭,与淋巴结转移密切相关。     

MEMO1共结合IGF-IR介导胃癌细胞侵袭转移

目的:探讨MEMO1（mediator of ErbB2-driven cell motility 1）调控IGF-IR（insulin-like growth factor-I receptor）介导胃癌侵袭转移的分子机制,为临床治疗提供潜在靶点。方法:选取五种不同分化程度胃癌细胞系（MKN-7、NCI-N87、MGC-803、BGC-823、MKN-74）,Western blot检测MEMO1、IGF-IR和E-cad表达差异;Transwell比较五种胃癌细胞系迁移能力;选取MEMO1/IGF-IR高表达细胞系MGC-803,瞬时敲除MEMO1或IGF-IR基因,Western blot检测EMT标志物表达差异;IP实验检测MEMO1与IGF-IR间相互作用;TCGA数据库分析胃癌组织MEMO1和IGF-IR mRNA表达水平与患者预后的关系。结果:基础状态下五种胃癌细胞IGF-IR与MEMO1的表达呈显著正相关,并且两种蛋白的表达强度与胃癌细胞EMT相关;五种胃癌细胞迁移能力MKN-7相似文献   

Lymph node metastasis and preoperative diagnosis of depth of invasion in early gastric cancer

Background. No reports have, to date, focused on the relationship between preoperative determination of the depth of invasion and lymph node metastasis. The present study, under the leadership of the Japanese Gastric Cancer Association, was designed to form a basis for decision making in limited treatment for early gastric cancer (EGC). Methods. From eight major hospitals in Japan, 2672 gastric cancers whose preoperative depth of invasion was mucosal(M-cancer), and 6209 EGCs, consisting of 3584 mucosal(m-) and 2625 submucosal(sm-) cancers, were collected by questionnaire. All registered patients underwent gastrectomy with D1 or more extensive lymphadenectomy between 1985 and 1998. Results. The accuracy of preoperative diagnosis of depth of invasion of M-cancers was 80.2% (2144/2672). However, of the total of 2432 M-cancers in which no nodal involvement was observed intraoperatively (N0), histological examination of the resected specimens confirmed that lymph node metastasis was absent in 2353 (96.8%). The frequencies of lymph node metastasis in early gastric, m-, and sm-cancers were 8.9%, 2.5%, and 17.6%, respectively. Node involvement was associated with a higher frequency of undifferentiated than differentiated histology, as well as with greater tumor size. The incidences of lymph node metastasis in m-cancers with a diameter of less than 4 cm, and in sm-cancers with a diameter below 1 cm were 1.3% (37/2837) and 4.9% (4/82), respectively. These metastases rarely extended beyond the first tier. Conclusion. N0 and M-cancers, m-cancers less than 4 cm in diameter, and sm-cancers no larger than 1 cm in diameter may be appropriate indications for limited surgery. Received: January 23, 2001 / Accepted: March 15, 2001     

Overexpression of lncRNA H19 enhances carcinogenesis and metastasis of gastric cancer

Long non-coding RNAs (lncRNAs) play key roles in the progression and metastasis of some carcinomas. We previously showed that the expression of lncRNA H19 (H19) was higher in gastric cancer (GC) tissues than that in paired noncanerous tissues. However, the underlying mechanisms remain unclear.In this study, H19/miR-675 knockdown models in the MKN45 cell line and ectopic expression models in the SGC7901 cell line were established, and a co-expression network of H19 was generated to identify target genes by RIP and DLR. The results showed that overexpression of H19 promoted the features of GC including proliferation, migration, invasion and metastasis. An H19 co-expression network identified ISM1 as a binding protein of H19, and its expression was positively correlated with that of H19. CALN1 was identified as a target gene of miR-675 and its expression was negatively correlated with that of miR-675. H19 and MiR-675 function in a similar manner. However, H19 RNA actively binds to ISM1 and miR-675 targets CALN1. These differences suggest that H19 plays other roles besides encoding miR-675 in GC. Our results suggest that the effect of H19 in GC is mediated by the direct upregulation of ISM1 and the indirect suppression of CALN1 expression via miR-675.