三重四级杆液质联用法测定金樱子中白桦脂酸

目的:建立金樱子中白桦脂酸含量测定方法。方法:采用三重四级杆液质联用(HPLC-MS-MS)法,色谱柱Dia-monsil C18(2)(2.1 mm×150 mm,3μm),流动相甲醇-0.2%的甲酸溶液(84∶16),流速0.3 mL·min-1。柱温30℃,质谱采用大气压电喷雾离子源,选择性离子流模式(负离子)。结果:白桦脂酸的平均样回收率为98.3%(RSD 2.6%)。结论:该方法快速简便,灵敏度高,重复性好,可用于金樱子的质量控制。     

白桦冲剂解热作用的实验研究

1　实验材料　动物 :大耳白家兔 ,昆明种小白鼠 ,均由哈医大一院动物中心提供。实验前置动物于实验室内适应 3ｄ。药物 :白桦冲剂由哈医大一院药剂部实验室提取 ,自制。白、百、破类毒素三联菌苗 ,卫生部长春生物制品研究所 ,批号 980 10 3 -1-2。鲎试剂 (甲种 )冻干装 ,湛江安度斯生物有限公司 ,批号 9912 10 ,灵敏度 0 5Ｅｕ/ｍｌ。内毒素为大肠杆菌内毒素 (Ｏ1 1 1 Ｂ4菌株 )湛江安度斯生物有限公司 ,批号980 60 7。氨基比林 :由哈医大一院制剂室提供。2　方法与结果2 1　白桦冲剂对菌苗致热家兔的解热作用[1 ] 　取大耳白家兔 ,体重1 …     

白桦酯醇的研究进展

白桦酯醇以及由白桦酯醇转化的次级产物白桦酯酸及其衍生物具有镇咳祛痰、清热利湿、消肿解毒、提高机体免疫力、调血脂等作用。更重要的是白桦酯醇、白桦酯酸作为天然药物在抗肿瘤和抗HIV等活性方面显示出了与以往药物不同的作用机制,靶向作用性更强,不良反应较小。因此,对于新型天然药物白桦酯醇和白桦酯醇的研究已逐步受到研究者的注视,就近年来白桦酯醇及其衍生物的制备,白桦酯醇的生物活性、合成途径及其关键酶等方面的研究追踪前人研究报道,为今后白桦酯醇相关研究的深入提供理论参考。     

HPLC法测定23-羟基白桦酸注射液中23-羟基白桦酸的含量

目的　建立 2 3-羟基白桦酸注射液中 2 3-羟基白桦酸的 HPL C分析方法。方法　采用 HPL C法。色谱柱 :YWG C1 8(2 5 0 mm× 4 .6 mm,10 μm) ;流动相 :乙腈 -水 -冰醋酸 (6 0 0∶ 4 0 0∶ 1) ;体积流量 :1.0 m L/ min;检测波长 :2 0 5 nm;柱温 :2 5℃ ;检测灵敏度 :0 .0 0 5 AU FS。采用外标法测定 2 3-羟基白桦酸的量。结果　 2 3-羟基白桦酸在 10～10 0 μg与峰面积具有良好线性关系 ,平均回收率为 99.5 4 % ,RSD为 1.98% (n=5 )。结论　该方法快速、简便、准确可靠 ,可用于 2 3-羟基白桦酸的定量。     

白桦皮多酚类成分及其药理活性的研究

雅树皮为禅木科排水属植物白禅（B．platyphyllaSub．）的树皮，我国诸家本草均有记载，具清热利湿，祛痰止咳，消肿解毒的功效［1］，我国学者针对禅树皮制剂在临床上治疗慢性支气管炎疗效确切，对其进行了药理筛选，确定了其镇咳、祛痰、平喘的有效部位，也有人对从其外皮中分出的三路进行了祛痰，镇咳作用的药理实验＊］，我们对禅树全皮的水溶性成分进行了研究。1仪器与原料：'H．'CNMR光谱分别在JEDLPS-100及JEOLFX－100核磁共振仪上测定，红外光谱在Nicolet一IR20SX9型红外光谱仪上测定，质谱用Finngan－MAT4510型质谱仪…     

一氧化碳对白桦悬浮细胞生长和三萜累积的影响

目的分析外源一氧化碳(CO)对白桦悬浮细胞生长和三萜累积的影响。方法在白桦悬浮细胞培养的第8天添加5、10、20、30μmol/L的CO供体高铁血红素处理0.25～8 d,采用高效液相色谱法、比色法和实时荧光定量PCR方法分析白桦三萜含量及其合成关键酶基因的表达。结果除20和30μmol/L CO处理2 d后显著降低白桦悬浮细胞干质量外,CO处理未对白桦悬浮细胞干质量产生显著影响。除30μmol/L CO处理提高pH值和丙二醛含量外,CO处理未对pH值和丙二醛含量产生显著影响。CO处理不同程度地增加了三萜、白桦酯醇和齐墩果酸含量,其中,30μmol/L CO处理1 d时三萜积累量达最大值,为同期对照的1.3倍;10μmol/L CO处理4 d时白桦酯醇含量达最高值,为对照的1.5倍;10μmol/L CO处理2 d时齐墩果酸含量达最高值,为对照的4.2倍。三萜合成关键酶FPPS、LUS、CAS1、CAS2和β-AS基因的实时荧光定量PCR检测结果进一步证实了CO对白桦三萜累积的促进作用。结论 CO处理促进了白桦悬浮细胞中三萜的合成。     

HPLC-DAD法同时测定酸枣仁皂苷中酸枣仁皂苷A、B和白桦脂酸、白桦脂醇

目的采用HPLC-DAD法同时定量测定酸枣仁皂苷中酸枣仁皂苷A、B和白桦脂酸、白桦脂醇。方法酸枣仁以甲醇提取,采用Agilent TC-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,乙腈-水为流动相梯度洗脱,体积流量1 m L/min,运行时间120 min,检测波长204 nm,柱温35℃。结果 4种成分的进样量与峰面积呈良好的线性关系(r≥0.999 0);加样回收率为99.2%~100.2%。结论经方法学验证,所采用的测定方法准确稳定,灵敏度高,可作为酸枣仁皂苷多指标定量测定方法。     

薄层比色法测定酸枣仁中白桦脂酸的含量

酸枣仁为鼠李科植物酸枣的种仁,是常用中药之一。笔者采用薄层层析比色法测定酸枣仁中白桦脂酸的含量,在硅胶薄层上,以石油醚(60～90℃)—苯—乙酸乙脂—冰醋酸(10∶20∶6∶0.5)为展开剂,白桦脂酸分离清晰,斑点集中。用香草醛—高氯酸—冰醋酸为比色显色试剂,最大吸收波长为530nm方法灵敏、操作简便。     

HPLC-ELSD法分析酸枣果中的白桦脂酸和熊果酸

目的 采用高效液相蒸发光检测器法对10个地区的野生酸枣果中的白桦脂酸和熊果酸进行研究.方法 WatersSunFire色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相A为乙腈,B为0.3％乙酸水溶液(pH 2.8);洗脱程序为20％A(0min)-30％A (10 min)-60％A(20 min)-100％A (50 min).ELSD-UM 6000蒸发光检测器,数据采集为Trisep-2003软件.结果 10个地区酸枣果白桦脂酸质量分数范围为(3.97±0.04)-(7.35±0.18)mg/g,熊果酸质量分数范围为(5.73±o.23) ～(9.92±0.27)mg/g.聚类分析表明样品4、5、7、10、6、8、9有别于其他样品,归为一类.结论 本研究可为野生酸枣资源开发利用提供质量评价的依据.     

白桦脂醇的体内抗肿瘤作用及机制

目的:研究白桦酯醇的体内抗肿瘤作用及机制。方法:采用小鼠肝癌细胞(H22)建立荷瘤小鼠动物模型,白桦脂醇灌胃10 d后,计算抑瘤率、胸腺指数、脾指数;MTT法测定小鼠T淋巴细胞转化功能及NK细胞杀伤活性。结果:白桦脂醇三个剂量组、阳性对照组瘤重均减轻,与阴性对照组比较差异有统计学意义(P0.05),中剂量组抑瘤率最高;三个剂量组脾指数与阳性对照组比较差异有统计学意义(P0.05),中、高剂量组与阴性对照组比较差异亦有统计学意义(P0.05);中剂量组胸腺指数与阴性、阳性对照组比较差异有统计学意义(P0.05);中剂量组T淋巴细胞转化率与阴性对照组和阳性对照组比较差异有统计学意义(P0.05);低剂量组在效靶比为25∶1时,NK细胞杀伤活性高于阳性对照组(P0.05),在效靶比为100∶1,杀伤活性高于阴性对照组(P0.05);中剂量组在效靶比为25∶1、50∶1、100∶1时,NK细胞杀伤活性均同时高于阴性对照组和阳性对照组(P0.05);高剂量组在效靶比为25∶1时,NK细胞杀伤活性高于阴性对照组和阳性对照组(P0.05)。结论:白桦脂醇通过刺激激活免疫器官,提高T淋巴细胞转化功能、提高NK细胞杀伤活性来抑制肿瘤细胞增殖。     

HPLC法测定枣仁安神颗粒中白桦酸的含量

目的 建立枣仁安神颗粒中白桦酸的含量测定方法.方法 采用高效液相色谱法对枣仁安神颗粒中白桦酸进行含量测定.色谱柱:Diamonsil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇-水-冰醋酸(85∶15∶0.08);流速:1.0 mL· min-1;检测波长为210 nm.结果 白桦酸在0.775 ～ 15.5 μg范围内呈良好线性关系,r=0.9991,平均加样回收率为98.1％,RSD=2.29％(n=5).结论 该方法准确、操作简单、重现性良好,可用于枣仁安神颗粒的质量评价.     

白桦脂酸在大鼠体肠吸收动力学的研究

目的:建立同时测定肠循环液中白桦脂酸和酚红浓度的HPLC-DAD法,并探讨白桦脂酸在大鼠各肠段的吸收动力学特征及不同药物浓度对吸收的影响。方法:采用大鼠在体肠吸收实验模型,并考察吸收部位、药物浓度和pH对药物吸收的影响。结果:在75～125 mg.L-1白桦脂酸的吸收速率与质量浓度呈线性关系,Ka基本保持不变;各肠段的吸收速率无显著性差异,十二指肠、空肠、回肠和结肠的Ka分别为(0.151±0.004 9),(0.159±0.005 6),(0.156±0.008 3),(0.149±0.004 1)h-1。结论:白桦脂酸在小肠中吸收良好,没有特定吸收部位;不同浓度对白桦脂酸在大鼠全肠道的吸收无显著影响,其在肠道的吸收呈一级吸收动力学特征,吸收机制为被动扩散。白桦脂酸是难溶性药物,可以通过增加药物的溶出度,进而提高药物的生物利用度。     

白桦酯酸及其衍生物的生物活性及作用机制研究进展

白桦酯酸是一种天然存在的五环戊烷型三萜类物质,通常是从白桦Betula platyphylla树皮中分离出来,在其他植物中也有发现,以游离糖苷和糖基衍生物的形式存在于不同植物中。通过对其化学结构的修饰可以得到多种多样的衍生物,研究表明白桦酯酸及其衍生物在抗肿瘤、抗病毒、消炎止痛、抑制脑神经及血管损伤和对其他常见疾病的治疗作用等方面具有积极的作用。综述了白桦酯酸及其衍生物的种类、生物活性及作用机制,以期为今后对其进一步的研究与应用提供理论参考。     

白桦酯酸及其衍生物的研究概况

 目的总结白桦酯酸及其衍生物的各种药理活性及制备方面的研究概况,进一步提出对这类天然产物的研究开发方向。方法检索查阅了国内外近10年来的30多篇有关文献和专利。结果与结论白桦酯酸及其衍生物具有显著的抗肿瘤、抗HIV和抗茵等活性,目前尚处于临床前的研究阶段,具有可预见的开发前景。     

正交试验法优选酸枣仁中白桦脂酸的提取工艺

目的优化酸枣仁中白桦脂酸的提取工艺。方法以白桦脂酸和干浸膏得率为检测指标,采用L9(34)正交试验,考察乙醇体积分数、溶剂用量、提取时间和提取次数4个影响因素,采用高效液相色谱法进行白桦脂酸测定。结果乙醇体积分数对提取物中白桦脂酸有显著影响,其他因素影响不显著,最佳提取工艺条件为3倍量95%乙醇热回流3次,每次2 h。结论优选得到的工艺稳定、方法可行。     

腐胺与过氧化氢交互调控白桦三萜合成的初步研究

目的 分析腐胺和过氧化氢调控白桦三萜合成中是否存在交互作用。方法 在白桦悬浮细胞的生长末期添加1 mmol/L腐胺（Put）、0.1 mmol/L过氧化氢（H₂O₂）和40 μg/mL真菌诱导子,采用比色法、高效液相色谱法和荧光显微镜分析白桦悬浮细胞中三萜量、多胺量和H₂O₂荧光强度变化。结果 1 mmol/L Put增加了细胞中H₂O₂的荧光强度和三萜量。0.1 mmol/L H₂O₂促进了三萜合成,却抑制了多胺中亚精胺（Spd）、精胺（Spm）的合成,而对Put无影响。Put与H₂O₂同时处理组,细胞中H₂O₂的荧光强度和多胺的量均介于Put与H₂O₂单独处理组之间,而三萜量却显著高于其单独处理组;进一步药理学实验分析发现,真菌诱导子与H₂O₂清除剂过氧化氢酶（CAT）处理后,细胞中的Put和Spd量比真菌诱导后增加了0.62%和16.05%,而对Spm无显著影响。真菌诱导子与多胺（Pas）合成抑制剂D-精氨酸（D-arg）处理组,细胞中的H₂O₂荧光强度比真菌诱导子处理组有所降低了;在真菌诱导子、CAT和D-arg同时处理下,细胞中的H₂O₂荧光强度、PAs量和三萜量均低于真菌诱导子与CAT或D-arg处理,但三萜量仍高于对照组。结论 Put与H₂O₂在促进白桦三萜合成中存在交互作用。     

白桦BpNOS基因的生物信息及表达模式分析

目的 克隆白桦Betula platyphylla一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS),探讨其生物信息及表达模式,并考察非生物胁迫对其NOS基因表达的影响.方法 通过RACE技术克隆了白桦NOS基因,命名为BpNOS.初步对该基因进行了生物信息学分析、分子进化分析、非生物胁迫处理以及信号诱导.结果 该基因全长1 806 bp,含有完整的开放读码框,编码601个氨基酸(Genebank登录号：KJ197336).BpNOS基因为不稳定疏水性蛋白,可能存在信号肽,具有跨膜能力,α-螺旋、延伸链、无规则卷曲分布于整个蛋白.分子进化分析结果表明,BpNOS基因与葡萄等物种的遗传距离较近,说明有着较近的亲缘关系;与大豆、苜蓿的遗传距离较远,说明其亲缘关系较远.BpNOS基因的表达具有节律性,在15:00时达到最大值,为0:00时的12倍.盐、低温、重金属镉胁迫均能抑制BpNOS基因的表达,但响应模式不同;水杨酸(SA)和外源一氧化氮可以促进BpNOS基因的表达.结论 非生物胁迫能够在一定时间范围内抑制NOS活性,SA和外源一氧化氮可以通过NOS途径调控内源一氧化氮的合成,为进一步研究白桦一氧化氮的代谢调控奠定了基础.     

23-羟基白桦酸体内抗肿瘤作用实验研究

目的 :研究白头翁皂甙元 ( 2 3 -羟基白桦酸 )对小鼠HepA瘤株的抑制作用。方法 :称取定量的 2 3 -羟基白桦酸 ,用食用植物油配制成所需浓度的溶液。将已接种HepA瘤株的小鼠模型 2 4小时后随机分组 ,各组均连续给药 10天 ,停药后 1天将小鼠脱颈椎处死 ,剥取瘤称重 ,结果 :该甙元有明显抑制HepA实体瘤的作用 ,高、中、低剂量组抑瘤率均在 3 0 %以上 ,说明该单体在抑制肿瘤上有研究前景。结论 ;2 3 -羟基白桦酸有一定的抗肿瘤活性     

中药白头翁中23-羟基白桦酸对照品的制备及鉴定

目的:研究中药白头翁中对照品23-羟基白桦酸的制备方法。方法:以酸水解的方法从白头翁药材中提取总三萜,以硅胶柱层析和重结晶的方法从总三萜中分离、制备对照品,采用波谱方法对其进行结构鉴定。结果:从白头翁总三萜中分离出23-羟基白桦酸对照品。结论:该对照品可作为控制白头翁总三萜制剂质量的指标成分。     

23-羟基白桦酸对血管内皮细胞增殖和迁移的影响

目的:探讨23-羟基白桦酸(23-HBA)对血管内皮细胞(ECV-304)形态变化,增殖和迁移的影响。方法:SRB方法测定23-HBA对ECV-304细胞的增殖抑制率,体外琼脂法检测内皮细胞的迁移能力,并用光镜观察内皮细胞形态变化。结果:23-HBA对ECV-304细胞的IC50为39.74μg/ml。当23-HBA浓度提高到20μg/ml以上,ECV-304细胞的凋亡现象非常明显。23-HBA浓度在1μg/ml时即能抑制细胞的迁移。结论:23-HBA对ECV-304增殖和迁移均有显著抑制作用。