糖皮质激素对SLE患者Th1/Th2类细胞因子mRNA表达及产生的影响

目的 探讨糖皮质激素治疗对系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单一核细胞(PBMC)中Th1/Th2类细胞因子mRNA表达及产生的影响.方法 采用逆转录-聚合酶链反应和酶联免疫吸附试验检测糖皮质激素治疗前后SLE患者PBMC中Th1类细胞因子干扰素γ(IFN-γ)和Th2类细胞因子白介素4(IL-4)、白介素10(IL-10)mRNA表达和产生的变化.结果 经糖皮质激素治疗后SLE患者PBMC产生IFN-γ,IL-4和IL-10水平分别为(74.08±15.85)pg/mL,(246.43±45.25)pg/mL,(549.52±67.00)pg/mL;mRNA平均表达水平分别为0.3298±0.2181,0.4951±0.2938,0.8671±0.6620.治疗前IFN-γ,IL-4和IL-10水平分别为(113.5±27.6)pg/mL,(272.97±33.78)pg/mL,(625.32±104.61)pg/mL;mRNA平均表达水平分别为1.4094±0.6317,0.6872±0.4713,1.1758±0.6255;治疗后各细胞因子水平均较治疗前显著降低(P<0.01);但IFN-γ较IL-4,IL-10降低更为显著.结论 糖皮质激素可通过影响SLE患者细胞因子mRNA表达和产生,调节Th1/Th2类细胞因子网络平衡,可能为糖皮质激素治疗SLE的机制之一.     

斑秃患者外周血单一核细胞中Th1/Th2型细胞因子的表达

【摘　要】:目的:探讨斑秃患者外周血单一核细胞(PBMC)中Th1/Th2型细胞因子的表达状况与斑秃发病的关系。方法:用逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测18例轻型斑秃、24例重型斑秃患者及20例正常人外周血单一核细胞(PBMC)经PHA刺激后具有代表性的Th1型细胞因子：γ干扰素（IFN-γ）和肿瘤坏死因子β（TNF-β）和具有代表性的Th2细胞因子白介素4（ IL-4）、白介素10（IL-10）的表达水平。结果:经PHA刺激后轻型斑秃患者PBMC中Th1型细胞因子(IFN-γ、TNF-β)基因表达水平明显升高,与正常对照组比较有显著性差异(P<0. 05);Th2型细胞因子(IL-4、 IL-10)基因表达水平下降,显著低于正常对照组(P<0. 05);重型斑秃患者PBMC中Th1型细胞因子(IFN-γ、IL-12)基因表达不仅显著高于正常对照组(P<0. 05),而且还高于轻型斑秃病人(P<0. 05);Th2型细胞因子(IL-4、IL-10)基因表达显著低于正常对照组(P<0. 05),与轻型斑秃病人比较有显著性差异。结论:斑秃患者PBMC中Th1/Th2型细胞因子基因表达失衡,表现以Th1型细胞因子基因过度表达为特征的Th1型反应,可能参与了斑秃的发病机制。 关键词:斑秃;细胞因子;基因表达; γ-干扰素; 肿瘤坏死因子-β; 白介素-4 ; 白介素-10 ;外周血单个核细胞;     

地氯雷他定对皮肤划痕症患者组胺及Th1/Th2细胞平衡的影响

目的观察地氯雷他定对皮肤划痕症患者组胺以及Th1/Th2细胞的影响,并探讨其相关的临床意义。方法收集北华大学附属医院皮肤性病科2012年6月-2014年1月治疗的皮肤划痕症患者40例,另取北华大学附属医院体检中心的健康体检者40例作为正常对照。Th1和Th2细胞使用流式细胞仪检测,组胺、Ig E,IL-4,IL-2,IFN-γ因子表达使用ELISA法检测。结果治疗前皮肤划痕症患者组胺含量、Ig E和IL-4表达水平显著高于对照组(P0.01),Th1/Th2细胞比值、IL-2和IFN-γ表达水平显著低于对照组(P0.01),治疗后组胺含量、Ig E和IL-4表达水平出现显著减低(P0.01),Th1/Th2细胞比值、IL-2和IFN-γ表达水平显著升高(P0.01)。Ig E表达与IL-4呈显著正相关(r=0.522,P0.05),与IL-2呈显著负相关(r=-0.361,P0.05),与IFN-γ呈显著负相关(r=-0.403,P0.05)。地氯雷他定治疗皮肤划痕症临床有效率为85.0%,不良反应发生率为7.5%。结论皮肤划痕症患者中存在组胺高表达及Th1/Th2细胞的失衡,地氯雷他定可以抑制组胺表达,调节Th1/Th2细胞的失衡,安全、高效的治疗皮肤划痕症。     

皮炎消净饮Ⅰ号对湿热型特应性皮炎Th1/Th2细胞因子的调控作用

目的探讨皮炎消净饮Ⅰ号治疗湿热型特应性皮炎(AD)的作用机理。方法用流式细胞术检测湿热型AD患者治疗前后与健康对照组外周血Th1/Th2细胞状态。结果AD组治疗前外周血Th1细胞水平低于健康对照组(P<0.01),而Th2细胞水平高于健康对照组(P<0.01);AD组治疗后Th1细胞水平升高,Th2细胞下降,与治疗前比较差异有显著性(P<0.01)。结论Th1/Th2失衡构成了湿热型AD患者的部分免疫学特点。皮炎消净饮Ⅰ号通过促进湿热型AD患者干扰素-γ的分泌,抑制白介素-4的分泌,调节Th1/Th2失衡,是其达到临床疗效的可能机制之一。     

Th17,Treg细胞及其相关细胞因子在带状疱疹患者治疗前后外周血中的检测

目的探讨Th17细胞、CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞(Treg)及相关细胞因子IL-6,IL-17,TGF-β1在带状疱疹病程中治疗前后的变化及意义。方法 32例带状疱疹患者分别于治疗前、治疗结束后7d复诊时采外周静脉血,20例健康体检者作为对照组。采用流式细胞分析法检测外周血中Th17,CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞占CD4~+T细胞的比例,ELISA法检测外周血IL-6,IL-17,TGF-β1水平。结果带状疱疹患者治疗前、治疗后外周血中Th17,CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞的比例明显高于对照组(P均0.05),治疗前亦明显高于治疗后(P均0.05),差异均有统计学意义。治疗前、治疗后相关细胞因子IL-17水平显著高于对照组(P均0.05),治疗前亦显著高于治疗后(P均0.05),治疗前IL-6,TGF-β1的水平显著高于治疗后及对照组(P均0.05),差异均有统计学意义;但治疗后与对照组之间差异无统计学意义(P均0.05)。结论 Th17,Treg细胞在带状疱疹患者外周血中显著增高,在治疗后显著下降,与二者相关的细胞因子也相应变化,提示二者通过多种机制参与机体的抗病毒免疫应答,这在带状疱疹发病机制中可能发挥了重要作用。     

斑秃患者外周血单个核细胞产生Th1/Th2细胞因子研究

目的:研究斑秃患者外周血单个核细胞产生Th1型细胞因子(如IFN-γ)和Th2型细胞因子(如IL-4、IL-10)水平,探讨其在斑秃发病中所起的作用及与病情活动性的关系。方法:采用ELISA双抗体夹心法检测36例斑秃患者(其中活动期19例、非活动期17例)和20例正常对照者外周血单个核细胞产生IFN-γ、IL-4和IL-10水平。结果:活动期斑秃患者外周血单个核细胞产生IFN-γ水平显著高于正常对照和非活动期患者(P<0.05),非活动期患者比正常对照者明显增高(P<0.05);活动期患者产生IL-4水平明显低于正常对照组(P<0.05),也低于非活动期患者,但差异无统计学意义(P>0.05),非活动期患者和正常对照组相比明显降低(P<0.05);活动期患者产生IL-10水平显著低于正常对照组和非活动期患者(P<0.05),非活动期患者与正常对照相比明显降低(P<0.05)。结论:斑秃患者体内可能存在Th1型细胞因子占优势,Th1型细胞因子如IFN-γ在斑秃的免疫发病中起到重要作用,并且与病情活动性有关联。     

复发性生殖器疱疹患者外周血IL-12与Th1/Th2细胞因子的检测

目的检测复发性生殖器疱疹(RGH)患者不同病期外周血CD4+T细胞内IL-12,IFN-,γIL-4的水平,探讨IL-12,Th1与Th2亚群在疾病中的可能作用。方法应用流式细胞仪对20例发作期、15例恢复期RGH患者和15名健康人外周血CD4+T细胞IL-12,IFN-γ和IL-4进行检测。结果发作期患者外周血IFN-γ+-CD4+T细胞百分率显著低于正常对照组(P<0.05),IL-4+-CD4+T细胞百分率明显高于正常对照组(P<0.01),Th1/Th2比值显著低于正常对照组(P<0.01),同时IL-12+-CD4+T细胞百分率显著降低(P<0.01)。恢复期患者外周血IL-12+-CD4+T细胞百分率仍显著低于正常(P<0.05)。结论RGH患者存在Th1/Th2比例失衡和IL-12水平低下,而后者可能是导致Th1/Th2比例失衡和病情反复发作的重要原因。     

系统性红斑狼疮患者CCR7+CD8+CD45RO+T细胞诱导CD4＋T细胞向Th2分化

目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血CCR7 CD8 CD45RO 记忆性T细胞对CD4 T细胞的诱导分化作用及其与SLE发病的关系。方法流式细胞仪、实时定量RT-PCR和RNA印迹检测同系CCR7 CD8 CD45RO T细胞和树突细胞协同刺激CD4 T细胞分泌细胞因子。结果活动期SLE患者CCR7 CD8 CD45RO 记忆性T细胞诱导CD4 T细胞表达Th2类细胞因子:白介素4的表达效率显著高于正常人对照组和非活动期SLE患者组(P<0.01),1型调节性T细胞(Tr1)源性细胞因子:白介素10和转化生长因子β的表达效率均低于正常对照组和非活动期SLE患者组(P<0.01);而活动期和非活动期SLE患者干扰素γ的表达效率显著低于正常人对照组(P<0.01)。结论活动期SLE患者外周血CCR7 中央型记忆性T细胞可与树突细胞相互作用,诱导同系CD4 T细胞向Th2分化,发挥CCR7-CD45RO 效应性记忆性T细胞的功能。     

粉尘螨舌下含服对慢性自发性荨麻疹患者Th1/Th2细胞因子平衡的影响

目的 探讨粉尘螨舌下含服治疗对慢性自发性荨麻疹患者T淋巴细胞表达Th1/Th2细胞因子[IL-2、IL-4、γ-干扰素(IFN-γ)]之间的平衡以及血清IgE水平的作用.方法 粉尘螨变应原皮试强阳性的慢性自发性荨麻疹患者72例,按患者就诊顺序随机分为2组,治疗组使用粉尘螨滴剂,对照组应用咪唑斯汀缓释片,在研究前、后分别测定血清Th1、Th2细胞因子IFN-γ、IL-2、IL-4的表达,同样检测血清IgE水平.结果 治疗前后比较,治疗组IFN-γ、IL-2表达均增加,而IL-4表达及血清IgE水平均降低,差异均有统计学意义(P＜0.01);对照组IFN-γ、IL-2表达均增加,而IL-4表达及血清IgE水平也降低,但差异没有统计学意义(P＞0.05).与对照组比较,治疗组IFN-γ、IL-2表达均显著高于对照组,而IL-4及IgE水平均显著低于对照组(P＜0.01).结论 舌下特异性免疫治疗慢性自发性荨麻疹患者,可纠正Th 1/Th2表达细胞因子功能的失衡,可能与其疗效机制有关.     

血热证银屑病患者外周血Th1、Th2和Th17的表达

目的:确定血热证银屑病患者Th1/Th2/Th17主要细胞因子与银屑病血热证候的相关性。方法:分别采用流式细胞技术(FACS)及酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测外周血单个核细胞(PMBCs)及血浆Th1/Th2/Th17细胞分泌主要细胞因子的表达。结果:血热证银屑病的CD4~+IFN-γ为26.06±11.86较正常对照12.35±6.52升高(P0.05);CD4~+IL-4~+及CD4~+IL-17~+较正常对照稍降低(P0.05)。IFN-γ为91.20±48.37较正常对照47.44±21.46升高,而IL-4较正常对照下降(P0.05)。IL-17的水平两组无统计学差异。结论:血热证银屑病Th细胞免疫机制节点起主导作用的细胞亚型及细胞因子可能为n1型,主导细胞因子为IFN-γ。     

CTLA4Ig诱导银屑病Th1/Th2转换的体外研究

目的 研究银屑病的Th1/Th2反应模式,并观察CTLA4Ig在诱导银屑病Th1/Th2转换中的作用。方法 标本取自33例寻常型银屑病患者和20例正常人对照,利用植物血凝素(PHA)和葡萄球菌肠毒素B(SEB)单独及与CTLA4Ig协同刺激外周血单一核细胞(PBMC)增殖,通过酶联免疫吸附法检测PBMC培养上清液中白介素2(IL-2)、干扰素γ(IFN-γ)和白介素4(IL-4)水平。结果 SEB显着促进银屑病组3种细胞因子的分泌(P<0.01);进行期IFN-γ/IL-4的比值明显高于静止期(P<0.01).CTLA4Ig可以抑制IL-2、IFN-γ的分泌,并呈剂量依赖关系;而IL-4相对于IL-2及IFN-γ分泌是增强的;当CTLA4Ig浓度达到10μg/mL时,3种细胞因子的分泌均明显被抑制。结论 银屑病属于Th1型反应模式,CTLA4Ig可以下调Th1型细胞因子,上调Th2型细胞因子,提示CTLA4Ig具有诱导银屑病的Th1/Th2失衡向Th2转换的作用。     

梅毒血清固定患者外周血Th1，Th2，Treg和Th17相关细胞因子检测

目的：探讨梅毒血清固定患者Th1,Th2,Treg和Th17相关细胞因子与梅毒血清固定的关系。方法：采用酶联免疫吸附试验法(ELISA)分别对不同组（梅毒血清固定组、新发梅毒组、梅毒治疗后转阴组和正常对照组）人群外周血进行Th1、Th2、Treg和Th17相关细胞因子（IFN-γ、IL-2、IL-12、IL-4、IL-10、IL-6、IL-17、IL-22、TGF-β的）检测,并进行相关性分析。 结果：与新发梅毒组、梅毒治疗后转阴组以及对照组比较,梅毒血清固定组IFN-γ、IL-2和IL-12水平均降低,差异均有统计学意义（均P<0.05）;但IL-4、IL-10及TGF-β水平均升高,差异均有统计学意义（均P<0.05）。血清固定组IL-17水平低于新发梅毒组和转阴组（均P<0.05）;IL-22低于新发梅毒组（P<0.05）;IL-6高于对照组（P<0.05）。结论：梅毒血清固定患者可能同时存在Th1细胞/Th2细胞,Treg细胞/Th17细胞的失衡,从而影响患者体内整体免疫应答水平。     

系统性红斑狼疮患者Th1/Th2细胞及白介素12、18及其受体mRNA的表达

目的 探讨未经药物治疗的初发系统性红斑狼疮患者Th1/Th2细胞亚群分布,白介素12、白介素18及其受体的基因表达.方法 运用三色荧光标记流式细胞术检测35例初发SLE患者、10例正常人Th1/Th2细胞亚群分布;ABI7700Real-TimePCR法同时检测38例患者和28例正常人IL-12、IL-18及其受体mRNA表达水平.结果 ①初发狼疮患者Th1较正常人明显减低(P<0.05),但Th1/Th2无显着性改变.②与正常人组相比,SLE组患者IL-12、IL-18mRNA及其受体表达较正常人明显降低(P值均<0.05);③面部红斑组患者Th1/Th2、IL-12P35较正常人组降低(P均<0.05);④RNP阳性组患者IL-12P40较正常人组升高,IL-12P35、IL-18较正常人组降低(P均<0.05).结论 SLE是一种以Th1细胞下降,Th2细胞相对占优势的自身免疫性疾病,源于诱导向Th1细胞分化的一系列细胞因子及其受体减少和细胞因子间失衡所致.     

催乳素与促生长素对体外培养系统性红斑狼疮患者单一核细胞产生细胞因子的影响

目的 研究催乳素、促生长素对系统性红斑狼疮(SLE)患者Th1/Th2型细胞因子的影响。方法 对SLE患者和正常人对照的淋巴细胞进行体外培养,并测定细胞因子。结果 在自分泌情况下,SLE活动期患者白介素6(IL-6)、白介素10(IL-10)的分泌量显著增高,而干扰素γ(IFN-γ)的分泌量低于静止期和正常人,但差异无统计学意义。经促生长素和催乳素干预后,活动期SLE患者IL-6、IL-10分泌量显著高于自分泌量和正常人对照组。IFN-γ分泌量经促生长素和催乳素干预后,与自分泌量相比,活动期患者无显著升高。促生长素对SLE患者IL-6、IL-10、IFN-γ分泌量的影响与催乳素的影响差异无统计学意义。结论 SLE患者不但存在Th2型细胞因子增高,而且促生长素和催乳素均能刺激Th2型细胞因子进一步增高,且刺激能力相当,并呈正相关。     

复方甘草酸苷对斑秃患者Th1/Th2型细胞因子水平的影响

目的观察复方甘草酸苷对斑秃患者血清Th1/Th2型细胞因子表达的调节作用。方法应用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测正常对照组和治疗组在治疗前、后轻型斑秃组和重型斑秃组患者血清IFNγ和IL-10水平。结果斑秃患者血清IFN-γ水平显著高于正常对照组,且重型斑秃组明显高于轻型斑秃组(P均<0.01);IL-10水平在轻型斑秃组、重型斑秃组、正常对照组间无显著性差异(P>0.05)。复方甘草酸苷治疗后斑秃患者血清IL-10水平较治疗前显著增高(P<0.01);而IFN-γ水平治疗前后无显著性差异(P>0.05)。结论复方甘草酸苷在治疗斑秃过程中,可能通过促进IL-10分泌,纠正Th1/Th2平衡失调而发挥治疗作用。     

补肾养血安胎汤治疗复发性流产的临床研究

目的探讨复发性流产(RA)患者应用补肾养血安胎汤治疗的临床效果。方法选取2016年3月至2017年12月陕西中医药大学第二附属医院妇产科收治的94例RA患者作为研究对象。采取随机数字表法分成观察组(n=47)与对照组(n=47)。对照组予以常规保胎方案(绒促性素+黄体酮)治疗,观察组在此基础上内服补肾养血安胎汤治疗,所有患者均治疗至妊娠12周。比较两组临床疗效,治疗前后妊娠激素[人绒毛膜促性腺激素β(β-HCG)、孕酮(P)]水平、中医证候总积分及血清辅助性T细胞(Th)1/Th2细胞因子[γ干扰素(IFN-γ)、白介素(IL)-4、IL-10和IFN-γ/IL-4、IFN-γ/IL-10比值]变化,不良反应及妊娠情况。结果观察组总有效率和妊娠成功率分别为95.7%、85.1%,均明显高于对照组(83.0%、61.7%)差异具有统计学意义(P<0.05)。两组治疗后血清β-HCG、P浓度较治疗前均显著增加(P<0.05),证候总积分均显著减少(P<0.05);且观察组改善更显著(P<0.05)。与治疗前对比,两组治疗后血清IFN-γ水平及IFN-γ/IL-4和IFN-γ/IL-10比值均显著下降(P<0.05),血清IL-4、IL-10浓度均显著升高(P<0.05);且观察组改善更显著(P<0.05)。观察组不良反应率(8.5%)与对照组(6.4%)比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论RA患者应用补肾养血安胎汤治疗可有效缓解患者肾虚血亏相关症状,上调体内妊娠激素表达水平,促进血清Th1/Th2细胞因子平衡向Th2方向偏移,保胎效果显著,患者耐受性较好。