一期前后路手术治疗颈椎骨折脱位并四肢瘫

目的探讨一期前后路手术治疗颈椎骨折脱位并四肢瘫的意义。方法回顾性分析23例颈椎骨折脱位并四肢瘫患者手术治疗的临床资料。结果 23例患者随访0～12个月,平均（5.8±3.6）个月。4例患者死亡,19例患者存活,脊髓功能ASIA评分提高0～1级。术前ASIA分级为A级9例,术后ASIA评分提高为B级2例,无提高3例,死亡4例;术前ASIA分级为B级14例,术后ASIA评分提高为C级6例,无提高8例。4例死亡病例均为单纯前路减压手术：1例术后呼吸、心搏骤停死亡,2例因自主呼吸微弱出院后在家中死亡,1例死于并发肺部感染。8例ASIA分级提高一个级别的均为一期前后路减压手术。结论一期前后路颈椎管减压植骨内固定或并硬膜下减压是治疗此类患者有价值的方法。     

脊髓内移植纤维蛋白胶包裹嗅粘膜固有层促进损伤轴突再生

目的：将富含嗅神经鞘细胞的大鼠嗅粘膜固有层(OLP)碎片裹以纤维蛋白胶(FG)，移植到脊髓全横断断端间隙内，观察对脊髓两断端连接及轴突再生的影响。方法：成年雄性SD大鼠24只，全横断胸10节段脊髓。分别于脊髓断端间隙内移植OLP(OLP组)、FG包裹的OLP(FG-OLP组)或等量的FG(FG组)，每组6只；另6只仅行脊髓横切（单纯全切组）。10wk后处死动物，取材观察四组大鼠脊髓断端的连接情况。再取损伤区2cm范围脊髓节段，行冰冻水平切片，免疫组化ABC法染色，观察神经丝（NF）和生长相关蛋白－43(GAP－43）免疫组化染色阳性神经纤维的分布与形态，同时行NF和GAP－43的免疫荧光双标染色，激光共聚焦显微镜下观察两者的相互关系及形态异同。结果：单纯全切组和OLP组脊髓两断端连接较差;FG组和FG－OLP组断端连接较好，少有空洞。单纯全切组和FG组损伤区可见少量NF及GAP－43免疫组化染色阳性纤维，分布弥散，纤维细小，排列方向凌乱。OLP组可见较多NF及GAP－43免疫组化染色阳性纤维，但未见跨越脊髓横切部位；而FG－OLP组损伤区内有大量NF及GAP－43免疫组化染色阳性纤维，并跨越脊髓横切部位。NF和GAP－43免疫荧光双标结果显示，二者在损伤区的分布相同。结论：脊髓断端间隙内移植FG包裹的OLP碎片可促进脊髓两断端的连接及轴突的再生。     

大鼠脊髓损伤BDNF基因修饰神经干细胞移植后HRP逆行示踪

目的：检测大鼠脊髓损伤脑源性神经营养因子（Brain-derived neurotrophic factor,BDNF)基因修饰神经干细胞移植后，神经纤维的再通及后肢功能恢复情况。方法：大鼠L4脊髓全横断后，在横断处立即移植BDNF基因修饰神经干细胞，分四个时相点（1周，1、2、3个月）进行辣根过氧化物酶（HRP）逆行示踪，并观察损伤移植处的形态学变化及大鼠后肢运动功能恢复情况。结果：损伤移植处脊髓的形态学明显好转；损伤移植处上段脊髓中，移植1个月组有HRP阳性细胞，以后两组逐渐增多；移植组大鼠后肢运动功能明显恢复。结论：大鼠脊髓损伤BDNF基因修饰神经干细胞移植后，在损伤移植处有HRP阳性神经元和神经纤维，大鼠后肢运动功能明显恢复，提示BDNF基因修饰神经干细胞有修复大鼠脊髓损伤的作用。     

大鼠嗅鞘细胞移植对脊髓横断损伤的修复作用

目的观察嗅鞘细胞（OECs）移植后在体内的存活情况和对脊髓横断伤的修复作用。方法4月龄SD大鼠,体质量250g左右。显露T9段脊髓,完全横行切断脊髓。A组（20只）在损伤远近端注射由成年SD大鼠嗅球分离、培养、纯化的OECs,B组（20只）在相同位置注射DMEM培养液,C组（10只）单纯做T9节段的椎板减压。术后观察动物脊髓功能恢复情况,每2周测定1次后肢运动功能（BBB评分法）,共12周。术后3个月取损伤段及其临近脊髓标本,做HE染色、嗜银染色、抗NF和p75免疫组化染色。利用p75免疫组化染色来观察OECs在体内存活情况。结果手术后4周开始有运动功能恢复,在各个时间段BBB运动功能得分A组均显著高于B组（均P〈0.001）。A、B组都有神经纤维进入损伤区,在损伤近端,神经纤维数量A组显著多于B组（P〈0.001）,但都显著少于相应节段的C组（P〈0.001）。经过p75免疫组化的OECs存在于脊髓损伤段周围,最远可到距离损伤区边缘1.0cm处。脊髓损伤再生神经纤维的数量与运动功能恢复成正相关（P〈0.01）。结论OECs移植具有明显促进脊髓横断伤神经纤维再生和功能恢复的作用。     

颈脊髓压迫模型的建立及意义

目的 :旨在探索、建立颈脊髓压迫损伤的动物模型 ,并观察、研究其病理学改变过程 ,为临床治疗颈脊髓损伤提供理论依据。　方法 :通过在犬C4 、C5椎间孔置入不锈钢螺钉压迫脊髓 ,成功建立起一种新型不完全性颈脊髓压迫损伤的动物模型 ,并通过光镜和电镜研究创伤后不同时间脊髓的病理改变。　结果 :损伤后动物表现为不完全性瘫痪 ,随时间的推移运动功能逐渐恢复。病理改变结果可分三期 :早期脊髓内出血、水肿及神经元和神经纤维变性 ;中期神经元和神经纤维变性达到高峰 ,胶质细胞增生 ;晚期出现机化和修复 ,部分神经元和神经纤维恢复正常形态。　结论 :颈脊髓不完全性压迫损伤后脊髓功能有恢复的可能 ,临床应进行早期治疗。     

阻断Rho/ROCK信号传导通路对大鼠脊髓损伤的治疗效果

目的：探究阻断Rho/ROCK信号传导通路对大鼠脊髓损伤的治疗效果。方法选取大鼠脊髓损伤动物模型150只,分为假手术组、实验组和对照组,各50只。假手术组进行椎板切除术;对照组进行脊髓横断损伤,并对其腹腔注射生理盐水;实验组进行脊髓横断手术,给予腹腔注射Fasudil。结果实验组的RhoA mRNA明显降低。同时还能见到部分纤维以及大量的NF阳性纤维穿过脊髓横断部位,并沿其尾端伸长。结论阻断Rho/ROCK信号传导通路对轴突再生、传导功能恢复以及损伤脊髓运动具有显著的促进作用。     

地塞米松局部应用对犬完全性脊髓横断伤再生的影响

目的　观察地塞米松局部应用对犬完全性脊髓横断伤再生的影响。方法　将 9条杂种犬分为两组 ,胸10平面造成 4～ 5mm的脊髓缺损 ,实验组 6条犬 ,将饱和状态下地塞米松组织液凝块植入脊髓缺损处。对照组 3条犬 ,仅植入组织液凝块。术后对两组犬的行为学进行评分 ,并用摄像机记录。术后 5个月心脏灌流固定 ,石腊包埋 ,切片。选用神经中丝抗体 (anti-neurofiblament ,NF)对桥接区组织内神经轴突进行标记 ,计算两组NF的阳性表达率。 6号犬和 9号犬桥接区组织同时行电镜观察。结果　实验组行为学评分明显高于对照组 ,有显著性差异 ( 0 .0 1

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Human neural stem cells promote corticospinal axons regeneration and synapse reformation in injured spinal cord of rats

Background Axonal regeneration in lesioned mammalian central nervous system is abortive, and this causes permanent disabilities in individuals with spinal cord injuries. This paper studied the action of neural stem cell （NSC） in promoting corticospinal axons regeneration and synapse reformation in rats with injured spinal cord. Methods NSCs were isolated from the cortical tissue of spontaneous aborted human fetuses in accordance with the ethical request. The cells were discarded from the NSC culture to acquire NSC-conditioned medium. Sixty adult Wistar rats were randomly divided into four groups （n=15 in each）： NSC graft, NSC medium, graft control and medium control groups. Microsurgical transection of the spinal cord was performed in all the rats at the T11. The NSC graft group received stereotaxic injections of NSCs suspension into both the spinal cord stumps immediately after transection; graft control group received DMEM injection. In NSC medium group, NSC-conditioned medium was administered into the spinal cord every week; NSC culture medium was administered to the medium control group. Hindlimb motor function was assessed using the BBB Locomotor Rating Scale. Regeneration of biotin dextran amine （BDA） labeled corticospinal tract was assessed. Differentiation of NSCs and the expression of synaptophysin at the distal end of the injured spinal cord were observed under a confocal microscope. Group comparisons of behavioral data were analyzed with ANOVA. Results NSCs transplantation resulted in extensive growth of corticospinal axons and locomotor recovery in adult rats after complete spinal cord transection, the mean BBB scores reached 12.5 in NSC graft group and 2.5 in graft control group （P〈 0.05）. There was also significant difference in BBB score between the NSC medium （11.7） and medium control groups （3.7, P〈 0.05）. BDA traces regenerated fibers sprouted across the lesion site and entered the caudal part of the spinal cord. Synaptophysin expression colocalized with BDA positive axons and neurons distal to the injury site. Transplanted cells were found to migrate into the lesion, but not scatter along the route of axon grows. The cells differentiated into astrocytes or oligodendrocytes, but not into the neurons after transplantation. Furthermore, NSC medium administration did not limit the degree of axon sprouting and functional recovery of the injured rats compared to the NSC graft group. Conclusions Human embryonic neural stem cells can promote functional corticospinal axons regeneration and synapse reformation in the injured spinal cord of rats. The action is mainly through the nutritional effect of the stem cells on the spinal cord.     

狗胚胎小脑组织移植修复脊髓横断的实验研究

本实验用狗胚胎小脑组织移植,修复脊髓横断损伤,获得如下结果:1.胚胎小脑组织移植,有抑制瘢痕组织生长、保存及促进脊髓组织再生的作用;2.保全血管或尽量减少血管损伤,是治疗修复脊髓损伤的重要条件;3.保存损伤脊髓的残存纤维联系,既或是微小的联系,对恢复脊髓的功能也是重要的。     

施万细胞移植促进大鼠脊髓全横断损伤后大脑皮质锥体神经元和红核神经元的存活

[目的] 探讨施万细胞移植对大鼠脊髓全横断损伤后大脑皮质感觉运动区神经元和脑干红核神经元存活的影响.[方法] 大鼠脊髓全横断损伤后移植吸附施万细胞的胶原或明胶,术后 3个月计数大脑皮质感觉运动区锥体神经元和脑干红核神经元密度以及红核体积.同时以单纯移植胶原或明胶或不移植物体的脊髓损伤大鼠为对照.[结果] 脊髓全横断损伤后,大脑皮质感觉运动区锥体神经元密度和脑干红核神经元密度明显较正常大鼠相应区域内的神经元密度降低;移植施万细胞的两个组(胶原施万细胞组和明胶施万细胞组)上述两个区域的神经元密度较未移植施万细胞的 3个组(对照组,胶原组和明胶组)高,差异有统计学意义;而移植施万细胞的两个组之间比较或未移植施万细胞的 3个组之间比较,上述区域的神经元密度无显著性差异.[结论] 脊髓全横断损伤可导致大脑皮质感觉运动区锥体神经元和脑干红核神经元发生死亡,施万细胞移植能够促进脊髓损伤后大脑皮质感觉运动区锥体神经元和脑干红核神经元的存活.     

大鼠不完全性脊髓损伤免疫组化及超微结构研究

应用改良Ａｌｌｅｎ方法制成Ｗｉｓｔａｒ大鼠Ｔ１３不完全损伤模型。采用定量免疫组化方法观察脊髓损伤后１周白质内轴突及神经胶质细胞数量变化。应用透射电镜技术，于损伤后６ｈ，２４ｈ观察脊髓超微结构变化。结果表明：脊髓损伤后白质内轴突及神经胶质细胞均明显减少；损伤早期，脊髓超微结构改变明显。本文对上述变化的机理和意义进行了讨论。     

胚胎脊髓移植对损伤脊髓修复作用的病理组织学和超微结构观察

目的：观察胚胎脊髓在缓解损伤脊髓的病理反应及其发生发展中的作用，方法：将妊娠１４ｄ大鼠胚胎脊髓植入半切洞损伤的成鼠脊髓后１、３、５、７、１０、１５、３０、４５和６０ｄ时，取材做光镜和电镜观察，结果：单纯脊髓损伤后，发生了出血水肿，变性坏死以及囊腔成胶质细胞增生和神经纤维再生，胚胎脊髓植入后，明显减轻了神经元和神经纤维的坏死变性程度，并能对损伤元实施挽救，有效抑制了病理囊腔的形成，也可填补原发损伤造     

多西他赛和顺铂对大鼠脊髓损伤的形态学观察

[目的]探讨化疗药物多西他赛（doeetaxel）和顺铂对大鼠脊髓损伤的影响。[方法]将24只Wistar品系大鼠随机分为空白组、多西他赛组、顺铂组、顺铂和多西他赛合用组,腹腔注射单次给予多西他赛5mg／kg、顺铂5mg／kg、多西他赛和顺铂各5mg／kg。5个月后,行活体灌注固定,取材,光镜和电镜观察脊髓的形态学变化。[结果]光镜下观察与对照组相比,顺铂组：灰质神经元形态未见异常,但可见血管扩张明显,白质神经纤维髓鞘变性肿胀断裂;多西他赛组：灰质神经元肿胀,尼氏体减少并消失,神经纤维变性坏死,神经胶质细胞增生,白质神经纤维髓鞘变性肿胀断裂;顺铂与多西他赛合用组：灰质内胶质细胞核固缩,灰质神经纤维变性肿胀,空泡样变,血管扩张,神经元尼氏体明显,白质神经纤维髓鞘变性肿胀断裂。电镜下,与对照组相比,顺铂组部分髓鞘的板层结构松解、扭曲;多西他赛组部分髓鞘结构出现板层结构松解、扭曲等轻度变化,细胞器相对完好;多西他赛与顺铂联合组髓鞘结构出现板层结构松解、扭曲。[结论]脊髓损伤后神经细胞损伤在形态改变上呈现多样性。化疗药物多西他赛和顺铂明显加重脊髓损伤,且顺铂与多西他赛合用脊髓损伤更重。     

24例胸腰椎爆裂性骨折合并脊髓损伤的综合治疗

目的为探讨胸腰椎爆裂性骨折合并脊髓神经损伤的治疗效果.方法自1998年10月至2004年10月我科用综合治疗方法治疗胸腰椎爆裂性骨折合并脊髓神经损伤病人24例,手术采用AF内固定系统,随访9个月至4年.结果不完全截瘫患者术后全部恢复良好,4例全瘫患者2例有1～2级恢复.结论我们认为:伤后早期手术,椎管彻底减压,坚强的内固定,术前术后正确处理是治疗胸腰椎爆裂性骨折合并脊髓神经损伤的关键.     

大鼠脊髓横断伤后大脑运动皮质的再生反应的实验研究

目的研究成年SD大鼠大脑运动皮质在脊髓横断伤后的再生反应。方法在胸9水平完全横断脊髓，术后1、3、5、7和14d，取大鼠大脑运动皮质和脊髓分别进行GAP-43mRNA组织原位杂交和NF200免疫组化。结果大鼠在脊髓横断伤后出现大脑运动皮质GAP-43mRNA表达，主要分布在大脑运动皮质的V、Ⅵ层；脊髓横断伤组在术后14d内，脊髓断端白质内NF200的表达逐渐由稀疏至消失。结论实验揭示了大鼠脊髓横断后，皮质脊髓束神经元在两周内不会出现数量减少；并发现大脑运动皮质在皮质脊髓束横断后能出现短时间的再生反应。     

带血运的组织并胚胎脊髓移植对损伤脊髓的修复作用

目的 探讨带蒂的大网膜、椎旁肌并胚胎脊髓移植对损伤脊髓的修复作用。方法 采用大鼠脊髓半切洞损伤模型,将动物分为胚胎脊髓移植 大网膜组、胚胎脊髓移植 椎旁肌组、胚胎脊髓移植组、损伤对照组。移植后1、2、4、8、12周,进行HE、Nissl、嗜银染色、电镜检查和免疫细胞化学检查,观察移植存活、分化及其宿主之间的关系。结果 提供血运的胚胎脊髓移植到损伤的脊髓后,移植物膛逐渐增大,充满损伤的洞腔,并可在宿主脊髓内继续分化发育,与宿主脊髓形成部分纤维和血管联系。结论 带蒂的大网膜和胚胎脊髓组织联合移植能较好地修复损伤的脊髓。     

电针对脊髓损伤后硫酸软骨素蛋白多糖表达的影响

目的观察电针对脊髓损伤后硫酸软骨素蛋白多糖(CSPGs)表达的影响,探讨电针对脊髓损伤修复的可能作用机制。方法将成年SD大鼠40只分为正常对照组、模型组和电针组。建立成年大鼠T9～T10段脊髓全横断损伤模型。除电针组于术后当天进行电针治疗外,3个组均分别于术后7、14、28 d取材,用免疫组织化学ABC法和图像分析技术检测脊髓内CSPGs的表达。结果术后7～28 d,与正常对照组相比模型组脊髓损伤邻近组织内CSPGs表达明显增强(P<0.05);与模型组相比,电针组脊髓损伤邻近组织内CSPGs表达明显受到抑制,差异显著(P<0.05)。结论电针能显著降低脊髓损伤后CSPGs的表达,从而减弱CSPGs对轴突再生的抑制作用,这可能是其促进脊髓损伤修复的可能机制之一。     

外源性血管内皮生长因子对损伤脊髓的作用

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实验性家兔脊髓损伤后后肢运动功能与肌肉运动诱发电位的关系

目的 了解实验性家兔脊髓损伤模型损伤后肢体肌力和肌肉运动诱发电位(MEP)之间的关系.方法 45只家兔随机分为打击组和对照组共9组,打击能量分别为0、50、75、100、125、150、175、200、250 gcf.打击后和第4周末记录实验兔双后肢肌力、MEP的潜伏期和波幅,并在第4周末取家兔脊髓固定,脊髓神经中丝(NF)免疫组化及病理形态观察,测量NF光密度,进行统计分析.结果 脊髓受到外伤打击后,术中MEP的表现是出现或消失,即"有或无",并与伤后实验兔后肢运动功能状态、术后皮质脊髓束神经微丝NF光密度相关.伤后4周实验兔的后肢MEP潜伏期延长程度与肌力下降呈线性相关,但其波幅与伤后肌力变化无相关.结论 在脊髓损伤中可以通过肌肉MEP的"有或无"作为判断脊髓损伤程度的指标.     

无脊髓损伤的陈旧性下颈椎骨折脱位的外科治疗

目的：探讨无脊髓损伤的陈旧性下颈椎骨折脱位的手术治疗方法。方法：对9例无脊髓损伤的陈旧性下颈椎骨折或者骨折脱位患者,采用经前路伤椎椎体次全切除减压、复位、自体髂骨植骨融合及Orion^TM钢板固定或采用一期前后路联合手术切开复位,椎间融合加Orion^TM钢板固定融合的方法进行手术治疗。结果：术后全部病例经随访观察,症状获得改善,7例完全恢复,2例残留手指麻木。术后6个月全部返回工作岗位。颈椎椎间高度、生理曲度维持良好,无内固定失败等并发症。结论：对于无脊髓损伤的陈旧性下颈椎骨折脱位宜采用一期前后路联合手术切开复位、椎间融合加钢板内固定的方法,最大限度保留活动节段,恢复颈椎椎间高度和生理曲度,重建颈椎即刻稳定性;对于无脱位的骨折宜采用单纯前路手术,除可达到减压、复位、恢复椎间高度和生理曲度外,更重要的是可重建颈椎即刻稳定性,对防止继发性脊髓损伤有极其重要的作用。