在实验动物模型中,引起血吸虫保护性免疫的抗原的研究

一、前言在实验动物中发现,将肿瘤移植于已患肿瘤的动物体内,则该动物不能阻止原来的肿瘤不断生长,却能抵抗移植的肿瘤,称为伴随免疫。在血吸虫的免疫中也存在类似现象,也称为伴随免疫,即宿主经过初次感染血吸虫后能产生对再感染的抵抗力,但这种抵抗力不能破坏初次感染的成虫,也不能阻止其产卵。血吸虫的伴随免疫是由于体液免疫和细胞免疫的协同作用,其效应机理至少涉及抗体、补体、嗜酸性粒细胞和巨噬细胞等的协同作用。近年来的研究肯定     

空肠弯曲菌热休克蛋白43对T细胞的活化作用

本文用＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入试验发现空肠弯曲菌４３ＫＤ热休克蛋白（ＨＳＰ４３）能显著促进小鼠脾淋巴细胞活化，并呈剂量依赖关系，这种活化作用不但能被特异性针对ＨＳＰ４３的二株单抗明显抑制，而且也能针对ＨＳＰ６０家族保守区序列的二株单抗所抑制，去除巨噬细胞同样也能抑制ＨＳＰ４３活化作用。用单抗和补体的特异性杀伤所致Ｔ细胞亚群缺失试验发现ＨＳＰ４３主要活化ＣＤ４＾＋Ｔ细胞，本文结果提示空肠弯曲菌ＨＳＰ４３可     

耐药质粒介导宿主菌抵抗非特异性免疫应答的研究

研究伤寒杆菌的耐药质粒pRST98是否能增强宿主菌的毒力 ,抵抗机体非特异性免疫应答———血清杀菌和巨噬细胞吞噬作用。 3株具有同源染色体的伤寒杆菌 (1)携带pRST98的野生型伤寒杆菌—STpRST98;(2 )经SDS人工消除pRST98的突变体菌株—ST (R ) ;(3)将pRST98重新导入突变体的接合子—pRST98/ST (R )菌株 ,用体外试验比较它们在人、兔及豚鼠 3种不同浓度、不同成分血清中的存活率 ,研究pRST98与血清杀菌试验中细菌抵抗力的关系。将荧光染料标记以上 3株细菌 ,用流式细胞术 (FCM )和标准系列稀释法检测它们被BALB/c小鼠腹腔巨噬细胞MΦJ774A 1吞噬和吞噬后在细胞内的存活情况。实验结果表明 ,携带pRST98的伤寒杆菌在血清中的抵抗力显著大于无此质粒的菌株 (P <0 0 5 ) ,被巨噬细胞吞噬的标记ST (R )菌量显著多于STpRST98和pRST98/ST (R ) ,但pRST98宿主菌在巨噬细胞内的活菌数却明显多于无此质粒的菌株 (P <0 0 5 )。说明pRST98不但能编码对药物的抗性 ,还能提高其宿主菌抵抗机体非特异性免疫应答的能力     

麻风患者的细胞免疫——外周血中的T淋巴细胞及其对PHA的反应

瘤型麻风(LL)有特异性和非特异性细胞免疫缺陷,但机制不明。有人认为与遗传因素有关,也有人认为是表示免疫耐受或免疫偏离状态。这种细胞免疫缺陷的发生部位可能在T淋巴细胞或者麻风菌诱导的淋巴细胞与巨噬细胞相互作用点。另有人认为可能由于存在血清因子所致。本文目的在于探     

氧固醇诱导巨噬细胞J774A.1的凋亡依赖于NF-κB的活化

目的:探讨7-酮基胆固醇(7-KC)作用小鼠巨噬细胞J774A.1后,NF-κB的活化与细胞凋亡的关系.方法:细胞经7-KC处理后,通过形态学观察,MTT检测法,DNA电泳,流式细胞术检测细胞凋亡水平.用Western blot和免疫组织化学方法检测NF-κB活化情况,采用二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)抑制实验检测NF-κB活化对7-KC诱导的细胞凋亡的影响.结果:7-KC能抑制小鼠巨噬细胞的生长并促进细胞凋亡,同时能诱导小鼠巨噬细胞NF-κB的活化,且NF-κB特异性抑制剂PDTC能显著抑制7-KC诱导的细胞凋亡.结论:7-KC能通过活化NF-κB途径诱导巨噬细胞发生凋亡.     

哮喘病人MΦ之ADCC效应及非特异性吞噬功能

体外测定了２４例支气管哮喘急性发作期病人和３４例健康人外周血单核／巨噬细胞的ＡＤＣＣ效应及非特异性吞噬功能。结果表明：自然状态下，哮喘病人单核／巨噬细胞ＡＤＣＣ作用及非特异性吞噬功能与健康对照无差异；但经ＬＰＳ活化后，哮喘组ＡＤＣＣ效应明显高于健康对照组，而特异性吞噬功能减弱，低于健康对照，两者差异均显著（Ｐ〈０．０５）。提示：哮喘病人单核／巨噬细胞ＡＤＣＣ作用增高可能参与了病变局部变态反应性炎症     

巨噬细胞对肿瘤细胞结合与杀伤功能的研究——癌性腹水对LPS活化的小鼠腹腔巨噬细胞结合与杀伤功能的研究

带瘤宿主中巨噬细胞(Mφ)的结合与杀伤功能均受到一定程度的抑制。带瘤宿主在体内通过分泌一些低分子量的可溶性物质可抑制迟发性超敏反应,及Mφ对“非特异性”刺激的聚集反应和Mφ介导的抗感染的抵抗力。在体外可抑制Mφ游走     

γ干扰素对培养的小鼠腹腔巨噬细胞产生过氧化氢的影响

活化的巨噬细胞是细胞免疫应答的主要效应细胞。巨噬细胞可以通过T细胞及其产物而激活,其中包括γ干扰素(IFN-γ)这就导致产生杀菌物质如过氧化氢的能力增强,IFN-γ已被看作是激活巨噬细胞的一种主要T细胞产物。然而作者的研究发现IFN-γ在某些情况下可担当调节因子,而不是单独起着活化因子的作用,这种变化要取决于巨噬细胞状态-是静止的,还是活化的,以及所用活化剂的种类。     

巨噬细胞特异性启动子调控的真核表达载体的构建及靶向性研究

目的:构建巨噬细胞特异性启动子调控的靶向巨噬细胞的真核表达载体.方法:PCR方法合成巨噬细胞特异性启动子,并将其插入带有绿色荧光蛋白(CFP)基因的真核表达载体pEGFP-N1 中,替代CMV启动子.利用脂质体转染法,将其与红色荧光蛋白真核表达载体(pERFP-N1)共转染巨噬细胞和非巨噬细胞,通过荧光显微镜观察GFP和RFP在不同细胞中的表达水平来鉴定启动子的靶向性.结果:成功构建了巨噬细胞特异性启动子调控的真核表达载体,并且能在巨噬细胞中高效特异性地表达报告基因.结论:构建的靶向巨噬细胞的真核表达载体能提高目的基因的表达特异性,为提高基因治疗胞内菌感染的靶向性及降低毒副作用奠定了实验基础.     

采用2-氯腺苷改善MTT法检测淋巴细胞激活和杀伤功能1

目的研究2-氯腺苷(2-ClA)特异性杀伤巨噬细胞对MTT法检测淋巴细胞激活试验和细胞毒试验的影响.方法运用细胞培养技术,培养小鼠脾淋巴细胞和腹腔巨噬细胞.通过MTT法检测2-ClA处理和未处理的淋巴细胞的激活以及特异性活化后对肿瘤细胞的杀伤,同时还检测2-ClA对巨噬细胞的毒性作用.结果2-ClA对巨噬细胞有很强的杀伤作用,采用MTT法检测淋巴细胞的活化和杀伤活性时,2-ClA处理组的OD值要明显低于未经2-ClA处理的对照组(P＜0.05).结论2-ClA通过特异性杀伤巨噬细胞可以消除巨噬细胞在MTT法检测淋巴细胞激活和杀伤试验中所产生的影响,使检测更为准确.     

采用2—氯腺苷改善MTT法检测淋巴细胞激活和杀伤功能

目的 :研究 2 氯腺苷 ( 2 ClA)特异性杀伤巨噬细胞对MTT法检测淋巴细胞激活试验和细胞毒试验的影响。方法 :运用细胞培养技术 ,培养小鼠脾淋巴细胞和腹腔巨噬细胞。通过MTT法检测 2 ClA处理和未处理的淋巴细胞的激活以及特异性活化后对肿瘤细胞的杀伤 ,同时还检测 2 ClA对巨噬细胞的毒性作用。结果 :2 ClA对巨噬细胞有很强的杀伤作用 ,采用MTT法检测淋巴细胞的活化和杀伤活性时 ,2 ClA处理组的OD值要明显低于未经 2 ClA处理的对照组 (P <0 0 5 )。结论 :2 ClA通过特异性杀伤巨噬细胞可以消除巨噬细胞在MTT法检测淋巴细胞激活和杀伤试验中所产生的影响 ,使检测更为准确。     

结核病患者循环免疫复合物的临床意义

<正> 1901年Levene曾指出结核杆菌对动物的致病力,主要地不是由于它分泌的毒素,而在于它对动物细胞和体液溶菌作用的抵抗力。人对结核菌的免疫力主要依靠巨噬细胞和T淋巴细胞协同作用的细胞介导兔疫,而体液免疫在结核发病机制中是与细胞免疫互相关联,并起调节作用。现将我院测得的142例结核病患者循环免疫复合物(简称CIC)进行了观察和分析。     

肠道NK细胞在清除鼠伤寒沙门氏菌中的作用

为了探讨肠道固有层NK细胞在抵抗肠道胞内菌感染中作用,我们建立了鼠伤寒沙门氏菌肠道感染模型,发现在用抗体清除NK1.1+NK细胞后,小鼠体重明显下降,肠系膜淋巴结和肝脾等部位的载菌量显著增多;继而应用流式细胞技术检测到感染后小肠固有层中NK细胞数量明显增加,发生明显活化,且IFN-γ的表达量增多;最后我们观察到,清除NK细胞明显削弱小鼠肠道固有层巨噬细胞的杀菌能力。结果表明,肠道NK细胞在抵抗肠道病原微生物入侵时发挥关键的作用,并且可通过促进肠道固有层巨噬细胞的活化增强巨噬细胞对病原菌的清除作用。     

心安颗粒的免疫作用研究

动物口服心安颗粒后，小鼠胸腺、脾脏等重要免疫器官重量增加；腹腔巨噬细胞吞噬功能增强；PHA刺激的淋巴细胞转化率提高。使HC50升高。说明该制剂具有增强非特异性和特异性免疫功能作用。     

肌萎缩蛋白参与淋巴细胞的活化及免疫突触的形成

目的：探讨在神经肌接头中发挥重要作用的膜表面糖化蛋白-肌萎缩蛋白是否参与免疫突触的形成，进而影响淋巴细胞的活化。方法：首先通过RT-PCR和FACS分别从mRNA水平和蛋白水平观察肌萎缩蛋白在各种免疫细胞中的表达，并经过共聚焦显微镜观察其是否参与免疫突触的形成，应用构建的反义质粒，研究其是否影响淋巴细胞的抗原特异性和非特异性活化。结果：肌萎缩蛋白广泛表达于T细胞、B细胞、不成熟DC、成熟DC及巨噬细胞中，且参与了免疫突触的形成。当淋巴细胞活化后其表达含量无明显上升，但其表达被下调后，不管是对特异抗原引起的淋巴细胞活化还是对非特异抗原引起的淋巴细胞活化都具有显著的抑制作用。结论：组成性表达于各种免疫细胞中的肌萎缩蛋白参与了免疫突触的形成，并影响了抗原特异性和抗原非特异性的淋巴细胞的活化。     

脂多糖增强对李斯特氏菌的抵抗力并抑制迟发超敏反应

已有报道革兰氏阴性菌的脂多糖(LPS)能提高小鼠对李斯特氏菌感染的抵抗力。但这类研究都是以存活动物数的多少来表示的。本文首次报道了给小鼠注射LPS后对抗李斯特氏菌反应的调节机制。以1μg LPS的剂量注入小鼠静脉后再用活菌攻击,发现LPS能提高小鼠抑制细菌繁殖的能力。4小时后试验组动物肝、脾中的细菌数明显低于对照组。经李斯特氏菌免疫后的小鼠脾细胞可以     

刀豆素A(ConA)对低浓度小鼠脾淋巴细胞的刺激——腹腔渗出细胞的作用

巨噬细胞是活化体外T淋巴细胞的必需辅助细胞。已经证明,不仅抗原、致有丝分裂因子和同种异体细胞活化T细胞需要巨噬细胞,而且细胞毒细胞的发育、许多因子活化B细胞也需巨噬细胞。行使这种功能的巨噬细胞必须是活细胞,但不一定要分裂。巨噬细胞在这些相互反应中的作用机制还不很清楚。作者用液体闪烁测定法观察腹腔渗出细胞(PEC)在刀豆素A(ConA)刺激鼠淋巴细胞培养中的作用。预备试验证明,10~5个淋巴细胞是研究ConA活化的最适浓度。     

预先用LPS处理可增强小鼠对李斯德氏菌的抵抗力并抑制DHR发生

革兰氏阴性(G~-)菌脂多糖(LPS)可增强或抑制好几种不相关微生物的抵抗力,这主要取决于感染的时间。材料报导,24小时前由静脉注入0.1 μgLPS,可保护小鼠对李斯德氏菌等G~ 或G~-菌致死剂量的攻击。LPS还是一种强烈的网状内皮系统刺激剂,可增强移植物抗宿主反应(GVH),同种移植物排斥等作用。LPS使动物对李斯德氏菌抵抗力增强的作用常常可用实验动物存活率增加来测定。本文报导了作者用小剂量LPS处理小鼠后,动物对李斯德氏菌的一些反应     

葡萄球菌花环试验检测抗巨噬细胞抗体

抗巨噬细胞抗体的发现和检测对进一步研究巨噬细胞(Mφ)及其在自身免疫性疾病过程中的作用具有重要意义。我们建立的葡萄球菌花环试验,是利用葡萄球菌A蛋白(SPA)能与人及多种哺乳类动物的Ig GFC段结合的特点,制成能吸附特异性抗体的颗粒载体,再与Mφ形成SPA花环,用来检     

巨噬细胞异质性与非酒精性脂肪性肝病进展的研究现状

巨噬细胞在非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)进展中发挥着关键作用。肝脏巨噬细胞由来源于卵黄囊和胎肝的组织定居巨噬细胞(Kupffer细胞)及骨髓单核细胞来源的巨噬细胞共同组成,具有起源异质性。另外,最新研究揭示体内巨噬细胞的活化状态已远远超出传统意义上简单的M1/M2型巨噬细胞活化模式而呈现出谱系变化,进而引起不同的功能变化。因此,我们从巨噬细胞起源,活化和功能异质性角度,结合NAFLD进程中激发肝巨噬细胞活化的因素及效应信号和靶向巨噬细胞治疗NAFLD的应用三个方面进行总结,有望为临床开展NAFLD的细胞治疗提供新思路和新策略。