核因子-kB反义核酸对前炎症细胞因子表达的实验研究

目的　研究核因子(NF) κB反义寡核苷酸对NF κB表达及其下游前炎症细胞因子表达的影响。方法　将不同浓度经硫代磷酸化修饰的反义寡核苷酸(PS AODN)导入培养的RAW 2 6 4 .7细胞中(与脂多糖预孵育) ,设立空白对照组和错义寡核苷酸(MODN)组。采用免疫组织化学SABC法检测细胞中NF κBp65、内皮细胞黏附因子(ICAM )、一氧化氮合酶(iNOS)的表达。结果　AODN组的NF κB p65,ICAM ,iNOS表达较空白对照组及MODN组明显降低(P <0 .0 5 ) ,且在1.0～5 .0 μmol/L范围内AODN的作用随其浓度增加而增加。结论　AODN能有效阻抑NF κB在脂多糖刺激下的表达,从而抑制各前炎症细胞因子的表达。     

镧对仔鼠海马核转录因子-κB表达影响

目的探讨亚慢性氯化镧(La Cl3)暴露对子代大鼠海马组织核转录因子-κB(NF-κB)表达的影响。方法健康成年雌性Wistar大鼠24只,随机分为对照组及0.25%、0.5%、1.0%La Cl3组,染镧组仔鼠自雌鼠受孕至断乳后1个月通过自由饮水摄入镧;利用免疫组化法检测海马p-IKKα/β的分布和表达;应用Western blot法检测海马组织p-IκBα和p-NF-κBP65的表达。结果 0.25%、0.5%、1.0%La Cl3组仔鼠海马CA1区p-IKKα/β表达分别为(54.72±10.04)、(40.73±4.90)、(32.99±5.42),CA3区表达分别为(64.80±8.27)、(47.78±4.92)、(36.17±7.71),DG区表达分别为(303.67±34.78)、(166.83±29.8)、(87.01±17.40);CA1、CA3、DG区各染镧组仔鼠海马3区的p-IKKα/β表达与对照组比较,除DG区0.25%La Cl3组外其他各染镧组仔鼠海马p-IKKα/β表达均低于对照组(P<0.05);0.25%、0.5%、1.0%La Cl3组仔鼠海马p-IκBα和p-NF-κBp65蛋白表达IDV值分别为(0.58±0.06)和(0.46±0.06)、(0.49±0.07)和(0.36±0.08)、(0.36±0.09)和(0.25±0.08),均低于对照组的(0.68±0.05)和(0.56±0.08)(P<0.05),仔鼠海马p-IκBα和p-NF-κBp65蛋白表达均与La Cl3染毒剂量呈负相关(r=-0.994、-0.978,P<0.05)。结论亚慢性La C13染毒可引起子代大鼠海马细胞NF-κB活性降低,可能是镧引起学习记忆能力下降的机制之一。     

SiO2对人肺泡巨噬细胞核因子-κB表达的意义

目的：探讨二氧化硅（SiO2）对人肺泡巨噬细胞核因子-κB（nuclear factor-κB,NF-κB）表达的影响。方法：收集硅肺患者肺泡灌洗液中的肺泡巨噬细胞（AM），在体外再次染尘和无血清培养基：培养3、6、12、18、24、36h，用免疫组化检测AM中NF-κB的表达。结果：处理组（AM二次染尘，S组）NF-κB的表达明显上调，并且随刺激时间不同表达量不同，于18h达高峰。处理组NF-κB的表达在3、6、12、18、24、36h均高于对照组（ 矽肺患者AM，C组）。结论：SiO2可诱导AM的NF-κB的高表达，提示其在肺纤维化过程中起重要作用。     

核因子-κB与肾脏的缺血再灌注损伤

核因子-κB是核因子中重要的一组蛋白质,核因子-κB过度活化在肾缺血再灌注损伤中起着重要作用.许多以抑制核因子-κB活化为目的的实验方法,试从分子水平、基因水平为防治肾脏的缺血再灌注损伤提供新途径.该文就核因子-κB与肾脏缺血再灌注损伤的关系与窒息后肾脏的缺血再灌注损伤的防治及与麻醉药物、一氧化氮、抗凋亡、血管扩张药物、热休克蛋白、促红细胞生成素肾保护作用的关系,基因工程法防治肾脏缺血再灌注损伤等方面的进展进行综述.     

活性氧对核因子-κB和低氧诱导因子-1的调控

氧是需氧生物必不可少的基本物质.需氧细胞在代谢过程中产生的活性氧(reactive oxygen species,ROS),不仅参与细胞的凋亡、坏死;还作为信号分子,参与细胞信号转导、激活转录因子、影响基因表达,以协调应答各种氧分压变化.     

全身炎症反应综合征患儿核因子-κB活化及IL-6合成的检测

目的探讨全身炎症反应综合征核因子-κB3活化及IL-6合成的情况。方法用中性粒细胞核因子-κB活性测定法、血清免疫因子IL-6放射免疫浓度测定法测定30例全身炎症反应综合征患儿及30例正常人组中性粒细胞核因子-κB活性、血清免疫因子IL-6放射免疫浓度。结果全身炎症反应综合征患儿核因子-κB活化及IL-6合成增加。结论患儿发生全身炎症反应综合征时存在核因子-κB活性及IL-6合成的变化。     

核因子-κB与缺血缺氧所致疾病的关系

核因子-κB是细胞中一个重要转录调控因子，存在于多种类型的细胞中。机体组织器官受到缺血缺氧的创伤后，核因子-κB被激活，从胞浆中进入细胞核内，结合到被诱导基因启动子序列上的κB位点，诱导基因转录，参与缺血缺氧导致心脏，肾脏，脑等重要器官的损伤，乃至危及生命。     

核因子-κB与缺血缺氧所致疾病的关系

核因子 κB是细胞中一个重要转录调控因子 ,存在于多种类型的细胞中。机体组织器官受到缺血缺氧的创伤后 ,核因子 κB被激活 ,从胞浆中进入细胞核内 ,结合到被诱导基因启动子序列上的κB位点 ,诱导基因转录 ,参与缺血缺氧导致心脏 ,肾脏 ,脑等重要器官的损伤 ,乃至危及生命。     

双歧杆菌黏附素对应激大鼠肠黏膜核因子-κB和细胞因子的影响

目的 研究双歧杆菌黏附素对大鼠肠黏膜核因子-κB （NF-κB）和细胞因子的影响.方法 将48只实验大鼠按随机数字表法分成应激组、黏附素组,每组24只,以束缚为应激条件建立应激模型,造模后持续实验8d.两组大鼠肠内营养供给量为热量125.4 kJ/（kg·d）,氮量0.2 g/（kg·d）.黏附素组大鼠喂养肠内营养加双歧杆菌黏附素5 mg/（kg·d）,应激组大鼠喂养肠内营养加等量的生理盐水5 mg/（kg·d）.测定造模前、造模后、实验第3天和第8天两组大鼠肠黏膜NF-κB定性表达结果以及肠黏膜和血浆NF-κB、白细胞介素-10 （IL-10）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、干扰素-γ（IFN-γ）定量表达结果.透射电镜下观察小肠黏膜形态学变化.结果 （1） NF-κB的表达：造模前、造模后、实验第3天、实验第8天应激组肠黏膜NF-κB的阳性表达率分别为O、79.2％ （19/24）、63.5％（15/24）、66.7％ （16/24）,黏附素组分别为O、68.4％ （17/24）、55.7％ （14/24）、45.8％ （11/24）;与造模前比较,造模后两组肠黏膜NF-κB表达明显上调（均P=0.000）,实验第3天和实验第8天,两组肠黏膜细胞核NF-κB表达阳性率仍明显高于造模前（均P=0.000）,与造模后和应激组比较,实验第8天黏附素组肠黏膜NF-κB表达明显下调（P值分别为0.015、0.021）.（2） TNF-α、IFN-γ与IL-10的定量表达：与造模前比较,造模后应激组与黏附素组大鼠肠黏膜TNF-α[应激组：（154.63±17.52）、（198.72±26.59） pg/g,黏附素组：（154.63±17.52）、（201.45±28.16） pg/g]、IFN-γ[应激组：（39.47±5.76）、（55.32±5.93） pg/g,黏附素组：（39.47±5.76）、（60.75±7.68）pg/g]浓度量和血浆TNF-α[应激组：（83.31±9.78）、（117.64±15.37） ng/L,黏附素组：（83.31±9.78）、（114.82±13.78） ng/L]、IFN-γ[（应激组：（17.35±2.62）、（28.73±4.17） ng/L,黏附素组：（17.35±2.62）、（30.56±4.85） ng/L]浓度明显升高（均P＜0.05）;实验第3天和第8天,应激组大鼠肠黏膜IFN-γ[（58.16±7.38）、（56.37 ±7.29） pg/g]、TNF-α[（215.76±31.54）、（211.83±33.61） pg/g]浓度和血浆IFN-γ[（29.35±4.76）、（30.25±3.67） ng/L]、TNF-α浓度[（125.71±17.38）、（141.26±19.65） ng/L]明显高于造模前（P均＜0.05）;实验第3天和第8天,黏附素组大鼠肠黏膜TNF-α[（165.43±24.58）、（171.57±26.87） pg/g]、IFN-γ[（42.35±4.92）、（40.58±4.65） pg/g]和血浆TNF-α[（103.96±13.68）、（94.53±12.66） ng/L]、IFN-γ[（20.78±2.84）、（19.65±2.45） ng/L]水平明显低于造模后（P均＜0.05）,而IL-10[肠黏膜：（62.82±8.34）、（75.16±9.65） pg/g,血浆：（43.32±5.28）、（55.64±6.87） ng/L]水平明显高于造模后（P均＜0.05）;与应激组比较,实验第3天和第8天,黏附素组大鼠肠黏膜TNF-α、IFN-γ和血浆IFN-γ、TNF-tα水平明显降低（P均＜0.05）,而IL-10水平明显升高（P均＜0.05）.（3）组织形态学观察：实验第8天,在电镜下可见黏附素组较造模后和应激组回肠绒毛、隐窝结构显著恢复.应激组较造模后肠黏膜绒毛、隐窝结构有一定程度的损害,固有膜水肿,膜内有炎性细胞浸润.结论 双歧杆菌黏附素通过调节肠黏膜炎性递质和细胞因子释放,对应激后肠黏膜损伤修复有一定作用.     

七叶皂苷钠对重症急性胰腺炎大鼠核因子-κB与炎性细胞因子的影响

目的观察七叶皂苷钠对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠胰腺组织核因子-κB(NF-κB)和血清炎性细胞因子的影响,探讨其作用机制。方法取SD大鼠24只,经胆胰管逆行注射5%牛磺胆酸钠制备SAP模型,分为假手术组、模型组、七叶皂苷钠组,每组各8只,雌雄各50%,采用尾静脉注射给药,术后6h和12h分别于光镜下观察胰腺组织的病理学改变、ELISA法检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1(IL-1)和IL-6水平,免疫组化法检测胰腺组织NF-κB的表达,数据采用SPSS15.0软件进行分析。结果术后6、12h七叶皂苷钠组病理评分分别为(6.40±1.20)、(9.90±2.10)分,与模型组的(8.80±1.70)、(15.50±2.00)分比较明显降低,差异有统计学意义(P<0.01);NF-κB阳性细胞IOD值分别为38.00±6.17、47.93±9.65,均低于模型组的49.93±10.66、61.24±8.70,差异有统计学意义(P<0.05);各时段血清TNF-α、IL-1和IL-6水平均明显低于模型组(P<0.05)。结论七叶皂苷钠通过抑制胰腺组织NF-κB的激活,减少炎性细胞因子的过度释放,对SAP大鼠具有保护作用。     

矽肺患者外周血的单核细胞核转录因子-κB水平

目的观察矽尘接触者和矽肺患者外周血单核细胞核转录因子-κB(NF-κB)水平的变化,探讨NF-κB在矽肺发生发展中的作用。方法采用ELISA法对100名不接触粉尘的对照人群,200名接触矽尘1年以上的接尘工人,32名矽尘作业观察对象(原诊断0+患者)及79例矽肺患者,检测其外周血单核细胞胞核蛋白中的NF-κB水平。结果矽肺组NF-κB水平较对照组和接尘组明显升高,接尘组NF-κB水平较对照组明显升高,差异均有统计学意义;在不同期别矽肺患者中NF-κB水平随矽肺期别升高也有升高的趋势。多元回归分析也表明NF-κB水平与接尘情况和矽肺的病情有关。结论接尘组和矽肺组外周血单核细胞NF-κB均有升高,此种升高除与矽肺的发病有关外,与矽肺的严重程度也有关,提示对外周血单核细胞NF-κB水平的监测可能成为矽肺发病预测、预后评估的生物标志物,而适当干预NF-κB的活化可能是矽肺防治新的干预靶点。     

迁移率改变法检测核转录因子-κB实验参数的建立

目的建立迁移率改变法检测核转录因子-κB实验参数,为准确检测核转录因子-κB奠定基础。方法分子探针标记,细胞的分离、培养和核转录因子的提取,NF-κB聚丙烯酰胺凝胶电泳分析。结果实验条件为300V,电泳18分钟后,对分子探针活性没有影响,分子探针与核转录因子结合特异性良好,电泳条带清晰。结论本文建立的方法省时、简便,敏感性高、特异性强。     

氯胺酮在体外循环中对核因子-κB及其他炎性介质表达的影响

目的观察氯胺酮在体外循环(CPB)中对核因子-κB(NF-κB)活性表达的影响及与TNF-α、IL-1活性表达的相关性。方法选择2008年全年CPB心内直视下瓣膜置换术手术患者24例,随机分成对照组和氯胺酮组,每组12例,氯胺酮组在诱导后和CPB流转开始前分别缓慢静脉滴注氯胺酮1 mg/kg,对照组静脉滴注同等容量的生理盐水,通过ELISA法-双抗体夹心法测定麻醉诱导后CPB前(T1)、CPB后30 min(T2)、CPB后1 h(T3)、CPB后4 h(T4)、手术结束(T5)、手术结束后24 h(T6)的NF-κB及TNF-α、IL-1的表达。结果两组患者在T3、T4时NF-κB及TNF-α、IL-1的表达较T1有明显增高,但氯胺酮组活性表达较对照组显著降低。结论氯胺酮在CPB中应用能够抑制NF-κB及其他炎性介质的活性表达。     

窒息新生鼠脑核因子-κB的表达及地塞米松的影响

【目的】观察核因子-κB（nuclear factor kappa B，NP-κB）在窒息新生大鼠窒息后不同时间脑组织内表达的动态变化及地塞米松（dexamethasone，DXM）早期干预的影响。【方法】出生7d新生大鼠随机分为：对照组，窒息组和DXM预处理组；制备新生大鼠窒息模型，并于窒息后1、3、5和7d取脑组织行石蜡切片。采用免疫组织化学方法检测窒息新生鼠脑组织NF-κB p65活性表达水平及应用DXM预处理后NF-κB p65活性变化情况，用苏木精-伊红染色观察窒息后脑组织形态学变化。【结果】窒息组新生鼠脑组织NF-κB的表达较对照组显著增强（P〈0．05），以5d时升高最明显；给予DXM预处理后，NF-κB的表达减弱（P〈0．05），窒息组神经元有凋亡现象，DXM预处理组凋亡神经元明显减少。【结论】窒息新生鼠脑组织NF—κB表达增加，凋亡神经元增多，窒息后5d时NF-κB的活性达高峰；DXM可抑制窒息新生鼠NF-κB的表达，减少神经元的凋亡。DXM可能通过抑制NF-κB活性减轻窒息脑损伤。     

核因子-κB在胚胎发育、毒物致畸中研究进展

胚胎及胚胎微环境的细胞因子对于维持正常妊娠很重要,其精细调控细胞的增殖、分化和凋亡.核转录因子-κB是调节凋亡的关键因子,通过对多种基因表达的调节,对妊娠的维持,胚胎发育有重要作用.该文对核转录因子-κB家族的基本组成结构和核转录因子-κB在胚胎发育及毒物致畸中的作用作以综述.     

核因子-κB抑制剂调控癌性恶病质的实验研究

目的:本研究旨在评价核因子-κB(NF-κB)抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)对C26恶病质小鼠炎性细胞因子的合成及对恶病质的调控作用.方法:采用雄性BALB/c小鼠皮下接种C26结肠癌细胞诱导恶病质模型,每天监测小鼠食物摄入量、体质量及肿瘤体积.于接种肿瘤后第7天开始,每天给予荷瘤鼠腹腔内注射等渗盐水及不同剂量的PDTC(10、50 及100 mg/kg),第16天处死小鼠,检测血生化指标、血清及肿瘤组织中IL-6水平,肿瘤组织NF-κB活性.结果:荷瘤组小鼠出现明显的组织消耗,第16天去瘤体质量为正常小鼠的71.3% (P＜0.01);腓肠肌及附睾脂肪重量分别减少42.4%和70.4% (P＜0.01);血清清蛋白、葡萄糖及三酰甘油水平显著下降(P＜0.01);血清及肿瘤组织IL-6水平显著升高(P＜0.01).PDTC呈剂量依赖性地抑制肿瘤组织NF-κB激活,抑制肿瘤组织IL-6的合成,抑制了去瘤体质量、腓肠肌及附睾脂肪的消耗,改善了恶病质.PDTC 100 mg/kg明显抑制肿瘤生长(P＜0.05).各组间食物摄入量无明显统计学差异.结论:PDTC通过抑制肿瘤组织NF-κB的激活,抑制炎性细胞因子的合成,从而改善了恶病质.     

核因子-κB1基因启动子区多态性与广东地区鼻咽癌的关联研究

目的 探讨核因子-κBl (NFKB1)基因启动子区-94ins/delATTG多态与鼻咽癌易感性的关系.方法 应用病例对照研究的方法,采用TaqMan基因型检测法对300例鼻咽癌原发病例和300例健康对照进行基因型检测,运用SAS9.13软件对研究位点基因型与鼻咽癌进行关联分析.结果 NFKB1基因-94ins/delATTG多态位点基因型分布在鼻咽癌病例和对照组中的差异有统计学意义(P=0.01),且鼻咽癌的发病风险随着-94ATTTGins等位基因个数呈显著的剂量效应关系(Ptrend=0.003),以-94del/delATTG基因型为参照,-94ins/insATTG基因型携带者发生鼻咽癌的危险性增高(Adjusted OR=2.02,95％CI=1.26～3.23),-94insATTG等位基因携带者发生鼻咽癌的危险是-94del/delATTG的1.65倍(Adjusted OR=1.65,95％CI=1.09～2.49).结论 NFKB1基因启动子区-94ins/delATTG多态与鼻咽癌相关,该位点insATTG等位基因可能是鼻咽癌的一个遗传易感基因.     

核因子κB与多囊卵巢综合征胰岛素抵抗相关研究

多囊卵巢综合征是育龄妇女常见的生殖内分泌紊乱性疾病,其临床表现高度异质性.胰岛素抵抗是多囊卵巢综合征的病理生理基础,但发生机制尚不清楚.近年研究发现,促炎细胞因子参与胰岛素抵抗的发生发展,多囊卵巢综合征可能是一种低度慢性炎症性疾病.核因子κB(NF-κB)是联系炎症与胰岛素抵抗的关键介质,NF-κB在多囊卵巢综合征的发病和进展中发挥着重要的作用.     

核因子κB与多囊卵巢综合征胰岛素抵抗相关研究

多囊卵巢综合征是育龄妇女常见的生殖内分泌紊乱性疾病,其临床表现高度异质性。胰岛素抵抗是多囊卵巢综合征的病理生理基础,但发生机制尚不清楚。近年研究发现,促炎细胞因子参与胰岛素抵抗的发生发展,多囊卵巢综合征可能是一种低度慢性炎症性疾病。核因子κB(NF-κB)是联系炎症与胰岛素抵抗的关键介质,NF-κB在多囊卵巢综合征的发病和进展中发挥着重要的作用。     

核因子-κB在左卡尼汀抑制肝细胞氧化损伤中的作用

目的研究左卡尼汀(L-carnitine)抑制过氧化氢(hydrogen peroxide,H_2O_2)诱导的肝细胞损伤作用是否与核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)有关。方法 CCK-8及乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)释放法测定核因子-κB抑制剂对过氧化氢诱导HL7702肝细胞损伤的影响;蛋白质印迹法检测左卡尼汀对过氧化氢损伤HL7702肝细胞核因子-κB表达的影响;细胞免疫荧光染色法测定核因子-κB的核易位情况;凝胶迁移实验(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)分析核因子-κB的DNA结合活性。结果与过氧化氢损伤组相比,核因子-κB抑制剂组细胞活性明显升高,乳酸脱氢酶释放率降低(P0.05,P0.01);过氧化氢损伤后细胞核核因子-κB表达增加,左卡尼汀预孵育对过氧化氢诱导的核因子-κB核转位具有明显抑制作用(P0.01);左卡尼汀对过氧化氢诱导的核因子-κB DNA结合活性增加也有抑制作用。结论左卡尼汀通过抑制核因子-κB活性而抑制过氧化氢诱导的肝细胞损伤。