炎症因素在泡沫细胞形成中的作用及三七皂苷对其影响

目的探讨炎症因素在小鼠腹腔巨噬细胞来源泡沫细胞形成中的作用及三七皂苷对其影响.方法在传统泡沫细胞形成模型基础上添加炎症刺激因素及三七皂苷,培养后,油红O染色观察泡沫细胞的形成,检测细胞内总胆固醇的含量,取细胞培养液测定TNF-α和IL-1的含量.结果酵母多糖能够明显增加细胞内脂质的沉积,同时伴有细胞产生TNF-α和IL-1的增加,三七皂苷可以明显减少由炎症因素引起的脂质沉积的增加,并同时减少炎症细胞因子的产生.结论炎症因素可以明显促进泡沫细胞的生成,三七皂苷可通过其抗炎活性干预这一过程.     

三七总皂苷对泡沫细胞内ABCA1和LXRα mRNA表达的影响

目的 观察三七总皂苷(Panat notoginseng saponins,PNS)对泡沫细胞ABCA1和LXRα mRNA表达及脂质沉积的影响.方法 提取SD大鼠腹腔巨噬细胞纯化后,与高、中、低剂量PNS(80、40、20μg/ml)及氧化低密度脂蛋白共孵育48 h.油红O染色观察细胞内脂质堆积情况,酶法测定细胞内总胆固醇(TC)、游离胆固醇(FC)、胆固醇酯(CE)的含量,并计算CE/TC值.采用RT-PCR法检测泡沫细胞ABCA1和LXRα mRNA表达情况.结果 模型组细胞中TC、FC、CE含量及CE/TC值均显著高于对照组(P<0.05);与模型组相比,PNS高、中剂量组细胞内TC、FC、CE含量及CE/TC值均显著降低(P<0.05).PNS高、中剂量组中ABCA1及LXRα mRNA的表达均显著高于模型组(P<0.01).结论 PNS可以上调ABCA1和LXRα mRNA表达并减少巨噬细胞源性泡沫细胞中脂质沉积.     

NG701通过减少CD36 mRNA表达抑制泡沫细胞形成

目的：观察NG701对泡沫细胞形成及CD36 mRNA表达的影响。方法：利用大鼠腹腔提取的巨噬细胞与氧化低密度脂蛋白共培养得到巨噬细胞源性泡沫细胞，加入不同浓度的NG701，观察泡沫细胞内胆固醇含量的变化，并利用RT-PCR法对CD36 mRNA表达情况进行检测。结果：NG701能够显著减少泡沫细胞内总胆固醇和胆固醇酯的含量，降低CE/TC的值。并剂量依赖性的降低CD36 mRNA表达。结论：NG701能通过减少CD36表达抑制巨噬细胞源性泡沫细胞的形成。     

三七总皂苷对人乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的影响

目的 探究三七总皂苷对人乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的影响.方法 三七总皂苷作用于人乳腺癌MDA-MB-231细胞作为处理组,同时设置空白对照组;MTT法检测细胞活性变化,光镜观察检测细胞形态学变化,凋亡试剂盒检测细胞凋亡情况,casepase 3试剂盒检测casepase 3的酶活性情况.结果 与空白对照组相比...     

三七总皂苷对成年地鼠视网膜节细胞存活的影响

【目的】探讨玻璃体注射三七总皂苷（tPNS）对视神经切断后视网膜节细胞（RGCs）存活的作用。【方法】用荧光素逆行示踪标记法和定量解剖学技术观察正常和经tPNS处理的金黄地鼠于视神经切断后5、7、14d时RGCs的密度。动物分为正常组、单纯切断视神经组（未注射组）、tPNS处理组和生理盐水对照组。【结果】正常RGCs平均密度为（1970±82）/mm^2;视神经切断后5、7、14 d时RGCs平均密度分别下降至（983±48）/mm^2、（788±44）/mm^2和（216±37）/mm^2;生理盐水对照组在各时间点RGCs平均密度与未注射组结果相似;tPNS处理组结果分别为（1363±56）/mm^2、（1169±70）/mm^2和（477±25）/mm^2,与未注射组和生理盐水对照组相比在各时间点上均存在显著性差异（P〈0.05）。【结论】玻璃体注射tPNS可提高成年地鼠视神经切断后RGCs的短期存活率。     

PRAR-γ对泡沫细胞形成的研究进展

在动脉粥样硬化的形成中，泡沫细胞的形成起着至关重要的作用。国外十余年的临床应用发现，TZD(Thiazolidinediones，噻唑烷二酮)类药物。不仅是胰岛素增敏剂，也是一种人工合成的PPAR-γ(Peroxisome proliferator-activated receptor-gamma。过氧化物酶体增殖活化受体)的配体，可以明显改善Ⅱ型糖尿病患者动脉粥样硬化并发症的发生。近年来，关于PPAR-γ的活化与泡沫细胞的形成已成为研究的热点之一。     

三七总皂苷对大鼠肝移植排斥反应的影响及相关机制

目的探讨三七总皂苷（PNS）对Kupffer细胞（KCs）功能状态、肝移植术后免疫环境的影响,及其相关机制。方法分离大鼠KCs,吞墨台盼蓝鉴定KCs活性,细胞实验分LPS（-）组、LPS（+）+ PNS（0 μmol）组、LPS（+）+ PNS（10 μmol）组,、LPS（+）+PNS（20 μmol）组,Western blot、ELISA检测各组细胞及上清液炎症因子和氧化应激产物的表达,免疫荧光检测KCs CD206的表达,Western blot 检测NF-κB和Keap1-Nrf2-ARE通路蛋白表达。建立大鼠移植模型,分为SHAM组、LT（PBS处理）组和PNS（200 mg/kg）组,术后检测各组肝功能、炎症因子、肝组织病例、凋亡情况,并观察大鼠生存时间。结果随着PNS浓度的增加,KCs分泌促炎因子和氧化应激产物MDA水平逐渐降低,明显低于PNS（0 μmol）组,而抗炎因子IL-10以及抗氧化应激产物SOD水平逐渐升高,明显高于PNS（0 μmol）组,且差异具有统计学意义（P<0.05）。免疫荧光示PNS提高了KCs表型CD206的表达。同时,PNS减少了KCs IRAK4、p-IKKα、p-IκBα、p-p65、Keap1蛋白表达,而Nrf2、ARE蛋白表达水平逐渐升高,且与低PNS浓度组比具有统计学上的差异（P<0.05）。与LT组比,PNS组的大鼠肝移植后肝功能明显改善,促炎因子表达水平降低,肝细胞凋亡减少,肝组织急性排斥病理改变减轻,大鼠生存时间明显增高（P<0.05）。另外,大鼠注射GdCl3封闭KCs功能发现,PNS组出现严重的急性排斥反应,与LT组比较无统计学上差异（P>0.05）。结论PNS能够通过抑制NF-κB和Keap1-Nrf2-ARE通路减少活化KCs的炎症和氧化应激反应,促进KCs向免疫耐受的M2型极化,提高大鼠移植术后的生存时间。     

三七总皂苷对成年地鼠视网膜节细胞存活的影响

 【目的】探讨玻璃体注射三七总皂苷（tPNS）对视神经切断后视网膜节细胞（RGCs）存活的作用。【方法】用荧光素逆行示踪标记法和定量解剖学技术观察正常和经tPNS处理的金黄地鼠于视神经切断后5、7、14d时RGCs的密度。动物分为正常组、单纯切断视神经组（未注射组）、tPNS处理组和生理盐水对照组。【结果】正常RGCs平均密度为（1970±82）/mm^2;视神经切断后5、7、14 d时RGCs平均密度分别下降至（983±48）/mm^2、（788±44）/mm^2和（216±37）/mm^2;生理盐水对照组在各时间点RGCs平均密度与未注射组结果相似;tPNS处理组结果分别为（1363±56）/mm^2、（1169±70）/mm^2和（477±25）/mm^2,与未注射组和生理盐水对照组相比在各时间点上均存在显著性差异（P〈0.05）。【结论】玻璃体注射tPNS可提高成年地鼠视神经切断后RGCs的短期存活率。     

PPAR-γ对泡沫细胞形成的研究进展

在动脉粥样硬化的形成中,泡沫细胞的形成起着至关重要的作用.国外十余年的临床应用发现,TZD(Thiazolidinediones,噻唑烷二酮)类药物,不仅是胰岛素增敏剂,也是一种人工合成的PPAR-γ(Peroxisome proliferator-activated receptor-gamma,过氧化物酶体增殖活化受体)的配体,可以明显改善Ⅱ型糖尿病患者动脉粥样硬化并发症的发生.     

三七总皂苷联合阿糖胞苷对K562细胞的影响

[目的]考察三七总皂苷联合应用阿糖胞苷对白血病细胞K562细胞活力、增殖抑制、诱导凋亡的协同作用.[方法]处于对救生长期的白血病K562细胞,给予三七总皂苷、阿糖胞苷以及两药的联合,采用MTT试验、集落形成实验、Annexin V-PI双染流式细胞检测等实验手段进行分析检测.[结果]单用三七总皂苷对K562白血病细胞有一定的增殖抑制作用,对抑制集落形成和诱导凋亡作用不明显;相同剂量的三七总皂苷联用阿糖胞苷后,对K562细胞的增殖抑制、集落形成和凋亡有明显的增强.[结论]三七总皂苷联用阿糖胞苷对白血病细胞K562有明显的抗肿瘤作用,提示三七总皂苷可提高白血病细胞对化疗药物的敏感性,为临床用三七总皂苷抗白血病的辅助治疗提供依据.     

三七皂苷对小鼠脾细胞抗瘤活性影响

用~(51)Cr释放试验研究三七皂苷诱导的小鼠脾细胞的抗瘤活性,发现在有ConA/PHA同时存在时,诱导的细胞具有较强的抗瘤作用。进一步的实验表明,三七皂苷对脾细胞的增殖没有刺激作用,但能改变脾细胞内cAMP的含量。     

三七总皂苷对人肝癌细胞HepG2移植瘤增殖的影响及其机制的研究

目的 研究三七总皂苷对人肝癌细胞HepG2移植瘤增殖的影响及其免疫调解作用.方法 将昆明种小鼠随机分为5组,连续给药10d后,计算抑瘤率、胸腺指数及脾脏指数,测定肿瘤坏死因子-α和白细胞介素-18含量.结果 与空白对照组相比,三七总皂苷高剂量组瘤质量显著降低(P<0.01),脾脏指数和白细胞介素-18含量显著提高(P<0.05),三七总皂苷各剂量组胸腺指数均有显著性提高(P<0.05),高、中剂量组肿瘤坏死因子-α含量显著提高(P<0.05).结论 三七总皂苷对人肝癌细胞HepG2移植瘤的增殖具有一定的抑制作用,并对机体的免疫能力有一定的调节作用.     

三七总皂苷对动脉粥样硬化形成中炎症免疫因子的影响

目的观察兔食饵性动脉粥样硬化(A S)形成过程中血清中白细胞介素-6(IL-6)、C-反应蛋白(CRP)、循环免疫复合物(C IC)水平的变化和三七总皂苷(PN S)对这些免疫因子及动脉粥样斑块面积大小的影响。方法日本大耳兔随机分为正常对照组、A S模型组及PN S防治组,喂饲高脂饲料制备兔A S模型,各组ig给药,每天1次,连续给药8周。分别于实验第4、6、8周末经耳缘静脉采血,测定血清中IL-6、CRP和C IC的水平。结果A S模型组IL-6、CRP及C IC水平明显高于正常对照组(P<0.01);PN S组各时相点IL-6、CRP和C IC水平显著低于A S模型组(P<0.05);PN S组主动脉斑块面积较A S组明显降低(P<0.05);IL-6、CRP和C IC水平均与A S斑块面积呈显著正相关性(r=0.975、0.960、0.968,P<0.01)。结论兔食饵性A S形成过程中有炎症免疫因子的参与,PN S可以通过抗炎和免疫调节的途径发挥抗A S的作用。     

三七总皂苷抑制K562细胞mTOR信号通路活性的实验研究

目的 探讨三七总皂苷(Panax notoginseng saponins,PNS)对体外培养K562细胞mTOR信号通路相关分子表达及活性的影响.方法 不同浓度的PNS(50～800 μ,g/mL)干预体外培养K562细胞24 ～ 72 h后,MTT比色法检测PNS对K562细胞增殖的抑制作用;AO/EB双荧光染色法观察细胞死亡及凋亡状况;RT-PCR检测mTOR、p70S6K、4E-BP1 mRNA表达变化;Western blot检测mTOR、p70S6K、4E-BP1及p-mTOR、p-p70S6K、p-4E-BP1蛋白表达量的变化.结果 与对照组相比,浓度为100～ 800 μg/mL的PNS能够抑制K562细胞增殖(P＜0.05),促进K562细胞凋亡及死亡(P＜0.05),PNS对K562细胞72 h的IC50为(229.07±2.36) μg/mL;100、200、400 μg/mL PNS作用于K562细胞72 h后mTOR蛋白表达量及mRNA表达量降低(P＜0.05),且磷酸化蛋白p-mTOR (Ser2448)、p-p70S6K (Thr229/389)及p-4E-BP1(Thr37/46)表达水平也随着药物浓度的增加而降低(P＜0.05).结论 PNS能够抑制K562细胞mTOR信号通路的活性,这可能是PNS抑制K562细胞增殖的机制之一.     

三七总皂苷对酒精性肝硬变大鼠肝星状细胞蛋白组学的影响

目的:探讨三七总皂对实验性酒精性肝硬变大鼠肝纤维化治疗作用的分子机制。方法:选取健康成年雄性Wistar大鼠36只,使用体积分数50%酒精16 m L·(kg·d)~(-1)灌胃造模,9周后随机分成模型组、安珐特组、三七总皂苷组,每组12只。安珐特组给予西药安珐特21.6 mg·(kg·d)~(-1)进行灌胃,三七总皂苷组给予三七总皂苷100 mg·(kg·d)~(-1)进行灌胃,模型组继续使用体积分数50%酒精灌胃。同时设置空白组。12周后处死大鼠,剪下肝右叶,提取肝星状细胞总蛋白,测定各组蛋白含量,继而进行等电聚焦双向电泳,比较组间的差异蛋白点。结果:通过组间两两比较发现,组间的蛋白表达均存在着差异,正常组与模型组比较,共有23个差异点;正常组与安珐特组比较,共有33个差异点;正常组与三七总皂苷组比较,共有30个差异点;模型组与安珐特组比较,共有30个差异点;模型组与三七总皂苷组比较,共有31个差异点;安珐特组与三七总皂苷组比较共有30个差异点。结论:三七总皂苷对实验性酒精性肝硬变大鼠具有保护作用,其机制可能与三七总皂苷引起肝星状细胞蛋白质表达差异有关。     

三七总皂苷对大鼠血管平滑肌细胞增殖及JNK磷酸化的影响

  【目的】 研究发现,三七总皂苷(TPNS) 具有抑制和促进细胞增殖的双向调节作用,但是具体的作用机制尚不明确&#65377;本研究旨在观察TPNS对大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的影响及经由何种信号通路介导&#65377;【方法】 采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)和蛋白印迹(Western blot)法观察了体外培养的大鼠VSMC在不同浓度及一定浓度不同作用时间TPNS作用下,VSMC增殖活性的变化及c*9鄄Jun氨基末端激酶(JNK)磷酸化的变化;并用DAPI染细胞核,观察TPNS作用后核形态的变化&#65377; 【结果】 MTT法观察到:TPNS的浓度为0.5 g/L,1.0 g/L,1.5 g/L时,无论是处于静息状态或50 mL/L血清刺激下,VSMC的代谢活性均增高;TPNS的浓度为3.0 g/L时,静息培养的VSMC的代谢活性没有明显的变化,而50 mL/L血清刺激的VSMC的代谢活性仍增高;TPNS的浓度为6.0 g/L,12.0 g/L时,静息培养或50 mL/L血清刺激下的VSMC的代谢活性均降低,并随着浓度的增大,代谢活性降低越明显&#65377;同时,Western blot 结果显示:TPNS能快速的激活JNK1/2,并呈时间和浓度依赖性&#65377;当TPNS的浓度为0.5 g/L时,即可引起JNK的磷酸化,并随着浓度的增大,磷酸化作用增强;当TPNS的浓度为1.5 g/L时,作用5 min,JNK呈现最大程度的激活,随后逐渐减弱&#65377; DAPI染核观察到,6.0 g/L TPNS作用48 h后,VSMC出现了核固缩&#65380;核碎片等细胞凋亡的特征&#65377;【结论】 较低浓度的TPNS可促进血管平滑肌细胞的增殖,而较高浓度的TPNS可抑制其增殖,JNK1/2磷酸化可能是引起细胞增殖受到抑制的机制之一&#65377;     

三七总皂苷对大鼠血管平滑肌细胞增殖及JNK磷酸化的影响

【目的】研究发现,三总皂苷（TPNS）具有抑制和促进细胞增殖的双向调节作用,但是具体的作用机制尚不明确。本研究旨在观察TPNS对大鼠血管平滑肌细胞（VSMC）增殖的影响及经由何种信号通路介导。【方法】采用四甲基偶氮唑盐比色法（MTT法）和蛋白印迹（Western blot）法观察了体外培养的大鼠VSMC在不同浓度及一定浓度不同作用时间TPNS作用下,VSMC增殖活性的变化及c—Jun氨基末端激酶（JNK）磷酸化的变化：并用DAPI染细胞核,观察TPNS作用后核形态的变化。【结果】MTT法观察到：TPNS的浓度为0．5g／L,1．0g/L,1．5g／L时,无论是处于静息状态或50mL／L血清刺激下,VSMC的代谢于活性均增高;TPNS的浓度为3．0g／L时,静息培养的VSMC的代谢活性没有明显的变化,而50mL／L血清刺激的VSMC的代谢活性仍增高;TPNS的浓度为6．0g／L,12．0g／L时,静息培养或50mL／L血清刺激下的VSMC的代谢活性均降低,并随着浓度的增大．代谢活性降低越明显。同时．Western blot结果显示：TPNS能快速的激活JNK1／2,并呈时间和浓度依赖性。当TPNS的浓度为0．5g／L时,即可引起JNK的磷酸化,并随着浓度的增大,磷酸化作用增强：当TPNS的浓度为1．5g／L时．作用5min,JNK呈现最大程度的激活,随后逐渐减弱。DAPI染核观察到,6．0g／L TPNS作用48h后,VSMC出现了核固缩、核碎片等细胞凋亡的特征。【结论】较低浓度的TPNS可促进血管平滑肌细胞的增殖,而较高浓度的TPNS可抑制其增殖,JNK1／2磷酸化可能是引起细胞增殖受到抑制的机制之一。     

扇贝糖胺聚糖对平滑肌源性泡沫细胞形成及其功能的影响

目的:研究扇贝裙边糖胺聚糖(SS- GAG)对氧化低密度脂蛋白(Ox- LDL)诱导的猪血管平滑肌细胞泡沫化过程及其表达的超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH- PX)和一氧化氮 (NO)分泌含量的影响,以探讨SS GAG抗动脉粥样硬化(AS)的作用机制。　方法:采用猪血管平滑肌细胞与 15mg/L的Ox -LDL孵育 72h,建立平滑肌源性泡沫细胞模型。将培养的平滑肌细胞分为 6组: 正常细胞对照组、模型组、肝素对照组和低、中、高浓度的SS GAG药物组。通过酶法测定不同处理组细胞内总胆固醇 (TC)、游离胆固醇 (FC)、胆固醇酯 (CE)含量及CE/TC,观察不同浓度SS- GAG对平滑肌细胞泡沫化过程中细胞内脂质代谢的影响。通过黄嘌呤氧化酶法、过氧化氢还原法、硝酸还原酶法,分别检测不同处理组细胞分泌的SOD、GSH- PX和NO的含量。　结果:培养的平滑肌源性泡沫细胞中TC、FC、CE和CE/TC均明显高于正常平滑肌细胞 (P<0. 01),CE/TC超过 50%,高达 62. 99%。而加入SS GAG的 3个药物组和肝素对照组则有不同程度降低,CE/TC均在 50%以下,抑制了泡沫细胞的形成,以800mg/LSS GAG组降低最为明显(P<0. 01)。SOD在各组中的表达差异无显著性意义 (P>0. 05)。泡沫细胞中GSH PX和NO的表达量明显低于正常平滑肌细胞(P<0. 01),而加入SS GAG的 3个组     

三七总皂苷诱导U937细胞凋亡及对Caspase-3表达的影响

目的观察三七总皂苷（PNS）对人急性单核细胞白血病细胞系U937细胞的增殖、凋亡及Caspase-3表达的影响。方法用不同浓度PNS作用于U937细胞,采用MTT法检测细胞增殖活性,用流式细胞术检测细胞周期和凋亡,Western-blot法检测Caspase-3蛋白表达。结果 PNS抑制U943细胞生长并呈时间和剂量依赖性;分别予100、200、400、800mg/L处理U937细胞48h,细胞凋亡率分别为（5.93±0.15）%、（7.43±0.70）%、（12.3±0.38）%和（20.4±0.91）%,对照组细胞凋亡率为（1.73±1.50）%（P〈0.01）,并诱导细胞G1期阻滞;Western-blot结果显示,PNS使Caspase-3蛋白表达上调。结论 PNS能抑制U937细胞增殖,并可能通过上调Caspase-3蛋白表达诱导细胞凋亡。