芦荟多糖联合Anti-CD3 McAb、rhIL-2干预的PBMC对HepG2生长的影响

目的探讨芦荟多糖(AP)的抗肿瘤作用机制。方法采用AP单独及联合Anti-CD3McAbr、hIL-2诱导干预外周血单个核细胞(PBMC)的方法建立效应细胞;采用MTT法测定效应细胞及其上清液对靶细胞HepG2生长的影响;ELISA法测定干预后各组PBMC分泌IFN-γ、TNF-α的水平,测定效应细胞及其上清液对靶细胞上清液中IFN-γ、TNF-α和AKP水平的影响。结果AP单独及其联合Anti-CD3McAbr、hIL-2可提高PBMC分泌IFN-γ水平,对TNF-α水平没有明显影响;效应细胞的上清液对HepG2的生长无明显抑制作用,而效应细胞细胞悬液对HepG2的生长有抑制作用,可升高混合培养后上清液中TNF-α、IFN-γ水平,降低AKP水平。结论AP体外抗肿瘤作用与提高免疫和促进肿瘤坏死因子释放有关。     

黄精粗多糖对体外培养小鼠脾淋巴细胞及巨噬细胞免疫活性的影响

[目的]探讨黄精粗多糖对体外培养小鼠脾淋巴细胞及巨噬细胞(RAW 264.7)免疫活性的影响.[方法]设置空白对照组及给药质量浓度分别为1 000,500,250,125 mg/L的黄精粗多糖组,分别与小鼠的脾细胞、巨噬细胞(RAW 264.7)共同培养.采用ELISA法检测共同培养后的细胞上清液中免疫因子IL-2,IL-6,IFN-γ和TNF-α的含量变化,利用MTT比色法测定黄精粗多糖对巨噬细胞(RAW 264.7)增殖作用的影响,Griess法测定细胞上清液中一氧化氮的水平,RT-PCR检测iNOS mRNA的表达情况.[结果]与空白对照组比较,各质量浓度黄精粗多糖组免疫因子IL-2,IL-6,IFN-γ和TNF-α含量明显增加(P<0.05),促进巨噬细胞(RAW 264.7)的增殖(P<0.05),一氧化氮分泌量及iNOS mRNA水平均明显增高(P<0.01).[结论]黄精粗多糖可增强体外培养小鼠脾淋巴细胞及巨噬细胞的免疫活性.     

红花多糖对人PBMC增殖活性及分泌细胞因子的影响

[目的]探讨红花多糖(SPS)对人外周血单个核细胞(PBMC)的增殖作用及PBMC诱生细胞因子的影响。[方法]采集健康成人外周血,常规分离PBMC,体外与不同浓度的SPS共同培养,检测PBMC的增殖活性及白细胞介素-2(IL-2)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和干扰素-γ(IFN-γ)的水平。[结果]SPS对PBMC增殖有促进作用,以1.25g/L和0.625g/L剂量组增殖活性增加明显(P<0.05);红花多糖(SPS)各组IL-2和IFN-γ水平明显高于对照组(P<0.05),而各组TNF-α的水平无显著性差异。[结论]SPS可促进PBMC的增殖,提高IL-2和IFN-γ水平,增强免疫功能。     

滋养层抗原对流产患者PBMC增殖和产生IFN-γ、TNF-α的影响

目的 :探讨滋养层抗原 (TA)对反复自然流产 (RSA )患者外周血单个核细胞 (PBMC)增殖以及产生 IFN-γ、TNF-α的影响及意义。　方法 :通过淋巴细胞转化试验和酶联免疫吸附法 (EL ISA)测定了 2 5例 RSA患者 ,2 2例对照者外周血 PBMC经 TA诱导后的淋巴细胞转化率和培养细胞上清中的 IFN-γ和 TNF-α水平。同时对其中 7例经白细胞免疫治疗患者的 IFN -γ和 TNF-α水平进行了动态观察。　结果 :RSA患者淋巴细胞转化率和 IFN-γ、TNF-α水平显著高于对照组 (P<0 .0 5 )。7例患者治疗后的 IFN-γ和 TNF-α水平明显低于治疗前。　结论 :RSA患者妊娠失败可能与其 PBMC对滋养层抗原的增殖反应和产生 IFN-γ、TNF-α增多有关。     

同种异体免疫反应对I-TAC及其受体表达诱导的体外研究

目的 探讨同种异体免疫反应对干扰素诱导的T细胞α亚族趋化剂(I-TAC)及其受体CXCR3的表达的影响.方法同种异体外周血单个核细胞(PBMC)混合培养后,将培养上清液作用于ECV304细胞系,RT-PCR检测ECV304的I-TAC mRNA表达,ELISA检测培养上清液中IFN-γ和TNF-α浓度,流式细胞术检测PBMC表面CXCR3的表达.结果与单独PBMC培养组相比,混合PBMC培养组上清液中细胞因子干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达显著升高,且能促进ECV304细胞I-TAC mRNA的表达;混合培养后PBMC表面CXCR3的表达亦呈显著升高.结论同种异体免疫反应可能通过细胞因子、趋化因子I-TAC及其在T细胞上的受体CXCR3的表达,以正反馈形式加剧同种异体移植排斥反应.     

茵陈多糖对妊娠胆汁淤积大鼠Th1/Th2细胞免疫平衡的影响

目的探讨茵陈多糖对妊娠胆汁淤积大鼠Th1/Th2细胞免疫平衡的调节作用。方法 32只妊娠SD大鼠随机分为对照组,模型组,低剂量组及高剂量组,妊娠16周采用苯甲酸雌二醇注射法建立妊娠胆汁淤积大鼠模型,造模成功后低剂量组(50mg/Kg.d-1)及高剂量组(100mg/Kg.d-1)分别给予茵陈多糖干预,1周后采用流式细胞技术检测各组大鼠静脉血Th1、Th2及Th1/Th2比值变化,采用比色法检测各组大鼠血清IL-6、TNF-α及IFN-γ表达水平变化。结果茵陈多糖干预1周后,模型组Th1较对照组上升,Th2较对照组下降,Th1/Th2比值升高,高剂量组及低剂量组Th1较模型组下降,Th2较模型组上升,Th1/Th2比值较模型组降低,高剂量组及低剂量组之间Th1、Th2及Th1/Th2比值差异有统计学意义。模型组IL-6、TNF-α、IFN-γ较对照组升高,高剂量组及低剂量组IL-6、TNF-α、IFN-γ较模型组降低。高剂量组及低剂量组间IL-6、TNF-α和IFN-γ水平差异有统计学意义。结论茵陈多糖能够对妊娠胆汁淤积大鼠Th1/Th2免疫失衡进行调节,减轻免疫损伤。     

大鼠小肠、大肠上皮及固有层淋巴细胞的分布差异

目的　研究大鼠小肠 (十二指肠、空肠、回肠 )和大肠 (乙状结肠 )上皮内淋巴细胞 (IEL)、固有层内淋巴细胞 (LPL)分布特点。方法　通过免疫组化双重染色 ,标记肠绒毛基底膜 ,区分出上皮和固有层 ,然后分别对IEL和LPL计数 ,并进行统计学分析。结果　大鼠肠道各部分 (十二指肠、空肠、回肠、乙状结肠 )IEL数量依次递减 ;与此相反 ,LPL数量依次递增。而且它们的T细胞亚群 (CD3、CD4、CD8、TCRαβ、TCRγδ)数量也存在显著性差异 (P <0 .0 5 )。结论　通过双重染色标记出基底膜来计数IEL、LPL的方法非常精确 ,肠道各段的IEL、LPL可能在黏膜免疫应答中起着不同的生物学作用     

脂多糖对人肺微血管内皮细胞骨架及TNF-α和IFN-γ表达的影响

目的 探讨脂多糖 (LPS) 直接诱导人肺微血管内皮细胞 (HPMVEC)后细胞骨架的改变,肿瘤坏死因子α(TNF-α)、γ干扰素(IFN-γ)mRNA的表达及细胞培养上清液中TNF-α、IFN-γ的表达水平的改变.方法 HPMVEC生长至80 %以上融合时,加入LPS 以 500 ng/mL浓度刺激细胞分别至 0、4、6、8 h,经鬼笔环肽染色后采用激光共聚焦显微镜观察HPMVEC细胞骨架的变化.至预定时相点离心收集培养液上清液,利用实时荧光定量RT-PCR法检测TNF-α、IFN-γ mRNA的表达,采用 ELISA方法测定细胞培养上清液中TNF-α、IFN-γ的表达水平,并进行统计学分析.结果 LPS 刺激培养后,8 h组细胞开始出现细胞骨架改变;4 h组TNF-α、IFN-γ mRNA表达与0 h组差异无统计学意义(P>0.05),6 h组TNF-α、IFN-γ mRNA表达高于0 h组(P<0.05),8 h组TNF-α、IFN-γ表达高于0 h组(P<0.05);4 h 组细胞培养上清液TNF-α、IFN-γ的表达水平与0 h组比较差异无统计学意义(P>0.05),6 h 组细胞培养上清液TNF-α、IFN-γ的表达水平高于0 h组(P<0.05),8 h组细胞培养上清液TNF-α、IFN-γ的表达水平高于0 h组(P<0.05).结论 细菌致病因子LPS能直接刺激HPMVEC使细胞结构发生改变,同时影响细胞因子的分泌,使促炎因子TNF-α和IFN-γ分泌升高,参与肺损伤.这可能是LPS发挥其毒性作用诱发急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征的一个重要途径.     

人参多糖对晚期肺癌化疗疗效及MDSCs、Treg细胞、免疫因子水平的影响

目的 分析人参多糖对晚期非小细胞肺癌(NSCLC)化疗疗效及髓系抑制细胞(MDSCs)、调节性T细胞(Treg细胞)、免疫因子水平的影响。 方法 选取2014年6月—2015年12月浙江省人民医院收治的晚期NSCLC患者63例，随机分为人参多糖组和对照组。应用GP或DP方案化疗，人参多糖组加用人参多糖注射液。比较2组临床疗效、生活质量及不良反应，比较MDSCs、Treg细胞和两者相关性，比较精氨酸酶和细胞因子(VEGF、TGF-β、IL-10、IFN-γ、TNF-α)水平。 结果 人参多糖组疾病控制率及生活质量均明显高于对照组(均P<0.05)。人参多糖组白细胞减少和恶心呕吐发生率明显低于对照组(均P<0.05)。治疗前2组MDSCs、Treg细胞百分比差异无统计学意义(均P>0.05)；治疗后人参多糖组MDSCs、Treg细胞百分比均明显低于对照组(均P<0.05)。Treg细胞与MDSCs呈正相关(P<0.05)。2组治疗前精氨酸酶和细胞因子差异无统计学意义(均P>0.05)；治疗后人参多糖组精氨酸酶、VEGF、TGF-β、IL-10较对照组均明显降低(均P<0.05)，IFN-γ、TNF-α均明显升高(均P<0.05)。 结论 人参多糖可通过影响MDSCs、Treg细胞及免疫因子，改善晚期NSCLC化疗患者的免疫功能，提高疗效和生活质量，同时能有效减轻化疗不良反应。      

IL-12对炎症性肠病患者外周血和肠黏膜固有层淋巴细胞激活和炎症介质分泌的影响

目的:探讨IL-12对炎症性肠病患者外周血和肠黏膜固有层淋巴细胞激活和炎症介质分泌的影响。方法:收集并分离15例克罗恩病、21例溃疡性结肠炎和13例结肠镜检正常者(对照)外周血单个核细胞(PBMC)及肠黏膜固有层单个核细胞(LPMC),体外培养并用IL-12刺激,培养12h、24h、48h后,用流式细胞仪测PBMC或LPMCCD69表达情况;培养48h后,收集细胞培养上清液并用ELISA检测干扰素(IFN)-γ、IL-2和肿瘤坏死因子(TNF)-α的水平。结果:IL-12刺激后炎症性肠病患者外周血T细胞表达高水平的CD69。克罗恩病患者的PBMC和LPMCCD69表达水平及IFN-γ、IL-2和TNF-α分泌水平较溃疡性结肠炎和对照者明显增高(P<0.05)。结论:IL-12能直接刺激炎症性肠病患者外周血和肠黏膜固有层淋巴细胞激活,并产生大量促炎症介质。     

玉米芯多糖及其硫酸酯抗凝血活性及其机制

目的：研究玉米芯多糖及其硫酸酯抗凝血活性的作用,探讨玉米芯多糖及其硫酸酯抗凝血机制,为玉米芯抗凝的临床应用奠定基础。方法：采用酸提法提取玉米芯粗多糖(ACC),并对其分级、纯化及硫酸酯化;以生理盐水为对照组,将ACC、玉米芯纯化多糖(ACP)及其玉米芯硫酸酯化多糖(ACS)分别按低、中、高浓度分为3组,分别检测小鼠全凝血时间（CT）、出血时间（BT）及对人混合血浆的活化部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶时间（TT）和凝血酶原时间（PT）。结果：每1000 g玉米芯中可提取ACC 12.5 g,提取率为1.25%,总糖含量为59%,气相色谱法分析其单糖组成为葡萄糖(Glc)、木糖(Xyl)和半乳糖(Gal),其摩尔比为15.36∶2.67∶1.00;纯化后多糖的总糖含量为90.2%,气相色谱法分析其单糖组成为Glc、Xyl和Gal,摩尔比为3.90∶2.12∶1.00;离子色谱法分析ACS的硫酸根含量9.86%;与对照组比较,除ACC低、中浓度组外,其余各组小鼠的CT和BT均明显延长（P<0.05或P<0.01）,人混合血浆的APTT和TT明显延长（P<0.05　或P<0.01）,呈现浓度依赖性, PT无变化。结论：ACC具有抗凝血活性,并通过内源性凝血途径和共同凝血途径来实现抗凝血作用。     

火箭免疫电泳法测定脑膜炎球菌多糖菌苗多糖含量研究

目的探讨检测脑膜炎球菌多糖菌苗多糖含量的新方法。方法将制备的脑膜炎奈瑟茵相应群兔抗血清加入熔化的琼脂糖凝胶，待冷却后于凝胶板上打孔，再将菌苗进行一定梯度稀释后加样于凝胶孔，在电场作用下，多糖抗原与抗血清形成的结合物在凝胶内泳动形成火箭状。通过不同多糖含量梯度的迁移距离进行线性回归分析，从而对菌苗多糖含量进行计算。结果将抗原稀释到一定浓度后进行火箭免疫电泳，电泳形成的火箭峰高度与抗原浓度呈正相关。结论运用火箭免疫电泳可以有效地测定脑膜炎球菌多糖菌苗中的多糖含量。     

玉米活性多糖的抗便秘作用

目的：研究玉米活性多糖(CAP)对小鼠的抗便秘作用,并对其机制进行初步探讨。 方法：采用正常小鼠和燥结型便秘小鼠模型,灌服给药,观察CAP对正常小鼠胃肠运动功能 的推进作用及对正常和燥结型便秘小鼠的排便量及排便时间的影响。 结果：CAP 3.50、1.75 g·kg^-1剂量对正常小鼠的胃肠运动功能有明显的促进作用,推进率分别提高17.80%、16.85%;CAP 3.50、1.75 g·kg^-1剂量能明显增加正常小鼠的排便量,缩短小鼠的排黑便时间,排便量分别增加54.32%、32.28%,排黑便时间分别缩短26.87%、19.70%;CAP能明显增加燥结型便秘小鼠的排便量,以3.50 g·kg^-1剂量组效果最好,口服4 h内排便量增加73.44%。 结论：CAP具有明显的抗便秘作用。     

低温挤出滚圆法制备银耳多糖微粒

目的：考察并优化低温挤出滚圆法制备银耳多糖微粒（TPP）的工艺条件。方法通过 L9（34）正交设计实验优化制剂工艺条件,制备直径小于190μm 微粒。结果载药量为65℅,稀释剂为65℅乙醇溶液, MCC 为主要辅料,挤出速度为50 r/ min,滚圆速度为1500 r/ min,滚圆时间为10 min,制备的微粒其平均粒径在115~190μm,圆整度、堆密度、总收率均较理想。结论应用挤出滚圆法制备 TPP,其工艺简便,稳定可行,适合小鼠药物药理学和毒理学研究的需要和大工业生产。     

Anti-ulcer effects of Lycium barbarum polysaccharide in rats

Objective: To investigate the effects of Lycium barbarum polysaccharide (LBP) on experimental gastric ulcers in rats. Methods: The ulcers were induced by water-immersion restraint stress, acetic acid and pylorus-ligation in rats. In each model, animals were divided randomly into 4 groups and administrated with LBP of 100 mg/kg and 300 mg/kg, ranitidine 100 mg/kg (as a reference standard) and saline respectively. Mucosal lesions were scored as ulcer index. In the pylorus-ligation model, we also compared the gastric juice volume, total acidity, acid output and pepsin activity among groups. Results: Oral administration of LBP inhibited the formation of the acute gastric lesions induced by physical stress such as water-immersion restraint (P＜0.05), and accelerated the healing of chronic gastric ulcer model induced by acetic acid (P＜0.05 to P＜0.01). In the pylorus-ligated rats, significant decrease was also seen in ulcer index (P＜0.05 to P＜0.01), total acidity (P＜0.05), acid output (P＜0.05 to P＜0.01). LBP 300 mg/kg even showed marked reduction of the volume (P＜0.05) and pepsin activity (P＜0.05) in the gastric juice. These effects were in a dose-dependent manner. Conclusion: LBP has protective effects on treating gastric ulcer and this action may relate to the reduction of acid output and pepsin activity in the gastric juice.     

瓜蒌薤白颗粒中多糖的含量测定

目的:从瓜蒌薤白颗粒中提取多糖并测定其含量。方法:以葡萄糖为对照品,采用硫酸-苯酚法测定瓜蒌薤白颗粒中多糖含量。结果:标准曲线回归方程为A=7.16C-0.0124,r=0.9998,加样回收率为98.04%,RSD=2.80%。结论:该法操作简单,重复性较好,可作为瓜蒌薤白颗粒中多糖含量测定的方法。     

紫外分光光度法测定柴胡中多糖含量

目的：采用紫外分光光度法测定柴胡中多糖含量。方法采用苯酚-硫酸显色法,以葡萄糖为对照品,490 nm为检测波长。结果测得柴胡中多糖的平均含量为15．8％,平均回收率为98．9％。结论该方法简便、快速且提取率高,可用于柴胡中多糖的含量测定。     

蕨麻多糖药理作用研究进展

藏药蕨麻是蔷薇科委陵菜属植物鹅绒委陵菜（Potentilla anserinea L.）的根,主要分布于北半球的温带、寒带和高寒地区,在中国主要分布于青海、甘肃、西藏等地。蕨麻作为药食两用植物,已有1200多年的药用历史。蕨麻主要含有多糖、甾类、三萜类、黄酮类、酚酸类和香豆素类化合物等多种化学成分。中医学研究表明,蕨麻具有健胃补脾、生津解渴、益气补血等功能。蕨麻在藏药中应用广泛,其中多糖作为其主要活性成分具有调节免疫力、抗低氧、抗氧化、抗肿瘤及保肝作用。本文主要综述蕨麻多糖的药理活性及其研究进展,以期为其深入研究和进一步开发利用提供参考。     

天赐胶囊中多糖的含量测定

目的：建立天赐胶囊的含量测定方法,方法：采用苯酚硫酸法,以葡萄糖作为标准品,分光光度法于490nm波长处测定吸光度。结果：多糖的线性范围为10－80μg/mL。相关系数r=0.9997,平均加样回收率为98．67％（n=5),RSD=2.58%,样品多糖含量为267．7－300．6毫克／粒。结论该法简便、准确,可用于本品的质量控制。     

不同产地黄精中多糖含量的比较

目的比较不同产地黄精（Polygonatum sibiricum）中多糖的含量。方法改进的硫酸苯酚比色法。结果以葡萄糖计,泰山生黄精、安徽生黄精、浙江生黄精、泰山熟黄精、浙江熟黄精中多糖含量分别为12.56%、9.92%、8.54%、7.36%、2.33%。结论不同产地黄精中多糖含量差异明显,其中以泰山生黄精多糖含量为最高;炮制黄精多糖含量低于生黄精。