慢性乙型肝炎患者血清IL-17表达水平及其调控IL-6/STAT3信号通路的研究

目的探究白介素-17(IL-17)在慢性乙型肝炎(CHB)患者中的表达水平及其与IL-6/STAT3信号通路的关系。方法收集50例CHB患者和50例健康体检者的血清并回顾性收集相关临床特征以及病毒学特征信息,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测受试者血清中IL-17水平;采用Spearman相关分析方法分析IL-17与CHB患者HBV-DNA、丙氨酸氨基转移酶(ALT)以及门冬氨酸氨基转移酶(AST)之间的相关性;进一步用人源重组IL-17(rh IL-17)处理HBV复制细胞系Hep G2.2.15后,采用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)方法检测细胞中IL-6 m RNA水平,通过ELISA方法检测细胞上清IL-6含量,同时采用蛋白免疫印迹法检测STAT3以及磷酸化STAT3(p STAT3)的表达水平。结果与健康对照组相比,IL-17在CHB患者中明显升高,同时IL-17含量与HBV-DNA、ALT及AST之间呈显著正相关性;当rh IL-17作用于Hep G2.2.15细胞时,可以检测到IL-6表达水平以及细胞中p STAT3明显升高。结论 IL-17在CHB患者中明显升高,与HBV-DNA病毒载量之间呈正相关性,并参与、激活IL-6/STAT3信号通路,与HBV复制及CHB疾病的进展密切相关。     

慢性乙型肝炎患者抗病毒治疗前后外周血IL-23/IL-17信号通路活性的变化

为探讨慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)患者及抗病毒治疗后患者IL-23/IL-17信号通路活性变化,本研究以2011年10月至2015年8月昆明医科大学第一附属医院感染科门诊及住院部收治的HBeAg阳性CHB患者111例作为观察组,并且选取相同时间段体检健康者22例作为对照组。治疗48周时根据HBeAg变化将其分为HBeAg阳性组、HBeAg阴性组和HBeAg/HBeAb血清学转换组。采用全自动生化分析仪检测丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(aspartate transaminase,AST)、总胆红素(total bilirubin,TBIL)水平;采用RT-PCR法测定患者血清HBV-DNA载量;采用流式细胞术检测外周血Th17细胞表达率;应用qRT-PCR法测定外周血维甲酸相关核孤儿受体(retinoid-related orphan nuclear receptorγt,RORγt)mRNA表达水平;采用ELISA法检测IL-17与IL-23水平。研究结果显示与对照组相比,CHB组Th17、RORγt、IL-17和IL-23水平显著增加(P0.05);与治疗前相比,治疗48周后Th17、RORγt、IL-17和IL-23水平显著下降(P0.05)。治疗48周时ALT复常率、HBV-DNA检测不到率和HBeAg血清学转换率分别是94.6%、80.2%和18.0%。HBeAg/HBeAb血清学转换组Th17、RORγt、IL-17和IL-23水平显著低于HBeAg阳性组(P0.05)。综上,本研究发现IL-23/IL-17信号通路参与了CHB患者的炎症反应过程,抗病毒治疗可以降低Th17、RORγt、IL-17和IL-23水平,进而通过IL-23/IL-17信号通路有限度地控制肝脏病程进展。     

IL-17、IL-23、TGF-β和IL-10在乙型肝炎病毒感染中的表达分析

目的探讨乙肝病毒(hepatitis B virus,HBV)感染患者外周血中几种细胞因子在疾病慢性化及疾病进展中的作用。方法分离HBV慢性感染者及健康人外周血,采用酶联免疫吸附法(ELISA法)检测IL-17、IL-23、TGF-β和IL-10的表达及其与乙肝患者肝功能指标及血清中病毒载量的关系。结果乙肝患者血清中IL-17、IL-23和TGF-β与健康对照比较无明显差异,但IL-10显著增加,IL-17、IL-10与转氨酶水平正相关,TGF-β与转氨酶水平负相关,而IL-10与乙肝病毒DNA载量正相关。结论IL-17、IL-10及TGF-β与HBV感染者肝细胞的炎性损伤有关,对于乙肝患者肝纤维化及疾病进展程度具有提示意义,而IL-10具有促炎和耐受的双重作用,可以预测乙肝感染慢性化及病毒持续感染。     

IL-17在慢性HBV感染及肝炎肝纤维化患者中表达升高

目的 探讨IL-17与HBV感染特别是肝纤维化发生的相关性.方法 酶联免疫吸附试验(ELISA)及反转录-多聚酶链反应(RT-PCR)法测定血清中IL-17浓度和外周血单个核细胞(PBMC)中IL-17 mRNA的水平.免疫组化法及ELISA法测定肝组织中IL-17的表达和IV型胶原、层黏连蛋白(LN)、透明质酸(HA)及Ⅲ型胶原的水平.结果 4组患者中血清IL-17和PBMC中IL-17 mRNA水平表达均高于正常对照组(P<0.005);与其他各组相比,IL-17及其mRNA水平在肝硬化患者中明显升高(P<0.005).肝组织IL-17表达强度及血清肝纤维化指标水平在肝硬化组高于慢性乙肝组,慢性乙肝组高于携带者组(IL-17表达强度P<0.01,肝纤维化指标P<0.001);肝组织IL-17染色位于汇管区,与纤维化高度相关;淋巴细胞、成纤维细胞及血窦内皮细胞染色阳性.肝组织IL-17表达强度与血清Ⅳ型胶原、LN、HA、Ⅲ型胶原呈正相关(r=0.883、0.834、0.793、0.722,P<0.01).结论 IL-17可能参与慢性HBV感染尤其是肝纤维化的发生过程.     

替比夫定治疗的慢乙肝患者中Th17细胞释放IL-26的变化研究

目的通过检测替比夫定治疗的慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)患者中IL-26的动态变化及与其它炎症因子的相关性,揭示其在CHB疾病中可能的促炎作用。方法将51个CHB患者和28个健康人纳入本研究。收集患者在替比夫定(tebivudine,LdT)治疗期间(0、12、24、36和52周)外周血,分析HBsAg、HBeAg、丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)和HBV病毒载量等临床数据。流式细胞仪分离CD4~+T、CD4~-T细胞,酶联免疫吸附检测血浆中IL-26、IL-17蛋白水平,荧光定量PCR检测IL-26、RORγt的mRNA水平。结果与健康对照组相比CHB患者血浆IL-26水平显著升高,LdT治疗期间IL-26水平呈时间依赖性下降。治疗期间血浆IL-26浓度与T辅助17(Th17)细胞分泌IL-17水平呈相似的下降趋势。CHB患者外周血单个核细胞中IL-26~+CD4~+细胞百分率明显高于IL-26~+CD4~-细胞百分率,CD4~+T细胞表达的IL-26和RORγt的mRNA水平呈正相关,且随治疗进程其表达水平逐渐降低,提示Th17细胞可能是IL-26主要源细胞。结论在CHB患者的外周血中,IL-26主要由Th17细胞产生,是一种潜在的CHB预后和治疗的生物标志物。     

慢性乙型肝炎患者外周血Th17细胞/调节性T细胞比值变化的意义

目的测定慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(Treg)和CD4+IL-17+T细胞(Th17细胞)频率及其相关细胞因子的变化,并探讨Th17/Treg平衡在CHB发病过程中的作用。方法选取CHB住院患者(CHB组)60例,其中35例轻中度CHB患者(CHB-LM),25例慢性重型肝炎患者(CSHB),同时选取21位健康体检者作为正常对照组(HC)。流式细胞术检测外周血中Th17和Treg的细胞频数,双抗体夹心ELISA检测血清中IL-17、IL-23、IL-10及转化生长因子β1(TGF-β1)的表达水平。结果与HC组相比,CHB患者外周血Th17细胞频率及其相关细胞因子IL-17、IL-23浓度明显增高,差异有统计学意义(P0.05);Treg频率及其相关细胞因子IL-10及TGF-β1浓度明显增高。Th17/Treg比值变化显示,与HC组相比,在CHB组中该比例明显升高,具有显著性差异,且与CHSB组相比,在CHB-LM组中该比值明显降低。结论 Th17细胞/Treg的失衡是造成慢性乙型肝炎病程演变的重要因素,检测Th17细胞/Treg比值变化对疾病发展的早期预测有一定价值。     

慢性乙型肝炎患者外周血Th17细胞/调节性T细胞比值变化的意义北大核心CSCD

目的测定慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(Treg)和CD4+IL-17+T细胞(Th17细胞)频率及其相关细胞因子的变化,并探讨Th17/Treg平衡在CHB发病过程中的作用。方法选取CHB住院患者(CHB组)60例,其中35例轻中度CHB患者(CHB-LM),25例慢性重型肝炎患者(CSHB),同时选取21位健康体检者作为正常对照组(HC)。流式细胞术检测外周血中Th17和Treg的细胞频数,双抗体夹心ELISA检测血清中IL-17、IL-23、IL-10及转化生长因子β1(TGF-β1)的表达水平。结果与HC组相比,CHB患者外周血Th17细胞频率及其相关细胞因子IL-17、IL-23浓度明显增高,差异有统计学意义(P<0.05);Treg频率及其相关细胞因子IL-10及TGF-β1浓度明显增高。Th17/Treg比值变化显示,与HC组相比,在CHB组中该比例明显升高,具有显著性差异,且与CHSB组相比,在CHB-LM组中该比值明显降低。结论 Th17细胞/Treg的失衡是造成慢性乙型肝炎病程演变的重要因素,检测Th17细胞/Treg比值变化对疾病发展的早期预测有一定价值。     

IL-17/IL-23免疫调节机制及其在慢性乙型肝炎中的作用

IL-17/IL-23作为机体免疫调节因子,分别与其他细胞因子相互协同,在免疫性疾病的发生发展与治疗过程中发挥着一定程度的作用。慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B, CHB)是乙型肝炎病毒(hepatitis B virus, HBV)感染引起机体免疫应答反应后发展而来的一种免疫性疾病。随着近几年对CHB免疫靶向治疗研究的深入,IL-17/IL-23信号通路在CHB发生发展中的作用逐渐被提出,以此为CHB的治疗提供了新的思路。     

Ι型固有淋巴细胞对慢性乙型肝炎的作用及机制

目的初步探讨固有淋巴细胞(ILCs)亚群如ILC1和ILC2(分别为适应性免疫应答中Th1和Th2的映像)对病原体感染的作用机制。方法收集临床慢性乙肝(CHB)患者和健康对照外周血和肝组织,运用流式细胞术、定量PCR和ELISA方法,检测CHB患者中ILC1和ILC2的频率、Ⅰ型和Ⅱ型转录因子和细胞因子水平,并与CHB患者临床指标进行相关性分析。结果CHB患者总ILCs中,ILC1转录因子T-bet、效应细胞因子IFN-γ、ILC1分化相关信号通路分子IL-12/IL-12R水平均显著升高。升高的ILC1亚群频率与CHB患者肝损伤显著相关,但与替比夫定疗效无明显关联。虽然ILC2相关的转录因子、细胞因子等在CHB中也升高,但升高的幅度均低于ILC1细胞。而且,ILC2细胞活性与HBV拷贝或肝损伤均没有显著关联。结论本研究结果提示了ILC1在CHB病理过程中的潜在促炎作用,以及ILC1及其相关分子可能是CHB诊断、预后甚至治疗的潜在干预靶标。     

绿原酸对溃疡性结肠炎的治疗作用及对IL-6/STAT3信号通路的影响

目的 探讨绿原酸对溃疡性结肠炎（ulcerative colitis, UC）小鼠的治疗作用及对IL-6/STAT3信号通路的影响。方法 SPF级C57BL/6小鼠随机分为对照组（control）、模型组（model）、绿原酸低及高剂量组（CGA-L、CGA-H）,每组8只。检测小鼠疾病活动指数（DAI）评分;HE染色观察小鼠结肠病理损伤;ELISA检测结肠组织中白介素-17A(IL-17A)、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、IL-4及IL-10水平;Western blot检测小鼠结肠组织中孤独核受体γt(RORγt)、叉头状转录因子（Foxp3）、IL-6、信号传导与转录激活因子3(STAT3)及磷酸化STAT3(p-STAT3)蛋白的表达。结果 CGA-L与CGA-H能降低小鼠DAI评分,明显减轻结肠组织病理损伤;降低IL-17A与TNF-α水平,上调IL-4与IL-10水平（P<0.05）;CGA-L与CGA-H能降低RORγt蛋白表达,上调FOXP3蛋白表达（P<0.05）;降低小鼠结肠组织中IL-6与及p-STAT3蛋白表达（P<0.05）。结论 绿原酸可有效治疗DSS诱导的小鼠UC,调控Th17/Treg平衡,其作用机制可能与抑制IL-6/STAT3信号通路有关。