重组人纤溶酶原Kringle 5的~(125)I标记及其体内代谢

目的:探讨放射性碘标记纤溶酶原Kringle 5(K 5)的生物学活性及其体内药代动力学。方法:采用基因工程方法制备重组人纤溶酶原Kringle 5(rhK 5),以小剂量Iodogen多次重复标记法标记rhK 5,细胞增殖抑制试验和亲和力试验检测125I-rhK 5活性,并研究其在大鼠体内的药代动力学。结果:125I-rhK 5的标记率为86%,放射化学纯度为96%。细胞增殖抑制试验表明,125I-rhK 5的生物活性与未标记rhK 5相当。大鼠单次股静脉注射2μg125I-rhK 5后,血药浓度-时间曲线符合两室模型,T 1/2α为(0.31±0.03)h,T 1/2β为(14.48±0.73)h,AUC为(436.58±34.6)ng.h.m-l 1。结论:小剂量Iodogen多次重复125I标记不影响rhK 5的生物学活性1。25I-rhK 5大鼠体内单次静脉注射的药代动力学符合两室模型,半衰期约为15h。125I-rhK 5为肿瘤的显像和靶向治疗奠定了基础。     

重组人肿瘤坏死单抗白细胞介素2融合蛋白在大鼠体内的药代动力学实验研究

目的研究125I标记的重组人肿瘤坏死单抗白细胞介素2融合蛋白(rhTNTIL2)单次静脉注射后在大鼠体内的药代动力学过程。方法用125I标记rhTNTIL2,γ放射免疫计数器检测三氯醋酸(TCA)沉淀前后血浆、组织、尿和粪的放射性计数,用DSA1.0软件拟合药物动力学模型,并计算相应参数。结果125IrhTNTIL2单次静脉注射后在大鼠体内的动力学过程符合三室模型,T12α为1.77～3.03h,T12β为24.58～28.88h,T1/2γ为82.17～114.09h。125IrhTNTIL2在大鼠肝、脾、肺、肾、卵巢等组织器官中有较高的积聚,而脑中放射性活度较小。125IrhTNTIL2主要经肾由尿排泄,给药后24h,67.1%的药物由尿排出。125IrhTNTIL2从粪中排泄的量甚微。结论125IrhTNTIL2在大鼠体内药代动力学过程的研究为其进一步的开发具有指导价值。     

人组织型尿激酶型纤溶酶原激活剂单次静脉给药大鼠体内半衰期、组织分布及排泄

目的评价人组织型尿激酶型纤溶酶原激活剂(HTUPA)在SD大鼠体内的半衰期、组织分布及排泄。方法以125I为示踪剂标记药物HTUPA,SD大鼠单次静脉注射不同剂量的HTUPA,于给药后各时间点采集眼眶血样、尿粪样本和胆汁样本,以及不同时间点处死的大鼠脏器样本,以放射性同位素示踪结合三氯乙酸沉淀法定量检测血浆浓度,分析药物半衰期、组织分布及排泄率。结果大鼠静脉注射1、2和4 mg/kg的HTUPA,其药物浓度-时间曲线符合二室模型特征,平均分布半衰期(t1/2α)分别为(5.62±4.22)、(6.37±4.93)和(6.57±4.13)min;平均消除半衰期(t1/2β)分别为(49.21±19.36)、(41.17±18.50)和(43.68±28.67)min,且剂量与药时曲线下面积呈正相关(r=0.998 5);单次静脉给药2 mg/kgHTUPA,肝肾组织中含量最高,脑含量最低;96 h经尿液和粪便的累计排泄量占总给药量的79.08%和15.40%,24 h胆汁累计排泄量占总给药量的6.67%。结论 HTUPA作为新一代溶栓候选药,体内分布速度快,半衰期适合。     

超氧化物歧化酶肠溶胶囊及经聚乙二醇修饰后在家兔体内的药动学

目的:获得聚乙二醇-超氧化物歧化酶(PEG-SOD)和超氧化物歧化酶(SOD)肠溶胶囊分别单次灌胃后家兔全血中的药动学参数.方法:以本实验室制成的PEG-SOD(PEG6000)进行125I标记并制成肠溶胶囊.分别将平均放射性为566082cpm/30s的125I-SOD肠溶胶囊和588942cpm/30s(cpm为放射性计数)的125I-PEG-SOD肠溶胶囊灌入兔子胃中,于给药后不同时间点:15,45,60,90,120,180,240,270,360,450,540,600 min,24 h自耳缘静脉分别取血样1 mL,分别测量全血中的放射性计数,血样放射性-时间数据用3P97程序处理,用残数法结合非线性加权最小二乘法计算药动学参数.结果:PEGSOD和SOD肠溶胶囊在家兔体内过程符合开放型二室动力学特征,Tmax分别为(3.37±0.20)h、(1.10±0.07)h,Cmax分别为(70379.2±6375.7)cpm、(91131.7±8201.8)cpm,T1/2α分别为(1.08±0.14)h、(1.06±0.16)h,T1/2β分别为(6.7±0.4)h、(2.6±0.4)h;灌胃24 h后,PEG-SOD和SOD肠溶胶囊在家兔体内的分布次序为肾＞肝＞肠＞胃＞肺＞脾＞胆＞心.结论:经聚乙二醇(PEG6000)修饰得到PEG-SOD并制成肠溶胶囊后半衰期大大延长.     

异硫氰酸基雷公藤内酯醇活性代谢物雷公藤甲素在大鼠体内的药代动力学

目的观察大鼠单剂量静脉注射异硫氰酸基雷公藤内酯醇后雷公藤甲素的药代动力学。方法将大鼠分为2组(每组5只),分别单次尾静脉注射异硫氰酸基雷公藤内酯醇低、高剂量(4.25,8.50 mg·kg-1)。用LC-MS/MS法,检测大鼠血浆中雷公藤甲素的浓度,用BAPP 3.2软件计算药代动力学参数。结果低、高剂量的主要药代动力学参数如下:Cmax分别为(12.36±1.09),(55.74±21.20)ng·mL-1,Tmax均为(2.0±0.0)min,t1/2分别为(12.82±2.41),(13.73±2.84)h,AUC0-t分别为(245.93±42.50),(1034.45±471.76)ng·min.mL-1。结论在4.25～8.50 mg·kg-1,雷公藤甲素的药代动力学表现出非线性消除特征。     

重组人^125I—CTLA4Ig在大鼠体内吸收、组织分布及排泄的药代动力学研究

目的:研究重组人单克隆抗体 CTLA4Ig 经静脉单次给药后在 Wistar 大鼠体内的药代动力学、组织分布及排泄过程,评价剂量与药代动力学参数之间的关系。方法:54只 Wistar 大鼠(雌雄各半)分为9组(雌雄各3只),3组分别单次给药(100,30,10 mg·kg~(-1),按不同时间点采血分离血浆,TCA 沉淀法测定~(125)I-CTLA4Ig 的放射强度,用所得结果评价~(125)I-CTLA41g 在大鼠体内的暴露情况,根据非房室统计矩模型用 WinNolin 药代软件进行曲线拟合并计算药代动力学参数;其余6组单次给药30mg·kg~(-1),其中4组大鼠给药后不同时间麻醉处死、解剖测定~(125)I-CTLA4Ig 组织分布,另外1组给药后收集不同时段的尿粪评价~(125)I-CTLA4Ig 的排泄过程,最后1组麻醉后插管给药收取胆汁评价胆汁排泄。结果:Wistar 大鼠分别静脉单次注射高、中、低(100,30,10mg·kg~(-1))后,T_(1/2)分别为(41.25±0.90)h、(47.25±1.79)h 和(54.81±1.96)h,CLs 与 Vss 随着剂量的减小发生减少的变化,血药浓度-时间曲线下面积 AUC_(INF)(h·μg·mL~(-1))分别为35833.37±2618.69,14171.04±1118.25,6186.85±480.35,剂量之比为10:3:1,对应的 AUC 比值为5.8:2.3:1,剂量与 AUC 成正相关性,AUC=0.524·Dose 0.5821,相关系数 R~2=0.9975,但是 AUC 的增加量小于剂量的增加量;单次静脉给药~(125)I-CTLA4Ig 30mg·kg~(-1)后,肝肾组织中~(125)I-CTLA4Ig 的含量最高,脑含量最低;120h 经尿粪排泄量占总给药量的68.98%和6.88%;胆汁在给药后28h 其排泄量相当于总给药量的5.80%。结论:在本实验的剂量范围内,剂量与 AUC 成正相关性,AUC 的增加量小于剂量的增加量,预示在以上剂量范围内 CTLA4Ig 在 Wiatar 大鼠血浆中的浓度变化可能呈非线性药代动力学特点;肾脏为~(125)I-CTLA4Ig 的主要排泄器官;胆汁的排泄量提示~(125)I-CTLA4Ig 在大鼠体内存在肝肠循环的代谢特征。     

重组人尿激酶原临床Ⅰ期药代动力学研究

目的:研究健康受试者单次静脉注射重组人尿激酶原(rhproUK)后的药代动力性质。方法:采用ELISA分析方法测定血浆总uPA、sc-uPA抗原浓度以及联合免疫生色底物法测定纤溶活性变化。结果:健康受试者单次静脉注射给药剂量分别为20、40和60mg,血浆uPA、sc-uPA和纤溶活性的AUC和Cmax呈剂量依赖性增加,剂量比为1∶2∶3,AUCuPA之比为1∶2.1∶3.3;AUCsc-uPA之比1∶1.9∶2.9;不同给药剂量组间的uPA、sc-uPA抗原浓度的CLS、VSS、MRT、末端t1/2和tmax等参数无统计学差异。血浆纤溶活性浓度时间曲线的AUC和Cmax随剂量增加而增加,但表现出一定的非线性变化趋势,Cmax之比为1∶2.3∶3.9,AUC之比为1∶2.9∶4.7,CLS与Vd随剂量增加而逐渐减少。结论:健康受试者个体口服20～60mg剂量rhproUK后,血浆总u-PA、sc-uPA抗原浓度变化表现为线性药代动力学;而血浆纤溶活性浓度表现出非线性药代动力学特点。     

胡黄连苷Ⅰ和胡黄连苷Ⅱ在大鼠体内的药物动力学

目的研究胡黄连苷Ⅰ和胡黄连苷Ⅱ在大鼠体内的药物动力学特征及胡黄连苷Ⅱ的绝对生物利用度。方法采用大鼠尾静脉注射和灌胃给药两种方式,利用LC-MS/MS法同时测定大鼠血浆中胡黄连苷Ⅰ和胡黄连苷Ⅱ的质量浓度,进行房室模型拟合并计算其主要药物动力学参数。结果大鼠尾静脉注射给予胡黄连总苷32mg·kg-1后,胡黄连苷Ⅰ和苷Ⅱ的t1/2β分别为(0.70±0.03)h和(0.63±0.25)h,AUC0t-为(1 379.74±122.82)μg·h·L-1和(16 221.01±562.50)μg·h·L-1。灌胃给予等量总苷后,胡黄连苷Ⅱ的绝对生物利用度仅为0.99%。结论胡黄连苷Ⅰ和苷Ⅱ在大鼠体内消除迅速,两者的药物动力学过程均符合二室模型。     

链霉菌产生的新型纤溶酶的纤溶性质和溶栓作用

目的旨在进一步确证纤溶活性的蛋白酶SW-1的溶栓作用和性质。用体外加热平板法、试管凝块法和在体内对大鼠静脉血栓溶解及对纤溶因子的作用等实验,发现SW-1在体外可直接降解纤维蛋白,而无激活纤溶酶原的作用。在体内,SW-1对大鼠静脉血栓有显著的溶解效果,与同剂量尿激酶的溶栓作用相当。给药(iv)30min后,SW-1引起大鼠血浆中纤溶酶、纤溶酶原水平提高,纤维蛋白原水平下降,而对组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)、α₂-纤溶酶抑制剂无显著影响。提示SW-1是一种具有纤溶活性的蛋白酶,而不是纤溶原激活剂。     

重组人胸腺肽α1在大鼠体内的药物动力学研究

研究了重组人胸腺肽α1（rh-Tα1）在大鼠体内的药物动力学，采用^125I标记rh—Tα1同位素法，观察单次皮下注射后的体内过程。^125I—rh—Tα1单次皮下注射后在大鼠体内的动力学过程符合一室模型，消除半衰期（t1/2ke）为5．42～7．07h，绝对生物利用度91．28％。^125I-rh—Tα1在大鼠体内组织器官中分布广泛并能较快地消除，其在肾、胃、肺和卵巢等组织器官中有较高的积聚，而脑中则较小。^125I-rh．Tα1主要经肾由尿排泄，给药后120h内，药物的82．4％由尿排出，7．6％由粪排出。     

多肽ADWX-1在大鼠体内的药代动力学研究

初步研究了蝎活性多肽ADWX-1单次皮下给药后在SD大鼠体内的动态变化过程。建立了同位素示踪结合三氯乙酸沉淀法测定大鼠血浆中ADWX-1的方法,绘制了ADWX-1单次皮下给药后在大鼠中的血药浓度-时间曲线,并计算出药代动力学参数。用氯胺-T法标记多肽ADWX-1,凝胶过滤HPLC法测定125I-ADWX-1的放射化学纯度,全细胞膜片钳法测定125I-ADWX-1的生物活性。结果显示,标记物125I-ADWX-1的放射化学纯度为96.77%,在相同浓度(1 nmol/L)下,标记物125I-ADWX-1与ADWX-1的生物学活性无显著差异。三氯乙酸沉淀法测定SD大鼠血浆中ADWX-1浓度的最低定量限为19.5 ng/mL,线性范围为39～2 500 ng/mL;大鼠SC单次给予50、100和200μg/kg ADWX-1多肽后的半衰期(T1/2)分别为:(161.310±41.105)、(129.832±21.315)、(143.021±34.727)min,无显著差异;药时曲线下面积(AUC)和峰浓度(Cmax)分别为(21 869.101±4 282.617)、(41 175.180±6 699.601)、(90 543.101±27 233.192)μg/min.L和(101.465±16.198)、(208.312±19.412)、(429.124±104.474)μg/L,AUC和Cmax与给药剂量呈良好的线性关系。这说明,ADWX-1皮下给药后在大鼠体内稳定性较好,半衰期较长,符合静脉外给药一房室模型一级动力学过程。     

甲氨蝶呤在抑郁SD大鼠体内药代动力学

目的 研究抑郁大鼠抗肿瘤药物甲氨蝶呤(MTX)的药代动力学.方法 对抑郁组大鼠连续8 w给予慢性不可预见性温和应激建立抑郁实验动物模型.采用荧光偏振免疫法(FPIA)测定SD大鼠给药后0.083、0.5、1、2、4、8、12 h各时间点血浆中MTX浓度,采用DAS药代动力学软件计算相应药代动力学参数.结果 甲氨蝶呤在抑郁组大鼠和对照组大鼠体内药代动力学主要参数:Cmax分别为(8.10±0 99)和(7.99±1.04) μmol/L;t1/2分别为(2.11±0.24)和(2.24±0.32) h;AUC0→∞分别为(13.92±3.46)和(13.73±1.55) μmol·h·L-1;MRT0→∞分别为(1.99±0.45)和(2.15±0.44) h;CL分别为(0.13±0.03)和(0.14±0.04) L/h,显示甲氨蝶呤在抑郁组和对照组大鼠体内药代动力学参数基本一致,两组数据没有显著性差异.结论 抑郁大鼠甲氨蝶呤体内代谢动力学与正常大鼠药代动力学相近.     

荷叶碱在大鼠体内的药代动力学研究

目的：建立大鼠血浆中荷叶碱的HPLC测定方法并进行大鼠体内药代动力学研究。方法：大鼠尾静脉注射后,不同时间点眼底静脉丛取血,乙酸乙酯提取大鼠血浆样品的荷叶碱,HPLC测定大鼠血浆中荷叶碱的含量,DAS软件计算药代动力学参数。结果：荷叶碱在大鼠体内的t1／2。为（1．73±0．58）h,V为（5．03±0．24）L／kg,CL为（4．23±0．78）L·h。·kg,药时曲线下面积（AUC0。－Inf）为（2．35±O．46）mg·L叫·h;在血浆中的平均驻留时间（MRT）为（1．51±0．31）h。结论：所建立的HPLC分析方法快速、准确、简便,能够满足荷叶碱药代动力学的研究要求。按10mg／kg单剂量单次静脉给药后,荷叶碱主要在血浆中分布,消除速度较快。     

内皮素受体拮抗剂CPU-0213血药浓度的HPLC测定法和药动学研究

目的 :建立内皮素受体拮抗剂CPU 0 2 13在小鼠和大鼠血清中的检测方法 ,测定单次静脉注射(iv)CPU 0 2 1380mg·kg-1后在小鼠和大鼠体内的药代动力学。方法 :用HPLC测定小鼠和大鼠血清中的药物浓度 ,3P97程序拟合药动学参数。结果 :CPU 0 2 13在 0 .4～ 2 0 0 μg·L-1的范围内呈良好的线性关系 (r =0 .9998) ,最低检测浓度为 35 μg·L-1。日内差小于 2 .7% ,日间差小于 6 .3% ,方法回收率大于 95 .9%。CPU 0 2 13在小鼠和大鼠体内的药 时数据均符合二室模型 ,消除半衰期分别为 83.0±1.8min和 96 .6± 11.5min。结论 :该方法灵敏、简单 ,专属性强 ,重现性好。单次ivCPU 0 2 1380mg·kg-1后 ,在小鼠和大鼠体内的药代动力学未见种属差异性。     

雷诺嗪在健康人体的药代动力学

目的 评价中国健康人单剂量口服雷诺嗪缓释片后体内的药代动力学.方法 随机双盲单中心Ⅰ期临床研究,2名受试者口服安慰剂,8名受试者单次口服雷诺嗪缓释片1500 mg后,用LC-MS-MS法测定血浆中雷诺嗪浓度,用WinNonlin@6.3软件对血药浓度数据进行处理,计算药代动力学参数.结果 血浆中雷诺嗪浓度线性范围为5～4000 ng·mL-1,定量下限为5 ng· mL-1,日内、日间精密度均小于15％.主要的药代动力学参数:Cmax为(1.27 ±0.50) mg·mL-,tmax为(3.13 ±1.55) h,t1/2为(5.02±1.47) h,V为(0.74 ±0.35) L,CL为(0.10±0.05) L· h-1,AUCo-48为(17.50±8.31) mg·h·mL-1.结论 本方法操作简便、快捷、灵敏度高,可用于雷诺嗪缓释片在中国健康受试者体内药代动力学的研究.     

毛兰素注射液在大鼠体内药动学研究

目的阐明毛兰素注射液在SD大鼠体内药动学规律。方法 SD大鼠分别单次和隔天、每隔一个半衰期一次多剂量静脉注射毛兰素注射液。采用高效液相色谱-质谱联用（HPLC-MS）测定大鼠静脉注射后不同时间大鼠血浆中毛兰素的血药浓度。结果大鼠单次静脉注射25,50,100mg·kg-1毛兰素注射液的主要药动学参数为：T1/2β分别为3.66,3.75,3.89h;AUC0-12分别为1453.0,3041.6,6731.6ng·mL-1·h;AUC0-∞分别为1462.0,3077.3,6788.7ng·mL-1·h;Vd分别为11.67,10.37,3.38L·kg-1;CL分别为0.049,0.089,0.024L·kg-1·h-1;MRT分别为0.18,0.28,0.21h;50mg·kg-1剂量的毛兰素注射液隔日给药5次其药动学参数与单次给药相近;而50mg·kg-1剂量的毛兰素注射液每隔一个半衰期一次给药5次的T1/2β为5.43h,AUC（S0）（0-t）为9800.8ng·mL-1·h。结论毛兰素注射液在大鼠体内的动力学过程与剂量相关,毛兰素注射液单剂量给药的体内药动学符合开放型二房室模型,T1/2β与给药剂量与关,表明毛兰素在大鼠体内的消除过程符合一级动力学规律。隔日多剂量给药的消除过程亦符合一级动力学规律;而每隔一个半衰期一次多剂量给予50mg·kg-1剂量的毛兰素其在大鼠体内则呈非线性消除。     

葡萄糖甘油二脂促进大白鼠肺血栓溶解及其作用机制研究

目的研究葡萄糖甘油二脂(Glucosyldiacylglycerol,GDG自马尾藻分离提取)促进大白鼠肺血栓溶解及其作用机制。方法用荧光异硫氰酸异构体Ⅰ(Fluorescein isothiocyanate isomerⅠ,略写为FITC)标记纤维蛋白以建立肺血栓动物模型,GDG尾静脉注射,观察其肺血栓溶解的药理作用。通过建立的体外纤溶反应体系,研究GDG对纤溶酶原和单链尿激酶型纤溶酶原激活剂体活性的影响,并且用圆二色谱进一步研究GDG对单链尿激酶型纤溶酶原激活剂构象的影响。结果GDG具有促进肺血栓溶解的作用;建立体外纤溶反应体系,发现GDG不能促使纤溶酶原和尿激酶型纤溶酶原激活剂分别直接转化为纤溶酶和尿激酶;用圆二色谱研究发现,GDG使单链尿激酶型纤溶酶原激活剂在208nm处的负峰向长波方向移动,并且α-螺旋结构减少β-折叠结构增加。结论GDG提高了单链尿激酶型纤溶酶原激活剂的内因性尿激酶型纤溶酶原活化因子的作用     

氚标记小牛胸腺DNA在大鼠和犬体内的药动学研究

目的:研究氚标记小牛胸腺DNA(3H-小牛胸腺DNA)在大鼠和Beagle犬体内的药动学特征。方法:采用氚水交换法制备3H-小牛胸腺DNA。取大鼠尾静脉注射高、中、低剂量(15、5、1.67 mg/kg,n=5)的3H-小牛胸腺DNA,中、高剂量组大鼠连续给药7d(第1、7天给予3H-小牛胸腺DNA,其余时间给予未标记小牛胸腺DNA),低剂量大鼠仅单次给药;另取犬前肢静脉注射高、中、低剂量(1.5、0.5、0.167 mg/kg,n=3)的3H-小牛胸腺DNA,中剂量犬连续给药7 d,低、高剂量犬仅单次给药。分别于第1、7天给药后0.033、0.25、1、2、4、6、8、12、24 h取血,分离血浆后加入闪烁液并使用液闪计数仪分析,以WinNonlin软件计算药动学参数。结果:高、中、低剂量3H-小牛胸腺DNA在大鼠体内的药动学参数分别为:单次给药的AUC0-24 h为(11 742±2 245)、(3 571±851)、(727±202)ng-Eq·h/g,t1/2为(21.4±5.08)、(13±6.0)、(6.8±1.76)h;重复给药高、中剂量的AUC0-24 h为(5 706±1 009)、(7 601±1 861)ng-Eq·h/g,t1/2为(16.0±10.13)、(9±2.7)h。高、中、低剂量3H-小牛胸腺DNA在犬体内的药动学参数分别为:单次给药的AUC0-24 h为(4 444±999)、(2 719±139)、(501±101)ng-Eq·h/g,t1/2为(17.6±7.57)、(14.0±1.76)、(16.4±2.39)h;重复给药中剂量的AUC0-24 h为(3 073±200)ng-Eq·h/g,t1/2为(20.6±6.62)h。结论:3H-小牛胸腺DNA在大鼠与Beagle犬体内单次给药和重复给药均可被快速消除。     

β-七叶皂苷钠在脑缺血再灌注大鼠体内药代动力学的研究

目的:研究β-七叶皂苷钠在脑缺血再灌注大鼠体内的药代动力学规律。方法:应用酶联免疫吸附分析(ELISA,enzyme-linked immunosorbent assay)检测方法,测定正常大鼠及脑缺血大鼠经静脉注射β-七叶皂苷钠5 mg.kg-1后β-七叶皂苷钠的血药浓度,并对其药物代谢动力学参数进行研究。结果:脑缺血再灌注及正常大鼠静脉注射β-七叶皂苷钠5mg.kg-1后,其药代动力学模型符合二室模型。正常大鼠在静脉注射β-七叶皂苷钠后,血药浓度迅速下降,大约20 min后,其血浆药物浓度已下降50%,T1/2α=0.343 h,T1/2β=23.325 h。约2 h后,血浆药物浓度下降速率减慢。而脑缺血再灌注大鼠脑缺血30 min后,静脉注射β-七叶皂苷钠后,其体内药物代谢规律与正常大鼠不同,药物的代谢速率减慢,且在3 h出现一个较低的血药浓度峰,随后血浓下降。结论:β-七叶皂苷钠在脑缺血再灌注大鼠体内的消除较正常大鼠慢,在体内停留的时间较长。提示β-七叶皂苷钠在临床的对症治疗时应考虑其药代动力学的特点。