大鼠体内桃核承气汤蒽醌类药代动力学研究

目的研究桃核承气汤中蒽醌类成分在大鼠体内药代动力学规律。方法大鼠灌胃给予桃核承气汤5、10 g.kg-1后,采集血浆、尿和胆汁,用HPLC方法分析样品中蒽醌类成分、测定血浆中大黄酸浓度经时变化,浓度-时间数据用3P97药代动力学软件进行分析,计算药动学参数。结果大鼠灌胃给予桃核承气汤后,血浆中检测到芦荟大黄素、大黄酸、大黄素,尿中检测到芦荟大黄素、大黄酸、大黄素和大黄酚,胆汁中检测到大黄酸和大黄酚;血液、尿液和胆汁中均以大黄酸含量最高,且经尿排泄的量明显多于经胆汁排泄的量。灌服桃核承气汤5和10 g.kg-1剂量组,T12(α)为0.03和0.13 h,T12(β)为1.46和2.51 h,T12(Ka)为0.01和0.12 h,V1为0.14和0.12 L.kg-1,CL为0.77和0.33 L.h-1.kg-1,Cm ax为(2.15±0.29)和(9.70±2.50)mg.L-1,Tpeak为(0.19±0.04)和(0.23±0.04)h,AUC0-∞为1.69和6.50 mg.L-1.h。结论桃核承气汤中蒽醌类成分可以吸收进入体内,其中以大黄酸为主;体内蒽醌类成分经尿和胆汁排泄,其中以尿排泄为主。大鼠灌服桃核承气汤,血浆中大黄酸浓度时间过程符合二室开放模型。     

参附配伍后附子在心力衰竭大鼠体内的药代动力学研究

目的 研究参附配伍后附子在心力衰竭大鼠体内的药代动力学,为参附配伍减毒增效提供数据支持.方法 SD大鼠40只,雌雄各半,建立并评价心力衰竭大鼠模型;手术后,SD大鼠分为3组,正常组、模型组和模型+红参组,开展药代动力学研究,各组大鼠1.0 g/kg灌胃给药附子提取液,于给药前和给药后0.25、0.5、1、2、4、8、1...     

栀子柏皮汤不同配伍在大鼠体内的药代动力学研究

目的：探讨栀子柏皮汤不同配伍对栀子苷体内药代动力学的影响。方法将30只SD大鼠随机分为5组,每组6只。分别灌胃含等量栀子苷的栀子苷单体溶液及栀子、栀子-炙甘草、栀子-黄柏、栀子-黄柏-炙甘草汤剂,采用HPLC方法测定给药后不同时间血药浓度,比较药代动力学参数。结果汤剂组AUT及T1/2显著高于栀子苷单体组,栀子-炙甘草、栀子-黄柏及栀子黄柏-炙甘草组T1/2、AUT0-t及AUT0-∞均显著高于栀子组,栀子-黄柏-炙甘草组AUT0-t、AUT0-∞、T1/2、Tmax及Cmax均高于其他组,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论栀子柏皮汤药材间相互作用有助于促进栀子苷吸收,从而提高药物生物利用度。     

富马酸托特罗定在健康中国人体内的药代动力学研究

目的:建立健康人血浆中托特罗定 HPLC—MS/MS 测定法,研究富马酸托特罗定在健康中国人的药物动力学,并与酒石酸托特罗定进行比较。方法:以丁洛地尔为内标,血浆样品碱化后经乙醚-正戊烷(3:1)萃取,经 Hypurity C_(18)柱分离,采用MS/MS 检测器检测。12名健康志愿者(男女各半)以随机交叉方式单剂量口服富马酸托特罗定3.72 mg 或酒石酸托特罗定4mg。另12名志愿者(男女各半)分别口服富马酸托特罗定3.72 mg,每日2次,连续6 d。研究比较不同酸根托特罗定的药物动力学。结果:托特罗定与内标分离度好,内源性杂质不干扰测定,标准方程为 Y=0.1819C-0.004672,r=0.9999。在0.1～20μg·mL~(-1)范围内托特罗定浓度与峰面积比的线性关系良好,定量下限为0.1μg·mL~(-1),回收率为102.4%～108.8%(n=15),日内 RSD 为5.0%～10.6%(n=5);日间 RSD 为9.2%～10.3%(n=15)。单剂量口服富马酸托特罗定3.72 mg 或与酒石酸托特罗定4 mg 后血药浓度时间曲线符合一级吸收一室模型。药代动力学参数 C_(max)(8.2±5.5)μg·L~(-1),(8.4±5.7)μg·L~(-1);T_(max)为(1.8±0.5)h,(1.9±0.5)h;AUC_(0→12)为(45.2±32.3)μg·h·L~(-1),(46.5±34.3)μg·h·L~(-1);AUC_(0→∞)为(55.6±42.5)μg·h·L~(-1),(56.5±42.9)μg·h·L~(-1);T_(1/2)为(3.8±1.7)h,(3.8±1.9)h。与酒石酸盐相比,富马酸托特罗定的相对生物利用度为(97.8±16.6)%。性别间 C_(max)、AUC_(0→12)、AUC_(0→∞)有显著性差异,可能和试验例数较少或志愿者 EM/PM 分型不同有关。多剂量口服富马酸托特罗定3.72 mg 达到稳态后,C_(max)~(ss)为(13.3±5.56)μg·L~(-1);T_(max)~(ss)为(1.7±0.3)h;AUC_(0→12)~(ss)为(68.3±33.6)μg·h·L~(-1);C_(min)~(ss)为(1.8±1.5)μg·L~(-1);C_(av)(5.7±2.8)μg·L~(-1);DF 为2.1±0.6。性别间主要药物动力学参数无显著性差异。结论:HPLC—MS/MS 方法简单,准确度高,灵敏度好,可用于托特罗定在人体内药物动力学研究。单剂量口服富马酸托特罗定3.72 mg 或酒石酸托特罗定4 mg 后体内药动学无显著性差异,酸根的改变没有改变托特罗定在人体内的药动学行为。托特罗定片在健康志愿者体内的药物动力学参数的性别差异可能和试验例数较少或志愿者 EM/PM 分型不同有关,多次给药后体内无明显蓄积现象。     

大鼠体内槲皮素的血药浓度测定及其药代动力学研究

目的建立测定大鼠血浆中槲皮素浓度的高效液相色谱法,并应用于药代动力学研究。方法10只大鼠(雌雄各半)灌胃给予槲皮素50 mg/kg。采用高效液相色谱法测定槲皮素的血药浓度,以山柰酚为内标,流动相为甲醇-缓冲液(0.1 mol/L NH4AC+0.3 mmol/LEDTA-Na2)-乙酸=(60∶40∶1,V/V),色谱柱为迪马ODS C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),测定波长为370 nm,进样量为20μL,流速为1 mL/min,柱温为35℃。结果槲皮素血药浓度线性范围是0.01～50μg/mL(r=0.999 9),定量下限为0.01μg/mL。低、中、高(0.05,5,25μg/mL)3个质量浓度的回收率为97.2%～103.4%,日内、日间精密度的RSD均小于10%。大鼠灌胃给予槲皮素50 mg/kg后的最大血药浓度为(2.033±0.41)μg/mL,达峰时间为0.5 h,t1/2ke为(4.17±0.64)h,0-∞药时曲线下面积为(6.77±0.80)μg/(h.mL)。结论方法专属性高,准确、灵敏,可为今后槲皮素的药代动力学研究提供方法学依据。     

左金丸配伍意义的药代动力学研究

目的研究黄连、吴茱萸单用或以其6∶1伍用(左金丸,消化系统中药)在SD大鼠的药代动力学。方法黄连、吴茱萸及左金丸制成水煎液,灌胃SD大鼠,用液质联用法测定小檗碱、吴茱萸次碱的血药浓度,并计算其药代动力学参数。结果给予左金丸后,小檗碱相对生物利用度增加,t1/2延长,tmax缩短但呈缓慢代谢状态。吴茱萸次碱的tmax提前,Cmax提高,相对生物利用度增加。结论临床应用左金丸30mL.kg-1,间隔为每日1次较为合理。     

扎莱普隆片的人体药代动力学和相对生物用度

目的:研究扎莱普隆片在20名健康志愿者体内的药代动力学特征及相对生物利用度。方法:20名健康男性志愿者采用随机交叉给药方案,分别单剂量口服的扎莱普隆片10mg和对照胶囊,用液-液相萃取后、HPLC-ESI-MS分析方法对血药浓度进行测定,计算两者的药代动力学参数及相对生物利用度。结果:试验片和对照胶囊的血药浓度水平一致。其主要药代动力学参数t_(1/2)分别为1.17±0.19h和1.14±0.12h;t_(max)分别为0.83±0.12h和0.91±0.12h,C_(max)分别为28.47±2.62μg·l~(-1)和28.12±3.44μg·l~(-1),AUC_(0-8)分别为52.83±4.81μg·h·l~(-1)和54.92±8.83μg·h·l~(-1),两制剂的药代动力学参数相近。用面积估算的扎莱普隆片的相对生物利用度F_(0.8)为(98.3±16.5)％,F_(0-∞)为(98.0±16.4)％。结论:扎莱普隆片和对照胶囊的AUC、C_(max)经方差分析和双单侧t-检验表明:两制剂生物等效;t_(max)经非参数法检验,表明两种制剂无显著性差别(P>0.05)。     

液相色谱-质谱联用技术在中药药代动力学研究中的应用进展

液相色谱-质谱法在中药药代动力学研究中的应用,包括中草药单一有效成分体内药物浓度测定及多组分同时测定、中草药体内代谢产物的鉴定与分析等。中草药特别是中药方剂,成分较复杂,较化学药物的药代动力学研究更困难;而液相色谱-质谱法结合了液相色谱的高分离能力和质谱的高灵敏度和极强的定性专属性,适于中药药代动力学研究。     

氨苄西林和甲硝唑配伍作用及药代动力学的研究

甲硝唑为抗滴虫药,亦具有抗厌氧菌作用,与其它抗生素联合作用,临床反映疗效较好,毒副反应较低。此配伍作用是否属合理用药?为此,我们根据临床用药剂量,将氨苄西林钠和甲硝唑按比例配伍后,进行稳定性实验及家兔体内药代动力学实验。结果表明氨苄西林和甲硝唑可配伍使用。     

大黄苷元注射抗大鼠脑缺血损伤炎性级联反应

目的评价大黄苷元抗脑缺血损伤作用,并从细胞因子水平及表达方面探讨其抑制脑缺血炎性级联反应机制。方法将大鼠分为假手术组、模型组、川芎嗪组、大黄苷元组(低、中、高剂量)。线栓法制备大鼠局灶性脑缺血6h模型。观察神经症状积分、脑组织含水量、梗死面积,放射免疫法测定脑组织TNF-α、IL-1β、TGF-β水平,免疫组织化学法测定TNF-α、VCAM-1表达,原位杂交法测定VCAM-1-mRNA表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠神经症状积分和脑含水量及梗死面积增加,脑组织TNF-α和IL-1β水平增高(P<0·01)、TGF-β水平降低(P<0·01),TNF-α和VCAM-1的表达增强(P<0·01)。与模型组比较,川芎嗪组和大黄苷元低剂量、中剂量组神经症状积分和脑含水量及梗死面积明显降低,大黄苷元低剂量组较中、高剂量组和川芎嗪组尤为明显。大黄苷元低剂量组和川芎嗪组TNF-α和IL-1β水平及TNF-α、ICAM-1表达明显降低,TGF-β水平增高(P<0·01),大黄苷元低剂量组较川芎嗪组尤为明显。结论由多种细胞因子如TNF-α、IL-1β、ICAM-1介导的炎性级联反应增强和TGF-β的保护作用减弱是脑缺血损伤的重要机制。大黄苷元抗脑缺血损伤作用机制可能是通过抑制缺血脑组织炎性级联反应和提高脑保护因子如TGF-β水平而实现的。     

丹红注射液对实验性脑缺血大鼠脑毛细血管通透性及脑含水量的影响

目的 研究丹红注射液对大鼠脑缺血所致脑水肿的影响.方法 建立以颈总动脉结扎致大鼠不完全性脑缺血模型,通过伊文氏蓝法和重量法观察丹红注射液对脑毛细血管通透性、脑指数、脑含水量的影响.结果 丹红注射液预防给药可明显降低模型大鼠脑毛细血管通透性、脑含水量和脑指数,减轻脑水肿(P＜0.05).结论 丹红注射液对实验性大鼠脑缺血所致脑水肿有一定的预防作用.     

线栓法制备Wistar大鼠局灶性脑缺血模型的实验研究

目的:建立一种简便可靠,创伤较小的Wistar大鼠局灶性脑缺血模型。方法:参照Zealonga及Koizum的线栓法,加以改进,制作Wistar大鼠局灶性脑缺血模型,随后行神经病学检查,测定脑组织含水量、丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性,并进行病理组织学检查,以观察模型的可靠性。结果:大鼠大脑中动脉阻断2小时(MCAO2h)后,出现神经功能障碍,缺血脑组织含水量及MDA含量增加,SOD活性下降,HE染色显示明显脑水肿。结论:该改良法制备的模型简便易行,结果可靠,创伤小,稳定性好,是用于研究局灶性脑缺血较为理想的实验动物模型。     

丹参素配伍川芎嗪对大鼠局灶性脑缺血的保护作用

目的研究丹参素配伍川芎嗪对大鼠局灶性脑缺血的保护作用。方法采用线栓法制备SD大鼠永久性大脑中动脉阻塞（permanent middle cerebral artery occlusion,pMCAO）模型。实验SD大鼠随机分为6组,分别为假手术组、模型组、丹参素组（1.2 mg·kg-1）、川芎嗪组（60mg·kg-1）、丹参川芎嗪注射液组[（1.2mg丹参素＋60mg川芎嗪）kg-1]、尼莫地平注射液组（1.2mg·kg-1）。造模24 h后,测定神经行为学评分、脑组织含水量、脑梗塞体积、血清中超氧化物歧化酶（SOD）活性和兴奋性氨基酸谷氨酸（Glu）含量,并进行组织病理学检查。结果与模型组相比,丹参素组、川芎嗪组、丹参川芎嗪注射液组大鼠的神经行为明显改善,脑含水量和脑梗塞体积显著降低（P〈0.05或0.01）,血清中SOD活性升高,Glu含量降低（P〈0.05或0.01）,HE染色显示组织间隙较小,病理损伤小于模型组。丹参川芎嗪注射液组保护作用最优,说明两单味药配伍使保护作用增强。结论丹参素配伍川芎嗪对大鼠局灶性脑缺血有协同的保护作用。     

硫化氢对局灶性脑缺血大鼠脑组织氧化应激的影响

目的：观察硫化氢（H2 S）对局灶性脑缺血大鼠脑组织氧化应激的影响。方法40只健康雄性 SD 大鼠,随机分为假手术（Sham）组、缺血模型（Ischemia）组、H2 S 低剂量（L-NaHS）组、H2 S 中剂量（M-NaHS）组和 H2 S 高剂量（H-NaHS）组。线栓法复制大鼠大脑中动脉闭塞模型。H2 S 低、中、高剂量组大鼠于缺血3 h 时分别腹腔注射0.7 mg/ kg、1.4 mg/ kg 和2.8 mg/ kg 的 NaHS,Sham 组和 Ischemia 组注射等容量的0.9%氯化钠溶液。5组大鼠均于缺血24 h 时断头取脑,测定脑组织中丙二醛（ MDA）的含量、超氧化物歧化酶（ SOD）的活性和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）的活性;透射电镜观察脑组织的病理变化。结果与 Sham 组比较,Ischemia 组大鼠脑组织 SOD、GSH-PX 活性明显降低（ P ﹤0.01）,MDA 含量明显升高（ P ﹤0.01）;电镜观察显示神经元水肿,线粒体膜肿胀、线粒体嵴断裂甚至消失,线粒体大量空泡化,细胞器的数量减少;与 Ischemia 组比较,M-NaHS、H-NaHS 组大鼠脑组织中 SOD、GSH-PX活性明显升高（ P ﹤0.05）,MDA 含量明显降低（ P ﹤0.05）;电镜观察可见神经元轻度水肿,线粒体部分肿胀、内外膜结构清晰、部分嵴断裂消失,细胞器数量增多,脑缺血损伤程度明显减轻。结论 H2 S 可减轻大鼠局灶性脑缺血损伤,其机制与提高大鼠的抗氧化应激能力有关。     

大黄苷元对骨髓间充质干细胞移植脑缺血大鼠血脑屏障的作用与机制

目的观察脑缺血/再灌注损伤大鼠血脑屏障通透性(BBB)改变,并从对纤溶酶系统调节的影响方面探讨大黄苷元、BMSCs移植及其联合保护微血管损伤的作用机制。方法体外培养扩增BMSCs;大鼠随机分组;线栓法制备MCAO模型;术后3h再灌注24h,将BMSCs由同侧颈内动脉移植入脑,大黄苷元灌胃用药;观察脑微血管病理改变,免疫组织化学法测定BMSCs移植后d7(早期)、d14(中期)和d28(后期)IgG和LN、tPA和PAI表达变化。结果模型组大鼠微血管残缺、破损,脑组织IgG和tPA表达增强,随再灌注时间延长呈增加趋势;LN和PAI表达减弱,其中PAI随再灌注时间延长呈减弱趋势。与模型组比较,大黄苷元组d7、移植组d14和d28、联合组各时间点大鼠微血管结构改善明显;大黄苷元组各时间点的IgG和tPA表达均减弱,LN增强,d14的PAI表达增强;移植组d14和d28的IgG和tPA表达减弱,LN增强;联合组各时间点IgG和d14的tPA表达减弱,d7的LN和各时间点PAI表达增强。联合组d7的微血管结构较移植组完整,其d28的tPA表达分别较大黄苷元和移植组降低,d14和d28的LN、d7和d28的PAI-1均较大黄苷元和移植组增强。结论脑缺血/再灌注损伤后微血管基底膜层连蛋白降解明显,BBB通透性随再灌注时间延长而增加;BMSCs移植后早期保护微血管受损的作用不明显,此后随移植时间的延长而增强;大黄苷元可使BMSCs移植早期的作用提前及中、后期作用增强,其作用机制可能与增强PAI-1表达以调节纤溶酶平衡,进而减轻微血管基底膜胶原降解有关。     

红景天苷对老龄大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的:观察红景天苷(salidroside,Sal)对老龄大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用并探讨其作用机制。方法:采用线栓法制备老龄大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,观察红景天苷对老龄大鼠局灶性脑缺血再灌注后神经功能障碍,脑水肿及脑梗死范围以及对脑缺血2h再灌注24h缺血脑组织能量物质ATP、葡萄糖无氧酵解产物以及体内自由基清除剂SOD、GSH和脂质过氧化产物MDA等生化物质的影响。结果:脑缺血2h再灌注24h腹腔注射Sal40,20,10mg.kg-1可明显减轻神经功能障碍(P<0.05,P<0.01),减轻脑水肿(P<0.05,P<0.01)及缩小脑梗死范围(P<0.05)。同时Sal40,20,10mg.kg-1组与缺血再灌注组相比,缺血脑组织内SOD活性和GSH活力明显增高(P<0.05,P<0.01),MDA含量显著降低(P<0.05,P<0.01),大鼠脑组织内ATP含量显著升高(P<0.05,P<0.01),脑组织内LA含量明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论:红景天苷对老龄大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤有良好的保护作用。其机制与其改善缺血脑组织能量代谢、降低自由基损伤有关。     

线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型的实验研究

目的:通过对线栓法制作的大鼠局灶性脑缺血再灌注模型的实验研究,探讨一种简便稳定的模型制作方法。方法:采用健康雄性Wistar大鼠随机分为假手术组(n=6)和缺血再灌注组(n=12),其中缺血再灌注组结扎颈总动脉(CCA)和颈外动脉(ECA),颈内动脉(ICA)和翼腭动脉不予分离,眼科剪在CCA远端上剪一小口插入线栓,通过调整线栓弧度方向来避免进入翼腭动脉,造成缺血,1 h后外拉栓线形成再灌注。通过神经功能缺损评分观察大鼠大体情况;2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色观察脑梗死体积;HE染色观察大鼠脑组织的病理改变。结果:术后大鼠神经功能缺损明显,TCC染色示脑梗死区,HE染色结果符合脑梗死病理过程。结论:该方法术式简便,手术时间短,缺血效果可靠,是一种理想的制作大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型的方法。     

二苯乙烯苷对慢性脑缺血大鼠学习记忆的影响

目的观察何首乌有效成分二苯乙烯苷(TSG)对慢性脑缺血大鼠学习记忆能力的影响,并探讨其可能机制。方法雄性SD大鼠双侧颈总动脉永久性结扎制备慢性脑缺血致痴呆模型。术前2周起,分别给TSG30,60及120mg·kg-1·d-1,ig,连续11周。术后8周时,分别用Morris水迷宫实验和避暗实验检测大鼠的空间学习记忆能力和被动回避学习记忆能力。术后9周时,采用生化方法检测海马乙酰胆碱酯酶(AChE)活性,免疫组化方法检测海马蛋白磷酸酶2A(PP-2A)和微管相关蛋白2(MAP-2)的表达。结果慢性脑缺血模型组大鼠空间和被动回避学习记忆能力明显降低,海马AChE活性显著升高,PP-2A和MAP-2表达明显减少。TSG给药10周可显著改善慢性脑缺血引起的学习记忆能力降低;给药11周明显抑制海马AChE活性增高,并增加PP-2A和MAP-2的表达。结论TSG可改善慢性脑缺血大鼠的学习记忆能力,其机制可能与抑制海马AChE活性,增加海马PP-2A和MAP-2的表达有关。     

Limb remote ischaemic postconditioning‐induced elevation of fibulin‐5 confers neuroprotection to rats with cerebral ischaemia/reperfusion injury: Activation of the AKT pathway

Limb remote ischaemic postconditioning (RIPostC) is an effective and well‐acknowledged treatment for brain ischaemia injury. The present study aimed to evaluate the role of fibulin‐5 in the neuroprotection of RIPostC against cerebral ischaemia/reperfusion (I/R) injury in rats. The middle cerebral artery occlusion (MCAO) model was established in rats and then RIPostC was carried out by three cycles of 10 minutes occlusion/10 minutes release of the bilateral femoral artery at the beginning of the reperfusion. To downregulate the fibulin‐5 level, fibulin‐5 siRNA was injected into the lateral ventricle 24 hours before MCAO. According to our present study, RIPostC attenuated cerebral I/R injury by decreasing infarct volume, improving neurobehavioral score and suppressing blood brain barrier (BBB) leakage. Moreover, the mRNA and protein levels of fibulin‐5 were upregulated by RIPostC at 24 hours and 72 hours after reperfusion. Downregulation of fibulin‐5 attenuated the neuroprotection of RIPostC. Finally, the result showed that fibulin‐5 was upregulated by RIPostC via activation of the PI3K/AKT pathway. Taken together, these results provide evidence that upregulation of fibulin‐5 is involved in the beneficial effect of RIPostC against cerebral I/R injury.