内皮素A受体拮抗剂BQ123对腺嘌呤诱导慢性肾贫血模型大鼠的肾保护作用及机制研究

目的研究内皮素A受体拮抗剂BQ123对腺嘌呤诱导慢性肾贫血模型大鼠肾功能的保护作用并探讨其作用机制。方法采用腺嘌呤诱导法制备慢性肾贫血模型大鼠,随机分为空白对照组、模型组、西他生坦组(50 mg/kg)、BQ123低(5μg/kg)、中(25μg/kg)、高(75μg/kg)剂量组,模型组及空白对照组给予等量生理盐水灌胃。连续用药10周,检测各组大鼠肾功能,苏木素-伊红(HE)染色观察肾组织病理学变化,透射电子显微镜观察肾组织中细胞自噬小体数量,蛋白印迹(WB)法检测肾组织中微管相关蛋白1轻链3(LC3-Ⅱ)、自噬相关蛋白Beclin1、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Akt)、雷帕霉素(mTOR)、p-Akt、p-mTOR蛋白表达情况。结果与空白对照组比较,模型组大鼠肾组织出现水肿、纤维化、萎缩等病理损伤,组织病理评分明显升高,肾功能显著下降,血液中血清肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)水平显著升高,自噬小体数目明显减少,LC3-Ⅱ、Beclin蛋白表达显著下调,p-Akt、p-mTOR蛋白表达明显上调;与模型组比较,BQ123低、中、高剂量组大鼠肾组织病理变化均显著改善,组织病理评分明显降低,肾功能显著恢复,自噬小体数目显著增多,LC3-Ⅱ、Beclin蛋白表达显著上调,p-Akt、p-mTOR蛋白表达显著下调,均呈剂量依赖效应。结论 BQ123可能通过抑制Akt/mTOR信号通路激活促进自噬小体的形成,发挥对腺嘌呤诱导的慢性肾贫血大鼠肾功能的保护作用。     

右美托咪定对七氟醚麻醉下老年大鼠海马神经元自噬的影响

目的探讨右美托咪定(dexmedetomidine, DEX)对七氟醚麻醉下老年大鼠海马神经元自噬的影响。方法 60只雄性SD大鼠随机分为对照组、七氟醚组、DEX预处理组,每组20只,对照组大鼠吸入体积分数60%O_2 6 h,七氟醚组大鼠吸入体积分数3.4%～3.6%七氟醚6 h,DEX预处理组大鼠在吸入七氟醚前1 h腹腔注射15μg/kg DEX。分别于麻醉前(T_1)、麻醉后12 h(T_2)、24 h(T_3)、48 h(T_4)每组各处死大鼠5只并取出其海马,HE染色进行组织病理学观察,采用荧光双标法检测LC-3与NeuN、mTOR共定位表达。采用免疫组织化学法检测海马组织自噬蛋白Beclin-1相对表达量,采用Western blot法检测海马组织自噬蛋白LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ及p-Akt、p-mTOR通路蛋白相对表达量。于麻醉后48 h处死大鼠前进行神经功能评分,记录各组Morris水迷宫实验结果。结果七氟醚组海马组织神经细胞胞质染色变浅、细胞核染色增深,DEX预处理组神经细胞形态改善和胞核染色较七氟醚组明显减轻;七氟醚组、DEX预处理组大鼠神经运动功能评分[(7.69±2.79)、(13.38±2.36)分]低于对照组[(22.15±1.47)分](P0.05),七氟醚组低于DEX预处理组(P0.05);七氟醚组、DEX预处理组、对照组大鼠逃避潜伏期依次缩短(P0.05),平台象限停留时间、穿越平台象限次数依次增加(P0.05);T_1～T_4时,对照组大鼠海马组织LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ、Beclin-1及p-Akt、p-mTOR蛋白相对表达量比较差异均无统计学意义(P0.05);T_2～T_4时,七氟醚组、DEX预处理组海马组织LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ及Beclin-1蛋白相对表达量较T_1时增高(P0.05),p-Akt、p-mTOR蛋白相对表达量较T_1时降低(P0.05),DEX预处理组LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ、Beclin蛋白相对表达量低于七氟醚组(P0.05),p-Akt、p-mTOR蛋白相对表达量高于七氟醚组(P0.05)。结论右美托咪定可明显改善七氟醚麻醉下老年大鼠的神经运动和认知功能,可能与激活PI3K/Akt/mTOR通路、抑制海马神经元自噬,从而减轻脑损伤有关。     

电针对缺氧缺血性脑损伤大鼠海马神经元自噬及IGF-1/PI3K/Akt通路的影响

目的 探讨电针对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠海马神经元自噬及胰岛素样生长因子1(IGF-1)/磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)通路的影响。方法 将108只新生大鼠随机分为假手术组、模型组、IGF-1组(0.2 mg/kg)、电针组、电针联合LY294002组(电针+PI3K抑制剂0.3 mg/kg),每组18只。采用左颈总动脉结扎和低氧处理2 h的方法构建新生大鼠HIBD模型(造模成功率为80%)。各组大鼠在手术清醒后和电针治疗结束后进行神经功能缺陷评分;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测脑组织IGF-1的含量;苏木精-伊红(HE)染色观察脑组织病理学变化;透射电镜观察细胞自噬情况;免疫荧光双标法检测自噬标志物与神经元特异性核蛋白(NeuN)的共定位表达;Western blot法检测海马组织PI3K/Akt通路、自噬相关蛋白的表达[PI3K、磷酸化PI3K(p-PI3K)、Akt、磷酸化p-Akt(p-Akt)、Beclin-1、微管相关蛋白轻链3Ⅱ(LC3-Ⅱ)、微管相关蛋白轻链3Ⅰ(LC3-Ⅰ)]。结果 与假手术组相比,HIBD模型组大鼠海马中神经元损伤...     

白藜芦醇通过促进自噬减轻糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤的实验研究

目的:探讨白藜芦醇减轻糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护机制及其对心肌细胞自噬的影响。方法:用链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)诱导建立糖尿病大鼠模型,选取35只糖尿病造模成功大鼠,随机分为假手术组、白藜芦醇未手术组、缺血再灌注损伤模型组、白藜芦醇治疗组、白藜芦醇+胰岛素联合治疗组,每组各7只。通过结扎-放松左冠状动脉制备缺血再灌注损伤模型。通过亚甲蓝染色观察心肌梗死面积变化;在透射电镜下观察自噬泡;采用蛋白质印迹(Western blotting)法检测微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)Ⅰ和Ⅱ、自噬相关基因5(autophagy related gene 5,Atg5)、Beclin-1的表达水平及腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)和雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)的表达及磷酸化水平。结果:白藜芦醇治疗组与白藜芦醇+胰岛素联合治疗组心肌梗死面积显著小于缺血再灌注损伤模型组(P0.05)。电镜结果显示,白藜芦醇治疗与白藜芦醇+胰岛素联合治疗可促进糖尿病大鼠缺血再灌注损伤心肌细胞的自噬,改善心肌细胞结构。缺血再灌注损伤模型组大鼠心肌细胞中LC3-Ⅱ、Atg5、Beclin-1表达水平较假手术组显著降低(P0.05),而LC3-Ⅰ表达水平差异无统计学意义(P0.05);白藜芦醇治疗组及白藜芦醇+胰岛素联合治疗组Atg5、Beclin-1表达水平均显著高于缺血再灌注损伤模型组,且白藜芦醇+胰岛素联合治疗组Beclin-1表达水平高于白藜芦醇治疗组(P0.05);各组之间mTOR、AMPK表达水平差异无统计学意义(P0.05),但白藜芦醇治疗组及白藜芦醇+胰岛素联合治疗组AMPK磷酸化水平显著高于缺血再灌注损伤模型组,而mTOR磷酸化水平则显著低于缺血再灌注损伤模型组(P0.05)。结论:白藜芦醇可能通过激活AMPK、抑制mTOR通路,上调LC3-Ⅱ、Atg5、Beclin-1的表达,促进自噬,抑制缺血再灌注损伤,减少心肌梗死面积,从而保护糖尿病大鼠心肌细胞。     

耐力运动对老年小鼠心肌T-钙粘蛋白的影响及其效应研究

目的 观察耐力运动对老年小鼠心肌组织T-钙粘蛋白及其配体脂联素和下游相关分子表达的影响,探讨T-钙粘蛋白的作用。 方法 选取30只17月龄C57雄性小鼠,采用随机数字表法将其分为老年对照组及老年运动组,每组15只;另取15只2月龄C57雄性小鼠纳入为青年对照组。老年运动组小鼠进行12周耐力运动,老年对照组及青年对照组小鼠均正常饲养、无特殊干预。于老年运动组小鼠最后一次运动结束24 h后处死3组小鼠。采用免疫印迹法检测各组小鼠心肌组织T-钙粘蛋白及其配体脂联素表达、腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK）磷酸化水平、凋亡及自噬相关信号蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)、Beclin-1等表达;采用免疫组化法观察各组小鼠心肌T-钙粘蛋白、脂联素及p-mTOR细胞定位和阳性表达。 结果 T-钙粘蛋白定位于心肌细胞胞膜及血管内皮处,脂联素定位于心肌细胞胞膜、胞浆及血管内皮处,p-mTOR定位于心肌细胞胞浆处。与青年对照组比较,老年对照组心肌T-钙粘蛋白、脂联素、AMPK活化水平、抑凋亡蛋白bcl-2、促自噬蛋白Beclin-1表达显著下调（P<0.05）,促凋亡蛋白bax、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-9(Caspase-9)表达及自噬相关蛋白mTOR活化水平均显著上调（P<0.05）;与老年对照组比较,老年运动组心肌组织T-钙粘蛋白及配体脂联素、AMPK活化水平、bcl-2、Beclin-1蛋白表达均显著上调（P<0.05),bax、Caspase-9蛋白表达、mTOR磷酸化水平均显著下调（P<0.05）。 结论 耐力运动可增强老年小鼠心肌T-钙粘蛋白表达,促进脂联素与心肌组织结合,刺激AMPK活化,从而发挥对老龄心肌组织的保护作用。     

竹节香附素A通过PI3K/Akt/mTOR信号通路对人宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响

目的 观察竹节香附素A（RDA）对人宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法 分别使用0、5、10、20及40μmol/L的RDA干预HeLa细胞48 h,CCK-8实验测定细胞增殖率,计算半抑制浓度（IC₅₀）,确定药物浓度。流式细胞术检测细胞凋亡,蛋白免疫印迹法检测细胞中B细胞淋巴瘤2家族蛋白（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、活化胱天蛋白酶-3（Cleaved-caspase-3）、磷酸化磷脂酰肌醇3激酶（p-PI3K）、磷酸化蛋白激酶B（p-Akt）、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（p-mTOR）的蛋白表达水平。将HeLa细胞分为4组,即空白对照组、胰岛素样生长因子-1（IGF-1）组、RDA组和联合用药组,检测及比较各组细胞增殖率、凋亡率和p-PI3K、p-Akt和p-mTOR蛋白相对表达量。结果 随着RDA浓度的增加,HeLa细胞的增殖率降低、凋亡率升高（P均< 0.05）,Bax、Cleaved-caspase-3蛋白相对表达量升高（P均< 0.05）,Bcl-2、p-PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白相对表达量降低（P均< 0.05）;IGF-1激活PI3K/Akt/mTOR信号通路后,RDA仍然能抑制HeLa细胞增殖（P均< 0.05）,降低p-PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白相对表达量（P均< 0.05）。结论 RDA可能通过抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路对人宫颈癌HeLa细胞产生抑制增殖与促进凋亡的效果。     

伊班膦酸钠对膝骨关节炎大鼠自噬相关蛋白LC3 Ⅱ的影响

目的:研究伊班膦酸钠对膝骨关节炎大鼠自噬相关蛋白LC3 Ⅱ的表达变化,初步探讨软骨组织中自噬相关蛋白水平与骨关节炎(osteoarthritis, OA)发生发展的关系。方法:将30只3月龄雌性SD大鼠随机分为3组,每组10只:假手术组(Sham)、生理盐水治疗组(ACLT+NS)和伊班膦酸钠治疗组(ACLT+IB)。ACLT+NS组、ACLT+IB组行膝关节前交叉韧带切断术(ACLT)建立膝骨关节炎模型。术后1周ACLT+IB组予以伊班膦酸钠干预。检测指标:番红染色、Mankin's评分;关节软骨下骨形态学检测;大鼠血I型胶原C端肽(CTX-I)、Ⅱ型胶原C端肽(CTX-Ⅱ)及IL-1、IL-6水平;基质金属蛋白酶-13(MMP-13)及自噬相关蛋白LC3 Ⅱ表达。结果:番红染色ACLT+NS组软骨结构破坏明显,Mankin's评分显著高于Sham组和ACLT+IB组(P <0.001); ACLT+IB组相对骨体积(BV/TV)、骨小梁数量(Tb.N)、骨小梁厚度(Tb.Th)等均明显高于ACLT+NS组(P<0.001),骨小梁分离度(Tb.Sp)则显著低于ACLT+NS (P <0.001); ACLT+NS组血清CTX-I、CTX-Ⅱ、IL-1、IL-6水平高于Sham组和ACLT+IB组(P <0.05);相比较于Sham组和ACLT+IB组,ACLT+NS组的MMP-13表达水平增高(P <0.01),LC3 Ⅱ表达降低(P <0.01)。结论:伊班膦酸钠能够下调MMP-13蛋白表达,并减少炎性因子IL-1和IL-6分泌,进而保护关节软骨,改善软骨下骨小梁微观结构,可能与自噬相关蛋白LC3 Ⅱ表达增高有关。     

氙气后处理对脊髓缺血再灌注损伤的效果：Akt信号通路和自噬机制

目的 探讨氙气后处理对大鼠脊髓缺血再灌注损伤(SCIRI)后自噬的影响及其与苏氨酸蛋白激酶(Akt)信号通路的关系。方法 30只健康雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组(Sham组)、脊髓缺血再灌注组(I/R组)和氙气后处理组(Xe组),每组10只。后两组通过夹闭腹主动脉85 min,再灌注4 h建立大鼠SCIRI模型。于再灌注1 h时,Xe组经呼吸机吸入50%氙气+50%氧气混合气1 h。其余两组吸入50%氮气+50%氧气混合气1 h。再灌注4 h时,对大鼠行BBB评分和斜板试验后,收集L_3-5脊髓,Nissl染色计数正常神经元数量,Western blotting检测脊髓组织中Akt、磷酸化Akt(p-Akt)、自噬蛋白[p62、Beclin 1、微管相关蛋白1轻链3 (LC3)Ⅰ和LC3Ⅱ]的表达,逆转录实时定量聚合酶链反应检测脊髓组织中p62、Beclin 1和LC3Ⅱ mRNA的表达。结果 与Sham组相比,I/R组后肢BBB评分明显降低(P <0.01),斜板试验最大倾斜度明显减小(P <0.01),正常神经元数量明显减少(...     

栀子苷预处理对大鼠心肌缺血再灌注后PI3K/Akt信号通路的研究

目的探索栀子苷(GEN)对大鼠心肌缺血再灌注(I/R)后心肌细胞氧化应激水平及心肌凋亡的影响极其与PI3K/Akt信号通路的关系。方法60只SD大鼠随机分为3组:缺血再灌注组(I/R),栀子苷预处理+缺血再灌注组(GEN+I/R),栀子苷+缺血再灌注组+PI3K/Akt信号通路抑制剂(LY294002)组(GEN+I/R+LY),GEN+I/R组在I/R造模前给予50 mg/kg GEN预处理,GEN+I/R+LY组在GEN预处理前给予0.3 mg/kg LY294002。ELISA法检测大鼠血清乳酸脱氢酶(LDH)、心肌组织丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)以及钙泵(Ca~(2+)-ATPase)水平;Western blot检测心肌组织p-e NOS,p-Akt,Akt以及Bcl-2、Bax蛋白表达;免疫组织化学染色检测p-e NOS,p-Akt蛋白表达。结果与I/R组比较,GEN+I/R组LDH、MDA含量显著降低,SOD、Ca~(2+)-ATPase显著升高(P0.05);与GEN+I/R组比较,GEN+I/R+LY组LDH、MDA含量显著升高,SOD、Ca~(2+)-ATPase显著降低(P0.05)。并且,与I/R组比较,GEN+I/R组p-eNOS、p-Akt、Akt、Bcl-2表达量以及p-e NOS,p-Akt免疫荧光强度显著提高(P0.05),Bax蛋白表达显著降低(P0.05);与GEN+I/R组比较,GEN+I/R+LY组p-eNOS、p-Akt、Akt、Bcl-2表达量以及pe NOS、p-Akt免疫荧光强度显著降低,Bax蛋白表达量显著升高(P0.05)。结论栀子苷可通过激活PI3K/Akt信号通路抑制心肌缺血再灌注后氧化应激及细胞凋亡从而发挥保护作用。     

神经肌肉电刺激对慢性低氧高二氧化碳诱导骨骼肌萎缩及PTEN/Akt/FoxO1通路的影响

目的 观察慢性低氧高二氧化碳模型大鼠骨骼肌中PTEN/Akt/FoxO1信号通路变化及神经肌肉电刺激（NMES）对该通路的影响,探讨该通路在慢性低氧高二氧化碳诱发骨骼肌萎缩中的作用及NMES治疗肌萎缩的可能机制。 方法 采用随机数字表法将32只雄性SD大鼠分为对照组、模型组、假刺激组及电刺激组,每组8只大鼠。将模型组、假刺激组及电刺激组大鼠置于常压低氧高二氧化碳实验舱内,维持舱内O2浓度为 9%~11%,CO2浓度为5.5%~6.5%,对照组大鼠则置于对照舱内吸入常压空气,其他条件相同,每天造模8 h,每周造模7 d,持续4周。于第3,4周每日舱内造模结束后,将电刺激组大鼠固定后予以30 min、100 Hz电刺激双后肢治疗,假刺激组大鼠仅固定30 min,未给予电刺激干预。于造模4周后取各组大鼠腓肠肌组织,经苏木素-伊红染色观察并计算各组大鼠腓肠肌纤维横截面积,采用免疫组织化学法和免疫印迹法检测各组大鼠腓肠肌中PTEN、p-Akt、Akt及FoxO1蛋白表达。 结果 与对照组比较,模型组肌纤维横截面积明显减小（P<0.05）,Akt和p-Akt蛋白表达明显减少（P<0.05）,PTEN和FoxO1蛋白表达明显增多（P<0.05）。与模型组比较,电刺激组肌纤维横截面积明显增大（P<0.05）,Akt和p-Akt蛋白表达明显增多（P<0.05）,PTEN和FoxO1蛋白表达明显减少（P<0.05）。 结论 NMES能通过调节PTEN/Akt/FoxO1信号通路诱导骨骼肌肌纤维蛋白合成,从而改善慢性低氧高二氧化碳模型大鼠骨骼肌萎缩。     

不同吸氧浓度对新生鼠视网膜血管发育和血管内皮生长因子表达的影响

背景：吸氧在早产儿视网膜新生血管中起重要作用,但其具体吸氧范围以及作用机制仍不明确。目的：观察不同氧环境在新生鼠视网膜病的作用。方法：将新生鼠40只分为空气组、波动1,2,3组,各10只,分别以正常空气、浓度50%、20%变化氧气、40%、10%变化氧气、50%、10%变化氧气环境饲养。饲养14d后,视网膜铺片经ADP酶染色和视网膜切片经常规苏木精-伊红染色观察视网膜血管的增生情况。Western blot检测视网膜血管内皮生长因子的表达。结果与结论：视网膜铺片波动2,3组新生血管钟点数、突破视网膜内界膜的血管内皮细胞数和血管内皮生长因子表达水平明显高于空气组和波动1组,空气组和波动组1组未见明显的视网膜新生血管。证实了反复血氧浓度波动可导致新生鼠视网膜新生血管增生性病变,吸入氧浓度差的波动与病变程度有关;低氧比高氧对发生视网膜病变可能更重要,血管内皮生长因子在视网膜新生血管形成中起着重要作用,促进视网膜新生血管形成。     

Effect of non-nutritive sucking on pain during the examination of retinopathy of prematurity

BackgroundThe eye examination of Retinopathy of Prematurity is a painful procedure for premature infants. Non-nutritive sucking is an effective non-pharmacologic method for reducing pain levels in premature infants utilized in most neonatal intensive care units across the globe.AimThis study investigated the effect of non-nutritive sucking on infants’ pain levels during retinopathy of prematurity eye examinations.MethodsThe study is a randomized controlled trial consisting of 60 premature infants (30 randomized to the control group and 30 to the intervention group) undergoing an eye examination related to retinopathy of prematurity. Premature infants in the control group did not receive NNS. Premature infants in the intervention group received non-nutritive sucking with a gloved-finger. The evaluation of pain levels in premature infants used the Premature Infant Pain Profile for 60 s before the eye examination, 30 s during the eye examination, and 30 s at the conclusion of the ROP eye examination. The clinical trial registration number of the study is NCT04463927.ResultsA statistically significant difference was found between the control and intervention groups of premature infants in terms of pain levels during and after the eye examinations for retinopathy of prematurity (p < .001). Pain scores were significantly lower in the intervention group during and after the retinopathy of prematurity eye examinations compared to the control group.     

Foxp3磷酸化通过调控调节性T细胞功能对类风湿关节炎大鼠TNF-α抑制状态影响的分子机制

目的探究Foxp3磷酸化通过调节性T细胞功能改善类风湿关节炎大鼠肿瘤坏死因子-α(TNF-α)抑制状态的分子机制。方法建立类风湿关节炎大鼠模型,分组为正常组(无特殊处理)、模型组(类风湿关节炎模型)和实验组(类风湿关节炎模型+尾静脉注射TNF-α阻滞剂进行治疗)。酶联免疫吸附(ELISA)检测炎症因子白介素10(IL-10)、白介素17(IL-17)和转化生长因子-β(TGF-β)水平;流式细胞术检测T细胞阳性率;Western Blot检测TNF-α表达以及试剂盒检测Foxp3磷酸酶活性。结果与正常组相比,模型组IL-10、TGF-β水平显著降低,IL-17水平显著升高(P<0.05);与模型组相比,实验组IL-10、TGF-β的水平显著升高,IL-17的水平显著降低(P<0.05)。与正常组相比,模型组CD4^+CD25^+T细胞和CD4^+CD25^+Foxp3^+T细胞检测阳性率均显著降低(P<0.05);与模型组相比,实验组以上指标检测比率均显著增加(P<0.05);与正常组相比,模型组的TNF-α蛋白相对表达量显著增加(P<0.05);与模型组相比,实验组TNF-α蛋白的相对表达量显著降低(P<0.05)。与正常组相比,模型组的Foxp3磷酸酶活性显著降低(P<0.05);与模型组相比,实验组Foxp3磷酸酶活性显著升高(P<0.05)。结论通过尾静脉注射TNF-α阻滞剂治疗后,大鼠炎症反应水平、TNF-α蛋白表达及FOXP^3磷酸酶活性均降低,机制可能是Foxp3磷酸化通过调控调节性T细胞数量及炎症因子的变化参与对类风湿关节炎大鼠抑制状态,从而一定程度缓解类风湿关节炎不良症状。     

不同吸氧浓度对新生鼠视网膜血管发育和血管内皮生长因子表达的影响

背景:吸氧在早产儿视网膜新生血管中起重要作用,但其具体吸氧范围以及作用机制仍不明确。目的:观察不同氧环境在新生鼠视网膜病的作用。方法:将新生鼠40只分为空气组、波动1,2,3组,各10只,分别以正常空气、浓度50%、20%变化氧气、40%、10%变化氧气、50%、10%变化氧气环境饲养。饲养14d后,视网膜铺片经ADP酶染色和视网膜切片经常规苏木精-伊红染色观察视网膜血管的增生情况。Western blot检测视网膜血管内皮生长因子的表达。结果与结论:视网膜铺片波动2,3组新生血管钟点数、突破视网膜内界膜的血管内皮细胞数和血管内皮生长因子表达水平明显高于空气组和波动1组,空气组和波动组1组未见明显的视网膜新生血管。证实了反复血氧浓度波动可导致新生鼠视网膜新生血管增生性病变,吸入氧浓度差的波动与病变程度有关;低氧比高氧对发生视网膜病变可能更重要,血管内皮生长因子在视网膜新生血管形成中起着重要作用,促进视网膜新生血管形成。     

大黄通过改善线粒体自噬缓解急性胰腺炎大鼠内质网应激和脂质代谢障碍的机制

目的探讨大黄通过改善线粒体自噬缓解急性胰腺炎大鼠内质网应激和脂质代谢障碍的机制。方法选取100只SD大鼠,按随机数字表法分为空白对照组、模型组、大黄低(0.5 mL/kg)、中(1.0 mL/kg)、高(2.0 mL/kg)剂量组,每组20只,除空白对照组其余各组均构建急性胰腺炎模型。蛋白质印迹法检测线粒体自噬相关蛋白[微管相关蛋白1轻链3-Ⅰ(LC3-Ⅰ)、微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)和自噬相关蛋白5(ATG5)]、内质网应激相关蛋白[磷酸化α亚基的真核起始因子2(p-eIF2α)、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)以及转录因子C/EBP同源蛋白(CHOP)]的表达。全自动生化分析仪测定各组大鼠总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)水平以及炎性因子白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。结果与空白对照组比较,模型组大鼠线粒体自噬相关蛋白(LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ和ATG5)和内质网应激相关蛋白(p-eIF2α、GRP78、CHOP)相对表达量显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,大黄低、中、高剂量组大鼠线粒体自噬相关蛋白和内质网应激相关蛋白相对表达量均显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与空白对照组比较,模型组大鼠TC、TG、LDL-C、MDA、IL-6、IL-1β、TNF-α水平均显著升高,HDL-C、SOD和GSH水平显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,大黄低、中、高剂量组大鼠TC、TG、LDL-C、MDA、IL-6、IL-1β、TNF-α水平显著降低,HDL-C、SOD和GSH水平显著增加,差异均有统计学意义(P<0.05),且大黄的作用呈剂量依赖性。结论大黄能够通过改善线粒体自噬来缓解急性胰腺炎大鼠内质网应激和脂质代谢障碍水平,且2.0 mL/kg的大黄效果最佳。     

孕中期血β-人绒毛膜促性腺激素水平与不良妊娠结局的关系

目的探讨孕中期血绒毛膜促性腺激素(β-HCG)水平异常与子痫前期、胎膜早破、早产等不良妊娠结局之间的关系。方法采用微粒子化学发光免疫技术测定本院217例孕16～22周孕妇血β-HCG水平,追踪观察其妊娠结局,分析β-HCG水平与妊娠结局的关系。结果 217例孕妇中出现子痫前期19例(8.8%),早产18例(8.3%),胎膜早破7例(3.2%),正常孕产妇173例(79.7%);新生儿中有低体重儿2例(0.9%),胎儿窘迫1例(0.5%),死胎1例(0.5%)、新生儿死亡1例(0.5%)。子痫前期组、早产组、胎膜早破组血β-HCG水平与正常孕妇血β-HCG水平比较差异具有统计学意义(P0.05或P0.01)。血β-HCG水平大于正常孕妇的2倍中位数者,子痫前期孕妇中有5例(26.3%),早产孕妇中有3例(16.7%),胎膜早破孕妇中有4例(57.1%)。结论孕中期血β-HCG水平的异常改变与不良妊娠结局之间有着密切的关联,可作为预测不良妊娠结局的指标。尤其β-HCG水平大于正常孕妇的2倍中位数时,妊娠风险大大增加。但β-HCG水平异常的原因及导致不良妊娠结局的发病机制有待于进一步研究。     

孕中晚期超声胎膜厚度联合血清IL-6、C反应蛋白预测早产发生的临床价值

  目的  探讨孕中晚期超声胎膜厚度检测联合血清白介素-6(IL-6)、C反应蛋白(CRP)预测早产发生的临床价值。  方法  收集2019年1月1日~2020年12月31日于我院建档进行产检和分娩的599例孕妇作为研究对象,根据分娩时间将孕妇分为早产组(n=86)和足月组(n=513),分析两组孕妇孕中、晚期血清IL-6、CRP及超声胎膜厚度,采用ROC曲线分析上述3项指标对孕妇早产的预测价值,并比较两组孕妇通过各指标诊断的阳性率。  结果  在孕23~25周和孕32~34周,早产组孕妇血清IL-6、CRP水平高于足月组(P < 0.05),胎膜厚度低于足月组(P < 0.05);ROC曲线分析结果显示,超声胎膜厚度联合血清IL-6、CRP预测早产的ROC曲线下面积高于3项指标单独预测的ROC曲线下面积(P < 0.05);且联合预测的准确度、敏感度和特异性均较高。早产组孕妇血清IL-6、CRP和胎膜厚度单项诊断和联合诊断早产的阳性率均高于足月组(P < 0.05)。  结论  与足月生产孕妇比较,早产孕妇中晚期的血清IL-6、CRP水平明显更高,胎膜厚度更高,联合检测血清IL-6、CRP和胎膜厚度对于预测孕妇早产具有较高的应用价值。      

c-abl is required for the development of hyperoxia-induced retinopathy.

The requirement for the nonreceptor tyrosine kinase c-abl in the pathogenesis of retinopathy of prematurity (ROP) was examined using the mouse model for ROP and c-abl-deficient mice. Hyperoxia-induced retinal neovascularization was observed in wild-type and heterozygous mice but animals that were homozygous null for c-abl did not develop a vasoproliferative retinopathy in response to hyperoxia. Two gene products, endothelin-1 (ET-1) and vascular endothelial growth factor (VEGF), have been implicated in the pathogenesis of ROP. The mRNA expression of ET-1 and VEGF was assessed in mice maintained in normoxia and in hyperoxia-exposed mice. ET-1 mRNA levels were unchanged in wild-type mice throughout the hyperoxia treatment, suggesting that ET-1 mRNA expression is not regulated by the increase in inspired oxygen. In wild-type mice maintained in room air, VEGF mRNA levels rose threefold from postnatal day 6 (P6) to P17. When wild-type mice were treated with the hyperoxia regimen, a fivefold decrease in VEGF mRNA expression was observed from P7 to P16. However, retinal VEGF expression in hyperoxia-treated homozygous null mice did not decrease and remained at control levels. These data suggest that c-abl is required for the hyperoxia-induced retinal neovascularization and hyperoxia-induced decrease in VEGF mRNA levels.     

芬太尼联合纳洛酮对大鼠疼痛模型镇痛效果及相关机制研究

目的分析芬太尼联合纳洛酮对大鼠疼痛模型镇痛效果及相关机制研究。方法将40只大鼠随机数字表法分成5组:生理盐水组(NS组)、疼痛模型组(CCI组)、芬太尼组(FN组)、纳洛酮组(NL组)、芬太尼+纳洛酮组(FN+NL组),每组8只。通过结扎坐骨神经制备大鼠坐骨神经慢性压迫(CCI)模型。FN组腹腔注射0.5μg/kg芬太尼,NL组腹腔注射10 ng/kg纳洛酮,FN+NL组腹腔注射0.5μg/kg芬太尼+10 ng/kg纳洛酮,1次/d,连续给药7 d。NS组和CCI组给予等体积生理盐水。于规定时间对大鼠体重、机械缩足反应阈值(MWT)、热缩足反应潜伏期(TWL)、内源性阿片样物质、炎性因子、黏附分子CD11b/c、胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)的含量进行检测。结果与NS组相比,CCI组给药1、3、7 d后大鼠体重、MWT、TWL均显著降低,术后给药30 min、6 h和24 h后的内啡肽(β-EP)、强啡肽(DynA1-13)、亮氨酸脑啡肽(L-EK)以及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、CD11b/c和GFAP表达量均显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与CCI组相比,FN组、NL组、FN+NL组大鼠体重、MWT、TWL均显著升高,β-EP、TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-10、CD11b/c和GFAP表达量均显著降低,DynA1-13、L-EK显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与FN组、NL组相比,FN+NL组大鼠体重、MWT、TWL均显著升高,β-EP、TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-10、CD11b/c和GFAP表达量均显著降低,DynA1-13、L-EK显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论纳洛酮能够增强芬太尼的镇痛效果,其机制可能是纳洛酮与芬太尼联合使用,上调了大鼠体内IL-10、内源性阿片样物质的表达,下调了其他炎性因子及CD11b/c、GFAP的表达。