左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症大鼠海马神经元微小兴奋性突触后电流的影响

目的观察左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症大鼠海马神经元微小兴奋性突触后电流(mEPSC)频率及幅度的影响,探讨其对海马神经元保护作用的可能机制。方法选用17~19 d胚胎大鼠离体培养海马神经元,神经元特异性烯醇化酶(NSE)免疫细胞化学染色进行细胞鉴定。细胞随机分为空白对照组、抑郁组、糖尿病组、糖尿病并发抑郁症组、空白血清组、左归降糖解郁方组和阳性药组,培养10 d后加入皮质酮(50μmol/L)和/或高糖(15 mmol/L)建立细胞模型,给予药物血清干预18 h,采用全细胞膜片钳记录神经元mEPSC,比较各组神经元mEPSC频率和电流幅度。结果经NSE免疫细胞化学鉴定,培养7 d后神经元纯度达95%以上。与空白对照组比较,抑郁组、糖尿病组和糖尿病并发抑郁症组大鼠海马神经元mEPSC的频率和幅度均显著上升(P0.01);与糖尿病并发抑郁症组比较,左归降糖解郁方组和阳性药组大鼠海马神经元mEPSC的频率和幅度均显著下降(P0.01)。结论左归降糖解郁方可降低糖尿病并发抑郁症大鼠海马神经元mEPSC的频率和幅度,对海马神经元有保护作用。     

六味地黄汤含药血清对海马神经元突触活动的影响

目的：研究六味地黄汤益智作用的机理。方法：应用血清药理学和电生理方法，观察六味地黄汤含药血清对原代培养大鼠海马神经元自发突触活动的影响。结果：含药血清作用48h可明显增加海马神经元自发动作电流(spontaneous action cur-rent,sAC)和微小兴奋性突触后电流(miniature excitatory post aynaptic currenl,mEPSC)的产生频率，但并不影响mEPSC的幅度。结论：六味地黄汤可作用于突触前位点对海马神经元突触活动产生调节作用，该作用可能是其调节海马神经元的兴奋性进而发挥益智作用的机制之一。     

芍药苷对皮质酮损伤大鼠皮层神经元的预防性保护作用

目的:考察芍药苷对皮质酮损伤的大鼠皮层神经元的预防性保护作用,为抗抑郁中药新药研发提供实验基础.方法:体外培养16 d胎鼠皮层神经元,于原代第7天加入各浓度(0.5,2,10μmol·L~(-1))芍药苷预处理30 min后,加入皮质酮(200μmol·L~(-1))损伤,采用MTT法检测芍药苷对神经元活力的影响,采用DAPI染色考察芍药苷对神经元凋亡形态的影响,采用Annexin V-FITC/PI细胞凋亡试剂盒检测芍药苷对神经元凋亡的影响.结果:与模型组比较,各剂量组(0.5,2,10 μmol·L~(-1))芍药苷均可显著提高神经元的活力(P<0.05),2,10 μmol·L~(-1)芍药苷可以显著降低神经元的凋亡率(P<0.05).结论:芍药苷对皮质酮损伤的大鼠皮层神经元损伤具有预防性保护作用.     

黄芪总苷对大鼠神经元缺氧/复氧损伤的影响

目的 探讨黄芪总苷（astragalosides, AST）对大鼠神经元缺氧/复氧损伤的影响。 方法 建立原代培养的大鼠海马神经元的缺氧/复氧模型。采用四唑蓝（MTT）法和乳酸脱氢酶（LDH）释放法检测细胞活力;检测细胞上清液中丙二醛（MDA）和一氧化氮（NO）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性;Hoechst染色和AnnexinV/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡;采用激光共聚焦显微镜和Ca2+荧光探针Fluo-3/AM观察细胞内游离钙[Ca2+]i。 结果 黄芪总苷可以提高缺氧/复氧后神经元的活力,降低细胞上清液中MDA和NO含量,提高SOD活性,降低细胞凋亡率,减轻神经元内的钙超载。 结论 黄芪总苷对缺氧/复氧损伤的神经元具有保护作用,其机制可能与抗氧化和减轻钙超载有关。     

芍药苷预处理对皮质酮损伤皮层神经元保护作用机制研究

目的:采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测芍药苷预处理对皮质酮损伤的大鼠皮层神经元凋亡相关基因以及营养因子BDNF mRNA表达的影响,初步阐明芍药苷对皮质酮损伤神经元的保护机制。方法:体外培养胎鼠皮层神经元,于原代第7天加入芍药苷低、中、高浓度(0.5,2,10μmol.L-1)预处理30 min后,加入皮质酮(200μmol.L-1)损伤,采用RT-PCR检测芍药苷预处理对神经元凋亡相关基因Bcl-2,Bax,Caspase-3以及营养因子BDNF mRNA表达的影响。结果:与模型组比较,芍药苷预处理组(2,10μmol.L-1)可显著下调Bax,Caspase-3 mRNA的表达,并显著上调Bcl-2和BDNF mRNA的表达(P0.05)。结论:芍药苷预处理对皮质酮损伤的大鼠皮层神经元的保护作用与芍药苷调控神经元凋亡相关基因Bcl-2,Bax,Caspase-3 mRNA的表达直接相关,同时可能与上调神经营养因子BDNF基因表达有关。     

芍药苷对KCl诱导原代培养大鼠皮层神经元损伤的保护作用

目的 观察芍药苷对KCl诱导原代培养大鼠皮层神经元损伤的保护作用.方法 采用细胞培养方法,以出生24h内大鼠大脑皮层神经元为材料,利用KCl复制神经元损伤模型,测定细胞活性、乳酸脱氢酶(LDH)活力、丙二醛(MDA)含量,超氧化物歧化酶(SOD)活性.结果 芍药苷能够显著提高损伤模型中神经细胞的活性,降低损伤模型中MDA含量和LDH活力,提高SOD的活性,与模型对照组比较差异有显著性.结论 芍药苷对KCl所诱导的大鼠皮层神经元损伤具有保护作用.     

益气活血法对急性缺氧脑细胞的保护作用

应用离体脑片灌流技术,观察了益气活血法对海马CA1区诱发群峰电位（PS）的影响。结果表明,益气法和益气活血法能增大PS幅值,活血法使PS幅值减小,并呈一定的量效关系;三个实验组均可延长缺氧过程中PS开始减小时间和消失时间;减少缺氧损伤电位（HIP）的出现率,增加复氧后PS的恢复率。提示益气法可兴奋脑细胞和促进突触传递功能,活血法则有抑制脑细胞过度兴奋和突触传递的作用。三种治法均能提高脑细胞的耐缺氧能力,减轻和防止缺氧所致的突触传递功能的不可逆损伤,对急性缺氧脑细胞有保护作用。     

芍药苷作用于神经系统的研究进展

芍药苷是芍药的主要活性成分,药理作用多样,应用广泛.近来,芍药苷对神经系统的作用研究受到越来越多的关注.目前的研究结果认为,芍药苷对多种痴呆模型动物的学习记忆功能衰退有改善作用,对脑缺血损伤有明显的保护作用,对帕金森病有一定的治疗作用,还具有镇痛、改善神经突触可塑性损伤等作用.其作用机制尚未完全阐明,现有结果显示腺苷Al受体在其中发挥了较为重要的作用,M胆碱受体、阿片受体、Ca2+通道、NF-κB等也都可能参与了芍药苷对神经系统的作用.     

钩藤总碱预处理对海马神经元急性缺氧的保护作用

目的:观察钩藤总碱预处理对急性缺氧后海马神经元电压门控性Na⁺电流的影响。方法:原代培养大鼠海马神经元,分为常氧、急性缺氧和钩藤总碱预处理进行实验。采用膜片钳全细胞记录技术,检测海马神经元钠电流(I_Na)的变化。结果:急性缺氧后,细胞I_Na幅度明显降低,I_Na阈值右移;而经钩藤总碱预处理的海马神经元I_Na的降低幅度明显减轻。结论:钩藤总碱预处理提高了海马神经元对急性缺氧的耐受性,对神经元有显著保护作用。     

蒲金口服液对HIBD幼鼠脑组织PSD-95、NMDAR-2B表达的影响

目的 探讨蒲金口服液对缺氧缺血性脑损伤（Hypoxic-ischemic brain damage,HIBD）幼鼠的神经保护机制。方法 单侧颈总动脉结扎联合缺氧环境制备HIBD幼鼠模型。动物分为中药组、西药组、模型组、假手术组、空白组。中药组蒲金口服液0.1 mL/（kg·d）灌胃;西药组单唾液酸四己糖神经节苷脂钠注射液3 mL/（kg·d）腹腔注射;余组生理盐水0.1 mL/（kg·d）灌胃,均每日1次,连续14 d。Morris水迷宫测试学习与记忆行为能力,尼氏染色观察脑组织神经元,透射电镜观察突触超微结构,Western Blot检测脑组织PSD-95、NMDAR-2B表达。结果 蒲金口服液可改善HIBD幼鼠神经损伤,上调脑组织突触后密度蛋白95(PSD-95)、谷氨酸受体2B抗体（NMDAR-2B）表达（P <0.05）。结论 蒲金口服液改善HIBD幼鼠神经行为学表现,可能与其调控PSD-95、NMDAR-2B表达,维护突触稳态有关。     

黄精多糖对新生大鼠大脑皮层神经细胞缺氧性凋亡的影响

目的:探讨黄精多糖对体外培养的新生大鼠大脑皮层神经细胞缺氧性凋亡的保护作用.方法:采用"Neurobasal加B27 Supplement"体外培养新生大鼠大脑皮层神经细胞,使用Hoechst 33342荧光染色、免疫细胞化学染色观察黄精多糖对缺氧复氧性神经细胞凋亡的保护作用.结果:缺氧前加入500μg/ml～1.5mg/ml的黄精多糖能显著地降低缺氧复氧培养诱导的神经细胞凋亡率,增加缺氧的神经细胞Bcl-2蛋白的表达,减少Bax蛋白的表达,提高Bcl-2/Bax比值.而缺氧12h后加入黄精多糖则无明显的抗凋亡作用.结论:缺氧前加入黄精多糖可以通过上调缺氧神经细胞Bcl-2表达、下调Bax表达和提高Bcl-2/Bax的比值以避免缺氧的神经细胞凋亡.     

丁基苯酞对缺血脑组织中及低糖低氧刺激后培养的神经细胞中胆碱乙酰化酶活性的影响

目的：观察丁基苯酞（ｄｌＮＢＰ）,ｄＮＢＰ和ｌＮＢＰ对脑缺血后皮层和纹状体中以及低糖低氧和ＮＭＤＡ刺激后培养的胎鼠皮层神经元中胆碱乙酰化酶活性变化的影响。方法：大脑中动脉堵塞起始处造成大鼠局灶性脑缺血;胎鼠皮层神经元以低糖低氧培养基培养造成低糖低氧模型;胆碱乙酰化酶活性以分光度法进行测定。结果：脑缺血后缺血区皮层和纹状体中胆碱乙酰化酶活性分别下降了６１．３％和５８．４％。ｄｌＮＢＰ,ｄＮＢＰ和ｌＮＢＰ（１０和２０ｍｇ·ｋｇ－１,ｉｐ）于脑缺血后５和６０ｍｉｎ给药２次皆可显著提高脑组织中胆碱乙酰化酶活性。ｄｌＮＢＰ,ｄＮＢＰ和ｌＮＢＰ（０．１～１０μｍｏｌ·Ｌ－１）对低糖低氧及ＮＭＤＡ刺激后神经细胞中胆碱乙酰化酶活性也有明显的提高作用。结论：ｄｌＮＭＰ改善局灶性脑缺血后动物的学习记忆功能可能与其对胆碱能神经功能的改善有关。     

黄连解毒汤有效部位对神经细胞内钙超载的作用及机制分析

目的:研究黄连解毒汤有效部位(HLJDTAF)对神经细胞内钙超载的影响及相关机制。方法:低糖低氧损伤胎鼠皮层神经细胞模拟脑缺血,双波长荧光分光光度法测定神经细胞内钙含量,观察HLJDTAF对细胞内钙超载的抑制作用。并分别采用谷氨酸(Glu),KCl,A23187,乙酰甲胆碱(MCh)和咖啡因(CAF)处理神经细胞,以分析药物的作用环节。结果:HLJD-TAF对低糖低氧处理所致神经细胞钙超载有明显的抑制作用(P0.05);对200μmol.L-1谷氨酸,50 mmol.L-1剂量的K+,0.05μmol.L-1钙离子载体A23187处理细胞引起神经细胞内钙超载有明显的抑制作用(P0.05,P0.01);正常外钙情况下和零外钙情况下,HLJDTAF对5 mmol.L-1CAF和Mch诱导神经细胞内钙超载有明显的抑制作用(P0.01,P0.05)。结论:HLJDTAF可显著抑制神经细胞拟缺血损伤后的钙超载,其机制可能是通过多途径抑制缺血缺氧后神经细胞内钙超载,从而拮抗脑缺血损伤。     

海马CA3区锥体神经元形态发育研究进展

人体海马的主要功能有:学习、记忆、空间导航以及调节神经内分泌和自主神经活动,海马体是大脑中兴奋发作阈值很低的部位,很多精神性疾病(比如癫痫)的发作与其关系较大,另外,在阿兹海默病中,海马也是首先受到损伤的区域:表现症状为记忆力衰退以及方向知觉的丧失。CA3区锥体神经元是海马中的重要神经元,数量多,功能完善,探索人体大脑海马CA3区锥体神经元的发育过程及其规律对研究大脑海马锥体神经元的形态发育及其功能的完善具有非常重要的意义。然而,在现阶段有关海马神经元发育的研究对象主要集中于大鼠、猴、兔等动物方面,而在人胎海马CA3区锥体神经元形态发育过程的研究却十分缺乏。     

天麻素对大鼠皮层缺氧神经细胞NR1亚基mRNA表达的影响

目的:观察天麻素对体外培养大鼠皮层缺氧神经细胞N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体NR1亚基mRNA表达的影响,探讨天麻素在神经保护方面的可能作用机制。方法:体外培养大鼠胚胎皮层神经细胞,以缺氧无糖培养建立神经细胞损伤模型,采用不同质量浓度的天麻素(13,26,52 mg.L^-1)处理细胞,用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测神经细胞NR1 mRNA的表达。结果:神经细胞缺氧损伤后,NR1 mRNA的表达显著增高;加入不同质量浓度的天麻素后均能显著降低神经细胞NR1 mRNA的表达。其中以26,52 mg.L^-1的抑制作用最佳。结论:天麻素可能通过拮抗由缺氧引起的神经细胞NMDA受体NR1亚基mRNA表达的增加,发挥其神经保护作用。     

丁基苯酞对缺血脑组织中及低糖低氧刺激后培养的神经细胞中胆碱乙酰化酶活性的影响

 目的:观察丁基苯酞(dl-NBP),d-NBP和l-NBP对脑缺血后皮层和纹状体中以及低糖低氧和NMDA刺激后培养的胎鼠皮层神经元中胆碱乙酰化酶活性变化的影响?方法:大脑中动脉堵塞起始处造成大鼠局灶性脑缺血;胎鼠皮层神经元以低糖低氧培养基培养造成低糖低氧模型;胆碱乙酰化酶活性以分光度法进行测定?结果:脑缺血后缺血区皮层和纹状体中胆碱乙酰化酶活性分别下降了61.3%和58.4%?dl-NBP,d-NBP和l-NBP(10和20mg·kg^-1,ip)于脑缺血后5和60min给药2次皆可显著提高脑组织中胆碱乙酰化酶活性?dl-NBP,d-NBP和l-NBP(0.1～10μmol·L^-1)对低糖低氧及NMDA刺激后神经细胞中胆碱乙酰化酶活性也有明显的提高作用?结论:dl-NMP改善局灶性脑缺血后动物的学习记忆功能可能与其对胆碱能神经功能的改善有关?     

三七总皂苷对大鼠海马神经细胞缺氧缺糖再给氧损伤的保护作用

目的观察三七总皂苷对大鼠海马神经细胞缺氧缺糖再给氧损伤的保护作用.方法建立缺氧/缺糖再给氧模型,模拟缺血再灌注损伤.流式细胞术检测凋亡细胞百分率,荧光显微镜观察细胞形态学变化和坏死细胞百分率,同时,测定细胞乳酸脱氢酶(LDH)的漏出和一氧化氮(NO)的产生量.结果神经细胞缺氧/缺糖5h后再给氧可诱导神经细胞凋亡和细胞坏死,并显著增加LDH的漏出和NO的产生,并随再给氧时间的延长而增加.三七总皂苷能降低神经细胞凋亡及坏死的百分率,减少LDH的漏出和NO的过量产生,三七总皂苷的作用随剂量增加而增加.结论三七总皂苷具有拮抗海马神经细胞凋亡的作用,这种作用可能与降低或抑制一氧化氮合酶(NOS)活性,减少NO的过量产生有关.     

人参藏红花组合物预防急性高原反应的研究

目的:研究人参藏红花组合物预防急性高原反应的作用。方法:将昆明小鼠按照体重随机分为5组,分别为空白组、诺迪康0.56 g·kg-1组、人参藏红花组合物20,10,5 g·kg-1组。预先给予小鼠人参藏红花组合物7 d,末次给药后1 h观察其在常压缺氧环境下的存活时间,低压低氧后的游泳时间以及在低压低氧环境下的死亡率。结果:人参藏红花组合物20,10,5 g·kg-1均能延长常压缺氧小鼠的存活时间及低压低氧后小鼠的游泳时间,但对低压低氧环境下小鼠的死亡率无影响。结论:人参藏红花组合物能够提高小鼠的耐缺氧和抗疲劳能力,可用于预防急性高原反应。