表面增强激光解吸/离子化质谱蛋白质芯片技术在筛选肾癌患者尿液标记物中的应用

目的 用表面增强激光解吸／离子化-飞行时间质谱(SEDLI-TOF-MS)蛋白质芯片技术筛选肾癌患者尿液相对特异标记物。方法 肾癌组40例,均经手术病理和／或临床影像证实;正常人群组40名,非肾癌其他泌尿系疾病组40例,二组合并为对照组。用IMAC-Cu-3芯片检测各尿液标本。结果 将肾癌组与对照组尿液标本结果相比较,发现肾癌差异明显的潜在标记物4个,相对分子量分别为4020、4637、5070、5500,分别以2．0、5．0、5．0、5．0为界值时,其诊断肾癌的敏感性为57．5％、66．7％、63．7％、65％,特异性为86．2％、95％、82．5％、75％;其中4637、5070差异表达蛋白质在对照组中高表达,肾癌组中低表达;而4020、5500差异表达蛋白质在肾癌组中高表达,对照组中低表达。结论 SELDI-TOF-MS蛋白质芯片技术是一种快速、简便易行、用量少和高通量分析方法,不仅能直接筛选出肾癌患者尿液中相对特异的潜在标记物,而且具有较好的临床应用价值。     

蛋白质芯片技术

DNA阵列在每平方厘米的面积上可放置成千上万个探针，通过高通量的杂交系统，一次实验就可获得大量的基因组顺序。它们在单核苷酸多态性和表达谱方面的应用已经改变了药物治疗学的研究，在临床上的应用将对医学和生物学研究产生巨大影响。但mRNA水平和蛋白质的表达并不总是相关     

蛋白质芯片技术在蛋白质组学中的应用

随着人类基因组计划的基本完成，以功能基因组学和蛋白质组学为主要研究内容的后基因组时代来临。由于同一基因组在不同细胞，不同组织中的表达情况各不相同，即使是同一细胞在不同的发育阶段，不同的生理条件，甚至不同的环境影响下，其蛋白质的存在状况也不尽相同。基因只是遗传物质的载体，蛋白质才是生理功能的执行者。基     

蛋白质芯片技术在前列腺癌诊断中的应用

目的通过应用蛋白质芯片和生物信息学技术筛选前列腺癌患者的血清标志蛋白,诊断早期前列腺癌.方法以集团普查诊断的83例前列腺癌患者血清和95例正常人血清为研究对象.采用SELDI（surfaced enhanced laser desorption/ionization）蛋白质芯片技术检测血清的蛋白质谱.以蛋白质芯片阅读机读取谱图数据,后者应用Biomarker Wizard 和Biomarker Pattern软件进行分析比较.结果与正常人血清蛋白质谱比较发现,前列腺癌患者血清有18个标志蛋白,其中4个标志蛋白呈高表达（15 265,15 868,16 003,16 068）,14个标志蛋白呈低表达.Biomarker Wizard和Biomarker Pattern软件在设定条件下自动选取8个标志蛋白用于建立前列腺癌诊断的分类树模型.此模型可正确划分96.386%的前列腺癌患者和92.632%的正常人.结论 SELDI蛋白质芯片技术可筛选出前列腺癌标志蛋白并建立前列腺癌诊断分类树模型,可能成为前列腺癌诊断的有效方法.     

SELDI 蛋白质芯片技术及其在医学研究中的应用

随着人类基因组计划的最终完成,蛋白质作为生命功能的最终执行者,其功能已越来越受到人们的重视.深入研究蛋白质的结构、功能以及它们之间的相互作用,将成为最终揭示人体疾病发生发展和转归规律的最关键环节之一.传统蛋白质研究的方法如色谱分离纯化技术、二维电泳、质谱等方法因操作过程繁锁、耗时冗长、重复性差、检测样本量小等缺点而不适合对蛋白质开展大规模的筛选研究,蛋白质组学研究迫切需要一种高通量、快速、全自动化的用于对批量蛋白质进行快速研究的仪器.近几年来,随着相关基础科学的发展,融合了生命科学与微电子科学、材料学等多门学科最新研究成果的表面增强激光解附离子化飞行时间质谱(surface enhancedlaser desorption ionization-time of flight-mass spectrometry,SELDI-TOFMS)蛋白芯片诞生了,该技术广泛用于各类疾病特异性生物标志物的检测和筛选、蛋白质的相互作用、揭示蛋白酶的作用、测定血清中小分子物质的含量及新药的研制和开发等领域,并取得了一系列突破性进展.     

蛋白质芯片技术在肿瘤检测中的应用

随着人类基因组全序列草图的完成,从基因水平向蛋白质水平深化已成为生命科学研究的迫切需要和新的任务.蛋白质芯片技术的建立为研究蛋白质水平的生命活动开辟了更为广阔的前景,提供了新型有效的研究手段.从蛋白质整体水平上研究肿瘤的发生与转移,寻找与肿瘤发生及转移相关的新的蛋白质、肿瘤特异性的标志物及肿瘤药物治疗的靶标,对肿瘤的诊治将起到重要作用.本文对蛋白质芯片技术在肿瘤检测中应用的最新进展作一综述.     

SELDI蛋白质芯片技术在肿瘤蛋白质组学研究中的应用

SELDI蛋白质芯片技术是结合色谱学，层析原理和SEIDI-TOF-MS技术制成的新一代生物芯片，是目前肿瘤蛋白质组学研究的重要工具之一。它的优点是能洞察肿瘤细胞、组织和生物体蛋白质含量的细微变化，且能精确分析某一特定蛋白质的理化性质。作者就SELDI蛋白质芯片联合二维电泳、激光捕获显微切割等技术在肿瘤蛋白质组学研究中所应采取的策略，SELDI蛋白质芯片在肿瘤蛋白质组学研究中的临床应用如筛选肿瘤标志蛋白、预测肿瘤转移和预后等作一综述。     

蛋白质芯片及其在蛋白质组研究中的应用

对在蛋白质组研究中发挥巨大作用的新技术蛋白质芯片的基本组成、特点、使用方法及应用等方面做了简要介绍,并展望了今后的发展前景。由于蛋白质芯片的超微量、全自动化的高通量筛选功能的优点,必将成为蛋白质组学研究的强有力的工具。     

表面增强激光解吸/离子化蛋白质芯片技术在肝细胞癌早期诊断研究中的应用

随着蛋白质组学研究技术的飞速发展,集样品分离、纯化、检测和数据分析为一体的表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱蛋白质芯片技术已成为蛋白质组学研究的有力工具,它可以快速、简便地直接检测各种体液及分泌物,具有标本用量少、高通量分析等特点,并在筛选、鉴定肿瘤标志物及临床疾病的诊断、防治方面发挥了重要作用。本文介绍了该技术的特点和分析步骤,以及该技术在肝细胞癌早期诊断中的应用情况,并对其前景进行展望。     

蛋白质芯片技术在肿瘤检测中的应用

蛋白质芯片技术在肿瘤研究领域中进展最快.随着肿瘤细胞的发生,肿瘤患者体内某些蛋白质会发生上调或下调,或产生新的与肿瘤关联的异常蛋白,而蛋白质芯片技术可以描绘出患者体液中所有蛋白质表达情况.     

多种肿瘤标记物蛋白芯片在肝癌诊断中的应用

目的研究多肿瘤标志物蛋白芯片诊断系统用于肝癌的临床诊断价值。方法用多肿瘤标志物蛋白芯片诊断系统测定分析263例肝癌患者、113例良性肝病患者和130例健康体检者血清CA199、NSE、CEA、CA242、Ferriting、β-HCG、AFP、f—PSA、PSA、CA125、HGH、CA153等12种肿瘤标志物。结果C12联合检测肝癌组的阳性率为91．6％，良性肝病组为15．9％，正常对照组为4．6％，肝癌组阳性率显著高于良性肝病组和正常对照组（X^2=89．39，P〈0．01；X^2=137．96，P〈0.01）。结论多肿瘤标志物蛋白芯片检测系统的应用对肝癌诊断有较高的临床参考价值。     

血清蛋白质指纹图谱筛选上皮性卵巢癌及预测肿瘤复发的应用研究

目的:建立人上皮性卵巢癌蛋白质组诊断模型,并盲法验证.方法:应用蛋白质芯片SELDI-TOF MS技术和生物信息学方法,比较40例上皮性卵巢癌患者手术前后、29例卵巢癌复发患者、22名健康人血清蛋白质谱,用45例包括良恶性卵巢病变患者和健康人的血清作肓筛验证.结果:卵巢癌和正常人血清比较,P＜0.01的差异蛋白峰有7个,用其中的质荷比4 162.69、5 804.26、6 749.37建立诊断模型,诊断的敏感度为98.3％,特异度为95.7％,阳性预测值为96.7％.卵巢癌术前、术后血清蛋白质谱比较,P＜0.01的差异蛋白峰有4个,术后化疗后复发与正常人血清差异蛋白质峰有5个,其中质荷比5 804.26蛋白峰术后下降、复发时升高.结论:应用SELDI方法建立人卵巢癌血清蛋白质谱诊断模型可用于卵巢癌的筛查,质荷比5 804.26蛋白峰有望成为卵巢癌疗效监测特异蛋白峰.     

血清多肿瘤标志物蛋白芯片检测系统在结直肠癌诊断中的价值

目的:探讨血清多肿瘤标志物蛋白芯片检测系统在结直肠癌诊断中的价值。方法:分析200例结直肠癌和100例结直肠良性疾病患者的多肿瘤标志物蛋白芯片检测系统检测结果。结果:结直肠癌组血清CEA、CA19-9、CA242、CA125水平和阳性率明显高于结直肠良性疾病组(P<0.05),结肠癌患者血清CA242水平明显高于直肠癌患者(P<0.05),但阳性率无统计学差异(P>0.05),Ⅰ期+Ⅱ期结直肠癌患者血清CEA、CA19-9、CA242、CA125水平和阳性率明显低于Ⅲ期+Ⅳ期结直肠癌患者(P<0.05),联合检测CEA、CA19-9、CA242、CA125的敏感性、准确性和诊断指数均高于单项检测(P<0.05),但特异性之间的差异无统计学意义(P>0.05)。结论:血清肿瘤标志物检测对结直肠癌有肯定的诊断价值,可作为肿瘤分期的一个重要依据。联合检测可以显著提高结直肠癌诊断的敏感性和准确性,提高早期检出率,CEA+CA19-9+CA242组合可作为诊断结直肠癌的最优化组合。     

肿瘤标志物蛋白芯片检测系统在肺癌临床诊断中的应用

目的:研究肿瘤标志物蛋白芯片检测系统在肺癌的临床诊断中的应用价值。方法:用该系统中的CEA、NSE、CA-153、CA-199等4个子系统结合TPA检查对肺癌患者和肺良性病变患者的肿瘤标志物进行检测后,进行对比分析。结果:四个子系统对各型肺癌的特异度分别为NSE(96%),CEA(100%),CA-153(93%),CA-199(82%);灵敏度分别为27.2%、58.8%和53.7%,43%。与肺良性病变组相比P<0.01。结论:肿瘤标志物蛋白芯片检测系统对肺癌有很高的敏感度,在肺癌的临床诊断方面有很大的应用价值。     

蛋白芯片法检测恶性胸腹水肿瘤标志物的临床应用价值

目的探讨多肿瘤标志物蛋白芯片技术检测对良、恶性胸腹水的鉴别诊断价值。方法检测100例患者的胸腹水癌胚抗原(CEA)、甲胎蛋白(AFP)、癌抗原125(CA125)、癌抗原153(CA153)、糖链抗原199(CA199)、糖链抗原242(CA242)、前列腺特异性抗原/游离前列腺特异性抗原(PSA/f-PSA)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、人绒毛膜促性腺激素β(β-HCG)、生长激素(HGH)、铁蛋白(FerritinFe)水平,并对检测数据进行统计学分析。结果良恶性组标本的胸腹水NSE、PSA/F-PSA含量比较,差异无统计学意义(P0.05),而两组另9种肿瘤标志物含量比较,差异有统计学意义(P0.05)。胸腹水多肿瘤标志物蛋白芯片检测系统在鉴别良恶性胸腹水诊断中的敏感性、特异性均高于常规检验。结论检测胸腹水肿瘤标志物有助于良、恶性胸腹水鉴别诊断。     

中药露蜂房蛋白对红白血病小鼠脾组织中Bcl-2／Bax蛋白表达

目的研究露蜂房蛋白（NVP）在体内对红白血病细胞Bcl-2／Bax蛋白表达的影响。方法制备红白血病小鼠模型，SP免疫组织化学检测实验各组脾组织中红白血病细胞Bcl-2／Bax表达，图像分析技术对Bcl-2／Bax免疫反应阳性细胞用SAS8．0统计软件处理分析。结果露蜂房蛋白处理组与生理盐水组比较，Bcl-2阳性表达细胞明显减少（P〈0．01），Bax蛋白表达明显增高（P〈0．01）。结论Bcl-2蛋白Bax蛋白与露蜂房蛋白对红白血病细胞在体内的作用密切相关。     

多肿瘤标志物蛋白芯片在肺癌中的临床应用

肺癌是严重威胁人类健康的恶性肿瘤,在我国居城市人口死亡原因首位。已有许多研究表明,肿瘤标志物在肺癌检出中起着非常重要的作用。蛋白芯片是以蛋白质为检测手段或检测目的的生物芯片的一种,近年来应用蛋白芯片的方法联合检测肿瘤标志物是引人关注的话题,基于目前国内外的研究进展,就多肿瘤标志物在肺癌中的临床应用简要综述。     

S—100蛋白免疫酶技术对脂肪肉瘤的诊断和鉴别诊断的意义

本文报告用常规H·E染色、组织化学和免疫组织化学“三结合”的方法对47例脂肪肉瘤和有空泡性瘤细胞软组织肿瘤及瘤样病变进行研究。结果:本组有3例肿瘤分别修正为胚胎型横纹肌肉瘸、圆形细胞型脂肪肉瘤和恶性纤维组织细胞瘤。作者认为应用此“三结合”法对有空泡性瘤细胞软组织肿瘤及瘤样病变的诊断、鉴别诊断和确定肿瘤组织学类型是有所裨益,特别是在缺乏电镜设备的情况下。此外,S-100蛋白反应的强度与脂肪肉瘤分化的程度有关,提示有可能对脂肪肉瘤的恶性程度进行判测。     

Evaluation of the Protein Requirement in Chinese Young Adults Using the Indicator Amino Acid Oxidation Technique

ObjectiveTo accurately calculate the protein requirements in Chinese young adults using the indicator amino acid oxidation technique.MethodsNine women and ten men received a restricted daily level of protein intake (0.75, 0.82, 0.89, 0.97, and 1.05 g/kg), along with L-[1-¹³C]-leucine. Subjects' protein requirement was determined by a biphasic linear regression crossover analysis of F¹³CO₂ data. In doing so, a breakpoint at the minimal rate of appearance of ¹³CO₂ expiration specific to each level of dietary protein was identified. This trial was registered with the Chinese clinical trial registry as ChiCTR-ONC-11001407.ResultsThe Estimated Average Requirement (EAR) and the Recommended Nutrient Intake (RNI) of protein for healthy Chinese young adults were determined to be 0.87 and 0.98 g/(kg·d), respectively, based on the indicator amino acid oxidation technique.ConclusionThe EAR and RNI of mixed protein are 5% and 16% that are lower than the current proposed EAR and RNI (0.92 and 1.16 g/(kg·d), respectively), as determined by the nitrogen balance method. The respective EAR and RNI recommendations of 0.87 and 0.98 g/(kg·d) of mixed protein are estimated to be reasonable and suitable for Chinese young adults.     

宫颈病变中HPV16/18感染与P16^INK4A蛋白表达的关系

目的通过检测宫颈癌及其癌前病变组织中HPVl6／18感染和P16^INK4A蛋白表达的情况，探讨两者之间的关系以及它们在病理诊断中的意义。方法应用荧光定量PCR技术对宫颈组织进行HPV DNA定性检测，采用Envision两步免疫组织化学染色方法检测P16^INK4A蛋白表达。结果268例宫颈组织中HPVl6／18的总检出率为53．73％（144／268），其检出率随CINI级、CINⅡ～Ⅲ级和宫颈鳞癌病变程度的加重而显著增高（P〈0．05）。P16^INK4A“蛋白表达的阳性率在慢性宫颈炎、CINI级、CINⅡ一Ⅲ级和宫颈鳞癌组织中两两比较均有显著性差异（P〈0．05）。HPVl6／18感染与P16^INK4A蛋白的表达呈正相关关系（r8=0．689，P〈0．01）。结论HPV16／18感染可能通过影响P16^INK4A“蛋白的过表达与宫颈癌及其癌前病变的发生发展密切相关，二者联合检测对宫颈癌的筛查和预防具有重要意义。