地塞米松促进胎儿主动脉血管CD105+间充质干细胞向脂肪细胞分化

目的:研究来自胎儿血管壁内的CD₁₀₅⁺细胞是否具有间充质干细胞的特性,地塞米松是否促进其向脂肪细胞分化。方法:免疫组化检测CD105阳性的细胞在胎儿主动脉分布,分离主动脉血管的成纤维样细胞,流式细胞仪检测细胞免疫表型,并接种在脂肪分化和成骨分化的诱导培养液中培养,油红O和VonKossa染色及透射电镜鉴定脂滴和钙化基质沉淀的形成。结果:CD105阳性的细胞分布在主动脉血管内膜的内皮细胞,部分中膜和外膜。分离到的细胞CD105、CD106、CD29、CD44阳性,CD34、CD31、CD11a、CD11b、HLA-DR为阴性。油红O和VonKossa染色分别显示脂滴和钙化基质形成。电镜下诱导的脂肪细胞胞浆中可见有包膜脂滴,诱导的成骨细胞胞浆内外电子密度高的钙盐沉积。诱导液中无地塞米松,未见含大脂滴的脂肪细胞。结论:分离到主动脉壁CD₁₀₅⁺细胞具有间充质干细胞的特性,并且地塞米松促进其向脂肪细胞分化,提示血管内的细胞可以向脂肪分化可能与动脉粥样硬化的病理发生过程可能相关。     

肥大细胞在平滑肌细胞源性泡沫细胞形成中的作用

目的 研究肥大细胞(或肥大细胞裂解上清液)、平滑肌细胞与氧化低密度脂蛋白(ox LDL)共孵育时,肥大细胞对平滑肌细胞源性泡沫细胞形成的影响.方法 用ox LDL处理大鼠腹腔肥大细胞后,采用荧光分光光度仪检测组胺释放率,通过倒置显微镜、甲苯胺蓝染色、透射电镜观察肥大细胞脱颗粒状态.将肥大细胞(或肥大细胞裂解上清液)、平滑肌细胞与60 mg/L ox LDL 共育48 h,以油红O染色观测细胞内中性脂质,高效液相色谱法检测细胞内胆固醇和胆同醇酯含量.结果 肥大细胞被ox LDL 激活脱颗粒,肥大细胞脱颗粒度与ox LDL呈剂鼍依赖性关系,以60 mg/L ox LDL处理肥大细胞时,肥大细胞脱颗粒度达71.70%±3.02%;甲苯胺蓝染色和透射电镜均显示,ox LDL处理后肥大细胞明显脱颗粒.在60 mg/L ox LDL存在时,以肥大细胞(或肥大细胞裂解上清液)处理平滑肌细胞48 h后,油红O染色显示,处理组胞浆内脂滴明显多于未处理组;高效液相色谱分析结果 显示,肥大细胞裂解上清液处理组细胞内总胆固醇和胆固醇酯含量明显高于未处理组,总胆固醇增高了 0.57倍,胆固醇酯增高了0.83倍.结论 ox LDL 以剂量依赖性方式诱导肥大细胞脱颗粒;肥大细胞脱颗粒后促进ox LDL诱导的平滑肌细胞源性泡沫细胞形成.     

羊水来源胎儿间充质干细胞定向诱导为脂肪细胞的研究

目的:研究体外诱导孕中期羊水来源胎儿间质干细胞(M SCs)分化为脂肪细胞。方法:机械手段挑取孕中期羊水细胞培养体系中的胎儿M SCs集落,培养扩增后,通过流式细胞仪检测表面抗原表达进行鉴定。取第3代胎儿M SCs,IBM X、胰岛素、氢化考的松等诱导其向脂肪细胞分化。倒置相差显微镜观察诱导后细胞形态的变化。诱导20 d后,油红O染色检测胞内中性脂肪并计算阳性细胞率,W estern Blot蛋白印记法检测PPA Rγ的表达。结果:机械手段分离出的胎儿M SCs为CD 44阳性,CD 34、CD 45、H LA-D R阴性,符合M SCs特点。诱导72 h后,细胞内有脂滴出现,随着时间延长,脂滴逐渐增加并融合为脂泡,细胞由梭形转变为圆形或多角性。20 d后85%以上胎儿M SCs变为油红O染色阳性,W estern Blot显示诱导20 d后,诱导组细胞PPA Rγ的表达量明显高于未诱导组。结论:经上述方法诱导20 d后,羊水来源胎儿M SCs可以分化为脂肪细胞。     

动脉壁整体标本油红O染色

本室因科研工作的需要,给鹌鹑和家兔喂高脂饲料,造成大动脉管腔中动脉粥样硬化的班盐病变。为了显示整体标本中粥样硬化的班块的脂肪堆积及分布情况,经几年实践摸索出用油红○显示整体标本方法,其步骤如下;1.将动物放血杀死,取出大动脉(包括主动脉弓,胸主动脉,腹主动脉,髂总主动脉),用剪刀剪开,在滤纸上铺平。2.将整体标本固定于福尔马林钙液中:10％福尔马林100ml加氯化钙1克,固定2-3天。3.充分水洗4小时,剥去动脉壁的外膜。4.油红○染色:油红○0.5克,溶于异丙醇100ml制成储备液。染色前,取储备液6ml加蒸馏     

胰岛素对THP—1细胞脂蛋白脂酶mMA表达及细胞泡沫化的影响

目的：观察胰岛素在氧化低密度脂蛋白(ox—LDL)致人髓系白血病单核细胞株THP—1细胞泡沫化过程中的作用，并探讨其机理。方法：用不同浓度胰岛素及ox—LDL与THP-1细胞一起共同孵育，观察：THP—1细胞脂蛋白脂酶(LPL)mRNA RT—PCR产物、非特异性脂酶染色THP—1细胞所得脂酶阳性细胞数、细胞大小变化、油红O染色所得含脂滴细胞数、细胞内胆固醇含量。结果：100mU/L以上浓度胰岛素各组：THP—1细胞LPL mRNA表达与oox—LDL对照组比较上调2倍；细胞周长、脂滴阳性细胞百分率及细胞内胆固醇含量均明显高于ox—LDL对照组(P＜0．05)。结论：高浓度胰岛素在ox—LDL存在条件下有促进THP—1细胞向泡沫细胞转化的作用，其机理可能与细胞LPL mRNA表达上调有关。     

组织块贴壁法扩增兔脂肪干细胞

背景:研究显示兔脂肪干细胞的体外分离方法大多数为Ⅰ型胶原酶消化法,采用组织块贴壁法扩增兔脂肪干细胞尚不多见。目的:采用组织块贴壁法从兔脂肪组织中分离培养兔脂肪干细胞,并进行成脂、成骨的诱导分化。方法:采用组织块贴壁法分离出兔脂肪干细胞,进行体外培养,观察其形态特征。取对数生长期的第3代细胞,用MTT法绘制其生长曲线;流式细胞仪检测其表面抗原CD29、CD44、CD45的表达情况;分别用成脂和成骨诱导培养液诱导其向脂肪细胞和成骨细胞分化,油红O、茜素红染色定性鉴定。结果与结论:体外培养的兔脂肪干细胞呈梭形纤维样细胞形态,生长力旺盛。流式细胞术分析结果显示,第3代兔脂肪间充质干细胞强表达CD29,CD44,阴性表达CD45。兔脂肪干细胞经成脂诱导14 d后,油红O染色阳性;成骨诱导培养14 d后,茜素红染色阳性。提示组织块贴壁法可以分离培养出兔脂肪干细胞。     

悬浮组织块法分离培养SD 大鼠脂肪干细胞的实验研究

目的:建立SD 大鼠脂肪干细胞悬浮组织块分离培养法。方法:取正常SD 大鼠股沟处脂肪组织,用悬浮组织块法和组织块贴壁法分离培养SD 大鼠脂肪干细胞,观察细胞的生长状况及形态特征。取第3 代对数期细胞,CCK-8 法绘制其生长曲线;免疫荧光法检测其表面抗原CD29、CD44、CD45 的表达情况;分别用成脂、成骨诱导培养液进行诱导分化,油红O、茜素红染色定性鉴定。结果:两种方法体外培养得到的SD 大鼠脂肪干细胞形态为梭形纤维样,生长力旺盛,生长曲线为典型的“S冶型;免疫荧光法检测显示第3 代细胞强表达CD29、CD44,CD45 表达阴性;细胞成脂诱导培养14 d 后,油红O 染色为阳性;成骨诱导培养14 d 后,茜素红染色为阳性。结论:悬浮组织块法可以分离培养出SD 大鼠脂肪干细胞,方法简便,为体外分离培养SD 大鼠脂肪干细胞提供了一种新的方法。     

从脊柱内镜手术摘除组织中分离髓核间充质干细胞及其生物学特征鉴定

目的:利用经皮内镜下腰椎间盘切除术获取来源明确的髓核组织,结合组织块培养法高效分离培养人髓核间充质干细胞(human nucleus pulposus mesenchymal stem cells,hNP-MSCs),并鉴定其生物学特征。方法:收集6例腰间盘突出症手术摘除的髓核组织,利用组织块培养法分离培养。取第3~6代生长良好的细胞用于实验,采用CCK-8检测增殖能力;用流式细胞术检测细胞表面标志物;并分别向成骨、成脂和成软骨方向诱导分化,用油红O染色、茜素红染色及阿利新蓝染色对分化结果进行检测。结果:成功从椎间盘内镜摘除的髓核组织中分离培养具有增殖能力的细胞,流式细胞术检测显示细胞高表达CD29、CD44、CD90、CD73和CD105等间充质干细胞抗原,不表达造血干细胞标志CD34和CD45。生长曲线显示符合正常间充质干细胞增殖特征。茜素红染色、阿利新蓝染色及油红O染色均呈阳性,说明分离培养的细胞具有向成骨、成软骨和成脂肪诱导分化的能力。结论:首次结合椎间盘内镜微创手术和组织块培养法,体外高效分离培养了具有自我更新能力和多向分化潜能的hNP-MSCs。     

炎症干扰PPARγ-LXRα-ABCA1途径介导的肾小球系膜细胞胆固醇外流

目的:观察炎症能否干扰过氧化物酶体增殖物活化受体γ(PPARγ)-肝X受体α(LXRα)-三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)途径介导的人肾小球系膜细胞(HMCs)的胆固醇外流。方法:将HMCs分为4组:对照组、高脂组[细胞给予100 mg/L低密度脂蛋白(LDL)处理]、炎症组[细胞给予20μg/L肿瘤坏死因子-α(TNF-α)处理]、联合干预组(细胞给予20μg/L TNF-α+100 mg/L LDL处理)。采用实时定量PCR和W esternb lotting方法检测PPARγ、LXRα和ABCA1的mRNA及蛋白表达水平。用[3H]标记胆固醇,液体闪烁计数法检测胆固醇外流量。用油红O染色法及化学酶促-比色法观察HMCs中脂质积聚情况。结果:与对照组相比,高脂组PPARγ、LXRα和ABCA1 mRNA及蛋白的表达明显增加,单纯的炎症刺激可下调它们的表达,而联合干预组中上述各基因和蛋白表达量比高脂组明显下降。胆固醇外流测定结果显示:与对照组相比,高脂组胆固醇外流量增加,而炎症组胆固醇外流量降低,联合干预组比高脂组胆固醇外流量明显减少。油红O染色提示联合干预组细胞内脂质积聚明显高于其余3组。细胞内胆固醇含量测定亦显示炎症能进一步加重胞内脂质积聚。结论:炎症因子可通过抑制PPARγ-LXRα-ABCA1表达导致HMCs胆固醇外流减少,加重细胞内脂质积聚。     

丹参酮ⅡA上调ABCA1表达促进泡沫细胞胆固醇流出

目的:探讨丹参酮ⅡA对氧化型低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)诱导的鼠源巨噬细胞性泡沫细胞形成的影响及其机制。方法:体外培养的鼠源性巨噬细胞株,用ox-LDL(50μg/mL)孵育细胞以诱导泡沫细胞,同时用不同质量浓度的丹参酮ⅡA(10-5,10-4和10-3mol/L)处理。用油红O染色观察细胞荷脂情况,高效液相色谱法测定细胞内总胆固醇(total cholesterol,TC)、游离胆固醇(free cholesterol,FC)和胆固醇酯(cholesteryl ester,CE)的水平。采用[3H]标记的胆固醇测定胆固醇流出率。实时定量PCR和Western印迹法分别检测细胞中三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ATP-binding cassette transporter A1,ABCA1)的mRNA和蛋白的表达。结果:Ox-LDL处理48 h后,与正常巨噬细胞相比,油红O染色阳性细胞数显著性增加,细胞体积明显增大,细胞内可见大量的脂滴,形态多呈不规则形。与泡沫细胞模型相比,10-4或10-3mol/L丹参酮ⅡA处理组油红O染色阳性细胞数显著减少,细胞内脂滴明显减少,细胞体积明显缩小。与泡沫细胞模型组相比,10-4或10-3mol/L丹参酮ⅡA显著性降低了细胞内TC,FC,CE水平和CE/TC比值,显著性增加了细胞胆固醇流出率和ABCA1mRNA和蛋白的表达。结论:丹参酮ⅡA可抑制ox-LDL诱导的鼠源巨噬细胞性泡沫细胞形成,其机制可能与丹参酮ⅡA增加泡沫细胞中ABCA1的表达,促进胆固醇流出有关。     

主动脉平滑肌细胞在三维培养中产生弹性纤维的研究

目的 研究主动脉平滑肌细胞(ASMC)在仿真皮替代物的三维培养中是否能产生弹性纤维。方法 取1周龄SD大鼠胸主动脉，进行原代和传代培养，以α肌动蛋白免疫细胞化学染色鉴定平滑肌细胞。然后，将ASMC与胶原、甲壳素及糖胺多糖组合形成的凝胶混合，进行三维培养；培养1周和2周后，用Gomori醛复红染色和弹性蛋白免疫细胞化学染色，检测ASMC胶原凝胶。结果传代细胞经α肌动蛋白免疫细胞化学染色鉴定，98％以上为ASMC。培养1周和2周的ASMC胶原凝胶中，均显示有弹性纤维存在。结论 ASMC在仿真皮替代物的三维培养中能够产生弹性蛋白，并形成弹性纤维。     

携带人胰岛素基因腺病毒载体转染人脐带间充质干细胞及其成脂分化

背景：胰岛素是成脂诱导剂的重要组成成分。然而胰岛素存在半衰期,会随着体内代谢不断灭活及降解,植入体内的细胞或材料无法像体外那样以更换培养液来达到目的。实验拟通过转染胰岛素基因,使转染后的干细胞稳定分泌胰岛素,促进其成脂分化。 目的：探讨携带人胰岛素基因腺病毒载体转染人脐带间充质干细胞后对其成脂分化能力的影响。 方法：取第3代人脐带间充质干细胞,以感染复数为20转染腺病毒载体。实验分为4组：对照组为第4代人脐带间充质干细胞;实验组1为腺病毒转染的第4代人脐带间充质干细胞;实验组2为第4代人脐带间充质干细胞+成脂诱导液;实验组3为腺病毒转染的第4代人脐带间充质干细胞+成脂诱导液。 结果与结论：转染48 h后实验组1和实验组3的人脐带间充质干细胞在荧光显微镜下显现弱荧光,72 h后荧光较强。经脂肪诱导培养液培养14 d后,实验组1,2,3油红O染色后显微镜下呈红色,对照组未见脂滴形成,实验组1可见一些细小脂滴形成;实验组3与实验组2相比,脂滴大且多,定量分析显示,实验组3油红O染色阳性的面积和吸光度大于实验组2(P < 0.05)。由此说明携带人胰岛素基因腺病毒载体转染人脐带间充质干细胞后可促进其成脂能力。     

绿色荧光蛋白转基因大鼠骨髓间充质干细胞的分离鉴定

背景:转基因动物提取的间充质干细胞自身携带绿色荧光蛋白,与传统病毒、质粒转染相比,能在活细胞中稳定地表达,可较快筛选其修饰的细胞。目的:观察绿色荧光蛋白转基因大鼠骨髓间充质干细胞的生物学特性。方法:取2周龄的绿色荧光蛋白转基因大鼠双侧长骨骨髓,采用全骨髓贴壁法分离培养骨髓间充质干细胞。流式细胞术分析第5代绿色荧光蛋白阳性骨髓间充质干细胞的细胞表型,并分别加入成骨及成脂条件培养液进行体外多向诱导分化,采用茜素红钙盐染色和油红O染色进行鉴定。结果与结论:成功获得了稳定表达绿色荧光蛋白的骨髓间充质干细胞,流式细胞仪检测细胞表达CD90和CD105,不表达或弱表达CD14和CD45。经成骨诱导3周后茜素红染色可见有橘红色钙盐沉积,经成脂诱导3周后油红O染色见红色的脂滴。结果表明稳定表达的绿色荧光蛋白未影响到骨髓间充质干细胞的多向分化潜能,可作为良好的示踪因子。     

差速贴壁法分离培养脂肪源间充质干细胞

目的:探讨差速贴壁法从大鼠腹股沟脂肪垫分离纯化脂肪源间充质干细胞(adipose tissue-derived mesenchymal stem cells,ADMSCs)的可行性。方法:采用差速贴壁培养法分离ADMSCs,并与普通培养法得到的ADMSCs进行表面分子CD44阳性率对比。在第2代ADMSCs中加入条件培养基进行诱导,根据条件培养基的不同分成3组:①成骨诱导组:加入成骨培养基;②成脂诱导组:加入成脂培养基;③对照组:仅加入基础培养基。成骨诱导组和对照组进行碱性磷酸酶(ALP)检测,成脂诱导组和对照组进行油红O染色检测。结果:差速贴壁培养法获得CD44阳性率更高的ADMSCs。成骨诱导组的ALP大大高于对照组,成脂诱导组油红O染色阳性,对照组油红O染色均为阴性。结论:差速贴壁培养法从大鼠腹股沟脂肪垫中分离得到高纯度ADMSCs。     

Omega-3多不饱和脂肪酸对动脉粥样硬化斑块稳定性的作用及机制研究

目的:探讨omega-3多不饱和脂肪酸(polyunsaturated fatty acid,PUFA)对动脉粥样硬化斑块稳定性的作用及可能机制。方法:采用低密度脂蛋白受体敲除(Ldlr~(-/-))小鼠喂养西方饮食(western diet,WD)6周诱导动脉粥样硬化,并在饮食中添加或不添加3%omega-3 PUFA进行干预。使用液相质谱联用检测血浆中PUFA及其代谢产物浓度。油红O染色分析测定动脉树斑块面积及主动脉根部斑块脂质含量,HE染色分析主动脉根部斑块大小,天狼星红染色分析胶原纤维含量,免疫荧光检测巨噬细胞和平滑肌细胞含量。结果:(1)与WD组相比,omega-3组小鼠动脉树斑块面积比例显著降低。(2)Omega-3处理组与对照组相比,主动脉根部斑块面积、脂质含量和巨噬细胞含量显著降低;同时胶原纤维和平滑肌细胞含量显著上升,斑块不稳定指数下降(P0.05)。(3)Omega-3处理组血清中omega-3 PUFA显著增加,分析代谢产物发现EEQ和18-HEPE水平显著增加。结论:Omega-3处理减少动脉粥样硬化斑块面积、增加斑块稳定性,其机制可能与其代谢产物水平变化相关。     

Ibrolipim抗猪动脉粥样硬化的作用

目的：探讨合成化合物NO-1886(ibrolipim)调节贵州小香猪脂代谢异常及其抗动脉粥样硬化(AS)的作用机制。 方法： 贵州小香猪15头，按体重随机分为3组。分别喂普通猪饲料(CD)；高脂高蔗糖饲料(HFSD)和高脂高蔗糖饲料加1％ibrolipim。每月末采集血样，测定血脂浓度。第8个月末处死动物，用高效液相色谱(HPLC)分析血浆高密度脂蛋白中胆固醇酯的含量；苏丹Ⅳ染色观察主动脉脂纹的面积；油红O染色观察脂质在肝组织中的沉积。 结果： HFSD组血浆总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和游离脂肪酸(FFA)浓度均高于对照组，主动脉可见脂纹，内膜增厚，内皮细胞损伤，内膜下有大量泡沫化细胞，肝细胞胞浆内大量脂质沉积；ibrolipim组血浆高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平高于对照组（其中胆固醇酯高于对照组,TG和FFA浓度低于对照组），肝细胞油红O染色见少量脂质沉积。 结论： Ibrolipim可能主要是通过降低血浆TG及升高HDL-C发挥其抗AS作用。     

残粒脂蛋白诱导大鼠脂肪间充质干细胞的成脂分化

背景:高三酰甘油血症患者血浆中的极低密度脂蛋白和乳糜微粒增多,可被水解为残粒脂蛋白。极低密度脂蛋白可诱导其他前体脂肪细胞的成脂分化,推测残粒脂蛋白也具有诱导脂肪间充质干细胞成脂分化的能力。目的:探讨不同质量浓度残粒脂蛋白对大鼠脂肪间充质干细胞成脂分化的影响。方法:无菌条件下切取大鼠腹股沟脂肪垫,胶原酶消化法获取脂肪间充质干细胞,接种入含胎牛血清的DMEM/F12培养基进行培养,观察细胞形态变化,流式细胞仪检测细胞表面分子的表达。将传至第2代的脂肪间充质干细胞分为4组,对照组单纯以10mg/L胰岛素进行孵育,剩余3组另加入50,100,200mg/L残粒脂蛋白,18d后通过油红O染色评价成脂分化情况。结果与结论:原代脂肪间充质干细胞早期呈集落样生长,随传代次数增加,逐渐呈均一性梭状细胞外观,细胞表达CD105,基本不表达CD34。与对照组比较,加入50mg/L残粒脂蛋白后油红O染色强度无明显变化(P0.05),加入100mg/L残粒脂蛋白后油红O染色强度明显升高(P0.05);加入200mg/L残粒脂蛋白油红O染色强度明显高于其他3组(P0.05)。提示残粒脂蛋白以浓度依赖性的方式诱导脂肪间充质干细胞成脂分化。     

miR-424 negatively regulates adipogenic differentiation of human adipose tissue-derived mesenchymal stem cells

目的 研究miR-424对人脂肪源间充质干细胞(hAMSCs)向成脂分化的影响.方法 用real-time PCR检测hAMSCs成脂分化前后细胞内miR-424水平的变化.在脂质体介导下,用人工合成的miR-424模拟物转染hAMSCs提高细胞内miR-424的含量,随后对其进行成脂诱导.用油红O染色法观察细胞内脂滴形成情况,用real-time PCR和Western blot检测成脂关键转录因子PPARγ及相关标记物mRNA的表达.结果 hAMSCs成脂分化后,miR-424表达下调.与对照组细胞相比,转染miR-424模拟物的实验组细胞中miR-424含量明显升高.成脂诱导第8天油红O染色结果显示,实验组脂滴形成显著少于对照组.PPARγ和成脂相关标记物的表达量也出现下调.结论 miR-424可负向调节hAMSCs向脂肪细胞分化.     

miR-424负向调节人脂肪源间充质干细胞向成脂细胞分化

目的研究miR-424对人脂肪源间充质干细胞(hAMSCs)向成脂分化的影响。方法用real-time PCR检测hAMSCs成脂分化前后细胞内miR-424水平的变化。在脂质体介导下,用人工合成的miR-424模拟物转染hAMSCs提高细胞内miR-424的含量,随后对其进行成脂诱导。用油红O染色法观察细胞内脂滴形成情况,用real-time PCR和Western blot检测成脂关键转录因子PPARγ及相关标记物mRNA的表达。结果 hAMSCs成脂分化后,miR-424表达下调。与对照组细胞相比,转染miR-424模拟物的实验组细胞中miR-424含量明显升高。成脂诱导第8天油红O染色结果显示,实验组脂滴形成显著少于对照组。PPARγ和成脂相关标记物的表达量也出现下调。结论 miR-424可负向调节hAMSCs向脂肪细胞分化。     

油酸联合胰岛素和地塞米松诱导hADSCs成脂

目的 利用油酸联合胰岛素和地塞米松诱导人脂肪间充质干细胞(human adipose derived stromal cells,hADSCs)成脂,探索一种在人体内脂肪细胞生成的诱导条件,更接近人的生物学状态,对疾病预防、治疗具有指导意义.方法 从人大腿部吸脂术所抽取的脂肪组织,分离培养hADSCs,并进行鉴定:免疫荧光染色法检测细胞表面分子的表达;进行成脂、成神经诱导.采用25、50和80μmol/L三种浓度的油酸联合胰岛素和地塞米松诱导hADSCs的成脂,油红O染色观察细胞成脂情况.结果 分离原代细胞,镜下观察呈长梭形,漩涡状排列,表面标记物CD49d和CD105为阳性表达.细胞成脂诱导后,胞浆出现大量脂滴,油红O染为红色;经神经诱导后,细胞伸出细长突起,突起之间有网状连接.油酸联合胰岛素和地塞米松可成功诱导hADSCs成脂:可见细胞内脂滴形成,油红O染为红色,三种浓度以80μmol/L浓度组油红O阳性细胞率最高.结论 成功从人大腿皮下脂肪分离、培养hADSCs,并使用80μmol/L油酸联合胰岛素和地塞米松对其诱导12d,可以获得满意的成脂效果.