分子杂交法研究肝炎病人血清和肝组织中输血传播病毒

目的 对各型肝炎病人血清和肝组织中输血传播病毒（TTV）核酸检测分析,探讨病毒的致病性。方法 以地高辛为标记物制备TTV DNA探针,斑点杂交法、原位杂交法分别检测血清中及肝组织中TTV DNA。结果 检测103例血清,TTV总阳性率为25．24％（26／103）;甲－戊型肝炎组检出率21．81％（12／55）、非甲－非庚型患者检出率47．37％（9／19）,显著高于正常对照组15％（3／20）。临床可见TTV的单独感染和重叠感染;出现急性、慢性甚至重度肝损伤。12 肝组织可见TTV阳性,阳性颗粒主要见于肝细胞核内。结论 从血清和肝组织证实了TTV的存在,提示这种病毒可能是导致肝脏炎症的一种新病原。     

一种新型输血传播的肝炎病毒检测及临床意义的探讨

采用间接酶联免疫法 (ELISA )对 10 8例不同来源的血清进行输血传播病毒 (TTV )抗体的检测。结果显示 :TTV在血透患者中感染率最高 ,且TTV与其他肝炎病毒可重叠感染。在非甲～庚型肝炎患者中TTV感染率亦较高。提示 :应重视对TTV的检测 ,特别是对献血员、血液透析患者应进行TTV的常规检测 ,避免经血传播。对非甲～庚型肝炎患者进行TTV检测 ,有利于临床的进一步诊断     

TTV酶联免疫方法的建立及其初步应用

目的 建立检测TTV的酶免疫技术,了解不同型肝炎患者血清中抗－TTV抗体的分布情况,并结合TTV DNA的检测分析两者的关系。方法 以原核表达的TTV ORF1蛋白为抗原建立检测抗－TTV的酶联免疫吸附试验（ELISA）方法,采用该方法检测不同肝炎患者中抗－TTV抗体;在套式聚合酶链反应（PCR）方法检测血清标本中TTV DNA。结果 所建立的检测TTV的ELISA方法具有较好的特异性,不同别肝炎患者中抗－TTV抗体阳性率分别为：甲型肝炎患者10.5%（4／38）,乙型肝炎患者12.5%（16／128）,丙型肝炎患者8.3%(7/84),丁型肝炎患者7.7%(30/93),健康人群1.3%(1/78)。统计学分析表明,非甲－庚型肝炎患者抗－TTV阳性率显著高于其他型肝炎患者（P＜0.01）,而正常人群则显著低于肝炎患者（P＜0.05）。抗－TTV阳性率与TTV DNA阳性率存在相关性（P＜0.05）。结论 在不同型肝炎患者中均可检出抗-TTV抗体,但以非甲－庚型肝炎患者阳性率高;TTV抗体可与基因同时存在于患者血清中,抗－TTV抗体可能类似抗－HCV, 是一传染性标志。     

南京市部分幼儿TT病毒DNA检测及基因序列分析

目的 了解幼儿人群中TT病毒的流行率及基因判别。方法 设计、合成引物,采用半套式聚合酶链反应（hemi-nested PCR)方法检测幼儿血清标本并进行序列分析。结果 在110份幼儿血清中,TTV DNA总检出率为12．73％。在107名ALT正常,抗HAV－IgM、HBsAg、抗HCV阴性的幼儿血清中,TTV DNA检出率为11．2％（12／107）;从1名ALT升高幼儿血清中检出TTV DNA,从2名HBsSg阳性幼儿血清中检出TTV DNA阳性血清1份。对2株TTV DNA阳性株序列分析结果显示,它们与日本分离株N22、TA278（G1a)、TX011（G1b)、TS003(G2a)、NA004（G2b)和中国株CHN1相应位置核苷酸序列的同源性分别为83．3％／86．0％、84．2％／87．8％、93．7％／98．6％、67．6％／67．1％、64．9％／64．4％、83．8％／88．3％,经系统发育分析它们属于G1b型。结论 幼儿人群中存在TTV感染,TTV流行率为12．73％。TTV感染可能存在血源传播途径外的其他传播途径,并存在健康携带状态。     

深圳地区不同人群TTV感染情况的调查

目的了解深圳地区不同人群ＴＴＶ的感染情况。方法在ＴＴＶＯＲＦ１保守区设计两对套式引物，建立了检测ＴＴＶＤＮＡ的巢式聚合酶链反应（Ｎｅｓｔｅｄ－ＰＣＲ），用该法对深圳地区９０例一般人群、８８例职业献血员、７９例静脉毒瘾者及２９例非甲庚型肝炎病人进行ＴＴＶＤＮＡ的检测。结果ＴＴＶＤＮＡ在以上４种人群中的阳性率分别为７８％，９０％，４１７％与４４８％，前者与后两者比较差异均有显著性（Ｐ＜００５）。９０例一般人群与８８例职业献血员中，１４例ＴＴＶＤＮＡ阳性者丙氨酸转氨酶（ＡＬＴ）均正常。结论深圳地区一般人群与职业献血员中ＴＴＶ携带者较常见；静脉毒瘾者是ＴＴＶ感染的高危人群；部分非甲～庚型肝炎可能与ＴＴＶ相关     

原位杂交法检测非甲～庚型肝炎患者肝组织中TT病毒DNA

目的 证实在非甲－庚型病毒性肝炎患者肝组织中TT病毒（transfusion-transmitted virus,TTV)的存在。方法 采用地高辛素标记TTV DNA探针以原位杂交技术对51例血清学病毒标记非甲－戊型、免疫组化检测肝组织中HBsAg、HCV NS3Ag及HGV N55Aag阴性的病毒性肝炎患者石蜡包埋肝组织进行了检测。结果 各型病毒性肝炎肝组织中TTV基因的总检出率为27．5％,其中急性轻型肝炎的检出率为30．8％（4 ／13）,急性重型肝炎为1／8,亚急性重型肝炎为3／7,慢性肝炎为2／6,活动性肝硬化为2／9,慢性重肝肝炎为1／4,原发性肝癌为1／4。TTV DNA表达于肝细胞核或胞质内,以核型多见。在急性肝炎,TTV阳性细胞弥漫分布于肝小叶内,慢性肝炎于汇管区附近较为密集,而在肝硬化病例,阳性细胞在假小叶内多呈片族状不规则分布。结论 在不明原因病毒性肝炎患者血清及肝组织中TTV DNA的检出表明TTV为一种新型的肝炎病毒,TTV为一种嗜肝性病毒。     

贵州地区不同人群TTV核酸检测及部分核苷酸序列分析

目的 了解贵州地区TTV感染状况，分析TTV贵州株的基因特点。方法 以公布的TTV第1读码区序列设计两对寡核苷酸引物，用套式聚合酶链反应法(nested—PCR)检测贵州地区不同人群血清中TTV核酸(TTV DNA)，并对3份TTV DNA阳性血清的PcR产物，用直接测序法测定核苷酸序列。结果 62例正常人，37例志愿献血员，50例血液透析患者，107例静脉药瘾者及139例肝病患者血清中TTV DNA阳性率分别为6．45％(4／62)，8．1％(3／37)，26.0％(13／50)，25.23％(27／107)和16.55％(23／139)。在肝病组中，重型肝炎、肝硬化、肝癌患者的TTV DNA阳性率分别为35.71％(5／14)，14．15％(15／106)和15．79(3／19)。测定的282个核苷酸中，3株贵州株的同源性均高于99％，与日本株N22相比，同源性都为98％。结论 贵州存在TTV感染，血透患者中有较高的TTV感染率，TTV可能是重型肝炎的病原因子，3株贵州株可能为同一基因型。     

深圳地区不同人群庚型肝炎病毒感染的分子流行病学调查

在庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）基因５’端非编码区（５’－ＵＴＲ）设计两对套式引物，建立检测ＨＧＶＲＮＡ的逆转录－巢式聚合酶链反应（ＲＴ－ｎｅｓｔｅｄＰＣＲ）。对深圳地区１０６例职业献血员、１６８例肝炎病人及８０例静脉毒瘾者进行ＨＧＶＲＮＡ的检测，阳性率分别为８．５％、７．７％与４６．３％，前两者与后者相比较差异均有显著性意义（Ｐ＜０．０１）。６１例慢性乙型肝炎与３３例慢性丙型肝炎病人ＨＧＶＲＮＡ阳性率分别为８．２％与２１．２％。３３例慢性丙型肝炎病人中，１５例接触过血液或血制品的病人ＨＧＶＲＮＡ阳性率为４０．０％，明显高于１８例无血液或血制品接触史者（Ｐ＜０．０５）。本研究结果提示深圳地区职业献血员中ＨＧＶ携带者较常见；静脉毒瘾者是ＨＧＶ感染的高危人群；慢性丙型肝炎常重叠ＨＧＶ感染，主要与接触血液或血制品有关。故对献血员进行ＨＧＶ筛查将减少输血后ＨＧＶ感染的发生     

北京地区部分人群血清中抗庚型肝炎病毒抗体的检测

以庚型肝炎病毒合成肽为抗原，建立酶联免疫吸附试验，检测北京地区部分自然人群，健康献血员及乙型肝炎病毒感染指标阳性的住院和门诊部虱血清中的抗－ＨＧＶ，其阳性率分别是１．５９％，５．３０％和８．０６％。证实了我国存在ＨＧＶ感染，并揭示确有ＨＧＶ与ＨＢＶ同时或重叠感染。     

7例庚型肝炎的临床分析

７例庚型肝炎的临床分析张绍刚王建文任宝琴检测了６１例各型病毒性肝炎病人血清中庚型肝炎病毒感染情况。检出庚型肝炎病毒抗体阳性者７例（抗－ＨＧＶ）。其中９例甲～戊型病毒性肝炎标志均阴性者，有２例抗－ＨＧＶ阳性，另外５例均与它型肝炎重叠感染。１材料和方法１...     

山西地区TT病毒感染的分子流行病学研究

目的 了解山西地区不同人群中ＴＴ病毒（ＴＴＶ）感染状况及ＴＴＶ山西分离株基因型分布情况。方法 用聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法对山西地区不同人群血清标本进行检测,分析其基因型。结果 ２４例慢性乙型肝炎患者、３１例非甲￣庚型肝炎患者、５３例职业献血员、１１２例健康产妇中,ＴＴＶ ＤＮＡ阳性率分别为４１．６６％、２９．０３％、５８．４９％、８．９３％;１８例２￣３岁健康儿童血清,１０例ＴＴＶ ＤＮＡ阳性产     

Novel TTV variants isolated in an epidemic of hepatitis of unknown etiology

TT virus (TTV) is a recently discovered single-stranded DNA virus that has been reported to be associated with elevated transminase levels in the patients with posttransfusion hepatitis of unknown etiology. TTV prevalence is very high in the common population and its pathogenicity remains unclear. In this study, we performed an epidemiological study to investigate the infection rate of TTV and its role in an epidemic of unknown-etiology hepatitis. Moreover, two TTV isolates named L01 and L02 were cloned from the serum of a patient with unknown-etiology hepatitis. Eighty-one subjects were included in the study and were divided into two groups: 18 in the case group and 63 in the control group. TTVDNA was detected by nested PCR from sera samples. The infection rates of TTV in case and control groups were 33.3 and 38.9%, respectively. There was no significant difference between the two groups. Homology analysis showed that L01 had a very poor homology with other TTV isolates and L02, and L02 was 75.5% identical to JA10. The result does not support TTV as a causative agent in this epidemic. The genetic divergence between L01 and other TTV isolates beyond genotype, so it represents a new genotype of TTV.     

中国不同人群的抗TTV血清流行病学及TTV基因不同区段的分子流行病学研究

目的　了解不同人群血清中抗 TTV抗体及ORF1 、ORF2 区段基因的分布状况 ,并分析其间的关系。方法　根据TTV的ORF1 、ORF2 区段的基因序列分别合成巢式PCR引物 ,扩增 2 46例血清标本中的TTV部分基因片段 ;采用TTVORF2 部分基因原核表达抗原 ,应用酶联免疫吸附试验(ELISA) ,检测相同血清标本中TTV抗体。结果　不同人群TTVORF1 、ORF2 基因及抗体检测的阳性率分别为 :有偿献血者 16 0 % (12 75 ) ,10 7% (8 75 )和 2 5 3% (19 75 ) ,甲型肝炎患者 10 0 % (3 30 ) ,16 7% (5 30 )和 16 7% (5 30 ) ;乙型肝炎患者 47 5 % (19 40 ) ,42 5 % (17 40 )和 2 2 5 % (9 40 ) ,丙型肝炎患者 42 9% (15 35 ) ,37 1% (13 35 )和 2 8 6 % (10 35 ) ;丁型肝炎患者 2 0 0 % (3 15 ) ,2 6 7% (4 15 )和13 3% (2 15 ) ;戊型肝炎患者 16 7% (2 12 )、16 7% (2 12 )、33 3% (4 12 ) ;庚型肝炎患者 2 3 8% (5 2 1) ,38 1% (8 2 1)和 2 3 8% (5 2 1) ;非甲～庚型肝炎患者 6 1 1% (11 18) ,5 0 0 % (9 18)和 44 4% (8 18)。统计分析TTVORF1 与ORF2 基因的检出率相关有统计学意义 (P =0 0 0 0 <0 0 1) ;不同人群间基因检出率相差有统计学意义 (P <0 0 1) ;TTV抗体的检出率与TTVDNA的检出率相关无     

Determination of antibodies to TT virus (TTV) and application to blood donors and patients with post-transfusion non-A to G hepatitis in Japan

Recently, a nonenveloped single-stranded DNA virus named TT virus (TTV) has been reported in association with non-A to G post-transfusion as well as sporadic acute and chronic liver disease. A method was developed for the detection of antibody to TTV (anti-TTV) by means of immune precipitation and detection of TTV DNA by the polymerase chain reaction. The test serum was incubated with TTV, recovered from feces of a carrier, and after incubation, the formed immune complexes were precipitated with goat antiserum to human IgG. TTV DNA was sought for by the polymerase chain reaction in both precipitate and supernatant. The detection of TTV DNA in the precipitate, but not in the supernatant, was considered to represent anti-TTV in the test serum. Of the 44 healthy blood donors in Japan, anti-TTV was detected in one of the six (17%) with TTV DNA and 11 of the 38 (29%) without TTV DNA. In the two patients with post-transfusion non-A to G hepatitis, free anti-TTV developed as they cleared TTV in serum. Anti-TTV complexed with TTV in serum, detectable by precipitating sera with goat anti-human IgG and testing for TTV DNA, elicited while the patients had elevated alanine transaminase levels. The determination of anti-TTV would be useful for detecting resolved infection in surveys for exposure to TTV in the general population, and for establishing the mechanism of liver injury associated with TTV infection.     

TLMV5‘非编码区基因的克隆与序列分析

目的 调查ＴＴＶ阴性的非甲￣庚型肝炎患者中ＴＴＶ－ｌｉｋｅ ｍｉｎｉ ｖｉｒｕｓ（ＴＬＭＶ）感染情况,对ＴＬＭＶ５’非编码区（５’ＮＣＲ）部分基因进行分子克隆与序列分析。方法 采用巢式ＰＣＲ技术检测５３例ＴＴＶ阴性的非甲－庚肝炎患者血清ＴＬＭＶ ＤＮＡ,对ＰＣＲ产物进行克隆、测序和分析。结果 ５３例病例中ＴＬＭＶ ＤＮＡ阳性３７例（６９．８％）,对其中８株ＴＬＭＶ基因克隆测序,并与Ｔａｋａｈａｓｈ     

TT病毒与肝炎关系的临床流行病学研究

目的 对闽南地区各种肝炎患者、健康体检者、义力献血员和肝癌患者共４８０例从临床流行病学角度探讨ＴＴ病毒（ＴＴＶ）的致生及其与各种肝炎的关系。方法 采用巢式ＰＣＲＩｇＧ,用ＥＰＩ ＩＮＦＯ６．０软件进行统计分析。结果 ４８０名研究对象中ＴＴＶＤＮＡ的总检出率为２３．９６％。各种胆炎患者的ＴＴＶ总阳性率为２３．９４％,肝癌患者的ＴＴＶ阳性率为２０．６９％,而健康者的ＴＴＶ阳性率为２４．８４％,义务献血     

High prevalence of TT virus (TTV) infection in patients on maintenance hemodialysis: frequent mixed infections with different genotypes and lack of evidence of associated liver disease.

Recently, a novel DNA virus, TT virus (TTV), was identified in patients with post-transfusion non-A-G hepatitis. We analyzed the prevalence and clinical implications of TTV infection in a cohort of 96 Spanish patients on long-term hemodialysis. TTV DNA was detected by nested PCR in 51 (53%) of 96 patients, a prevalence significantly higher than that found in healthy blood donors. Persistent liver test abnormalities were found in only 2 (7.7%) of 26 patients infected with TTV alone, compared with 12 (75%) of 16 patients infected with hepatitis C or hepatitis B virus, or both (P < 0.01). Mixed infections with multiple strains of TTV, including different major genotypes, were common in patients on hemodialysis. These patients had received a significantly greater number of blood units (22.7 +/- 20) compared with patients apparently infected with a single strain of TTV (8.9 +/- 11) (P = 0.01). Phylogenetic analyses of TTV from infected patients identified strains of genotypes 1, 2, 3, and 4. In summary, TTV infection was common in patients on hemodialysis but was not associated with liver disease