作用于MAPK信号转导系统的抗肿瘤药物研究

丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)是细胞内重要的信号转导系统,可以调节细胞的生长、增殖、分化、凋亡、黏附、迁移等一系列过程,继而影响肿瘤的发生、侵袭、转移以及耐药,是可能的抗肿瘤药物靶点之一。近年来,已有大量以MAPK信号转导通路为靶寻找抗肿瘤药物的研究报道,涉及该系统的多个分子,如表皮生长因子受体、Ras、Raf、蛋白激酶C、谷胱甘肽转移酶等。     

隐丹参酮对脑缺血再灌注损伤神经元细胞凋亡的作用

目的 探讨隐丹参酮(CTs)抑制c-Jun氨基末端激酶/p38丝裂原活化蛋白激酶(JNK/p38 MAPK)信号通路对脑缺血再灌注损伤(CIRI)神经元细胞凋亡的作用.方法 将30只SD大鼠随机分为假手术组、模型组和实验组,每组10只,模型组和实验组参照改良Longa法制备CIRI模型.造模成功后,实验组腹腔注射CTs...     

Boehmeria nivea attenuates LPS-induced inflammatory markers by inhibiting p38 and JNK phosphorylations in RAW264.7 macrophages

Abstract

Context: Boehmeria nivea (Linn.) Gaudich (Urticaceae), a natural herb, has a long history of treating several diseases including wound healing. However, the anti-inflammatory effect of B. nivea has not been investigated.

Objective: We investigated whether the 70% ethanol extract of B. nivea (Ebn) can exert anti-inflammatory activity. Several phenolic compounds of extracts were determined to provide further information on the correlation between anti-inflammatory effects and phenolic compounds.

Materials and methods: We prepared a 70% ethanol extract of B. nivea leaves and evaluated its anti-inflammatory activity (200, 400, 800, 1200?µg/mL) by measuring the secretions of nitric oxide (NO), tumor necrosis factor alpha (TNF-α) and interleukin 6 (IL-6), which were stimulated by lipopolysaccharide (LPS) in RAW264.7 macrophages. The total phenolic compounds were determined by the Folin–Ciocalteu method and major compounds were determined by HPLC.

Results: Ebn was able to abolish the LPS-induced secretions of NO, TNF-α and IL-6. It also decreased the protein levels (IC₅₀?=?186?µg/mL) of LPS-induced inducible nitric oxide synthase (iNOS). The LPS stimulated p38, JNK and ERK phosphorylations significantly more than the controls. Surprisingly, although Ebn reduced p38 and JNK phosphorylations, it did not influence ERK phosphorylation. We found that Ebn revealed several major compounds such as chlorogenic acid (1.96?mg/100?g), rutin (46.48?mg/100?g), luteolin-7-glucoside (11.29?mg/100?g), naringin (1.13?mg/100?g), hesperidin (23.69?mg/100?g) and tangeretin (1.59?mg/100?g).

Discussion and conclusion: Boehmeria nivea exerts an anti-inflammatory effect on macrophages by inhibiting p38 and JNK, suggesting that it may be used as a functional ingredient against inflammation.     

CCl_4诱导的大鼠肝纤维化模型肝纤维化逆转与MAPK信号通路的研究

目的通过检测CCl4诱导肝纤维化大鼠逆转恢复各时期MAPK信号通路蛋白动态变化,研究其在肝纤维化恢复期可能的调控作用。方法采用CCl4皮下注射SD大鼠12周,复制肝纤维化模型,分别于注射12周,停药后2、4、6、8周取材。通过检测各组ALT、AST、Hyp、LN、PⅢNP的含量变化和肝脏病理组织切片Masson染色,加以验证。采用West-ern blot法检测各组肝组织中MAPK通路蛋白表达。结果 ALT、AST、Hyp、LN、PⅢNP等反映肝损伤和纤维化进程的指标在第12周最高,即模型组最高,并且随着肝纤维化逆转而含量逐渐降低,Masson染色结果与之一致,表明大鼠肝纤维化模型期与各恢复期模型建立完成。p-ERK1/2在模型组表达明显降低,与正常组相比差异有显著性(P<0.01),恢复4周表达明显升高,与模型组相比差异有显著性(P<0.01),以后逐渐降低。p-JNK1/2在模型组表达明显降低(P<0.01),恢复期逐渐升高(P<0.05)。p-p38在模型组表达明显升高(P<0.01),恢复期逐渐降低(P<0.05)。p-ERK/ERK与Hyp相关系数r=-0.46,P=0.003;p-JNK/JNK与Hyp相关系数r=-0.53,P=0.0004;p-p38/p38与Hyp相关系数r=0.81,P=0.0001。结论 MAPK信号通路中的ERK、JNK和p38信号通路在肝纤维化逆转中发挥重要作用。     

吡格列酮对脂多糖诱导星形胶质细胞诱导型一氧化氮合酶表达的抑制作用

目的 研究吡格列酮(Pio)对脂多糖 (LPS) 诱导星形胶质细胞(AC)诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的抑制作用及其作用机制。方法 AC分别加入Pio 0.1, 1.0和10.0 μmol·L^-1, c-Jun氨基端激酶(JNK)抑制剂SP600125 20.0 μmol·L^-1, p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)抑制剂SB203580 20.0 μmol·L^-1或过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)抑制剂GW9662 10.0 μmol·L^-1,1 h以后加入LPS 10.0 mg·L^-1, 继续作用24 h。Griess法测定培养AC上清液中一氧化氮(NO)含量。免疫印迹法和免疫荧光法检测iNOS的表达水平。结果 与正常对照组相比,LPS 10.0 mg·L^-1组iNOS表达水平和NO分泌水平均显著增高(P<0.01)。Pio 0.1, 1.0和10.0 μmol·L^-1可明显抑制LPS诱导的iNOS表达上调及NO分泌增加(P<0.05),Pio 10.0 μmol·L^-1组iNOS蛋白表达水平由LPS组1.711±0.283下降到0.157±0.082(P<0.01),NO分泌量由LPS组(16.63±2.25)μmol·L^-1下降到(6.92±1.30)μmol·L^-1(P<0.01)。GW9662 10.0 μmol·L^-1可抑制Pio 1.0 μmol·L^-1的上述作用,iNOS蛋白表达水平由Pio 1.0 μmol·L^-1组0.562±0.100增加到0.847±0.088(P<0.01),NO分泌量由(9.27±1.23)μmol·L^-1增加到(15.54±2.30)μmol·L^-1(P<0.01)。SB203580 20.0 μmol·L^-1和SP600125 20.0 μmol·L^-1的作用与Pio作用相似,使iNOS蛋白表达水平降低到0.434±0.082和0.434±0.076,NO分泌量下降到(11.53±2.40)μmol·L^-1和(8.81±0.58)μmol·L^-1;而单独应用SB203580 20.0 μmol·L^-1和SP600125 20.0 μmol·L^-1对AC的iNOS表达和NO分泌没有影响。结论 Pio能通过抑制LPS诱导的大鼠皮质AC的iNOS表达,从而减少NO的分泌,这种抑制作用可能与其激活PPARγ和阻断JNK和p38MARK信号转导通路有关。     

吡格列酮对淀粉样β蛋白片段1-42引起的大鼠海马c-Jun氨基端激酶信号传导通路改变的作用

目的探讨吡格列酮(Pio)对淀粉样β蛋白片段1-42(Aβ1-42)所致大鼠海马神经细胞损伤保护作用的信号传导机制。方法 SD大鼠左侧脑单次icv给予5μlAβ1-422.0mmol.L-1制备大鼠痴呆模型。65只大鼠随机分为正常对照组、Aβ1-42模型组及Pio20,40和80mg.kg-1组;Pio组大鼠在icv单次给予Aβ1-42前24h先ig给予Pio20,40及80mg.kg-1,每天一次,连续给药7d。Western印迹法检测海马CA1区磷酸化丝裂原激活蛋白激酶激酶4(MKK4)、磷酸化c-Jun氨基端激酶1(JNK1)和磷酸化c-Jun的蛋白表达水平;应用激光共聚焦显微镜观察磷酸化JNK在小胶质细胞表达部位。结果与正常对照组比较,Aβ1-42模型组大鼠icv给予Aβ1-42后,可引起海马CA1区磷酸化的MKK4,JNK1和c-Jun的表达明显增加(P<0.01);与Aβ1-42模型组比较,Pio20,40和80mg.kg-1可剂量依赖性地对抗Aβ1-42引起的磷酸化MKK4,JNK1和c-Jun表达的增加(P<0.01),Pio40mg.kg-1使磷酸化MKK4蛋白与总量MKK4蛋白之比从Aβ1-42模型组的1.02±0.35降低到0.44±0.06,磷酸化JNK1从0.94±0.17降低到0.55±0.05,磷酸化c-Jun从4.64±0.41降低到2.48±0.12(P<0.01)。荧光免疫组织化学双染,激光共聚焦显微镜观察结果显示,磷酸化的JNK主要在小胶质细胞表达。结论 Pio通过抑制小胶质细胞内JNK激酶信号传导通路的活化,对抗Aβ1-42引起的海马神经细胞损伤。     

Effect of phosphodiesterase type 4 inhibitor rolipram on cyclophosphamide-induced cystitis in rats

Schisandrin is the main active ingredient isolated from the fruit of Schisandra chinensis Baill. Recent studies have demonstrated that schisandrin exhibits anti-oxidative effects in vivo. In the present study, the effect of schisandrin on plasma nitrite concentration in lipopolysaccharide (LPS)-treated mice was evaluated. It also significantly inhibited carrageenan-induced paw edema and acetic acid-induced vascular permeability in mice. Furthermore, schisandrin had a protective effect on lipopolysaccharide (LPS)-induced sepsis. In vitro, our results are the first that show that the anti-inflammatory properties of schisandrin result from the inhibition of nitric oxide (NO) production, prostaglandin E(2) (PGE(2)) release, cyclooxygenase-2 (COX-2) and inducible nitric oxide synthase (iNOS) expression, which in turn results from the inhibition of nuclear factor-kappaB (NF-kappaB), c-Jun N-terminal kinase (JNK) and p38 mitogen-activated protein kinase (MAPK) activities in a RAW 264.7 macrophage cell line.     

阿魏酸钠对淀粉样β蛋白片段1～40引起的大鼠海马MAP激酶信号传导通路及凋亡蛋白表达的影响

目的观察阿魏酸钠(SF)是否对淀粉样β蛋白(Aβ)所致的海马损伤具有保护作用及其信号转导机制。方法大鼠灌胃给予SF(50,100和250mg.?-1),连续应用3周,左侧脑室内单次注射Aβ1-40(10μL,1.0mmol.L-1)制备大鼠痴呆动物模型,注射后6h,取海马CA1区。Western印迹观察有丝分裂原活化蛋白p38(p38MAP)激酶、丝裂原激活的蛋白激酶的激酶4(MKK4)、c-Jun氨基末端激酶(JNK1/2)、P53蛋白、FasL和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase3)蛋白表达。应用caspase3活性测定试剂盒分析caspase3活性变化。结果脑室内注射Aβ1-40可引起大鼠海马CA1区磷酸化p38MAP激酶表达明显增加,从正常0.127±0.018增加到0.95±0.12(n=4,P<0.01)。也可使磷酸化MKK4和JNK1/2表达明显增加。这些MAPK信号传导通路改变伴随有促凋亡蛋白P53和FasL表达明显增加,caspase3蛋白表达和活性均明显增加,P53从正常0.053±0.012增加到0.30±0.07(n=4,P<0.01),FasL从正常0.25±0.04增加到0.51±0.05(n=4,P<0.01),caspase3从正常0.036±0.007增加到0.63±0.041(n=4,P<0.01),caspase3活性从正常0.38±0.04增加到0.86±0.09(n=4,P<0.01)。SF(50、100和250mg.kg-1)连续应用3周,能明显抑制Aβ1-40引起的p38MAP激酶、磷酸化MKK4和JNK1/2表达明显增加,同时促凋亡蛋白p53和FasL表达明显增加,降低caspase3的活性。结论SF通过抑制Aβ1-40引起的p38MAP激酶和JNK1/2信号传导通路,产生抗凋亡作用,保护海马免除Aβ1-40引起的神经毒性。     

通心络胶囊对糖尿病小鼠视网膜 p38 MAPK信号通路的影响

目的：观察通心络胶囊对糖尿病小鼠视网膜p38丝裂原活化蛋白激酶（ p38 MAPK）信号通路的影响,探讨其视网膜保护作用的可能机制。方法 KK／Upj-Ay小鼠40只随机分为糖尿病模型组、通心络低、中、高剂量组,每组10只,另设C57BL／6（C57）小鼠10只作为对照组。按照分组给予不同剂量处理因素,疗程3个月,观察体质量,测定空腹血糖（FBG）,取眼球行HE 染色,Western-blot 检测视网膜p38MAPK、JNK、ERK 总蛋白及磷酸化p38MAPK、JNK、ERK（ p-p38MAPK、p-JNK、p-ERK）的表达。结果与对照组比较,模型组体质量、FBG及p-p38MAPK、p-JNK、p-ERK表达均显著增高,通心络胶囊能够减轻视网膜病理损伤,降低p-p38 MAPK表达（ P ＜0?．05）,而不影响体质量、FBG及p-JNK、p-ERK表达（ P ＞0．05）;且各组p38MAPK、JNK、ERK 总蛋白表达差异无统计学意义（ P ＞0．05）。结论 p38 MAPK信号通路可能参与了糖尿病视网膜损害的发生发展。通心络胶囊可减轻糖尿病小鼠视网膜病理损伤,其机制可能与降低p38MAPK蛋白磷酸化水平有关。     

p38 Mitogen-activated protein kinase up-regulates LPS-induced NF-kappaB activation in the development of lung injury and RAW 264.7 macrophages

Clarification of the key regulatory steps that lead to nuclear factor-kappa B (NF-kappaB) under cellular and pathological conditions is very important. The action of p38 mitogen-activated protein kinase (MAPK) on the upstream of NF-kappaB activation remains controversial. To examine this issue using an in vivo lung injury model, SB203580, a p38 MAPK inhibitor was given intraorally 1h prior to lipopolysaccharide (LPS) treatment (intratracheally). The mice were sacrificed 4 h after LPS treatment. SB203580 substantially suppressed LPS-induced rises in p38 MAPK phosphorylation, neutrophil recruitment, total protein content in bronchoalveolar lavage fluid, and apoptosis of bronchoalveolar cells. Furthermore, SB203580 blocked LPS-induced NF-kappaB activation in lung tissue through down-regulation of serine phosphorylation, degradation of IkappaB-alpha, and consequent translocation of the p65 subunit of NF-kappaB to the nucleus. It is likely that, in cultured RAW 264.7 macrophages, SB203580 also blocked LPS-induced NF-kappaB activation in a dose-dependent manner. SB203580 inhibited LPS-induced serine phosphorylation, degradation of IkappaB-alpha, and tyrosine phosphorylation of p65 NF-kappaB. These data indicate that p38 MAPK acts upstream of LPS-induced NF-kappaB activation by modulating the phosphorylation of IkappaB-alpha and p65 NF-kappaB during acute lung injury. Because LPS-stimulated macrophages may contribute to inflammatory lung injury, the inhibition of the p38 MAPK-mediated intracellular signaling pathway leading to NF-kappaB activation represents a target for the attenuation of lung inflammation and parenchymal damage.     

氯沙坦对糖尿病大鼠肾脏结构、功能及肾组织p38MAPK的影响

目的　探讨特异性血管紧张素ⅡⅠ型受体拮抗剂氯沙坦对糖尿病大鼠肾脏结构、功能的保护机制及p38MAPK信号转导通路对此过程的作用。方法　♂Wister大鼠行右肾切除术 2wk后 ,随机分为 3组 ,右肾切除对照组、糖尿病组 ,氯沙坦治疗组。腹腔注射链脲佐菌素 (STZ ,6 5mg·kg-1)诱发糖尿病模型 ,氯沙坦 4 0mg·kg-1·d-1灌胃。分别于注射STZ后 4wk后各组选取 6只大鼠 ,收集尿液 ,测定尿蛋白(Upro) ,尿肌酐 (Ucr) ;股动脉放血分离血清 ,测定血糖(Glu)、血尿素氮 (BUN) ,血肌酐 (Scr)并计算肌酐清除率(Ccr)。免疫组化检测肾皮质磷酸化p38蛋白激酶 (p p38MAPK)及磷酸化cAMP反应元件结合蛋白 (p CREB)的表达特征 ,纤维粘连蛋白 (fibronectin ,FN )及层粘连蛋白(laminin ,LN)的表达 ,应用图像分析系统进行半定量分析。Westernblot及流式细胞术定量检测 p p38MAPK和 p CREB蛋白的表达。结果　与对照组相比 ,4wk时糖尿病模型组肾小球基底膜轻度增厚 ,细胞外基质 (ECM )增多 ,系膜区扩大 ,肾脏肥大指数升高 ,肾功能轻度受损 ,p p38MAPK、p CREB、FN及LN表达明显升高 ;而与糖尿病模型组相比 ,氯沙坦组肾脏结构 ,功能及各指标的表达有不同程度的降低。结论　氯沙坦对糖尿病大鼠肾脏结构和功能具有保护作用 ,可能是通过调     

没食子酸丙酯对脑缺血大鼠神经元SAPK/JNK及p38MAPK激活的抑制作用

目的探讨没食子酸丙酯对大鼠脑缺血再灌注模型缺血区周边组织神经元损伤的保护作用及其可能机制。方法通过Nissl和TUNEL染色法检测阳性神经元数量，蛋白免疫印迹、免疫组化法观察活化型Caspase-3，SAPK/JNK，p38MAPK及其磷酸化组分的表达。结果没食子酸丙酯干预后，SAPK/JNK，p-SAPK/JNK(1 h)，p38MAPK，p-p38MAPK(6 h)及活化型Caspase-3(12 h)表达均减弱，TUNEL阳性神经元减少(24 h)，Nissl阳性神经元增多(24 h)，神经元凋亡率明显降低。结论没食子酸丙酯保护缺血再灌注后神经元损伤的机制可能与抑制SAPK/JNK及p38MAPK的激活有关。     

白花蛇舌草提取物对肝癌细胞 JNK/p38MARK通路及细胞学行为的影响

目的研究白花蛇舌草提取物( HDE)对肝癌 QGY细胞增殖、凋亡的影响,并探讨其抗肿瘤的可能作用机制。方法体外培养肝癌 QGY细胞,分为对照组: RPMI-1640培养基培养;阳性对照组:全反式维甲酸( AT-RA)(5 μmol/L);白花蛇舌草提取物( HDE)低、中、高剂量组:分别给予 20、40、80 g/L HDE。四甲基偶氮唑盐比色法( MTT)检测细胞增殖能力,采用 Hoechst33258荧光染色以及流式 AnnexinV-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率;通过蛋白质印迹法( Western blotting)检测增殖相关蛋白增殖细胞核抗原( PCNA)、凋亡相关蛋白 B淋巴细胞瘤基因 -2(Bcl-2)、 Bcl-2相关 X蛋白基因( Bax)、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶 3(caspase3)及 JNK/p38MARK通路相关蛋白水平。结果 24、48 h时 QGY细胞增殖抑制率,与对照组［( 16.56±     

p38丝裂原活化蛋白激酶选择性抑制剂对难治性癫痫模型大鼠神经细胞的保护作用及其机制研究

目的:研究p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)选择性抑制剂SB202190对难治性癫痫模型大鼠神经细胞的保护作用及其机制。方法:取大鼠随机分为空白对照组、模型组、阳性对照组(卡马西平5 mg.kg-1)和SB202190低、中、高剂量组(7.5、15、30mg.kg-1),每组10只,除空白对照组外,其余各组腹腔注射海仁酸(KA)10 mg.kg-1建立难治性癫痫模型,阳性对照组和SB202190各剂量组建模前30 min腹腔注射相应药物。建模给药后按Racine分级标准对各组大鼠进行行为学评价,观察建模给药后1 h内各组大鼠的脑电图(EEG)变化,采用免疫组化法和蛋白免疫印迹法检测建模给药后3 h各组大鼠脑组织中p38MAPK蛋白的表达。结果:空白对照组无癫痫发作,EEG无明显节律性;模型组癫痫大发作,发作程度为5级,EEG出现癫痫样放电,与空白对照组比较,模型组p38MAPK阳性细胞数明显增加,其表达明显增强(P<0.01);与模型组比较,阳性对照组和SB202190 3个剂量组发作程度、EEG癫痫样放电、p38MAPK阳性细胞数及其蛋白表达均明显降低(P<0.05或P<0.01)。结论:SB202190对KA诱导的难治性癫痫模型大鼠神经细胞具有保护作用,可能与其抑制p38MAPK蛋白的表达有关。     

地塞米松抑制哮喘大鼠肺组织p38蛋白激酶的表达

目的:探讨支气管哮喘大鼠肺组织p38蛋白激酶(p38 MAPK)表达的变化以及地塞米松对其影响.方法:复制大鼠哮喘模型,随机分成3组:正常对照组、哮喘对照组和地塞米松(DEX)干预组.分别采用酶联免疫吸附法(ELISA)和蛋白质印迹检测支气管肺泡灌洗液(BALF)IL-5含量和肺组织磷酸化p38 MAPK表达的变化,并观察气道阻力、BALF中EOS计数以及肺组织病理学变化.结果:哮喘对照组大鼠肺组织磷酸化p38 MAPK表达水平及气道阻力、BALF中IL-5含量和EOS计数均较正常对照组显著增加(P＜0.01);DEX干预组上述指标较哮喘对照组显著降低(P＜0.01),肺组织病理学损伤程度明显减轻.肺组织磷酸化p38 MAPK表达水平与气道阻力、BALF中IL-5含量和EOS计数之间分别呈显著正相关(r=0.77、0.63、0.65,P＜0.01).结论:p38 MAPK可能参与了支气管哮喘的发病过程.DEX对哮喘的治疗作用至少部分与抑制磷酸化p38 MAPK的表达有关.     

通心络胶囊对糖尿病心肌病小鼠的心脏保护作用

目的 观察通心络胶囊调控p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinases,p38 MAPK)炎症信号通路对糖尿病心肌病小鼠防治作用。方法 KK/Upj-Ay小鼠40只随机分为模型组和通心络低、中、高剂量组,每组10只,另设C57BL/6小鼠10只作为对照组。各组给予相应药物,疗程为12周,观察体质量,测定空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)、糖化血红蛋白(hemoglobin A1c,HbA1c)、甘油三酯(triglyceride,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、左心室指数;放射免疫法测定各组血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)含量;HE染色观察心肌组织病理变化;Western blot法检测心肌组织p38 MAPK、c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)、细胞外信号调节激酶(extracellular-signa1 regulated kinase,ERK)总蛋白及磷酸化p38 MAPK、JNK、ERK(p-p38 MAPK、p-JNK、p-ERK)的表达。结果 与对照组比较,模型组FBG、HbA1c、TG、TC、左心室指数、TNF-α、IL-6及p-p38MAPK、p-JNK、p-ERK表达均显著增高,通心络胶囊能够减轻心肌组织病理损伤,降低TG、TC、TNF-α、IL-6含量及p-p38MAPK、表达,而不影响体质量、FBG、HbA1c及p-JNK、p-ERK表达;且各组p38 MAPK、JNK、ERK总蛋白表达无统计学意义。结论 通心络胶囊可减轻糖尿病心肌病理损伤,改善心功能,其机制可能与降低p38 MAPK蛋白磷酸化水平,抑制炎症反应有关。     

Involvement of p38 mitogen-activated protein kinase in PLL-AGE-induced cyclooxgenase-2 expression

In the present study, murine RAW 264.7 macrophages were incubated with poly-L-lysine-derived advanced glycosylation end products (PLL-AGEs) to examine cyclooxygenase-2 protein expression. Treatment of RAW 264.7 cells with PLL-AGEs caused the dose-dependent expression of cylooxygenase-2 but not cylooxygenase-1 and an increase in cylooxygenase activity. Increased cylooxygenase-2 expression was seen at 6 h and reached a maximum at 24 h. The tyrosine kinase inhibitor, genistein, and the p38 mitogen-activated protein kinase (MAPK) inhibitor, [4-(4-fluorophenyl)-2-(4-methylsulfinylphenyl)-5-(4-pyridyl)1H-imidazole] (SB 203580), inhibited PLL-AGE-induced cylooxygenase-2 expression, while the Ras inhibitor, FPT inhibitor II, and the MAP kinase kinase inhibitor, (2'-amino-3'-methoxyflavone) (PD 98059), had no effect on PLL-AGE-induced cylooxygenase-2 expression. Incubation of RAW 264.7 cells with PLL-AGEs resulted in activation of p38 MAPK, and this activation was suppressed by genistein and SB 203580. Taken together, our results suggest that activation of protein tyrosine kinase and p38 MAPK is involved in AGE-induced cyclooxygenase-2 expression in RAW 264.7 macrophages.     

11,12-EET对在体大鼠正常及再灌注心肌JNK1/JNK2表达的影响

目的　观察11, 12- 环氧二十碳三烯酸对再灌注心肌JNK1 /JNK2表达的影响,探讨其与心肌保护作用的关系。方法　制备大鼠缺血/再灌注心肌损伤模型,动态观察心功能的变化;实验后取心肌,用Western Blot法测定心肌JNK1 /JNK2的表达。实验分①正常组(Norm);②假手术组(Sham);③缺血再灌注组(I/R);④短阵缺血预处置组(SI+I/R);⑤11, 12 -EET预处置缺血/再灌注损伤组(EET+I/R)。结果　再灌注30min,I/R组+dp/dtmax、-dp/dtmax和LVDP均低于Sham组、SI+I/R组和EET+I/R组(P<0 .05);而I/R组大鼠心肌JNK1 /JNK2磷酸化表达高于Sham组、Norm组及EET+I/R组(P<0. 05 ),EET+I/R组与Sham组间;SI+I/R组与I/R组差异均无显著性(P>0 .05)。结论　11, 12- EET具有保护心功能的作用,这种保护作用可能是通过抑制JNK1 /JNK2的表达。     

NAC和地塞米松对脂多糖诱导大鼠肺泡巨噬细胞p38蛋白激酶的影响

目的　观察脂多糖 (LPS)诱导肺泡巨噬细胞 (AM )p38蛋白激酶活化及抗炎药物地塞米松 (DEX)和N 乙酰半胱氨酸 (NAC)对其影响。方法　分离培养大鼠肺泡巨噬细胞 ,设正常对照组、LPS刺激组、DEX或NAC干预组 ,共 4组。分别采用Western印迹和放射免疫分析法检测AM核提取物 p38蛋白激酶和细胞培养上清TNF α、IL 8含量。 结果　LPS刺激组核蛋白提取物p38蛋白激酶和细胞培养上清TNF α、IL 8含量较正常对照组升高 (P <0 0 1 )。DEX组和NAC组虽较正常对照组高 ,但均低于LPS刺激组 (P <0 0 1 )。核提取物 p38蛋白激酶和细胞培养上清TNF α、IL 8含量之间分别呈正相关 (r =0 754、0 62 5 ,P <0 0 1 )。结论　LPS诱导肺泡巨噬细胞 p38蛋白激酶活化 ,进而导致TNF α、IL 8表达增多 ;DEX和NAC可能通过抑制 p38活化而减少炎性介质TNF α、IL 8的释放