心肌型肌球蛋白轻链激酶调控肌球蛋白轻链对心肌肥大的影响

  目的  探讨心肌型肌球蛋白轻链激酶(cardiac myosin light chain kinase, cMLCK)对AngⅡ诱导的心肌肥大的作用。  方法  纯化cMLCK作为激酶,体外激酶反应实验探索cMLCK活性位点。制作野生型cMLCK(WT-cMLCK)及敲除了氨基端(N端)的变异体(ΔNT-cMLCK)腺病毒,感染原代心肌细胞,并用随机数法随机分为6组:对照组、AngⅡ组、WT-cMLCK组、WT-cMLCK+AngⅡ组、ΔNT-cMLCK组、ΔNT-cMLCK+AngⅡ组,每组3个样本。RT-PCR检测心衰因子表达;Western blotting检测cMLCK及底物的表达;免疫荧光检测细胞表面积。  结果  WT-cMLCK在体外体系能对其底物MLC2v进行磷酸化;而ΔNT-cMLCK对MLC2v的磷酸化作用消失;使用AngⅡ处理后,可见细胞面积增大[(1 787.0±142.6)μm2 vs.(2 458.0±211.3)μm2,P < 0.001],ANP、β-MHC表达上调(均P < 0.05);cMLCK及p-MLC2v表达上调(均P < 0.05);过表达WT-cMLCK可逆转心肌肥大[(2 527.0±116.4)μm2 vs.(1 775.0±88.5)μm2,P < 0.001];敲除N端可使cMLCK的保护作用丧失[(1 775.0±88.5)μm2 vs.(2 613.0±118.4)μm2,P < 0.001]。  结论  过表达cMLCK可改善AngⅡ诱导的心肌肥大,该作用依赖于其N端。      

人心肌内肌球蛋白轻链mRNA测定新方法

采用异硫氰酸胍－苯酚－氯仿一步法提取心肌内总ＲＮＡ，随机引物将所有ｍＲＮＡ逆转录成ｃＤＮＡ；用特异肌球蛋白轻链２（ＭＬＣ２）ｃＤＮＡ扩增引物增产ＭＬＣ２ｃＤＮＡ，以１８ｓｒＲＮＡ为内标，用激光光密度扫描仪扫描ＭＬＣ２及１８ｓｒＲＮＡ之扩增条带，计算出ＭＬＣ２ｍＲＮＡ的相对量。依此确定在不同心脏疾病状态下心肌内ＭＬＣ２ｍＲＮＡ的量。此方法重复性好，为直接从人心肌研究ＭＬＣ２对心肌收缩力的调节作用提供     

先天性心脏病家系心室肌球蛋白轻链1基因的的限制酶切片段长…

利用人心室肌球蛋白轻链１ｃＤＮＡ探针对先天性心脏病患者家系心室肌球蛋白轻链１基因进行了限制酶切片段长度多态性分析。从患有４种不同先天性心脏病的９个家系４０名成员和１３例无血缘关系患者的分析结果，发现有２个家系呈现限制性酶切片段多态性，但这种限制性酶切片段多态性似与先天性以及病的发生没有联系。     

心肌急性损伤肌球蛋白轻链激酶酶促反应动力学研究

以内毒素休克狗作为急性心肌损害的动物模型，从心肌中提纯肌球蛋白轻链（ＭＬＣ）和肌球蛋白轻链激酶（ＭＬＣＫ），根据酶动力学分析法研究急性损害对ＭＬＣＫ活性的影响。结果发现在此种状态下狗心肌ＭＬＣＫ活性显著降低，推测ＭＬＣＫ活性降低导致可磷酸化轻链（ＰＬＣ）磷酸化的磷酸酶相对占优势，磷酸化型Ｐ－ＬＣ向去磷酸化型转变。     

人心肌肌球蛋白轻链的提取、纯化和电泳分析

用一种简便有效的方法，从１３０ｇ成人心室肌中先提职心肌肌球蛋白纯品３１８ｍｇ，再从中进一步分离和纯化得到肌球蛋白轻链１８ｍｇ。纯化肌球蛋白轻链的核酸含量＜０．０１％，基本不含有肌动蛋白、原肌球蛋白、肌钙蛋白及其它蛋白。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ显示，人肌球蛋白轻链１和轻链２的分子量为２４ｋＤ和２０ｋＤ。纯化猪心肌球蛋白的Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性为０．４６μｍｏｌＰｉ／ｍｇ／ｍｉｎ，其分离后的轻链亚基则无此活性。本文对人和猪的心室肌肌球蛋白轻链的电泳行为进行了分析。     

急性心肌损害对心肌肌球蛋白磷酸化系统的影响

为探讨急性心肌损害对心肌肌球蛋白磷酸化系统的影响，选择对于心肌有特异性损害作用的异丙基肾上腺素（ＩＳＰ），造成大鼠实验性心肌损害的动物模型，动态观察心肌损害时肌球蛋白磷酸化系统的变化规律。研究结果表明，低剂量ＩＳＰ导致心肌匀浆中肌球蛋白轻链激酶（ＭＬＣＫ）和肌动球蛋白ＡＴＰ酶的活性下降，但心肌组织病理切片基本正常；高剂量注射ＩＳＰ，ＭＬＣＫ和ＡＴＰ酶活性显著下降，与正常对照组和低剂量组相比，差异十分显著（Ｐ＜０．０１）。在病理形态学上大鼠心肌组织有多处较大的坏死灶。提示，在未发生明显的病理性变化前，心肌细胞内就已发生了一系列的代谢紊乱，如酶活性下降，心肌细胞的收缩功能发生改变；当心肌组织出现病理形态学改变时，细胞内酶活性显著下降，表明已由可逆性损害发展到不可逆的心肌坏死。     

抑制肌球蛋白轻链激酶活性诱导细胞凋亡的研究

目的:探讨抑制肌球蛋白轻链激酶(MLCK)活性诱导细胞凋亡。方法:应用尿素/甘油胶检测平滑肌细胞肌球蛋白轻链磷酸化水平,流式细胞仪检测平滑肌细胞凋亡细胞比例。结果:ML-7处理后细胞具有剂量依赖的肌球蛋白轻链去磷酸化与细胞凋亡,肌球蛋白轻链去磷酸化早于细胞凋亡。结论:抑制MLCK活性足以引起细胞凋亡,且肌球蛋白轻链去磷酸化早于细胞凋亡。     

人血小板肌球蛋白轻链激酶的研究

报道了人血小板匀浆上清液肌球蛋白轻链酶微量快速测定方法，对该酶的性质进行了初步研究，并建立了较为合适的测定酶活性的体系。该酶活性依赖于Ｃａ＾２＋和ＣａＭ，其半激活浓度分别为０．３５ｍｍｏｌ／Ｌ和１０μｍｏｌ／Ｌ，ＴＦＰ能抑制该酶活性，其半抑制浓度为１５０μｍｏｌ／Ｌ。     

心肌梗死患者抗肌球蛋白轻链抗体检测的临床意义

目的；观察急性心肌梗死（AMI）患者血清中是否存在抗心肌肌球蛋白链抗体，探讨该抗体与AMI患者心功能和预后的关系。方法：67例AMI患者分别于发病第1周末和6个月进行免疫印迹法检测血清中的抗肌球蛋白轻链抗体和超声心动图检查。根据抗体结果分为抗体阳性组和阴性组，比较两组的心功能指标和预后，结果：67例AMI患者血清抗肌球蛋白轻链抗体阳性有17例，阳性率为25．4％，30例健康对照均为阴性；抗体阳性组和阴性组的梗死部位和范围相似，但抗体阳性组Killip分级心功能明显差于抗体阴性组（P＜0．05），而室壁运动减弱，室壁瘤形成和死亡率均明显高于阴性组（P＜0．05）。结论：急性心肌梗死患者血清中可检测到抗肌球蛋白轻链的自身抗体，自身免疫反应可能参与心肌损伤和心室重构，影响心肌梗死患者的心功能和预后。     

Pathological study on right atrium myocardium in rheumatic heart dis-ease patients with atrial fibrillation

Objective: To study the pathological basis of right atrial fibrillation in rheumatic heart disease (RHD) patients with atrial fibrillation (AF). Methods: Twenty-nine patients with mitral valve replacement of RHD were divided into AF group (n=13) and sinus rhythm group (SN group) (n=16). There was no significant statistical difference in clinical factors between the 2 groups. During the operation of valve replace-ment, the samples of right atrial appendages were taken and the qualitative and quantitative study were made by light microscopy and electron microscopy. Results: (1) Light microscope: The interstitial fibrosis and the arrangement of myocardium was more disordered in AF group than that in SN group. However, no statistic difference was found in interstitial fibrosis and cellar hypertrophy degree between the 2 groups. (2) Electron microscope: Mitochondrial crosta broke and dissolved obviously in AF group. The mitochondrial volume in AF group was smaller than that in SN group. Volume density, average area and average perimeter in AF group were less than that in SN group ; specific surface in AF group was bigger than that in SN group. There was significant difference of above factors between the 2 groups; but there was no significant difference of surface density and numerical density on area in the 2 groups. Volume density of myofibril in AF group and SN group were less than that in SN group. (3)Split of Intercalated disc(ID) gap was found in AF group, and there was marrowing and floccular substance in ID gap. Conclusion : There were significant differences in the pathological changes of right atrial myocardium between AF and SN with RHD, these changes may be the im-portant pathological basis for RA fibrillation of AF patients with RHD.     

98例老年人风湿性心脏病的临床分析

分析98例老年人风湿性心脏病患者,其临床特点为:多无风湿活动史;临床症状不典型;合并症多见,并对发病率及治疗中需注意的一些问题进行了讨论。     

风心病中肥大细胞与心肌纤维化的关系

目的探讨风心病心肌中肥大细胞与心肌纤维化的关系. 方法用甲苯胺兰染色检测患者心肌组织中肥大细胞数量,用HE, Messon染色检测心肌纤维化面积,用免疫组化法检测PCNA, Ⅰ, Ⅲ型胶原表达量,并将结果进行相关性分析. 结果风心病心肌组织中心肌纤维化明显增加,且与PCNA表达量呈明显正相关(r=0.857, P<0.001). 肥大细胞数量在实验组较正常对照组明显增多,其数量与心肌组织中Ⅰ, Ⅲ型胶原表达量呈正相关(rⅠ=0.797, rⅢ=0.851, P<0.01). 结论风心病心肌组织中肥大细胞参与了胶原合成及代谢,检测肥大细胞数可间接反映胶原增生状态.     

厄贝沙坦联合雷米普利在风湿性心脏病慢性心力衰竭患者中的作用

目的:观察厄贝沙坦联合雷米普利在风湿性心脏病慢性心力衰竭患者中的作用.方法:120例风心瓣膜置换术后慢性心力衰竭患者随机分为试验组(60例)和对照组(60例).所有患者常规给予雷米普利5 mg,1/d治疗,试验组加用厄贝沙坦150mg,1/d.随访6个月,观察指标为心功能(纽约心脏协会,NYHA)分级、6 min步行实验、超声心动图各参数.结果:治疗6个月后,试验组较对照组心功能分级、6 min步行实验、超声心动图各项指标(左室舒张末期内径、左室收缩末期内径、左室射血分数、短轴缩短率)均改善明显(P<0.05).结论:厄贝沙坦联合雷米普利可显著改善风心慢性心力衰竭患者心功能、逆转心室重塑.     

脂质过氧化对培养心肌细胞肌球蛋白轻链磷酸化系统的影响

应用氢过氧化枯烯（ＣＨＰＯ）作为机体产生自由基的引发剂，作用于培养的心肌细胞，激起和促使细胞遭受过氧化损伤，同时使用硒（Ｓｅ）、维生素Ｅ（ＶＥ）等抗自由基物质，观察细胞中肌球蛋白轻链磷酸化系统的变化。结果表明，ＣＨＰＯ引发的自由基以及脂质过氧化反应，造成肌球蛋白轻链激酶（ＭＬＣＫ）和ＡＴＰ酶活性显著下降，Ｓｅ、ＶＥ以及二者联合应用，可使心肌细胞抗自由基损伤的能力极大增强，ＭＬＣＫ和ＡＴＰ酶活性都有不同程度的提高。提示：ＣＨＰＯ引发的自由基已造成了对心肌细胞肌球蛋白磷酸化系统的损害，Ｓｅ和ＶＥ的应用，对保护肌球蛋白分子的完整结构和其生化功能起着重要作用。     

体外循环心脏瓣膜置换术对风湿性心脏病患者T淋巴细胞主要免疫表型的影响

目的观察风湿性心脏病(RHD)患者在体外循环(ECC)心脏瓣膜置换术前、后细胞免疫功能的变化。方法用流式细胞仪检测28例ECC瓣膜置换术RHD患者(RHD组,其中单瓣组15例,双瓣组13例)和20例非体外循环冠状动脉搭桥术患者(对照组)术前、术毕及术后第1、3、5、8天外周血CD3+、CD3+/CD4+、CD3+/CD8+T细胞、NK细胞(CD3-/CD16+56+)、CD3+CD4-CD8-双阴性T细胞的水平。结果 RHD组患者与术前比较,术后CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、NK细胞计数明显降低(P<0.05),CD8+、CD3+CD4-CD8-计数明显升高(P<0.05)。双瓣组的上述指标波动明显大于单瓣组。与对照组比较,术后RHD组患者的CD3+、CD4+和CD4+/CD8+T细胞计数明显下降(P<0.05),而CD8+和CD3+CD4-CD8-计数明显升高(P<0.05)。对照组NK细胞在术前、术后无明显变化(P>0.05)。结论 ECC瓣膜置换术可使RHD患者的细胞免疫功能受到明显的抑制。     

地氟烷和异氟烷对风心病患者循环功能影响的比较

目的：观察和比较地氟烷和异氟烷对风心病患者循环功能的影响。方法：２０例风湿心瓣膜置换患者随机与分成两组，每例在麻醉诱导前局麻下作桡动脉穿刺和基内静脉穿刺放置漂浮导管备测循环功能指标。用咪达唑仓０．１５ｍｇ／ｋｇ、芬太尼１０μｇ／ｋｇ，维库省铵８ｍｇ静脉注射麻醉诱导，其后两组分别吸入１．０ＭＡＣ地氟烷和１．０ＭＡＣ异烷，利用ＨＰ多功能监护仪观察两组在吸入地氟烷或异氟烷前后循环功能的改变。结果：两组在     

风湿性心脏病二尖瓣狭窄患者健康相关生存质量的研究

目的 探讨与评价风湿性心脏病二尖瓣狭窄（ＭＳ）患者的健康相关生存质量（ＨＲＱＯＬ）,为全面评ＭＳ球囊成形术（ＰＴＭＶ）治疗效果提供相应的依据。方法 应用ＳＦ－３６生存质量表对９０例ＭＳ患者及９０健康者财期横断面调查与对比,并用受试者特征曲线（ＲＯＣ）确定ＨＲＱＯＬ最佳诊断参考值。然后对治疗组采用自身前后对照设计,经ＰＴＭＶ治疗三个月后,分析比较了ＨＲＱＯＬ与治疗效果之间的关系。结果 （１）ＭＳ患者     

风湿性心脏病患者能量、能量效率与左室收缩功能关系的研究

目的　探讨风湿性心脏病 (RHD)患者能量 (E)、能量效率 (EE)与左室收缩功能的关系。方法　应用超声心动图检测 5 8例RHD患者左室收缩功能 ,根据相应公式计算出E、EE ,并与 45例正常对照组进行比较 ,了解RHD患者E、EE与左室收缩功能的关系。结果　与对照组比较 ,RHD患者E随心功能变化而改变 ,有显著性差异 (P <0 0 5 ) ;EE则明显降低(P <0 0 5 )。结论　RHD患者E、EE与左室收缩功能密切相关     

门冬氨酸钾镁对风湿性心脏病患者瓣膜置换术后心律失常和心功能的改善

目的 观察门冬氨酸钾镁对风湿性心脏病患者瓣膜置换术后心律失常和心功能的改善.方法 将280例风湿性心脏病患者按随机表随机分为2组,治疗组155例,对照组125例,2组在性别、年龄及病因等方面无差异(P>0.05).治疗组给予门冬氨酸钾镁40 ml,静脉滴注,每日1次;对照组常规治疗.同时保持两组患者每天出入最相当,动态监测血清钾、镁浓度.观察患者心律失常发生率,以及心功能的变化.结果 手术后的第1天和第2大,治疗组的血清钾、镁浓度高于对照组(P<0.05).治疗组术后14 d的心脏每搏输出量、心输出量和射血分数高于对照组(P<0.05);而左室舒张末内径无差异(P>O.05).治疗组术后3 d心律失常发牛率小于对照组(P<0.05).治疗组频发室早、房颤和室上速的发生牢低于对照组(P相似文献