三氧化二砷对人卵巢癌细胞株SKOV3 细胞增殖抑制的影响

 目的 观察As₂O₃对人卵巢癌细胞株SKOV3体外生长的影响。方法 采用MTT比色法，测定不同浓度As₂O₃对SKOV3细胞生长的抑制作用，并绘制浓度一抑制率量效曲线；用倒置显微镜及透射电镜观察药物作用后SKOV3细胞形态变化；流式细胞仪检测细胞周期变化。结果 As₂O₃对SKOV3有明显抑制作用，且具有浓度和时间依赖性。72h时As₂O₃的IC50为4．67μM。As₂O₃ 1．0～4．0μM作用于SKOV3细胞在24～72h后均出现G2／M期阻滞，以48h最明显。As₂O₃ 2．0μM作用24h、48h后流式细胞仪检测SKOV3细胞的凋亡率分别为3．68％、6．66％。倒置显微镜和透射电镜均观察到用药后凋亡细胞典型的形态学特征。结论 As₂O₃对卵巢癌SKOV3细胞的生长有明显的抑制作用，并可诱导SKOV3细胞周期阻滞及细胞凋亡。     

三氧化二砷诱导鼻咽癌CNE1细胞凋亡及其作用机制的实验研究

 目的研究三氧化二砷（As₂O₃）诱导人鼻咽癌细胞株凋亡作用及其相关机制。方法采用流式细胞术，电镜、TUNEL方法检测As₂O₃诱导CNE1细胞凋亡作用，免疫组织化学法检测As₂O₃对CNE1细胞p53、bcl-2和bax蛋白表达的影响。结果经As₂O₃处理的CNE1细胞发生凋亡，表现为FCM可检测到“亚二倍体峰”，形态学上可见核固缩，染色质边集，凋亡小体形成等改变；TUNEL法可检测到细胞内呈棕色颗粒的凋亡细胞，随着药物浓度升高，凋亡细胞发生率逐渐增多，As₂O₃目浓度为0．5mg／L、1．0mg／L和2．0mg／L作用48h后，CNE1细胞的凋亡指数分别为2．66±0．64、8．15±0．96和11．59±0．68，显著高于非药物处理组（0．43±0．43，P〈0．05）。经As2O3处理的CNE1细胞内p53和bax蛋白表达较对照组明显增加，与凋亡指数呈正相关关系（r=0．554，P=0．011；r=0．891，P=0．000…）；p53和bax蛋白表达也呈正相关关系（r=0．626，P=0．003）。结论As₂O₃在体外可诱导鼻咽癌CNE1细胞凋亡，其机制可能与上调p53、bax基因表达有关。     

三氧化二砷抑制人鼻咽癌细胞侵袭的体外实验研究

 目的 观察三氧化二砷(As₂O₃)对人鼻咽癌细胞株HNEl-LMPl侵袭、转移的影响。方法 鼻咽癌细胞在含3μmol／L的As₂O₃培养基中培养48小时。然后在无含砷的培养基中继续培养48小时后，收集此时间点贴壁的细胞作为研究对象；用细胞-基质黏附实验、细胞运动实验和肿瘤细胞重组基底膜侵袭实验检测As₂O₃对HNEl-LMPl细胞黏附、运动及侵袭能力的影响；用激光共聚焦的方法检测EB病毒编码的潜伏膜蛋白1(LMPl)的表达情况。结果 肿瘤细胞-基质黏附实验结果显示，经As₂O₃处理的HNEl-LMPl细胞，其黏附能力(平均吸光度为0．524±0．09)低于对照组细胞(平均吸光度为0．665±0．14)，两者相比有差异(P<0．05)。运动实验和肿瘤细胞重组基底膜侵袭结果均显示，经As₂O₃处理后，穿过游离的聚乙烯吡咯烷酮膜(PVP-F)的肿瘤细胞数明显减少(P<0.01)，同时As₂O₃能够下调LMPl的表达。结论As₂O₃具有抗人鼻咽癌细胞株转移的潜力，其机制可能与抑制LMPl的表达相关。     

微缺氧对三氧化二砷抑制胃癌细胞SGC-7901生长的影响

 目的 常氧和微缺氧条件下三氧化二砷（As₂O₃）注射液对人胃癌细胞株SGC-7901生长抑制作用的对比研究。方法 运用产气袋法（GasPaK）制造微缺氧条件，实验分为微缺氧组和对照组，用MTT法检测药物效应。流式细胞仪分析细胞周期和细胞凋亡。结果 不同浓度As₂O₃对人胃癌细胞株SGC-7901生长有抑制作用，并呈剂量一效应关系。细胞滞留于G2／M及S期。微缺氧条件下As₂O₃对人胃癌细胞株SGC-7901生长抑制作用下降（P〈0．01）。凋亡细胞百分比下降。结论 As₂O₃对人胃癌细胞生长有抑制作用，但对缺氧胃癌细胞的抑制作用下降，单用As₂O₃治疗胃癌存在一定的局限性。     

三氧化二砷诱导肺癌细胞凋亡的体外实验研究

 目的　观察三氧化二砷体外作用于肺癌 A549细胞株所致的凋亡作用及形态学改变 ;方法　采用 MTT法、透射电镜法及 TUNEL荧光染色法观察不同浓度 As₂ O₃ 对肺癌 A549细胞株的作用效果 ;结果　 1及 2 .5μmol/ L As₂ O₃ 对肺癌 A549细胞株 2 4 h的凋亡诱导率为 :2 2 .80 %及 30 .1 5% ,48h的凋亡诱导率为 :41 .75%及 60 .0 4 % ,72 h的凋亡诱导率为 :56.38%及 73.30 % ,均分别高于相应时间点的 5- FU的作用 ,光镜下观察可见凋亡细胞体积缩小变圆 ,TUNEL染色后在免疫荧光显微镜下观察可见凋亡的细胞呈荧光染色阳性 ;结论　 As₂ O₃ 在体外可明显有效地诱导 A549细胞株凋亡.     

三氧化二砷逆转人肺腺癌A549/ R 细胞耐药及对GSTs 表达的影响

 目的 探讨三氧化二砷（As₂O₃）对人肺腺癌A549／R细胞耐药的逆转及谷胱甘肽S转移酶（GSTs）表达的变化。方法 分别采用生化方法及RT-PCR方法检测GSTs活性及GST-πmRNA表达水平的变化。结果 0．15μmol／L As2O3可使A549／R细胞内阿霉素（ADM）浓度增加，其IC50值由原来的0．495μmol／L降低至0．217μmol／L，逆转倍数为2．3倍。耐药细胞中GSTs活性增高，GST-πmRNA呈过表达状态。不同浓度的As2O3作用后，GSTs活性下降（P〈0．05），GST-πmRNA表达水平下调，呈浓度依赖性变化。结论 As₂O₃可部分逆转A549／R细胞对ADM的耐药性，GST-π的改变参与其耐药机制。     

As2 O3对人胃癌BGC-823 细胞端粒酶的影响

 目的 观察三氧化二砷（As₂ O₃）对人胃癌BGC-823细胞端粒酶活性及端粒酶逆转录酶基因转录的影响。方法 用不同浓度的三氧化二砷作用于人胃癌BGC-823细胞，通过MTT法测定细胞活力；流式细胞术检测细胞凋亡变化；TRAP PCR ELIsA方法检测细胞端粒酶活性的变化；RT-PCR半定量方法检测细胞端粒酶hTEI汀基因mRNA的转录水平。结果 三氧化二砷可明显抑制人胃癌BGC-823细胞的生长，诱导细胞发生凋亡，抑制作用随三氧化二砷浓度的升高及作用时间的延长而增强。细胞的端粒酶活性明显下降，细胞hTERT基因的转录表达显著抑制。BGC-823细胞端粒酶活性的下调与As₂ O₃作用时间和浓度有关，呈现明显的时间-剂量效应关系。结论 As₂ O₃能够抑制人胃癌BGC-823细胞的增殖、促使细胞凋亡、抑制细胞的端粒酶活性。As₂ O₃是一种良好的端粒酶抑制剂，在肿瘤的治疗中具有一定应用价值。     

As2S2对人卵巢癌耐药株C13K/DDP细胞增殖和凋亡的作用

 目的：研究As₂S₂对卵巢癌耐药株C13K/DDP细胞增殖抑制和诱导凋亡的作用。方法：以 不同浓度(4、6、8、10μmol/L)的As2S2,分三个时间点(24、48、72h)干预C13K/DDP细胞,采用 四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测As2S2对C13K/DDP细胞的增殖抑制率;流式细胞仪(FCM)检测细胞凋 亡率;Western blot检测BCL-2、BAX、AKT的表达。结果：MTT结果显示不同浓度(4、6、8、10 μmol/L)的As₂S₂作用C13K/DDP细胞后,与DDP组相比其增殖受到抑制,作用呈明显的时效和量效 关系,差异有统计学意义(P<0.01);流式细胞仪的结果显示6、8μmol/L As₂S₂诱导细胞的24h凋 亡率分别为(16.05 ±2）%、( 22.30±3）%,DDP组为(9.45 ±2)%,对照组为( 7.82±1.2)% ;6、8μmol/L As₂S₂诱导细胞48h凋亡率分别为(28.94 ±1.8）%、(37.85 ±3）%,DDP组为 （14.74±3.2）%,对照组为( 9.80±2.6）%,各组比较,差异有统计学意义(P<0.05);Western blot结果显示BCL-2、AKT表达下调,BAX表达明显上调。结论：As₂S₂对人卵巢癌耐药株 C13K/DDP细胞具有增殖抑制和诱导凋亡的作用,可能与BCL-2下调、BAX上调或AKT下调有关。     

蛋白酶体抑制剂PS-341 诱导U266 细胞凋亡与胞浆内[Ca 2+]变化的关系

 目的 探讨蛋白酶体抑制剂PS-341（Bortezomib）诱导骨髓瘤细胞株U266细胞凋亡时对其胞浆内[Ca²⁺]（[Ca²⁺]i）的影响。方法 以浓度梯度的PS-341干预U266细胞4h后收集,荧光显微镜观察细胞凋亡,Annexin V-FITC／PI双参数流式细胞术（FCM）检测细胞凋亡,Fluo-3／AM荧光素标记FCM检测[Ca²⁺]i。结果 （1）PS-341作用U266细胞4h后荧光显微镜观察到凋亡细胞数随浓度增加而增多;（2）FCM检测凋亡细胞的比例分别为0．56％、7．71％、19．84％、31．10％、40．72％,与PS-341浓度成正比;（3）PS-341作用后U266细胞[Ca²⁺]i均值分别为403．65nmol／L、418．20nmol／L、378．65nmol／L、356．36nmol／L、349．21nmol／L;（4）PS-341诱导U266细胞凋亡时伴随[Ca²⁺]i的改变,浓度〉50nmol／L时诱导的细胞凋亡伴随[Ca²⁺]i下降。结论 蛋白酶体抑制荆PS-341诱导骨髓瘤细胞凋亡呈浓度依赖性;PS-341浓度〉50nmol／L时下调[Ca²⁺]i,并由此发挥抗骨髓瘤细胞作用。     

三氧化二砷诱导人肝癌细胞株SMMC-7721凋亡的实验研究

 MTT法、AO/EB荧光染色法和流式细胞仪分析法观察As₂O₃对人肝癌细胞林SMMC-7721的作用.结果发现:As₂O₃可显著抑制SMMC-7721细胞的生长;经药物作用后,AO/EB染色时,肝癌细胞在显微镜下呈现典型的凋亡形态学改变;在流式细胞仪上可见亚G_l峰;凋亡呈剂量,时间依赖性特点;As₂O₃使细胞周期阻止于G₂/M期.以上表明:As₂O₃可诱导人肝癌细胞株凋亡,可望为临床应用砷剂治疗肝癌提供实验依据.     

钙通道阻滞剂对体外培养的脑膜瘤细胞信号转导及增殖的影响

 目的 观察维拉帕米对体外培养的脑膜瘤细胞信号转导及增殖的影响并探讨其作用机制。方法 采用荧光光度计检测脑膜瘤细胞内游离钙离子浓度([Ca²⁺]i)水平，结合细胞计数方法测定细胞的增殖情况。结果 1μmol／L维拉帕米能明显抑制血清诱导的脑膜瘤细胞的增殖(P<0．01)；细胞数为对照组的80％。10％的血清作用于脑膜瘤细胞以后，[Ca²⁺]i迅速升高到(435．3±34．9)μmol／L(P<0．01)。用维拉帕米预处理后，[Ca²⁺]i为221．1±26．1，升高辐度明显降低，(P<0．01)。结论 维拉帕米能抑制血清诱导的体外培养的脑膜瘤细胞增殖信号的转导，其作用机制与降低了[Ca²⁺]i增加有关。     

鞣酸对LLC/cMOAT细胞多药耐药性的逆转机制

目的本研究探讨鞣酸(Tannic acid,TA)对LLC/cMOAT细胞多药耐药性的逆转作用及其可能机制。方法采用MTT法检测LLC/CMV和LLC/cMOAT细胞对各种化疗药物的敏感性以及在不同浓度的TA处理下细胞的存活状态;确定TA的非细胞毒性浓度以及在该浓度下各梯度浓度处理时细胞的存活率;采用流式细胞仪技术检测使用非细胞毒性浓度的TA处理前后LLC/cMOAT细胞内柔红霉素(DNR)浓度变化、细胞周期阻滞及对凋亡的影响。结果LLC/cMOAT细胞对羟基喜树碱(CPT-11),阿霉素(ADM),顺铂(DDP)和长春新碱(VCR)均有不同程度的耐药,其耐药倍数分别是2.08、3.02、4.01和9.31,对依托泊苷(VP-16)、紫衫醇(TAX)无明显耐药,10.0μmol/L浓度以下的TA对LLC/CMV和LLC/cMOAT细胞无明显细胞毒性,2.5、5.0、10.0μmol/L浓度的TA能显著降低LLC/cMOAT细胞的IC₅₀(P<0.05),其逆转倍数分别为5.09、6.33、7.76倍;细胞内DNR荧光强度随着TA浓度的增高而明显增强;TA作用细胞12h可使G₁期细胞数百分比由(46.35±3.74) %增至(66. 43 ±5. 87) % , 阻滞细胞于G₁期; TA 与VCR 联合处理细胞24 h 和48 h 时凋亡率分别为12. 1 %和19. 0 % ,与处理前(1. 65 %) 相比提高明显;使用2. 5μmol/ L 、5.0μmol/ L 和10. 0μmol/ L 浓度的TA 与VCR 共同处理细胞24 h 后,凋亡率由处理前的4. 96 %分别提高到11. 2 %、17. 9 %和25. 1 %。结论　TA能部分逆转LLC/ cMOAT 细胞的多药耐药,显著提高耐药细胞内DNR 荧光强度并呈浓度依赖性,阻滞细胞周期于G₁ 期,并可诱导细胞凋亡,呈时间、剂量依赖性,其机制可能与抑制化疗药物外排、增加细胞内药物浓度以及诱导细胞凋亡有关。     

Sister chromatid exchanges in Chinese hamster V79 cells treated with the trivalent chromium compounds chromic chloride and chromic oxide

The induction of sister chromatid exchanges (SCEs) in Chinesehamster V79 cells exposed to soluble CrCl₃ and insoluble Cr₂O₃,compounds of trivalent chromium (Cr³⁺), was determined. Theirability to induce SCEs was compared with those of three hexavalentchromium (Cr⁶⁺) compounds: K₂CrO₄, Na₂CrO₄ and Na₂Cr₂O₇. Boththe delay in progression through the cell cycle induced by Cr³⁺compounds and the SCE frequencies in the delayed cells werealso evaluated. The exposure for 28 h to CrCl₃ and Cr₂O₃ atconcentrations of 9.7–39 µg and of 34–136fig of Cr³⁺ per ml, respectively, induced a statistically significant(p < 0.001) dose-dependent increase in SCEs up to 1.9–fold(CrCl₃ and 4-fold (Cr₂Cl₃) over control levels. Compared withthe effective concentrations of Cr⁶⁺ compounds, which producedup to 4-fold increase of SCEs, inducing concentrations of CrCl₃and Cr₂O₃ were 300- and 1000-fold higher in terms of chromium.By prolongation of treatment time up to 48 h, a progressivedose- and time-related enhancement in SCE frequencies inducedby Cr³⁺ compounds in delayed cells was observed. Lower concentrationsof Cr₂O₃, without effect after 28 h of treatment, induced anincrease of SCEs by prolongation of exposure time.