肝细胞受体介导的基因治疗

肝脏是基因治疗的重要靶向器官,受体介导的基因转移方法能够借助于受体与配体的特异性结合将目的基因有效导入靶细胞,对肝脏疾病的治疗有其优越性。受体介导的复合物由目的DNA、配体及中介多价阳离子组成。复合物的大小、对溶酶体的抗性及其进入核内的数量均会影响目的基因的转导效率与表达水平。     

甲状腺激素调节靶基因转录的分子机制

甲状腺激素受体（TR）为配体依赖性转录因子。未结合T3的TR与辅阻遏因子等形成复合物，此复合物通过使局部的组蛋白去乙酰化而使局部染色质变得紧密，进而抑制靶基因的基础转录，结合了T3的TR与辅阻遏因子解离，转录恢复到基础水平，随后辅激活因子与结合了T3的TR形成复合物，此复合物通过使组蛋白乙酰化而使局部染色质变得松弛，进而激活靶基因的转录。辅激活因子复合物还能使RNA聚合酶稳定，从而促进转录。     

法尼酯衍生物X受体与肝纤维化

法尼酯衍生物X受体(FXR)是一种在肝肠系统等组织器官表达的胆汁酸受体,属于激素核受体超家族的一员,在胆汁酸代谢及胆固醇代谢中发挥重要作用.当FXR配体与FXR羧基末端配体结合区(LBD)直接结合后,核受体空间构象发生改变并与视黄醛衍生物受体(RXR)形成异源二聚体,最后与靶基因特定FXR DNA反应元件结合从而调节靶基因的转录.初级胆汁酸鹅脱氧胆酸是FXR最有效的配体,次级胆汁酸石胆酸和脱氧胆酸也可以激活FXR.目前还有合成FXR配体(如6-ECDCA、GW4064等),其与FXR结合力比天然配体强数倍.FXR的主要靶基因包括胆盐输出泵(BSEP)、小异源二聚体伴侣受体(SHP)等,FXR通过和这些基因启动子上的FXR反应元件(FXRE)结合从而调控这些基因的表达.但如胆固醇7α羟化酶(CYP7α1)等主要FXR调控基因的启动子序列中没有典型FXR结合反应序列,FXR则是间接通过诱导转录抑制因子SHP表达,然后SHP与CYP7α1启动子肝受体同源物1(LRH-1)形成抑制性复合物,从而阻断CYP7α1和其它LRH-1靶基因转录.由于FXR在胆汁酸及胆固醇代谢中的重要作用,这将使其和肝脏相关疾病关系日益受到关注[1,2].     

PPARγ基因转录与单核巨噬细胞来源的泡沫细胞形成

目的 :探讨PPARγ基因转录在动脉粥样病变局部的作用。方法 :观察动脉粥样硬化局部PPARγ基因表达与巨噬细胞来源的泡沫细胞、清道夫受体A(SRA)分布的关系 ;分析PPARγ配体对氧化低密度脂蛋白 (ox LDL)介导的巨噬细胞SRA、PPARγmRNA表达、肿瘤坏死因子α(TNF α)和基质金属蛋白酶 9(MMP 9)释放的影响。结果 :PPARγ基因表达与巨噬细胞来源的泡沫细胞、清道夫受体A(SRA)的分布相似 ;PPARγ配体在增加巨噬细胞PPARγmRNA表达的同时 ,显著抑制了ox LDL介导的巨噬细胞SRAmRNA表达和TNF α、MMP 9的释放。结论 :PPARγ基因激活可抑制巨噬细胞SRAmRNA表达及细胞因子释放     

胰岛素受体底物及其基因多态性与胰岛素抵抗

胰岛素受体底物(IRS)是胰岛素信息传递的重要介质。IRS-1主要介导胰岛素在外周组织的效应，调节β细胞分泌；IRS-2主要介导胰岛素在肝脏的作用，对β细胞发育有重要影响；IRS-3、IRS-4的作用尚存争论。IRS-1、IRS-2基因多态性可致肝脏、外周组织及β细胞胰岛素抵抗；IRS-3、IRS-4基因多态性尚缺乏相关的报道。     

SC:免疫球蛋白多聚体的受体

分泌成分(SC)是腺上皮细胞和某些动物肝细胞的受体,它能调节IgA和IgM的多聚体(pIgA和pIgM)向分泌液的输送.SC-pIgA系统是一种独特的受体一配体反应形式.受体与配体结合后,既不再循环,也不被降解,而是与配体形成复合物后被细胞分泌.SC已引起免疫学家和细胞生物学家的浓厚兴趣.小肠和结肠腺上皮细胞、胰胆管上皮及某些情况下的胃上皮细胞能合成SC.最近发现某些动物的肝细胞也有SC表达,SC并与血清IgA进入胆汁的量有关.因此,SC对胃肠和肝脏病学者也是一种重要分子.SC参与粘膜和肝脏免疫80～95%血清IgA是7S的IgA单体.哺     

结合珠蛋白基因多态性与糖尿病血管并发症的研究进展

结合珠蛋白(Hp)又称血红素结合蛋白、触珠蛋白,是肝脏合成的一种急性时相反应蛋白。Hp可以与游离血红蛋白(Hb)结合形成Hp-Hb复合物,通过巨噬细胞清道夫受体CD163介导的内吞作用进行降解,从而阻断血红蛋白诱导的氧化损伤。人类Hp有Hp1-1、Hp2-1、Hp2-2共3种基因型。研究显示,不同Hp基因型对糖尿病患者血管并发症的影响不尽相同。本文就Hp基因多态性与糖尿病血管并发症的相关研究作一综述。     

c-Jun氨基末端激酶信号转导途径与胰岛β细胞凋亡

甲状腺激素受体 (TR)为配体依赖性转录因子。未结合T3 的TR与辅阻遏因子等形成复合物 ,此复合物通过使局部的组蛋白去乙酰化而使局部染色质变得紧密 ,进而抑制靶基因的基础转录。结合了T3 的TR与辅阻遏因子解离 ,转录恢复到基础水平。随后辅激活因子与结合了T3 的TR形成复合物 ,此复合物通过使组蛋白乙酰化而使局部染色质变得松弛 ,进而激活靶基因的转录。辅激活因子复合物还能使RNA聚合酶稳定 ,从而促进转录     

FXR促进肝脏再生作用的研究进展

肝脏具有再生的能力是众所周知的,他在部分切除或损伤后通过代偿增生的方式能够实现自我再生.法尼酯X受体(farnesoid X receptor,FXR)是配体激活转录因子的核激素受体超家族中的一员,胆汁酸是FXR的内源性配体.作为一种代谢调节因子,FXR在调节胆汁酸、脂质和葡萄糖的代谢中起到了至关重要的作用.近来,研究发现胆汁酸与其受体FXR结合激活细胞间的信号转导对肝再生起重要作用,胆汁酸/FXR信号通路是正常肝再生所必需的.此外,FXR能促进肝脏损伤后的修复,且FXR的活化能够减轻年龄相关性的肝脏再生缺陷.这些新的发现提示FXR介导的胆汁酸信号在正常肝再生中是一个不可或缺的组成部分,同时也突出了FXR配体对促进部分肝移植或肝癌切除术后的肝脏再生的潜在应用.这篇综述概述了FXR的基本资料和对肝脏再生作用的研究进展.     

盐皮质激素受体拮抗剂的研究进展

<正>盐皮质激素(MC)受体(MR)有多重配体,其中包括醛固酮和皮质醇等,醛固酮是MC的代表,由球状带分泌,醛固酮可作用于肾远曲小管和集合管上皮细胞,当进入这两类细胞胞质后,与胞质内受体结合,形成激素-受体复合物,激素-受体复合物穿过核膜进入核内,通过基因调节机制,生成醛固酮诱导蛋白,该蛋白可能是基底侧膜上的钠泵,因而可加速细     

甲状腺激素调节靶基因转录的分子机制

甲状腺激素受体(TR)为配体依赖性转录因子.未结合T3的TR与辅阻遏因子等形成复合物,此复合物通过使局部的组蛋白去乙酰化而使局部染色质变得紧密,进而抑制靶基因的基础转录.结合了T3的TR与辅阻遏因子解离,转录恢复到基础水平.随后辅激活因子与结合了T3的TR形成复合物,此复合物通过使组蛋白乙酰化而使局部染色质变得松弛,进而激活靶基因的转录.辅激活因子复合物还能使RNA聚合酶稳定,从而促进转录.     

人生长激素和胰岛素样生长因子—Ⅰ：作用的分子机制

人生长激素（ｈＧＨ）与生长激素（ＧＨ）受体结合形成配体受体比为１：２的复合物，胞内酪氨酸激酶ＪＡＫ２激活，导致胞内底物经；磷酸化ＪＡＫ２引导转录的启动激活物ＳＴＡＴ９１和有线分裂原激活蛋白激酶（ＭＡＰ激光酶）磷酸化；激活的ＳＴＡＴ９１和ＭＡＰ激酶进入细胞核内，启动ＧＨ的目标基因转录。胰岛素样生长因子（ＩＧＦ）－Ｉ基因是ＧＨ最主要和最重要的目标基因。ＩＧＦ与ＩＧＦ－Ｉ受体结合后，启动两条信号传递锁链     

胰岛素受体底物及其基因多态性与胰岛素抵抗

胰岛素受体底物(IRS)是胰岛素信息传递的重要介质。IRS-1主要介导胰岛素在外周组织的效应,调节β细胞分泌;IRS-2主要介导胰岛素在肝脏的作用,对β细胞发育有重要影响;IRS-3、IRS-4的作用尚存争论。IRS-1、IRS-2基因多态性可致肝脏、外周组织及β细胞胰岛素抵抗;IRS-3、IRS-4基因多态性尚缺乏相关的报道。     

PPARs激动剂与胰岛素抵抗及治疗评价

过氧化物酶体增殖物激活受体（peroxisome proliferator—activated recepteoes，PPARs）是一种配体激活的与多种基因调节有关的核受体和转录因子，属于甾体激素核受体家族的成员，该家族成员还有甲状腺激素受体和雌激素受体。现已证实PPARs配体包括内源性脂肪酸及代谢产物、工业化学制剂和人工合成药物等多种不同的化合物。PPARs与其选择性配体结合后，PPARs转录活性被激活。PPARs与另一种核受体维甲酸X受体（RXRa）结合形成异质二聚体。此二聚体与PPARs靶基因上的PPAR反应元件（PPRE）结合从而调节靶基因的转录表达。近十年人们对PPARs相关的生物学反应、分子机制、配体种类、生理和病理作用的研究取得了长足的进步，PPARs家族广泛参与脂肪生成、脂肪代谢、胰岛素敏感性、葡萄糖代谢、炎症反应、血压调节、细胞生长和分化等多种生物学过程，并在某些人类疾病如代谢综合征的发病中起重要作用。     

转铁蛋白受体介导的自杀基因转移系统的建立及其体外抗瘤效应

目的 构建转铁蛋白受体介导的自杀基因系统并观察其对肝癌细胞的体外杀伤效应。方法 SPDP法制备抗转铁蛋白受体与多聚赖氯酸(PLL)的复合物并用分子筛层析纯化。根据DNA阻断试验结果，pEBAF／tk重组质粒与Ab-PLL按1：6混合使二者结合形成PEBAF／tk—Ab PLL复合物。将此复合物转入人肝癌细胞株SMMC7721、HepG2和肺癌细胞株A549，并以脂质体转移为对照。加入不同浓度的更昔洛韦(GCV)以观察细胞的自杀效应。结果 加入GCV后HepG2／tk的增殖受抑制最明显。100mg／L和1mg／L时抑制率分别为60．5％和24．3％。SMMC7721／tk受抑制较低，而A549的增殖不受抑制。结论 本基因治疗体系具仃很好的靶向性和杀肿瘤效果。     

不同注射途径对糖化多聚赖氨酸偶联的表达质粒在大鼠肝脏靶向分布表达的影响

目的：比较静脉注射途径和腹腔注射途径对糖化多聚赖氨酸(G-PLL)偶联的目的基因在肝脏靶向分布表达的影响。方法：将真核细胞表达质粒与G-PLL偶联成复合物．分别经尾静脉和腹腔注射导入大鼠体内，通过原位杂交和免疫组化法，观察目的基因在肝脏和其他脏器的分布表达。结果：运用G-PLL偶联的质粒DNA经两种途径导入体内24小时后均见明显表达，1周后逐渐下降，3周时仍有表达；均以肝脏为主要分布器官，但经静脉途径导入者，质粒DNA在肝脏中的分布表达高于经腹腔途径导入者。结论：经静脉途径导入的G—PLL／质粒DNA复合物在肝脏的靶向定位效果优于经腹腔途径导入者。     

糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体相关蛋白及其配体在肝脏疾病中的作用

糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体(GITR)属于肿瘤坏死因子受体家族,与其特异性配体GITRL结合后,所介导的下游信号既可以作为协同刺激分子,促进效应T淋巴细胞增殖与细胞因子分泌;还可以影响调节性T淋巴细胞增殖和抑制效应T淋巴细胞的功能,从而调控效应T淋巴细胞的炎症反应与杀伤肿瘤细胞的作用。GITRL主要表达于抗原递呈细胞且有胞内结构域,与GITR结合后,可以通过受体/配体逆向信号从而影响抗原递呈细胞的功能。在肝脏疾病中,GITRL/GITR信号不仅与肝移植术后和基因治疗中免疫排异反应有关,也与肿瘤免疫微环境形成、肿瘤的免疫逃逸有关。GITRL/GITR在其他肝脏疾病发生和进展中的作用仍有待进一步研究。     

阻断转化生长因子-β1信号传导治疗大鼠实验性肝纤维化

目的 观察腺病毒介导的反义Smad4基因阻断转化生长因子-β1(TGF-β1)信号传导后对肝纤维化的治疗作用。方法 将腺病毒介导的反义Smad4基因导入四氯化碳／乙醇诱导的大鼠纤维化肝脏，用RT-PCR及western方法观察Smad4的表达，并观察肝脏的病理变化和胶原表达。结果 纤维化肝脏中Smad4的表达较正常肝脏明显增强，Ⅰ型胶原增多。经转基因处理后大鼠纤维化肝脏中Smad4的表达明显弱于未治疗的纤维化肝脏，Ⅰ型胶原减少；且治疗组肝脏纤维间隔也明显减少，纤维化程度明显减轻。结论 腺病毒介导的反义Smad4基因能有效阻断TGF-β信号传导系统，减少细胞外基质的产生，从而减轻肝纤维化的程度。     

过氧化物酶体增生物激活受体的特性及其在多种疾病中的作用

过氧化物酶体增生物激活受体(peroxisomeproliferator activatedreceptors,PPARs)是一种配体活化的转录因子,有3种类型。配体与之结合后调节靶基因的转录,调控多种细胞功能和病理生理过程。1　PPAR受体PPAR属于核受体超家族的一员,和其相应的配体结合后调节相应靶基因的表达。目前确认的PPAR受体有3种:PPARα、PPARγ和PPARβ(也称为PPARδ)。其中,PPARγ又分为两个长度不等的亚型PPARγ1、PPARγ2 。肝脏、心脏和肾脏中富含PPARα,同时它在骨骼肌、脂肪组织、巨噬细胞和血管中也有表达。PPARγ同样表达于上述组织,但…     

经大鼠静脉和腹腔途径导入脂质体包埋质粒在肝脏靶向分布表达的影响

目的比较静脉途径和腹腔途径对脂质体包埋的目的基因在肝脏靶向分布表达的影响。方法将真核细胞表达质粒经脂质体包埋成复合物，分别经尾静脉注射和腹腔注射导入大鼠体内，通过原位杂交和免疫组化的方法观察目的基因在肝脏和其他脏器的分布表达。结果运用脂质体包埋的质粒ＤＮＡ经两种途径导入体内２４小时后均见明显表达，１周后逐渐下降，３周时仍有表达；均以肝脏为主要分布器官，但经静脉途径导入者，质粒ＤＮＡ在肝脏中的分布表达高于经腹腔途径导入者。结论经静脉途径导入的脂质体／质粒ＤＮＡ复合物在肝脏的靶向定位效果优于经腹腔途径的导入。