柱前衍生液相色谱法与柱后衍生液相色谱法测定疫苗中游离甲醛残留量的对比研究

目的:建立柱前衍生液相色谱法与柱后衍生液相色谱法测定疫苗中游离甲醛残留量,并考察2种方法测定结果的一致性程度。方法:柱前衍生液相色谱法色谱条件：岛津LC-20AT液相色谱仪(SPD-20A紫外检测器),采用Kromasil 100-5-C₁₈(250 mm×4.6 mm)色谱柱,流动相为60%乙腈溶液,流速0.8mL·min^-1,柱温40℃,测定波长360 nm。柱后衍生液相色谱法色谱条件：岛津LC-20AT液相色谱仪(SPD-M20A二极管阵列检测器和vector衍生装置),采用纳谱AQ-C₁₈(250 mm×4.6 mm)色谱柱,流动相为0.2%(V/V)磷酸溶液,流速1.0 mL·min^-1,柱温25℃,检测波长412 nm;衍生溶液为醋酸缓冲液,流速0.5 mL·min^-1,温度100℃。分别对2种方法的精密度、重复性、加样回收率等项目进行考察,并对测定结果进行显著性检验(F检验和t检验)。结果:柱前衍生液相色谱法线性范围为0.025～100μg·mL^-1     

柱前衍生-反相高效液相色谱法测定转移因子胶囊中游离氨基酸

目的用柱前衍生-反相高效液相色谱法测定转移因子胶囊中游离氨基酸的含量。方法采用二硝基氯苯(DNCB)为衍生试剂进行衍生,Waters Novapak C8(3.9 mm×150 mm,4μm)色谱柱分离,以乙腈-乙酸钠水溶液为流动相,梯度洗脱,检测波长360 nm,在65 min内,测定各氨基酸含量。结果回收率为97.5%~103.5%,RSD为0.7%~3.0%。结论DNCB柱前衍生-反相高效液相色谱法可测定转移因子胶囊中游离氨基酸的含量。     

柱前衍生-高效液相色谱法测定肠内营养剂中脯氨酸的含量

目的建立一种柱前衍生-高效液相色谱法测定肠内营养剂中脯氨酸的含量。方法以氯甲酸-9-芴基甲酯（FMOC-Cl）为衍生化试剂,色谱柱采用Agilent C₁₈（150 mm×4.6 mm,5.0μm）柱,流动相为乙腈-50 mmol·L^-1醋酸钠缓冲液（pH4.2）,梯度洗脱,流速为1.0 mL·min^-1,柱温30℃;FLD荧光检测,激发波长263 nm,发射波长315nm。待测肠内营养剂样品经10 mol·L^-1盐酸溶液溶解稀释后,超声提取,在室温条件下与衍生化试剂反应15 min,反应终止并取20μL进样分析。结果脯氨酸在质量浓度0.1～1 mg·L^-1内线性关系良好,r=0.999 6;平均回收率109.42%～112.72%,日间、日内精密度RSD均<7%;样品溶液在24 h内稳定。结论该方法灵敏、简便、专属性强,能对肠内营养剂中的脯氨酸进行准确的定量分析,并能避免制剂中其他氨基酸组分的干扰。     

柱前衍生高效液相色谱法测定胎盘多肽注射液中的氨基酸

目的建立柱前衍生-高效液相色谱法测定胎盘多肽注射液中游离氨基酸和水解后总氨基酸的方法。方法以α-氨基丁酸为内标,以6-氨基喹啉基-N-羟基琥珀酰亚氨基甲酸酯(AQC)为柱前衍生化试剂,采用KromasilC18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,140 mmol/L醋酸铵缓冲液(pH 5.10)和57%乙腈溶液为流动相进行梯度洗脱,检测波长为248 nm,同时测定胎盘多肽注射液中21种游离氨基酸和水解后氨基酸含量。结果该方法重现性好,精密度高,各氨基酸浓度在0.005～0.50 mmol/L范围内线性关系良好;各氨基酸检出限≤1.57 ng。结论建立的AQC柱前衍生-高效液相色谱法可用于检测胎盘多肽注射液中氨基酸的含量,测定的结果为胎盘多肽注射液的质量研究和评价提供了依据。     

Captiva EMR-Lipid技术结合UPLC-Q-TOF/MS测定压片糖果中非法添加的美托拉宗

目的 建立一种超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(UPLC-QTOF/MS)分析方法对压片糖果中的非法添加药物美托拉宗进行快速筛查与定量检测。方法 使用乙腈提取待测组分,Captiva EMR-Lipid净化柱进行净化,经Agilent RRHD Eclipse Plus C₁₈(100 mm×2.1 mm,1.8μm)色谱柱进行分离,运用UPLC-Q-TOF/MS的Targeted MS/MS模式进行检测分析。结果 美托拉宗在浓度范围50～1 000 ng·mL^-1内线性良好(r=0.999 0);检测限为1.0μg·g^-1;定量限为2.5μg·g^-1,平均回收率为98.15%,RSD为2.2%(n=18)。结论 该方法具有操作简易快速、定性定量准确等特点,能应用于日常样品的检验检测。     

AQC柱前衍生高效液相色谱法测定胃乐宁片中游离氨基酸

目的:建立柱前衍生高效液相色谱法测定胃乐宁片中各种游离氨基酸的方法.方法:以α-氨基丁酸为内标,以6-氨基喹啉基-N-羟基琥珀酰亚氨基甲酸酯(AQC)为柱前衍生化试荆,采用Kromasil C(18)(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,醋酸铵缓冲液(pH5.10)和57%乙腈水溶液为流动相,梯度洗脱,检测波长为2...     

HPLC测定转移因子注射液中游离氨基酸含量探讨

目的探讨转移因子注射液中游离氨基酸含量的测定方法。方法采用高效液相色谱（HPLC）法进行含量测定,色谱柱为Diamonsil C18（250.0 mm×4.6 mm,5μm）;检测波长：360 nm;进样量：20μL;柱温：（40±1）℃,流速：1.0mL/min;梯度洗脱;流动相：A液为0.1%三氟乙酸,B液为0.1%三氟乙酸乙腈,用0.45μm滤膜过滤并脱气,2,4-二硝基氟苯柱前衍生,梯度洗脱。结果游离氨基酸面积线性关系良好,r^2=0.997 7,相对标准偏差为0.6%。结论 HPLC法测定转移因子注射液中游离氨基酸含量简便、快捷、准确,值得推广应用。     

UPLC法测定人血浆中卡马西平的游离浓度

目的 建立一种测定人血浆中卡马西平游离浓度的中空纤维离心超滤(HFCF-UF)-超高效液相色谱(UPLC)法.方法 血浆样本经中空纤维离心超滤技术预处理.色谱柱:Waters UPLC BEH C18柱(50.0 mm×2.1 mm,1.7μm),流动相:乙腈-水=35:65,流速:0.2 mL·min-1,柱温:30...     

HPLC法测定L-肌肽中的游离氨基酸的含量

目的采用柱前衍生高效液相色谱法对L-肌肽原料药中的游离氨基酸进行测定。方法采用异硫氰酸苯酯(phenyl isothiocyanate,PITC)柱前衍生高效液相色谱法,使L-肌肽中游离的β-丙氨酸和L-组氨酸衍生物达到完全分离,并测定其含量。色谱柱为DiamonsilTM C18(200 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.05 mol.L-1醋酸钠溶液(体积比为13∶87),流速为1.0 mL.min-1,检测波长为254 nm,柱温为35℃。结果HPLC法测定β-丙氨酸和L-组氨酸的线性范围分别为2.01～20.10 mg.L-1(r=0.999 7)和2.00～20.00 mg.L-1(r=0.999 3);平均回收率分别为110.6%和98.2%。结论HPLC法无需专业的氨基酸分析仪,可用于L-肌肽中游离氨基酸的检查。     

CPU-0213原料药的含量测定

目的研究CPU0213含量测定的紫外分光光度法及反相高效液相色谱法。方法紫外分光光度法,检测波长258nm。高效液相色谱法,色谱柱汉邦ODS柱(4.6mm×150mm,5μm);流动相:甲醇醋酸醋酸钠缓冲液(pH3.6)(84∶16);检测波长258nm。结果紫外分光光度法,含量在2.52～20.16μg·ml-1浓度范围内,符合比尔定律。高效液相色谱法,在2.52～20.16μg·ml-1峰面积与浓度呈线性关系,r=0.9999。结论两种方法均能很好地进行CPU0213含量测定,测定结果基本一致。     

HPLC—ELSD法测定疏血通注射液中17种未衍生氨基酸含量

目的:建立高效液相色谱-蒸发光散射检测法(HPLC-ELSD),直接测定疏血通注射液中17种未衍生氨基酸含量的方法。方法:以异亮氨酸等氨基酸为标准品;色谱柱:Prevail~(TM) C_(18)(4.6mm×250mm,5μm);流动相A:乙腈,流动相B:5.0mmol·L~(-1)七氟丁酸的0.7%三氟醋酸溶液,流动相A与B比例:0min为0∶100,5min为0∶100,8min为15∶85,25min为35∶65;漂移管温度:115℃;气体流量:2.5L·min~(-1);流速:0.8mL·min~(-1);柱温:35℃;进样量:10μL。结果:在25min内即可完成对疏血通注射液中17种氨基酸的分离测定,氨基酸质量浓度0.071～2.285g·L~(-1)时,其对数值与峰面积对数值线性关系良好,17种氨基酸的加样回收率为92.9%～105.1%,信噪比为3时,异亮氨酸检出限为20mg·L~(-1)。结论:该法不需要专门的氨基酸分析仪和衍生化氨基酸,操作简便,有足够的灵敏度,结果准确可靠。     

鹿肉酶水解液中游离氨基酸的高效液相色谱分析

目的应用高效液相色谱法对鹿肉酶水解液中游离氨基酸进行检测。方法以AQC为衍生化试剂,采用柱前衍生化技术、紫外检测考察了氨基酸衍生和液相分离过程中的各种影响因素,检测鹿肉酶水解液中各种游离氨基酸含量。结果鹿肉酶水解液中蛋白质含量为83.2 8% ,总游离氨基酸含量为4 8.79mg/g。结论柱前衍生高效液相色谱法可用于检测鹿肉酶水解液中游离氨基酸含量,此法可为鹿肉的综合利用提供依据     

柱前衍生化方法测定L-鸟氨酸盐酸盐的有关物质

目的：采用9-芴甲氧羰酰氯（FMOC-Cl）为柱前衍生化试剂,建立FMOC-Cl柱前衍生化反相高效液相色谱法测定L-鸟氨酸盐酸盐的有关物质。方法：采用Agilent Extend C18（250 mm×4.6 mm,5μm）色谱柱,醋酸盐缓冲溶液（0.1 mol·L-1醋酸铵,冰醋酸调节pH至5.0）-乙腈为流动相,梯度程序洗脱,流速：1 mL·min-1,检测波长：265 nm,柱温：35℃,测定L-鸟氨酸盐酸盐中的有关物质。衍生化方法与条件：需衍生化样品与0.05 mol·L-1硼砂缓冲液和8 mg·mL-1 FMOC-Cl乙腈溶液（v/v,1∶3∶3）室温反应20 min后正己烷萃取2次,4 mol·L-1盐酸溶液调节pH至3~4。结果：该品及其潜在的12种氨基酸类有关物质衍生物色谱分离度良好;测得各氨基酸浓度在1.0~20μg·mL-1范围内,线性关系良好,r均大于0.9995,加样回收率和精密度结果均良好。结论：该方法专属性好、准确度高,适用于该品有关物质的检测。     

鸡蛋中酰胺醇类药物及其代谢物残留检测超高效液相色谱-串联质谱法建立

目的:建立超高效液相色谱-串联质谱法同时检测鸡蛋中氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考及其代谢物氟苯尼考胺残留的方法,可用于鸡蛋中酰胺醇类药物及其代谢物的残留检测。方法:样品经氨水碱化乙酸乙酯提取,正己烷除脂后,以Waters BEH C₁₈色谱柱(50 mm×2.1 mm, 1.7μm)进行分离,乙腈-水为流动相梯度洗脱,采用正负离子分段扫描和多反应监测模式(MRM)检测,内标法定量。结果:氯霉素(CAP)、氟苯尼考(FF)、氟苯尼考胺(FFA)在0.5～200 ng·mL^-1、甲砜霉素(TAP)在2.5～1 000 ng·mL^-1内呈现良好的线性关系,相关系数r均大于0.998。CAP、FF和FFA的检测限为0.05μg·kg^-1,定量限为0.1μg·kg^-1;TAP的检测限为0.15μg·kg^-1,定量限为0.4μg·kg^-1。CAP、FF和FFA质量浓度在0.2～10μg·kg^-1浓度下及TAP在1～50μg·kg...     

柱前衍生UPLC法测定甜瓜籽中13种游离氨基酸的含量

目的测定黑龙江产地甜瓜籽中13种氨基酸的含量。方法采用异硫氰酸苯酯(phenyl isothiocyanate,PITC)为衍生试剂进行衍生。色谱柱为Shim-pack XR-ODSⅢC18(75mm×2.0mm,1.6μm);流动相A为乙腈-水(体积比为4∶1),流动相B为30mmol·L-1乙酸钠-乙腈(体积比为97∶3),梯度洗脱;流速为0.3mL·min-1;柱温为25℃;检测波长为254nm。结果 13种氨基酸线性关系良好(r=0.999 1~0.999 8);平均回收率在97.0%~104.0%内,回收率的RSD均小于3.0%。结论本方法可用于甜瓜籽中游离氨基酸的检测。     

建立超高效液相色谱法测定莫匹罗星软膏含量

目的:建立莫匹罗星软膏含量测定超高效液相色谱法,提高检测效率。方法:采用超高效液相色谱法(Ultra performance liquid chromatography, UPLC),色谱柱为ACQUITY UPLC BEH C₁₈(2.1 mm×100 mm, 1.7μm);流动相为0.01 mol·L^-1磷酸二氢钠(1 mol·L^-1 NaOH调节pH至6.3)-乙腈(75∶25);检测波长为230 nm;流速为0.4 mL·min^-1。结果:建立了莫匹罗星软膏含量测定超高效液相色谱方法,此方法精密度好,准确度高,其线性范围为0.01～1 mg·mL^-1,R²为0.999 6。结论:相比于高效液相色谱(High Performance Liquid Chromatography, HPLC)法,本文所提方法更便捷高效,可有效地控制莫匹罗星软膏含量。     

柱前衍生化高效液相色谱法测定全蝎中游离牛磺酸的含量

目的:建立全蝎中游离牛磺酸的含量测定方法。方法:采用50%乙醇超声提取全蝎中的游离氨基酸,异硫氰酸苯酯柱前衍生化后进行反相高效液相色谱分析。色谱柱为Agilent ZORBAX SB-C18(150mm×4.6 mm,5μm),以0.07 mol·L-1醋酸-醋酸钠缓冲液-2.5%乙腈(pH=6.5)为流动相A,乙腈-甲醇-水(40∶15∶45)为流动相B,流速1.0 mL·min-1,检测波长254 nm。结果:牛磺酸在0.008 3～0.414 8μg范围呈良好的线性关系(R2=0.999 9);平均回收率为102.1%,RSD为1.6%(n=6);全蝎中游离牛磺酸含量在0.026 9%～1.27%之间。结论:该方法灵敏度高,重复性好,结果准确可靠,可用于全蝎的质量控制。     

高效液相色谱法测定氨碘肽滴眼液中5种氨基酸的含量

目的采用HPLC法测定氨碘肽滴眼液中丝氨酸(Ser)、甘氨酸(Gly)、组氨酸(His)、异亮氨酸(Ile)、亮氨酸(Leu)的含量。方法采用Ocean-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相A:乙腈-水(4∶1),流动相B:0.1 mol·L-1乙酸钠-乙腈(97:3);流速为1.0 mL·min-1;柱温:25℃;检测波长:254 nm;用异硫氰酸苯酯(PITC)作为柱前衍生化试剂,采用柱前衍生HPLC法进行分析。结果各种氨基酸能良好地分离,衍生化试剂对氨基酸分析无干扰;平均回收率在98%¹02%,RSD均<3%。结论该方法简便、准确、可靠,可用于氨碘肽滴眼液中氨基酸含量的检测。     

UPLC和HPLC方法对丹参药材中丹酚酸B含量测定结果的比对

目的:比对超高效液相色谱与高效液相色谱方法测定丹参药材中丹酚酸 B 的含量结果。方法:采用中国药典2005年版(一部)丹参药材含量测定项下有关标准对原高效液相色谱方法进行转换并优化为超高效液相色谱方法。原高效液相色谱方法色潜柱为 Waters X-Bridge~(TM)BEH C_(18)柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相:乙腈-甲醇-水-甲酸(10:30:59:1),流速:1mL·min~(-1),检测波长:286 nm,柱温:30℃;超高效液相色谱方法色潜柱为 Waters ACQUITY UPLC~(TM)。BEH C_(18)柱(2.1 mm×50mm,1.7μm),流动相:乙腈-甲醇-水-甲酸(8:25:66:1),流速:0.4 mL·min~(-1),检测波长:286 nm,柱温:30℃。结果:2种方法所得含量测定结果一致。结论:超高效液相色谱方法能够替代高效液相色谱分析方法测定丹参药材中丹酚酸 B 含量,既加快了分析速度,达到了样品分析的高通量,减少有机溶剂的使用,又得到更高的分析灵敏度。     

UPLC-MS/MS法检测人体毛发中右美沙芬及其代谢物去甲右美沙芬

目的:建立一种准确、快速检测毛发中右美沙芬及其代谢物去甲右美沙芬的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)方法。方法:用含内标双苯戊二氨酯(SKF_525A)的甲醇溶液提取含有右美沙芬及其代谢物的毛发,经0.22μm微孔有机滤膜过滤,UPLC-MS/MS检测。采用ACQUITY UPLC HSS T3超高液相色谱柱(100 mm×2.1 mm, 1.8μm),以0.2%甲酸(10 mmol·L^-1甲酸铵)和乙腈为流动相进行梯度洗脱,流速0.3 mL·min^-1,柱温为室温。采用电喷雾离子源,正离子多反应模式检测。结果:右美沙芬和去甲右美沙芬质量浓度均在1～100 ng·mL^-1范围内线性响应良好,线性方程分别为Y=1.349 49X-0.020 80 (r=0.998 8)和Y=0.775 10X-0.013 87 (r=0.999 1),检测限和定量限均分别为0.01 ng·mL^-1和0.025 ng·mL^-1,平均回收率在97.0%～104.8%...