HPLC测定盐酸戊乙奎醚注射液中的有关物质

目的采用HPLC法测定盐酸戊乙奎醚注射液中的有关物质。方法采用Hypersil GOLD^TM C₁₈色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5μm),流动相为乙腈-0.05 mol·L^-1磷酸二氢铵溶液(pH3.0),梯度洗脱,流速1.0 mL·min^-1,柱温35℃,检测波长210 nm,进样量20μL。采用不加校正因子的主成分自身对照法检测盐酸戊乙奎醚注射液中的有关物质。结果所用方法能够使盐酸戊乙奎醚色谱峰与有关物质得到良好的分离,盐酸戊乙奎醚的最低检测限为50μg·L^-1,精密度良好(RSD=0.10%)。结论所用方法稳定性好、专属性高,可作为盐酸戊乙奎醚注射液有关物质的检测方法。     

高效液相-纳克级激光计数检测器联用法测定注射用兰索拉唑中葡甲胺的含量

目的 建立高效液相-纳克级(水凝粒子)激光计数检测器(HPLC-NQAD)联用法测定注射用兰索拉唑中助溶剂辅料葡甲胺的含量。方法 采用HPLC-NQAD联用,色谱柱使用CAPCELL PAK CR 1∶4(2.0 mm×150 mm,5 μm);以流动相(A)(5 mmol·L^-1甲酸铵-2%乙腈)和流动相(B)(50 mmol·L^-1甲酸铵-50%乙腈)梯度洗脱;流速0.3 mL·min^-1;柱温40℃;进样量5μL;NQAD参数设定：蒸发温度35℃,雾化温度30℃,氮气压力30 psi。结果 供试品中的葡甲胺和其他成分能够良好分离,在1.0～100.0μg·mL^-1范围内,葡甲胺的浓度与峰面积呈良好线性关系,相关系数r=0.999 8,平均回收率为99.96%,精密度RSD为1.01%。结论 该方法结果准确,重复性好,可实现注射用兰索拉唑中无紫外吸收辅料葡甲胺的高灵敏检测。     

HPLC法结合LC-MS法测定硫酸鱼精蛋白含量及肽段鉴定

目的:建立了一种同时测定硫酸鱼精蛋白中主成分纯度和含量的HPLC方法，并采用LC-MS法对肽段氨基酸序列进行鉴定。方法:HPLC方法采用的色谱柱为ThermoHypersil GOLD色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5μm),流动相A为0.1 mol·L^-1磷酸二氢钠溶液(用磷酸调节pH至1.8),流动相B为乙腈-0.1 mol·L^-1磷酸二氢钠溶液(用磷酸调节pH至1.8)(6.5∶93.5),梯度洗脱，流速1.0 mL·min^-1,柱温55℃,紫外检测波长为214 nm,进样量100μL。LC-MS法先采用馏分收集方式对各肽段进行提取富集，然后液质联用采用Waters ACQUITY UPLC Peptide BEH C₁₈色谱柱(15 cm×0.21 cm, 1.7μm),流速为0.2 mL·min^-1,流动相A为0.1%甲酸溶液，流动相B为5%乙腈-0.1%甲酸溶液，梯度洗脱；Thermo Q-Exactive Plus, ESI离子源，阳离子检测模式，雾化电压为...     

高效液相色谱法测定异甘草酸镁原料药中的有关物质

目的:建立异甘草酸镁原料药中有关物质的高效液相色谱(HPLC)检查方法。方法:采用Agilent Poroshell 120 C₁₈色谱柱(150 mm×4.6 mm,4μm),以50 mmol·L^-1乙酸铵溶液(含0.2%三氟乙酸,氨水调节pH值至8.0)为流动相A,以50 mmol·L^-1乙酸铵溶液-乙腈(15∶85)为流动相B,梯度洗脱;流速为1.0 mL·min^-1,柱温为35℃,检测波长为250 nm,进样量为10μL。结果:在此色谱条件下,异甘草酸镁与各杂质能完全分离。异甘草酸镁的线性范围为0.33～3.33μg·mL^-1,相关系数为0.999 9,检测限与定量限分别为0.11和0.33μg·mL^-1。各已知杂质在相应浓度范围内均拥有良好的线性关系,相关系数均在0.999 8～0.999 9。加样回收率(n=12)均在90%～108%之间,RSD均<3.0%。结论:本法专属性好,准确度高,能有效检测出异甘草酸镁原料药中的有关物质。     

基于UHPLC/Q-TOF-MS技术的人血浆磷脂类成分快速分析及质谱裂解规律初探

采用超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱联用技术(UHPLC/Q-TOF-MS)对人血浆磷脂类成分进行快速分析并推测其质谱裂解规律。本文采用Acquity UHPLC^TMBEH C18色谱柱(50 mm×2.1 mm, 1.7μm),以含10 mmol·L^-1甲酸铵和0.1%甲酸的水溶液(A)与含10 mmol·L^-1甲酸铵和0.1%甲酸的乙腈-异丙醇(体积比为1∶1)有机溶液(B)作为流动相进行梯度洗脱,流速0.3 mL·min^-1,柱温50℃, ESI源正、负离子模式下采集质谱数据。根据Masslynx 4.1软件计算的精确相对分子质量和元素组成,并通过与对照品、二级质谱碎片离子以及脂质数据库的比对,共鉴定出82个血浆脂质成分,其中包括14个溶血磷脂酰胆碱(LysoPCs)、39个磷脂酰胆碱(PCs)、17个鞘磷脂(SMs)、7个神经酰胺(Cers)、4个磷脂酰乙醇胺(PEs)、1个磷脂酰肌醇(PI)。本实验建立了一种简便高效、快捷、稳定的分析方法,可对人血浆磷脂类成分进行较为全面地定性分析,同时...     

HPLC法测定阿莫西林钠克拉维酸钾中的22个杂质

目的 建立HPLC法同时测定阿莫西林钠克拉维酸钾原料中22个已知杂质含量的方法。方法 采用YMC Triart C₁₈色谱柱(4.6×250 mm, 3μm);流动相A为0.05 mol·L^-1磷酸二氢钾溶液(pH=5.9)-乙腈(99∶1),流动相B为0.05 mol·L^-1磷酸二氢钾溶液(pH=5.9)-乙腈(80∶20),梯度洗脱;流速为1.0 mL·min^-1,检测波长为215 nm,柱温为25℃。结果 该方法下主峰与各杂质间分离良好,各成分在各自线性范围内与峰面积线性关系良好(r>0.999);对各杂质的校正因子进行了计算,定量限、检出限及回收率等均符合规定。结论 该法专属性强、灵敏度高、准确度和重复性好,可用于检测阿莫西林钠克拉维酸钾的有关物质。     

HPLC法测定艾司奥美拉唑钠中3个潜在基因毒性杂质的研究及控制

目的:建立HPLC法测定艾司奥美拉唑钠中潜在基因毒性杂质E、杂质I、2-氯甲基-3,5二甲基-4-甲氧基吡啶。方法:杂质E色谱条件：YMC-Triart C₁₈色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5μm),流动相A为0.05 mol·L^-1磷酸二氢钾缓冲液,流动相B为乙腈,梯度洗脱,流速为1.0 mL·min^-1,检测波长为302 nm,柱温为30℃;杂质I色谱条件：Agilent Microspher C₁₈色谱柱(100 mm×4.6 mm, 3μm),流动相A为水-磷酸盐缓冲液(pH 7.6)-乙腈(80∶10∶10),流动相B为乙腈-磷酸盐缓冲液(pH 7.6)-水(80∶1∶19),梯度洗脱,流速为1.0 mL·min^-1,检测波长为302 nm,柱温为30℃;2-氯甲基-3,5二甲基-4-甲氧基吡啶色谱条件：GL Inertsil ODS-3色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5μm),流动相A为0.01 mol·L^-1磷酸氢二钠溶液(pH...     

复杂抗生素多黏菌素E甲磺酸钠的组分与杂质谱研究及在质量控制中的应用

目的:建立二维液质联用方法确定多黏菌素E甲磺酸钠(CMS)杂质的结构及来源,进而用于药物质量控制研究。方法:一维系统：采用Acquity UPLC^?Peptide CSH C₁₈(150 mm×2.1 mm, 1.7μm)色谱柱,以磷酸盐缓冲液(7.8 g·L^-1磷酸二氢钠,用1 mol·L^-1氢氧化钠溶液调节pH至6.4)-乙腈(19∶1)为流动相A,磷酸盐缓冲液-乙腈(1∶1)为流动相B,梯度洗脱,流速0.3 mL·min^-1,柱温30℃;二维系统：采用Acquity BEH C₁₈柱(50 mm×2.1 mm, 1.7μm)色谱柱,以甲酸铵(A)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱,流速0.2 mL·min^-1,柱温40℃,检测波长210 nm。质谱检测器采用ESI源,负离子扫描模式。结果:采用2D-LC-Q TOF MS法,推定了CMS中55个杂质的结构,并推测其主要来源为多黏菌素E1-I、多黏菌素E1-7MOA、多黏菌素E3及多黏...     

UHPLC-MS/MS法测定盐酸普萘洛尔缓释片中基因毒性杂质N-亚硝基普萘洛尔

目的 建立盐酸普萘洛尔缓释片中基因毒性杂质N-亚硝基普萘洛尔的超高效液相色谱-串联质谱(UHPLC-MS/MS)检测方法。方法 Waters ACQUITY UPLC CSH^TM C₁₈色谱柱(3.0 mm×150 mm, 1.7μm),10 mmol·L^-1甲酸铵的水溶液(含0.1%甲酸)作为流动相A,乙腈溶液(含0.1%甲酸)作为流动相B,梯度洗脱,流速为0.5 mL·min^-1,柱温为50℃,进样器温度为5℃,进样体积为10μL,采用多反应监测(MRM)模式,对盐酸普萘洛尔缓释片中的N-亚硝基普萘洛尔进行定量检测。结果 N-亚硝基普萘洛尔在1～20 ng·mL^-1范围内具有良好的线性关系。低、中、高3个浓度的加样回收率(n=3)在98.4%～103.2%之间,RSD≤2.7%。检测限和定量限分别为0.09 ng·mL^-1和0.3 ng·mL^-1。检出盐酸普萘洛尔缓释片中基因毒性杂质N-亚硝基普萘洛尔含量为1.8μg·g^...     

超高效液相色谱串联三重四极杆质谱法测定梅花鹿茸中总游离氨基酸与游离氨基酸含量

目的建立市售梅花鹿茸中总游离氨基酸及16种游离氨基酸的含量测定方法,为该药材的质量评价提供检测手段。方法采用紫外分光光度法,以色氨酸为对照品,建立市售梅花鹿茸中总游离氨基酸的含量测定方法,检测波长570 nm。采用超高效液相色谱串联三重四极杆质谱法(UPLC-QqQ-MS/MS),建立市售梅花鹿茸样品中16种游离氨基酸含量测定方法,采用ACQUITY BEH Amide色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm);以20 mmol·L^-1乙酸铵溶液-含0.5%甲酸的乙腈溶液(15:85)为流动相A,含0.5%甲酸的20 mmol·L^-1乙酸铵溶液为流动相B,梯度洗脱;流量0.6 mL·min^-1;柱温35℃。质谱部分采用电喷雾电离源(ESI),以多反应离子监测(MRM)模式检测。结果总游离氨基酸成分浓度与吸光度呈良好线性关系(r=0.999 6);方法精密度、重复性和稳定性RSD均<3.3%;平均加样回收率98.9%;RSD为2.1%。16种游离氨基酸成分浓度与峰面积呈良好线性关系(r>0.999 5);...     

复方氟尿嘧啶口服溶液中氟尿嘧啶含量测定方法的改进

目的：改进复方氟尿嘧啶口服溶液中氟尿嘧啶含量测定方法。方法：采用高效液相色谱法,色谱柱为Agilent 5 TC-C₁₈(2)(4.6×250 mm,5μm),流动相为6.8 g·L^-1的磷酸二氢钾溶液(用5 mol·L^-1氢氧化钾溶液调节pH值至5.7±0.1)：甲醇(95∶5),检测波长为265 nm。结果：氟尿嘧啶在10.289μg·mL^-1～51.443μg·mL^-1浓度范围内线性关系良好,线性方程：Y=34.554X+5.479,(r=0.999 98),平均回收率为96%(RSD=0.9%,n=9)。结论：本文所建立高效液相色谱法简便、准确、灵敏度高、重复性好,满足复方氟尿嘧啶口服溶液中氟尿嘧啶的含量测定。     

液质联用技术用于醋酸阿托西班注射液中杂质结构鉴定

目的:采用高效液相色谱(HPLC)、超高效液相色谱-四极杆串联静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q Orbitrap MS)技术对醋酸阿托西班注射液中杂质结构进行鉴定。方法:HPLC法采用Inertsil ODS-2 C₁₈色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5μm),流动相A为乙腈-甲醇-三氟乙酸溶液(pH 3.2)(15∶10∶75),流动相B为乙腈-甲醇(60∶40),梯度洗脱，流速1.2 mL·min^-1,检测波长220 nm。UPLC-Q Orbitrap MS法采用BEH300 C₁₈色谱柱(150 mm×2.1 mm, 1.7μm),流动相为0.1%甲酸水溶液(A)-0.1%甲酸乙腈溶液(B),梯度洗脱，流速0.2 mL·min^-1;采用电喷雾离子源，选择正离子模式进行Full MS/dd-MS²扫描。结果:对5家企业各1批醋酸阿托西班注射液进行了有关物质测定，以面积归一化计算，含量>0.1%的杂质峰个数分别为9、10、13、9和6,总杂含量分别为0.35...     

高效液相色谱法测定盐酸阿莫罗芬搽剂的含量

目的:建立盐酸阿莫罗芬搽剂的含量测定方法。方法:利用HPLC技术,采用Alltima C₁₈色谱柱(150 mm×4.6 mm, 5μm),流动相为甲醇-0.02 mol·L^-1磷酸二氢钾溶液(磷酸调pH至3.0)(75∶25),流速为1.0 ml·min^-1,检测波长为214 nm,柱温为30℃,进样体积为10μl。结果:盐酸阿莫罗芬在50.42～151.3μg·ml^-1与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 9);平均回收率为99.30%,RSD为0.78%(n=9)。结论:该方法准确、简单、快速,能够用于盐酸阿莫罗芬搽剂的含量测定。     

高效液相色谱法测定曲伏噻吗滴眼液中曲伏前列素有关物质含量

目的 建立高效液相色谱法测定曲伏噻吗滴眼液中曲伏前列素有关物质的含量。方法 采用Phenomenex LUNA苯基己基色谱柱(3.0 mm×150 mm, 3μm)色谱柱;流动相A为20 mmol·L^-1庚烷磺酸钠溶液(用磷酸调pH值至2.5),流动相B为甲醇,流动相C为乙腈,洗脱梯度;检测波长220 nm;柱温40℃;流速0.5 mL·min^-1。结果 在该色谱条件下,曲伏前列素与各杂质均可良好分离;曲伏前列素、曲伏前列素杂质A、曲伏前列素15-表非对映异构体、曲伏前列素5,6-反式杂质异构体、曲伏前列素15-酮衍生物分别在0.02～219.29μg·mL^-1(r=1.000 0),0.02～3.10μg·mL^-1(r=0.999 9),0.02～3.87μg·mL^-1(r=1.000 0),0.02～4.37μg·mL^-1(r=1.000 0),0.02～3.98μg·mL^-1(r=0.999 9)浓度范围内与峰面积呈良好线性关系...     

UHPLC-MS/MS法测定依那普利氢氯噻嗪复方制剂中潜在基因毒性杂质

目的 通过合成基因毒性杂质N-亚硝基氢氯噻嗪(NO-HZCT),建立超高效液相色谱-串联质谱法(UHPLC-MS/MS)测定依那普利氢氯噻嗪制剂中N-亚硝基氢氯噻嗪。方法 参考文献方法合成NO-HZCT,采用高分辨质谱对其相对分子量和结构进行确定;采用Agilent Eclipse Plus C₁₈ RRHD(3.0 mm×150 mm, 1.8μm)色谱柱,以10 mmol·L^-1甲酸铵-0.1%甲酸的水溶液作为流动相A,以0.1%甲酸的乙腈溶液作为流动相B,梯度洗脱,体积流量0.6 mL·min^-1;采用ESI离子源正离子扫描,多反应监测(MRM)模式下,对NO-HZCT进行定量检测。结果 NO-HZCT质量浓度在0.51～50.67 ng·mL^-1范围内具有良好的线性关系,相关系数(r)为0.999 7;低、中、高3个浓度的加样回收率(n=3)分别为93.10%(RSD 3.7%)、104.30%(RSD 1.0%)和106.48%(RSD 1.8%);检测限和定量限分别为0.08 ng·mL...     

高效液相色谱法测定氧化型染发产品中44种染发剂的含量

目的:建立氧化型染发产品中44种染发剂的高效液相色谱检测方法。方法:样品经无水乙醇-2 g·L^-1亚硫酸氢钠溶液(1∶1)超声提取后,分别采用Waters XBridge Shield RP18(250 mm×4.6 mm, 5μm)和Agilent ZORBAX SB Aq(250 mm×4.6 mm, 5μm)色谱柱进行分离,分别以甲醇-0.005 mol·L^-1乙酸铵溶液(pH 7.7)、甲醇-0.005 mol·L^-1磷酸二氢钾溶液(pH 7.0)为流动相,梯度洗脱,流速为1.0 mL·min^-1,柱温30℃,检测波长为230、240、250 nm,进样量5μL。结果:44种染发剂在考察的质量浓度范围内呈良好的线性关系(r>0.999 5),各成分的检测下限范围为2～58μg·g^-1,3个浓度水平的平均加标回收率为80.5%～113.6%,RSD范围为0.10%～5.6%。应用该方法对20批氧化型染发产品进行检测,结果未检出禁用染发剂,检出20种准用染发剂,含量范...     

LC-MS测定双氢青蒿素哌喹片中阿莫西林、头孢克洛和头孢克肟的残留量

目的 建立双氢青蒿素哌喹片中阿莫西林、头孢克洛、头孢克肟残留量的液质联用检测方法。方法 采用Thermo Gold C₁₈色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.9μm);流动相为10 mmol·L^-1乙酸铵溶液(A)-乙腈(B)。阿莫西林、头孢克洛稀释剂为10 mmol·L^-1乙酸铵溶液(氨水调节pH值至7.2),流速为0.3 mL·min^-1,进样量为10μL;头孢克肟稀释剂为10 mmol·L^-1乙酸铵溶液(氨水调节pH值至11.0),流速为0.25 mL·min^-1,进样量为2μL。阿莫西林、头孢克洛和头孢克肟分别采用2种梯度洗脱条件。结果 阿莫西林、头孢克洛和头孢克肟线性良好,线性方程分别为y=3 734.53x–2 188.63(r=0.999 5),y=1 396.67x–266.554(r=0.999 8)和y=3 636.39x+2 277.48(r=0.999 7),重复性RSD分别为3.1%,2.8%,2.2%,回收率分别为107.1%...     

加校正因子的主成分自身对照法测定维生素B6片中有关物质

目的 建立高效液相色谱-加校正因子的主成分自身对照法测定维生素B₆片中杂质A、杂质B、未知最大单杂及杂质总量。方法 采用Inertsil ODS-SP(4.6×250 mm,5μm)色谱柱,以0.04%戊烷磺酸钠溶液(冰醋酸调p H至3.0)-甲醇(92∶8)为流动相,流速为1.0 m L·min^-1,检测波长为291 nm。结果 维生素B₆杂质A和杂质B的校正因子分别为1.4、1.3。维生素B₆对照品、杂质A和杂质B分别在(0.4988～24.94)μg·m L^-1、(0.5005～5.005)μg·m L^-1、(0.5025～5.025)μg·m L^-1质量浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系(r均为1.000)。杂质A和杂质B检测限分别为0.069μg·m L^-1、0.0739μg·m L^-1。杂质A、杂质B平均回收率分别为99.98%(RSD=0.56%)、100.02%(RSD=0....     

超高效液相色谱串联质谱法筛查款冬花中135种农药残留及其风险评估

目的 采用超高效液相色谱串联质谱技术对款冬花中135种农药残留进行筛选。方法 供试品采用乙腈为提取溶剂,高速匀浆提取;CORTECSTM UPLC C18(1.6μm,2.1 mm×150 mm)色谱柱,流动相：流动相以0.1%甲酸水溶液(含5 mmol·L^-1甲酸铵)为水相,以95%乙腈水溶液(含0.1%甲酸和5 mmol·L^-1甲酸铵)为有机相梯度洗脱;流速0.3 mL·min^-1、柱温40℃、进样量为2μL。电喷雾离子源,多反应监测模式,以标准曲线法计算含量。采用慢性暴露评估法计算慢性风险商(HQc)。结果 135种农药的回收率为70.30%～118.45%,相对标准偏差小于9.1%,各测定组分在1～100 ng·mL^-1范围内呈良好的线性关系(r≥0.99)。27批样品中,7批检出毒死蜱,1批检出腈菌唑,1批检出甲萘威。所有批次HQc均远小于1,款冬花的农药残留风险较低。结论 该方法全面、准确、快速,适合款冬花中135种农药残留的高通量测定及风险评估,对其他中药材农药残留的检测也具有参考意义...     

HPLC法同时测定五维赖氨酸口服溶液中4种水溶性主成分的含量

目的:建立直接同时测定五维赖氨酸口服溶液中盐酸赖氨酸和三种水溶性维生素含量的RP-HPLC法。方法:采用Phenomenex Gemini C₁₈ 100A(4.6 mm×250 mm, 5μm)色谱柱，以0.03 mol·L^-1磷酸二氢铵溶液(pH 3.0)-甲醇(98∶2)为流动相，检测波长为205 nm,流速1.0 mL·min^-1。结果:盐酸赖氨酸、维生素C、维生素B₆和烟酰胺分别在30.56～488.9μg·mL^-1(r=1.000 0)、24.86～397.8μg·mL^-1(r=0.999 8)、1.018～16.29μg·mL^-1(r=1.000 0)、10.72～171.5μg·mL^-1(r=0.999 0)范围内与峰面积呈良好的线性关系；定量限分别为10.39、0.466 1、0.092 79、0.136 2 ng;平均回收率分别为100.6%、98.5%、98.0%、99.2%,RSD分别为0...