CyclinD1 mRNA反义寡脱氧核苷酸导入对颊癌细胞株BcaCD885生物学行为的影响

目的研究CyclinD1 mRNA反义寡脱氧核苷酸导入对颊癌细胞株BcaCD885生物学行为的影响,验证CyclinD1在口腔黏膜癌变中的作用。方法采用差示PCR技术检测颊癌细胞株BcaCD885中CyclinD1编码基因的扩增,并以脂质体为载体,将CyclinD1 mRNA的反义寡核苷酸序列转染肿瘤细胞,观察转染前后细胞增殖速度、体外集落形成能力的变化。结果 BcaCD885细胞株中出现CCND1基因扩增,扩增倍率6.9;转染CyclinD1mRNA的反义寡脱氧核苷酸后,细胞增殖速度减慢,体外集落形成能力下降。结论转染CyclinD1 mRNA反义寡脱氧核苷酸,能部分抑制体外培养肿瘤细胞的增殖活性和恶性表型。     

转染Bax基因提高BcaCD885颊癌细胞热敏感性的研究

目的：探讨Bax基因对BcaCD885颊癌细胞热敏感性的影响。方法：采用脂质体Lipofectamine 2000转染人Bax-α基因重组质粒pORF-hBax-α于人颊癌细胞株BcaCD885细胞中，再对细胞进行43℃ 40min水浴加温处理，用流式细胞仪检测BcaCD885细胞的凋亡率及Bax蛋白的表达水平；用RT-PCR技术检测BcaCD885细胞的Bax mRNA的表达水平。结果：Lipofectamine 2000能将人Bax-α基因重组质粒pORF-hBax-α导人BcaCD885颊癌细胞中，Bax-α基因重组质粒pORF-hBax-α能在BcaCD885颊癌细胞中表达，提高BcaCD885颊癌细胞内Bax蛋白质及mRNA的水平，促进热诱导BcaCD885颊癌细胞凋亡的发生。结论：转染Bax基因于BcaCD885颊癌细胞内，能提高细胞对热杀伤的敏感性。     

硫代反义Bcl-xL寡脱氧核苷酸对BcaCD885颊癌细胞凋亡及热敏感性的影响

目的　探讨硫代反义Bcl-xL寡脱氧核苷酸(AS-sODN)对BcaCD885颊癌细胞凋亡及热敏感性的影响。方法　以脂质体Lipofectin为载体,转染AS-sODN于BcaCD885细胞内,倒置显微镜观察细胞形态学改变,TUNEL原位末端标记检测细胞凋亡,流式细胞技术(FCM)测定细胞凋亡率及Bcl-xL蛋白表达水平;转染AS-sODN于BcaCD885 细胞内,再以43℃,40 min加热细胞,FCM检测细胞凋亡率。结果　AS-sODN转染后,BcaCD885颊癌细胞出现皱缩、呈浮起状,TUNEL原位末端标记阳性,Bcl-xL蛋白表达明显下降(P<0·05),热诱导细胞凋亡率明显提高(P< 0·05)。结论　硫代反义Bcl-xL寡脱氧核苷酸能诱导BcaCD885颊癌细胞凋亡并能提高其热敏感性。     

阻断内源性bcl-2蛋白表达提高BcaCD885颊癌细胞热敏感性的研究

目的：探讨与bcl—2翻译起始部位碱基互补的反义bcl—2寡脱氧核苷酸(oligodeoxynucletide，ODN)对BcaCD885颊癌细胞热敏感性的影响。方法：以脂质体Lepofectin加为载体，转染20μM反义bcl—2 ODN于BcaCD885细胞内，阻断内源性bcl—2蛋白表达，再以43℃40min加热后，以流式细胞术—抗体及DNA分析对bcl—2蛋白、bax蛋白和细胞凋亡进行检测。结果：反义bcl—2 ODN阻断BcaCD885细胞内源性bcl—2蛋白表达后，bax／bcl—2升高，细胞凋亡率明显提高。结论：阻断BcaCD885细胞内源性bcl—2蛋白表达能提高其热敏感性。     

顺铂诱导颊癌细胞凋亡及凋亡分子(Apo-1)表达的实验研究

目的:研究细胞毒类化疗药——顺铂诱导人颊癌细胞凋亡发生的规律以及凋亡分子Apo-1的表达。探讨口腔癌化疗的细胞凋亡机制。方法:以建株人颊癌细胞系BcaCD885为对象,采用光镜、电镜以及流式细胞术等手段观察顺铂诱导颊癌细胞凋亡的形态特征及规律,同时检测顺铂对颊癌细胞Apo-1表达的影响。结果:顺铂作用后的颊癌细胞出现典型的凋亡细胞形态学特征;顺铂诱导颊癌细胞凋亡呈现时间及剂量依赖性效应关系;顺铂能上调颊癌细胞Apo-1的表达。结论:细胞凋亡可能是顺铂杀灭颊癌细胞的重要机制,Apo-1在顺铂诱导颊癌细胞凋亡中可能起着关键性调节作用     

高温诱导颊癌细胞凋亡的相关机理研究

目的 :探讨热诱导BcaCD885细胞凋亡的分子机理。方法 :水浴加温诱导BcaCD885产生凋亡。通过FCM DNA、FCM 抗体检测技术 ,观测热诱导颊癌细胞凋亡过程中bcl- 2及bax基因蛋白表达的动态变化。结果 :凋亡率与bcl- 2蛋白表达水平存在负相关关系 ,与bax蛋白表达水平存在正相关关系。结论 :高温作为一种外来刺激信号通过下调bcl 2基因的表达、上调bax基因的表达、上调bax基因的表达 ,诱导BcaCD885细胞凋亡的发生     

热诱导颊癌细胞凋亡与Bcl-xL蛋白表达的关系

目的：探讨热诱导颊BcaCD885细胞凋亡与Bcl-xL蛋白表达变化的关系。方法：43℃40min水浴加温诱导BcaCD885细胞产生死亡。采用流式细胞仪（FCM）及抗体检测技术分别测定细胞凋亡率及Bcl-xL蛋白表达量，观测诱导颊癌细胞凋亡过程中Bcl-xL蛋白表达的动态变化，探讨二者间的关系。结果：凋亡组内Bcl-xL蛋白表达量明显低于对照组（P＜0．05），凋亡率与Bcl-xL蛋白表达水平存在负相关关系（r=-0.89，P＜0．05）。结论：Bcl-xL在热诱导BcaCD885细胞凋亡的调控中起重要作用。     

肽段连接的近红外荧光量子点对人颊鳞癌BcaCD885细胞侵袭和转移能力的影响

目的 研究肽段连接的近红外荧光量子点(QDs)对人颊鳞癌BcaCD885细胞的生长、侵袭、黏附和趋化运动能力的影响.方法:1)用表面连接穿膜肽段最大发射波长为800nm的近红外荧光量子点(QD800)标记BcaCD885细胞(BcaCD885/QD800),用流式细胞仪检测QD800对BeaCD885细胞的标记率,用激...     

高温诱导颊癌细胞凋亡的相关机理研究

目的：探讨热诱导BcaCD885细胞凋亡的分子机理。方法：水浴加温诱导BcaCD88产生调亡。通过FCM－DNA、FCM－抗体检测技术,观测热诱导颊癌细胞凋亡过程中bcl-2及bax基因蛋白表达的动态变.:地亡率与bcl-2蛋白表达水平存在负相关关系,与bax蛋白表达存在正相关关系。结论：高温作为一种外来刺激信号通过下调bcl-2基因的表达、上调bax基因的表达、上调bax基因的表达,诱导BcaCD885细胞凋亡的发生。     

nm23-H1基因对舌癌细胞株化疗敏感性的影响体外实验

目的：通过nm23-H1的转化及导入BcaCD885细胞株，观察nm23-H1对BcaCD885细胞株化疗敏感性的影响。方法：完成细胞培养和基因转染后，MTT法观察nm-23-H1对BcaCD885化疗敏感性影响。结果：转染前BcaCD885细胞株对ADM、5－FU、MTX的化疗敏感性无显著差异。但转染后的BcaCD885细胞株对CDDP明显增敏。结论：nm23-H1可能通过特异笥地影响细胞内的能量交换过程来达到对CDDP化疗增敏的效果。     

反义bcl-2寡脱氧核苷酸对BcaCD885细胞凋亡的影响

目的 探讨反义bel-2寡脱氧核苷酸（oligodeoxynucleotide,ODN）对BcaCD885细胞凋亡的影响。方法 以脂质体 Lepofection为载体,一过性转染20μmol/L反义及正义bel-2 ODN于BcaCD885细胞后,通过细胞形态观察及流式细胞术（FCM）分析,从形态学及细胞学水平对凋亡细胞进行检测。结果 20μmol/L反义bel-2 ODN转染组,细胞出现了凋亡形态学改变,FCM检测凋亡率与对照组间存在显著差异（P<0.05）。而 20μmol/L正义bell-2ODN转染组与对照组相似,在形态学上未见明显的凋亡细胞出现,FCM检测两者凋亡率不存在显著差异（P<0.05）。结论 反义 bel-2 ODN能促进 BcaCD885细胞凋亡。     

Tca8113和BcaCD885对口腔癌靶向隐形顺铂聚乳酸纳米粒的敏感性研究

目的：观察口腔鳞癌细胞系（Tca8113和BcaCD885）对口腔癌靶向顺铂聚乳酸聚乙二醇纳米粒（CDDP—PLA—PEG—NP，或称隐形聚乳酸纳米）的敏感性，并与顺铂（CDDP）对Tca8113和BcaCD885的抗癌活性进行对比观察。方法：用四唑盐显色法（MTr法）检测CDDP—PLA—PEG—NP和CDDP在1～8d内8个时间点对Tca8113和BcaCD885的抗癌活性，计算出2种药物在8个时间点对2种癌细胞的抑癌率和药物的半数抑癌率浓度。结果：CDDP—PLA—PEG—NP和CDDP对Tca8113和BcaCD885均有强的杀伤作用，其杀伤效应均呈时间依赖性和剂量依赖性。结论：经改型后的CDDP—PLA—PEG—NP对口腔鳞癌细胞Tca8113和BcaCD885仍有强大的杀伤作用，为以后进一步的体内实验提供了依据。     

平阳霉素-活性炭纳米微粒对口腔鳞癌细胞系Tca8113和BcaCD885细胞体外的杀伤作用

目的探讨平阳霉素-活性炭纳米微粒（PYM-CH-NP）对人舌鳞癌细胞系Tca8113和颊鳞癌细胞系Bca-CD885的药物敏感性。方法采用甲基噻唑基四唑（MTT）法检测不同剂量的PYM-CH-NP和平阳霉素（PYM）在7个时间点（1～7 d）对Tca8113和BcaCD885的杀伤效应,计算各时间点2种剂型的半数抑癌率浓度值（IC50）、抑癌率和药物抗肿瘤作用强度的相对值（RAA）,选择药物作用后第5天观察量效关系。结果PYM-CH-NP和PYM对Tca8113和BcaCD885均有较强的抑癌作用,其抗癌效应与药物浓度和作用时间相关。结论改型后的PYM-CH-NP保留了PYM的抗癌活性,且具有缓释性,作用于肿瘤时可以维持周围有效的浓度和作用时间,有效地杀伤肿瘤细胞。     

OK-432对人口腔鳞癌细胞系Tca8113和BcaCD885药物敏感性研究

目的    探讨OK-432对人口腔鳞癌细胞系Tca8113和BcaCD885的药物敏感性。方法    采用四基偶氮唑蓝（MTT）法检测不同剂量OK-432在5个时间点（1、2、3、4、5 d）对Tca8113和BcaCD885的生长抑制作用,计算不同时间点OK-432的半数抑癌率（IC50）和生长抑制率,选择药物作用后第4天观察量效关系。结果    OK-432 能明显抑制Tca8113和BcaCD885细胞的增殖生长,与对照组比较差异有统计学意义（P＜0.05）,其抑制效应随药物浓度升高而增高。结论    OK-432能显著抑制Tca8113和BcaCD885增殖,对Tca8113的敏感性比BcaCD885强。     

nm23-H1基因对BcaCD885细胞侵袭、粘附和运动力影响的研究

目的：通过nm23-H1的转化及导入BcaCD885细胞株，建立稳定、高效、低毒的转染方法，观察nm23-H1对BcaCD885细胞株侵袭转移能力的影响。方法：（1）利用基因转化技术，制备高纯度的nm23-H1真核表达质粒；（2）利用阳离子脂质体介导的转染技术，完成转染方法的建立；（3）利用免疫组化技术，检测转染前后的NDPKA的表达；（4）利用transwell小室和冲刷实验，观察转染前后细胞的侵袭、粘附、趋化运动能力的变化。结果：（1）使用重组的pCMV-N-B 的真核表达载体，将nm23-H1转染口腔癌,细胞并获得稳定表达；（2）发现BcaCD885细胞株nm23-H1基因的转染前后表达水平有明显差异；（3）转染后的BcaCD885细胞侵袭、粘附、趋化运动能力均显著降低。结论：nm23-H1对BcaCD885细胞的侵袭转移能力具有显著抑制作用。     

人口腔鳞癌细胞系对淋巴靶向葫芦素BE聚乳酸纳米微粒的敏感性研究

目的:探讨人口腔鳞癌细胞系(Tca8113和BcaCD885)对颈淋巴结靶向性葫芦素BE聚乳酸纳米微粒(CuBE- PLA-NP)的敏感性。方法:用四唑盐显色法(MTT法)检测用不同剂量的CuBE-PLA-NP和CuBE在1~8 d内8个时间点对Tca8113和BcaCD885的抗癌活性,计算出2种药物在8个时间点对2种癌细胞的抑癌率和药物的半数抑癌率浓度。结果:CuBE-PLA-NP和CuBE对Tca8113和BcaCD885均有强的杀伤作用,其杀伤效应均呈时间依赖性和剂量依赖性。结论:经改型后的淋巴靶向CuBE-PLA-NP没有降低CuBE成份的抗癌活性,同时,由于CuBE-PLA-NP具有淋巴靶向性,更有利于杀灭口腔癌颈淋巴结转移灶内的癌细胞。     

《华西口腔医学杂志》2004年(第22卷)主题索引

使用说明1.本索引按《医学主题词注释字顺表 (2 0 0 2年版 )》标引主题。2 .主题词按首字汉语拼音字顺排列。3.主题词之后“ ”为副主题词。4 .副主题词也按汉语拼音字顺排列在同一主题词之下。Aai癌 ,鳞状细胞 　口腔鳞癌中树突状细胞的免疫组化分析　(王志勇　李声伟　胡勤刚等 )　 2 :(1 0 3)口腔癌前沿细胞基质金属蛋白酶_2表达与颈淋巴结转移的关系　 (刘来奎　李怡宁　江宏兵等 )　 2 :(1 0 6)硫代反义Bcl_xL寡脱氧核苷酸对BcaCD885颊癌细胞凋亡及热敏感性的影响　 (何永文　边　莉　梁新华 )　 2 :(1 1 2 )口底鳞状细胞癌形态计量…     

体外培养之颊,舌癌细胞的形态和功能及超微结构比较研究

来自细胞系 BCaCD885的颊癌细胞胞体大,集落形成力弱,生长代谢活跃,而来自细胞系 TCa8113的舌癌细胞则相反。电镜揭示:前者细胞膜除微绒毛外,还见分泌物质及纤毛样结构,胞浆细胞器分化发育良好,见许多张力细丝;后者胞浆分化差,见大量分散的核糖体。糖原、角蛋白和角化珠等上皮细胞合成产物在颊癌细胞的种植瘤中见到,而舌癌细胞的未见。故 BCaCD885细胞系具备分化潜能,存在终末分化途径,是一分化程度较高的鳞状上皮癌株。     

反义bcl-2寡脱氧核苷酸对BcaCD885细胞内源性bcl-2表达的阻断作用

目的　探讨与 bcl-2翻译起始部位碱基互补的反义 bcl-2寡脱氧核苷酸 ( oligodeoxynucleotide,ODN)对 Bca-CD885细胞内源性 bcl-2表达的阻断作用。方法　以脂质体 Lepofectin为载体 ,一过性转染 2 0 μmol/L 反义及正义 bcl-2 ODN于 Bca CD885细胞中 ,FCM-抗体观测转染后 2 4h、3 6h、48h细胞内 bcl-2基因蛋白表达变化 ,RT-PCR技术检测转染后 2 4h bcl-2 m RNA的表达变化。结果　转染反义 bcl-2 ODN后 2 4h、3 6h、48h Bca CD885细胞内 bcl-2基因蛋白表达与对照组相比都明显下降 ( P<0 .0 5 ) ,而正义组与对照组无差异 ( P>0 .0 5 ) ;正反义组 bcl-2m RNA与对照组相比无明显变化 ( P>0 .0 5 )。结论　反义 bcl-2 ODN能在蛋白翻译水平特异性抑制颊癌细胞内源性 bcl-2蛋白表达     

趋化因子受体CXCR4及其配体CXCL12在口腔鳞状细胞癌细胞增殖和迁移中的作用

目的 检测趋化因子受体CXCR4及其配体CXCL12在口腔鳞状细胞癌细胞中的表达及其在肿瘤细胞增殖和 迁移中的作用。方法 采用逆转录聚合酶链式反应和Western blot法检测20例口腔鳞状细胞癌组织、颈部淋巴结组织、舌鳞状细胞癌细胞株Tca8113、颊鳞状细胞癌细胞株Bca885和10例正常口腔黏膜组织中CXCR4的表达,采用逆转录聚合酶链式反应检测CXCL12的表达,通过MTT法检测细胞的增殖能力,通过趋化实验观察CXCR4特异性配体CXCL12对口腔鳞状细胞癌细胞的趋化迁移作用。结果 1）在口腔鳞状细胞癌组织、Tca8113细胞及Bca885细胞中, CXCR4 mRNA的相对表达量分别为2.31±1.13、1.89±1.20、1.67±1.10,CXCR4蛋白的相对表达量分别为1.36±0.15、1.85±0.34、1.97±0.23,正常口腔黏膜组织在mRNA及蛋白质水平均未检测到CXCR4表达。口腔癌患者颈部淋巴结组 织中,CXCL12 mRNA表达量的平均值为1.14±0.87,而口腔鳞状细胞癌组织和正常口腔黏膜组织未检测出CXCL12的 表达。2）口腔鳞状细胞癌细胞在CXCL12作用下增殖反应明显增强,CXCR4抗体可明显抑制肿瘤细胞的增殖。3）趋化实验显示CXCL12可诱导口腔鳞状细胞癌细胞发生明显迁移,在30~100 ng·mL-1的范围内,诱导口腔鳞状细胞癌细 胞迁移的作用呈明显量效关系。结论 CXCR4/CXCL12受体配体系统可介导口腔鳞状细胞癌细胞的增殖和迁移, 在癌细胞向颈部淋巴结转移中发挥着重要作用。