槐定碱对人结肠腺癌细胞株SW620增殖和凋亡的影响

目的考察槐定碱对人结肠癌SW620细胞的增殖影响及探讨其诱导凋亡作用。方法MTT法测定槐定碱对SW620细胞的半数抑制浓度;光学显微镜、荧光显微镜及电镜观察细胞凋亡形态变化;流式细胞仪分析细胞周期变化及细胞凋亡率。结果实验结果显示槐定碱对体外培养的SW620细胞增殖具有明显抑制作用,并可诱导其发生凋亡,其作用呈剂量和时间依赖性,48hIC50=2.8mmol.L-1。凋亡细胞表现为细胞固缩、变圆、核染色质聚集或碎裂、胞质空泡化。DNA ladder结果显示有凋亡引起的"梯状"条带出现。流式细胞仪细胞周期分析结果表明,随着槐定碱作用时间的延长,G0-G1期细胞增多,同时S期细胞比例也相应增高。结论槐定碱对体外培养SW620细胞生长增殖有明显抑制作用,其作用机制与阻滞细胞周期的进程,诱导细胞凋亡相关。     

雷公藤红素通过活性氧诱导结肠癌SW620细胞凋亡

目的:探讨雷公藤红素(celestrol)诱导KRAS驱动的结肠癌SW620细胞产生凋亡的作用和机制。方法:四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和台盼蓝拒染法检测细胞增殖;免疫印迹法检测蛋白表达;流式细胞仪和荧光显微镜检测细胞凋亡、细胞周期、线粒体膜电位;荧光显微镜检测细胞内活性氧水平(reactive oxygen species,ROS)。结果:雷公藤红素明显抑制SW620细胞的增殖活性;雷公藤红素下调SW620胞内的p-Akt、NF-κB、Survivin表达,激活caspase-7、caspase-3 和PARP;雷公藤红素增加SW620细胞内的ROS、降低线粒体膜电位、阻滞细胞周期于G₂/M期和诱导凋亡。抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)抑制雷公藤红素引起的上述作用。结论:通过诱导细胞内ROS的累积导致细胞内线粒体膜电位的下降进而触发细胞发生凋亡是雷公藤红素诱导SW620细胞凋亡的作用机制之一。     

重楼活性单体PP-22对人结肠癌SW620细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨重楼活性单体PP-22对人结肠癌SW620细胞增殖和凋亡的影响及其联合5-氟尿嘧啶(5-FU)和洛铂的抗肿瘤效果。方法 采用噻唑蓝(MTT)法和克隆形成抑制实验观察不同浓度PP-22对人结肠癌SW620细胞增殖的抑制作用;分别观察PP-22联合5-FU和洛铂对人结肠癌SW620细胞增殖的抑制作用;碘化丙锭单染流式细胞术检测细胞周期变化及细胞凋亡水平;Western blot法检测PP-22作用后细胞凋亡相关蛋白的表达。结果 重楼单体PP-22能显著抑制SW620细胞的生长,作用呈剂量-效应关系;随着PP-22浓度的增加,细胞克隆形成逐渐减少,与细胞对照组和DMSO组相比有显著差异;PP-22联合不同浓度的5-FU和洛铂作用于SW620细胞48 h,可提高SW620细胞对5-FU和洛铂的敏感性;不同浓度PP-22作用于SW620细胞后,细胞周期阻滞于S期;PP-22作用后存在Caspase-3和Caspase-9蛋白的活化和降解,抗凋亡蛋白Bcl-2、Bcl-xL减少,促凋亡蛋白Bax的表达增加。结论 PP-22能显著抑制人结肠癌SW620细胞增殖,诱导细胞凋亡,提高SW620细胞对5-FU和洛铂的敏感性。     

腺病毒介导HSV-tk/GCV系统诱导ScaBER细胞凋亡的实验研究

目的 HSV-tk／GCV系统体外诱导膀胱癌队ScaBER细胞凋亡的作用，探讨其治疗膀胱癌的机制。方法 采用了带有CMV(人巨细胞病毒早期蛋白启动子)启动子驱动HSV-tk基因的重组腺病毒载体，体外转染ScaBER细胞后加入不同浓度更昔洛韦(GCV)，MTT法检测对癌细胞生长的抑制作用。应用倒置显微镜、荧光显微镜、透射电镜观察细胞凋亡的形态学，流式细胞仪定量检测细胞凋亡的查分率，琼脂糖凝胶电泳检测DNA断裂片断。结果 当MOI＝100时，MTT法表明HSV-tk／QCV系统作用于ScaBER细胞，能明显抑制细胞生长，呈时间、剂量依赖性。ScaBER细胞的IC50为3．23mg/L。透射电镜下可见凋亡小体。DNA琼脂糖凝胶电泳呈梯形条带。结论 HSV-tk／QCV系统对细胞有较强细胞毒作用，并可以诱导ScaBER细胞凋亡，诱导细胞凋亡是其抗肿瘤的主要机制之一。HSV-tk／GCV系统是一种治疗膀胱癌的新方法。     

熊果酸对HL60细胞作用机制的初步研究

目的探讨熊果酸在体外对急性早幼粒白血病HL60细胞增殖抑制和诱导凋亡作用。方法采用体外细胞培养技术,荧光显微镜观察细胞结构变化、MTT法观察细胞生长抑制作用、流式细胞仪检测细胞凋亡及周期变化。结果 MTT法证实熊果酸对HL60细胞具有增殖抑制和杀伤效应,并呈浓度和时间依赖性。显微镜下可见HL60细胞出现典型凋亡细胞形态学改变。流式细胞仪检测细胞周期阻滞于G0/G1期。结论熊果酸在体外可抑制急性早幼粒白血病HL60细胞增殖,诱导细胞凋亡。     

冬凌草甲素对人胰腺癌SW1990细胞系生长抑制作用

目的研究冬凌草甲素(oridonin)对人胰腺癌SW1990细胞生长抑制作用并探究其可能机制。方法采用MTT法检测冬凌草甲素对SW1990细胞增殖抑制作用、Hoechst 33258染色法及透射电镜观察细胞的形态学变化、流式细胞仪检测细胞周期及凋亡率、RT-PCR法检测survivin、p21mR-NA表达。结果冬凌草甲素对人胰腺癌SW1990细胞具有明显的生长抑制作用,荧光显微镜和透射电镜下均见到典型的凋亡形态学改变,流式分析出现亚G1峰并显示G2/M期周期阻滞。RT-PCR分析结果显示p21mRNA表达增加而survivin mRNA表达减少。结论冬凌草甲素通过诱导凋亡和G2/M期周期阻滞来抑制人胰腺癌SW1990细胞生长,其分子机制可能与survivin和p21调节的信号途径有关。     

固公果根提取物促进结肠癌细胞凋亡的机制研究

目的 探讨固公果根提取物促进结肠癌细胞凋亡及机制研究。方法 分别采用MTT法、DAPI染色及流式细胞术检测固公果根提取物对结肠癌细胞增殖活性及细胞凋亡的影响;蛋白免疫印迹（Western-Blot）法检测凋亡相关蛋白的活性表达水平。结果 固公果根提取物能显著抑制结肠癌SW620和LOVO细胞增殖,促进两种结肠癌细胞凋亡,上调凋亡相关基因Keap-1、Bax的蛋白表达,下调Nrf2、HO-1以及Bcl2蛋白的表达。结论 固公果根提取物能显著抑制人结肠癌细胞SW620和LOVO增殖、诱导细胞凋亡,其作用机制可能涉及调控凋亡相关基因Bax、Bcl-2表达,且与激活Nrf2氧化应激通路有关。     

苦参碱诱导胰腺癌细胞凋亡的实验研究

目的 探讨苦参碱对胰腺癌细胞SW 1990生长抑制和诱导凋亡作用.方法 将不同浓度的苦参碱作用于培养的SW1990细胞,通过MTT比色法、流式细胞仪和DNA凝胶电泳、电子显微镜技术观察检测细胞凋亡,研究分析其对SW1990细胞的生长抑制和诱导凋亡作用.结果 苦参碱浓度为0.5、1.0、1.5g/L时,细胞生长抑制率分别为14.3%、24.8%、41.6%;流式细胞术测定RD横纹肌肉瘤细胞的凋亡率分别为10.3%、18.3%、27.5%;DNA电泳见DNA"梯形"图谱;电镜显示肿瘤细胞的凋亡形态.结论 苦参碱能抑制SW1990细胞增殖,诱导其凋亡.     

土贝母皂苷诱导人鼻咽癌细胞株CNE-2Z细胞凋亡的研究

目的　研究土贝母皂苷 (下称皂苷 )对人鼻咽癌细胞株CNE 2Z细胞凋亡的影响。方法　MTT法检测皂苷对CNE 2Z细胞生长的影响 ;形态学方法 (荧光显微镜和透射电镜 )、流式细胞仪和DNA琼脂糖凝胶电泳观察和分析在皂苷作用下CNE 2Z细胞形态、DNA含量的变化和DNA断裂的情况 ;蛋白免疫印迹法检测凋亡相关基因bcl 2、bax和cas pase 3表达的变化。 结果　皂苷抑制CNE 2Z细胞的生长 ,其效果与皂苷的浓度和作用时间相关 ;诱导CNE 2Z细胞发生典型程序性死亡 ;凋亡抑制基因bcl 2表达逐渐减少 ;而凋亡诱导基因bax和caspase 3在 1、3、5h表达增高。 结论　诱导细胞凋亡是皂苷发挥抗瘤效果的一种重要机制 ;皂苷诱导的CNE 2Z细胞凋亡与bcl 2、bax和caspase 3基因有关     

三氧化二砷体外对人EGFR T790M肺腺癌细胞抑制作用的研究

目的观察三氧化二砷对在体外对EGFR T790M突变非小细胞肺癌H1975细胞的生长抑制作用。方法运用MTT法检测三氧化二砷对H1975细胞增殖抑制,流式细胞仪检测细胞周期变化。倒置显微镜观察三氧化二砷作用下细胞形态变化。结果不同浓度的三氧化二砷在体外均能明显抑制H1975细胞的增殖,且具有时间和浓度依赖性,与浓度和时间呈正比。倒置显微镜观察发现三氧化二砷具有诱导H1975细胞出现核固缩、染色质凝集等凋亡形态改变。流式细胞仪检测提示细胞周期停留在G0/G1期。结论三氧化二砷在体外能抑制EGFRT790M突变肺癌细胞增殖、诱导调亡和改变细胞周期的作用。     

土贝母皂苷体外诱导SW480细胞凋亡作用

目的探讨土贝母皂苷甲、丙对于SW 480肿瘤细胞的体外诱导细胞凋亡作用机制。方法通过光镜或电镜观察药物干预后SW 480细胞形态改变;采用流式细胞仪测定FITC-Annexin V/PI双标记后SW 480细胞凋亡早期信号;用免疫细胞化学的方法观察药物对细胞中Bc l-2,p53,Fas蛋白表达的影响。结果药物组与对照组比较,从细胞形态中观察到细胞凋亡的特征结构;用流式细胞仪检测到凋亡细胞和坏死细胞数量均有增加;免疫细胞化学检测表明土贝母皂苷是通过抑制Bc l-2,p53基因和上调Fas基因表达诱导细胞凋亡。结论土贝母皂苷甲、丙能够诱导SW 480细胞凋亡,这可能是土贝母皂苷抗肿瘤作用的途径之一。     

姜黄素联合伊立替康对结肠癌SW620细胞的体外抑制作用

目的研究姜黄素增强伊立替康对结肠癌SW620细胞的体外抑制作用,并探讨其作用机制。方法 MTT法检测不同质量浓度伊立替康和姜黄素单用或联合用药对SW620细胞增殖的影响;流式细胞仪检测不同质量浓度伊立替康和姜黄素单用或联合用药对SW620细胞凋亡的影响,比较细胞凋亡率;采用蛋白质印记法检测不同质量浓度伊立替康和姜黄素单用或联合用药对SW620细胞内拓扑异构酶I蛋白表达水平的影响。结果伊立替康和姜黄素单用均对SW620细胞增殖具有抑制作用,呈浓度和时间相关性。5、50μg/mL伊立替康分别与0~30μg/mL姜黄素联合处理SW620细胞12、24、48 h均具有协同抑制细胞活性的作用,且呈浓度和时间相关性。高质量浓度比低质量浓度的伊立替康与姜黄素联合用药抑制效果显著(P0.01)。0、20μg/mL姜黄素分别与0、5、50μg/mL伊立替康联合处理SW620细胞12、24、48 h,姜黄素可以增强伊立替康诱导的SW620细胞凋亡率。20μg/mL姜黄素联合5、50μg/mL伊立替康显著上调了SW620细胞内拓扑异构酶-Ⅰ蛋白的表达,协同诱导了SW620细胞内拓扑异构酶-Ⅰ蛋白的表达。结论伊立替康联合姜黄素可以协同增强对SW620细胞活性的抑制作用,协同诱导SW620细胞凋亡,其作用机制可能与伊立替康、姜黄素上调拓扑异构酶-Ⅰ表达有关。     

分枝石蕊多糖诱导人白血病K562细胞凋亡

目的：研究分枝石蕊多糖（CFP-1）是否能诱导K562细胞凋亡。方法：抑制细胞增殖的测定采用MTT法;用荧光显微镜和透射电镜观察细胞的形态学变化;采用琼脂糖凝胶电泳法观测DNA碎片;用流式细胞仪检测凋亡细胞数。结果：CFP-1（50-800mg/L）明显抑制K562细胞增殖,并且呈浓度依赖性,K562细胞与CFP-1300mg/L共同培养5d后,观察到典型的凋亡形态变化,电泳呈现梯形条带。结论：CFP-1诱导人白血病K562细胞凋亡。     

异鼠李素诱导A549细胞凋亡的研究

目的观察异鼠李素是否能诱导人肺腺癌细胞株A549细胞凋亡及相关基因的变化。方法20μg/ml异鼠李素处理A549细胞,光镜电镜下观察细胞形态;进行集落形成实验,MTT法测细胞生长抑制率;流式细胞仪检测凋亡峰及bax,bcl-2等凋亡相关基因的表达。结果10～640μg/ml异鼠李素可抑制A549细胞生长,抑制率有剂量依赖性。流式细胞仪检测20μg/ml异鼠李素处理后出现明显凋亡峰;药物可使bax表达上调,bcl-2表达明显下降,表达改变有浓度依赖性。结论异鼠李素可抑制A549细胞生长,诱导其凋亡,其诱导凋亡的作用与凋亡相关基因抗凋亡基因bcl-2表达明显下调,bax表达上调有关。     

NSAIDs对结肠癌细胞生长的抑制作用及对VEGF表达的影响

目的明确非甾体抗炎药（NSAIDs）对体外培养结肠癌细胞SW1116生长的影响及血管内皮生长因子（VEGF）表达的调控。方法采用MTT法观察NSAIDs对SW1116细胞生长的影响;电镜下观察尼美舒利诱导细胞凋亡的形态学变化;ELISA法检测细胞上清液中VEGF的含量。结果NSAIDs能呈剂量和时间依赖性抑制结肠癌SW1116细胞生长．加入尼美舒利后,上清液中VEGF的含量随作用时间的延长逐渐下降,作用72h后电镜下见凋亡小体。结论NSAIDs可明显抑制SW1116细胞生长,尼美舒利可诱导其凋亡,下调VEGF的表达,从而抑制结肠癌新生血管的形成。     

汉黄芩苷体外抗结肠癌作用及机制研究

目的研究汉黄芩苷对结肠癌细胞和肾小球系膜细胞增殖的影响,并探讨其诱导肿瘤细胞凋亡的机制。方法体外培养的结肠癌细胞和肾小球系膜细胞经不同浓度的汉黄芩苷处理后,MTT法检测细胞的存活率,激光共聚焦显微镜观察LoVo细胞的形态学变化,流式细胞仪术检测LoVo细胞的凋亡率,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测LoVo细胞凋亡相关基因bcl-2、bax的表达情况。结果 MTT检测结果显示,汉黄芩苷对体外培养的结肠癌细胞(CT-26,LoVo,Caco-2)的增殖具有明显的抑制作用,并呈剂量-效应关系,而对正常肾小球系膜细胞的毒性较小;明场和荧光图像显示汉黄芩苷作用后LoVo细胞出现明显的凋亡特征;流式细胞仪分析显示汉黄芩苷可以诱导LoVo细胞发生凋亡;RT-PCR检测结果显示汉黄芩苷可抑制LoVo细胞中bcl-2 mRNA的表达,促进bax mRNA的表达。结论汉黄芩苷可以显著抑制结肠癌细胞的增殖并诱导其凋亡,而对正常细胞影响较小,其机制可能与抗凋亡基因bcl-2表达下调,促凋亡基因bax表达上调有关。     

黄芪提取物抑制胃癌细胞对腹膜间皮细胞损伤的实验研究

目的观察黄芪提取物抑制胃癌细胞上清对腹膜间皮细胞的凋亡作用。方法将胃癌细胞(MKN45)上清单独或与黄芪提取物联合作用于人腹膜间皮细胞HMrSV。光镜下观察人腹膜间皮细胞形态学变化;MTT检测黄芪作用后人腹膜间皮细胞生长曲线;流式细胞仪检测细胞凋亡率,荧光显微镜观察细胞凋亡情况。结果 MTT及流式细胞仪检测出胃癌细胞(MKN45)上清诱导人腹膜间皮细胞凋亡呈时间依赖性;荧光显微镜观察胃癌细胞(MKN45)上清作用后,间皮细胞出现典型凋亡特征。结论黄芪提取物明显抑制胃癌上清促间皮细胞凋亡作用。     

人参皂苷-Rh2对人乳腺癌T47D细胞的生长抑制作用及对Caspase-3表达的影响

目的：研究人参皂苷-Rh2（GS-Rh2）对雌激素依赖性人乳腺癌T47D细胞增殖和凋亡的影响，并对可能引起凋亡的机制做一初步探索。方法：采用MTT比色法观察GS-Rh2对体外培养的T47D细胞生长的抑制作用；用光学显微镜观察T47D细胞用药前后的形态学变化；应用流式细胞仪检测凋亡细胞和细胞周期变化以及Castmse-3表达的变化。结果：MTT比色法测定结果显示，T47D细胞经GS-Rh2作用后生长受抑制，呈剂量依赖性和时间依赖性，半数抑制浓度（IC50）为21．6μg/mL；光学显微镜显示T47D细胞经GS-Rh2作用后呈较明显的凋亡形态学改变：流式细胞仪检测证实，GS-Rh2能在一定浓度范围内诱导T47D细胞凋亡，将细胞周期阻滞于G1期，并使Caspase-3表达增加。结论：GS-Rh2能抑制体外培养的T47D细胞增殖并诱导其凋亡。Caspase-3表达增加可能是GS-Rh2诱导T47D细胞凋亡的机制之一。     

温郁金二萜类化合物C对人结肠癌细胞SW620增殖的影响

目的观察温郁金醚提物中二萜类化合物C（以下简称化合物C）体外对人结肠癌细胞SW620生长、细胞凋亡和细胞周期的影响。方法以顺铂（DDP）为阳性对照药物,采用噻唑蓝（MTT）法检测化合物C对SW620细胞增殖的抑制作用; An nexin V FITC标记流式细胞术（FCM）检测化合物C对SW620细胞的凋亡抑制率,流式细胞术检测化合物C对SW620细胞周期的影响。结果MTT法显示化合物C对SW620的半数抑制浓度（IC50）为24.16 μg•mL 1,顺铂为45.80 μg•mL 1;化合物C较低浓度时的抑制率与阳性对照组(DDP组)相似,在30,50,70 μg•mL 1时的抑制率与对照组比较,差异有统计学意义（均P＜0.05）;FCM显示,化合物C能诱导SW620细胞凋亡,其诱导凋亡率呈现一定的浓度和时间依赖性,48 h后化合物C70 μg•mL 1组凋亡率为33.55%;化合物C能将SW620细胞阻滞于G1期,减少肿瘤细胞在S期和G2/M的比例。结论化合物C能诱导SW620细胞凋亡,阻滞其细胞周期,抑制细胞增殖,是温郁金发挥抗肿瘤作用的有效成分之一。     

蛇床子素体外对人前列腺癌DU145细胞增殖的抑制作用及机制

目的观察天然化合物蛇床子素对人前列腺癌DU145细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用,为临床应用提供实验基础。方法用不同浓度的蛇床子素作用于DU145细胞,用四甲基偶氮噻蓝(MTT)法检测细胞增殖;用流式细胞仪AnnexinV/PI双染法检测蛇床子素诱导DU145细胞凋亡;用荧光显微镜观察蛇床子素作用于DU145细胞后细胞核的形态变化。结果 MTT法显示,蛇床子素对DU145细胞的增殖有明显的抑制作用(P<0.05),并呈现明显的时间浓度依赖性;流式细胞仪法显示,蛇床子素可诱导DU145细胞凋亡,且呈浓度依赖性;荧光显微镜下观察到蛇床子素处理组可见核固缩、核碎裂等典型的凋亡改变。结论蛇床子素对人前列腺癌DU145细胞的增殖具有抑制作用,机制与其诱导细胞凋亡有关。