中药石菖蒲对脑内单胺类神经递质5-羟色胺水平的影响

目的:观察石菖蒲各提取部分对小鼠大脑内5-羟色胺(5-HT)含量的影响。方法:通过给小鼠灌服石菖蒲不同提取部分,用高效液相色谱-电化学检测法分别测定小鼠大脑内5-HT的含量,研究石菖蒲各提取部分对5-HT含量的影响。结果:小鼠灌服石菖蒲后大脑内5-HT的含量变化如下:石菖蒲挥发油组,石菖蒲水煎液及全方组5-HT的含量均比空白组显著升高(P<0.05,P<0.01,P<0.01)。结论:石菖蒲可显著增加小鼠大脑内5-羟色胺的含量,以此推测石菖蒲很可能通过上调脑内5-HT水平,促进血脑屏障的开放。     

人血浆中伊立替康及其活性代谢物7-乙基-10羟基喜树碱浓度高效液相色谱-荧光测定方法的建立

目的:建立人血浆中伊立替康(CPT-11)及其代谢物7-乙基-10羟基喜树碱(SN-38)的浓度测定方法并进行方法学考证。方法:用Luna 5u CN100A(4.6 mm×150 mm,5μm)色谱柱,乙腈与醋酸铵缓冲溶液(50 mmol.L-1,pH4)为流动相梯度洗脱,CPT-11的检测波长为Ex/Em=368 nm/432 nm,SN-38的检测波长为Ex/Em=368 nm/535 nm。结果:CPT-11保留时间为(9.3±0.3)min,SN-38保留时间为(4.8±0.3)min。空白样品在CPT-11、SN-38及内标喜树碱出峰位置均无干扰。CPT-11在46.9～6 000.0nmol.L-1的范围内线性良好,SN-38在2.0～250.0nmol.L-1的范围内线性良好,r值均为0.998。低浓度点RSD均在20%内,其余浓度点的RSD均在15%内,准确度均在85%～115%之间。血浆样品长期冻存稳定性良好,反复冻融3次及提取后室温放置24 h条件下,样品浓度均无显著变化。结论:使用高效液相色谱-荧光检测方法简便,准确,灵敏,适用于伊立替康及其活性代谢物SN-38的血药浓度检测。     

微透析取样和微柱液相色谱电化学检测法测定大鼠脑纹状体中的5-羟色胺

目的:建立一个测定生物样本中5-羟色胺的灵敏方法.方法:将微透析取样和微柱液相色谱电化学检测(LCEC)有机结合,建立灵敏的分析方法.结果:很容易地测定了自由活动大鼠脑纹状体透析液中fg-pg的5-羟色胺变化.结论:本法对生物活体研究很有用.健康大鼠脑纹状体内5-羟色胺水平是相当稳定的.     

HPLC-ECD法同时测定海洛因急性中毒大鼠不同脑区 中单胺类神经递质含量

目的:建立高效液相色谱-电化学检测器(HPLC-ECD)法同时测定大鼠伏隔核和纹状体两个不同脑区中单胺类神经递质多巴胺(DA)和5-羟色胺(5-HT)含量的方法,并对海洛因急性中毒大鼠不同脑区中单胺类神经递质的含量变化进行研究.方法:高效液相色谱采用QUATTRO C18色谱柱,以磷酸二氢钠-柠檬酸-辛烷磺酸钠缓冲液:...     

开心散对5-HT合成、代谢及重摄取的影响

目的中药复方开心散(KXS)抗抑郁作用明显。本文观察KXS对慢性应激大鼠脑匀浆液中色氨酸羟化酶(TPH)、5-羟色氨酸脱羧酶(AADC)、单胺氧化酶(MAO)、5-羟色胺转运体(SERT)等含量或活性的影响,探讨KXS对5-HT合成、代谢及重摄取的作用,明确KXS升高5-羟色胺(5-HT)含量的机制。方法选择Open-filed评分相近的雄性Wistar大鼠,采用孤养结合慢性不可预见性中等强度应激(CUMS)连续刺激3周造模,将CUMS大鼠随机分为模型组,KXS高剂量(676 mg·kg-1)组和KXS低剂量(338 mg·kg-1)组,连续灌胃给药3周,空白组和模型组动物给予生理盐水代替。给药结束后取脑组织匀浆,采用高效液相色谱法检测5-HT和5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)的含量,酶联免疫吸附法(ELISA)检测色氨酸(Trp)和AADC的含量,Western blotting法检测TPH和SERT的含量,化学发光法检测脑线粒体MAO-A和MAO-B的活性。结果与模型组相比,KXS 676 mg·kg-1和338 mg·kg-1均能显著升高CUMS大鼠脑匀浆液5-HT的含量(P<0.01);但5-HT的代谢产物5-HIAA的含量没有显著升高,用化学发光法进一步检测了KXS给药3周后大鼠脑线粒体中MAO-A和MAO-B活性的影响,发现KXS组MAO-A和MAO-B的活性无明显降低;Western blotting法检测SERT的含量并对蛋白条带进行灰度分析发现,KXS不能显著升高大鼠脑匀浆液中SERT蛋白的含量;但是,KXS 676 mg·kg-1和338 mg·kg-1均能升高CUMS大鼠脑匀浆液中Trp(P<0.05),AADC(P<0.05)及TPH(P<0.01)蛋白含量。结论开心散对5-HT重摄取和代谢无抑制作用,其可能是通过促进5-HT合成,升高CUMS大鼠脑5-HT含量,进而发挥抗抑郁作用的。     

用在体脑微透析技术研究大鼠纹状体中单胺递质的释放和代谢

采用脑微透析技术与高效液相色谱-电化学检测器联用测定了清醒自由活动大鼠纹状体细胞外液中多巴胺(DA)及其酸性代谢物3,4-二羟苯乙酸(DOPAC)和高香草酸(HVA)以及5-羟色胺代谢物5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)的含量.透析液中DA为0.44 pmol/40μl,DOPAC和HVA含量较DA高约80倍.右旋苯丙胺2 mg/kg,ip使纹状体DA释放显著增加,DOPAC和HVA含量明显下降.     

褪黑素对大鼠脑内β-内啡肽、去甲肾上腺素和5-羟色胺释放的影响

目的　观察褪黑素(MLT)对大鼠脑内β-内啡肽(β-Ep)、去甲肾上腺素(NE)及5-羟色胺(5-HT)释放的影响,以探讨MLT镇痛作用机制。方法　结合痛阈测定,放免测定第三脑室推挽灌流液中β-Ep样免疫活性物质(ir-βEp)含量;高效液相色谱法测定脑内微透析液中NE和5-HT的代谢产物。结果　ipMLT110mg·kg^-1可显著增加第三脑室灌流液中ir-βEp含量,同时显著提高大鼠痛阈;但对中脑导水管周围灰质(PAG)、下丘脑微透析液中3-甲氧基-4-羟基苯乙二醇、5-羟吲哚乙酸含量无显著影响。结论　MLT可促进脑内β-Ep的释放,可能是其镇痛作用的机制之一;MLT的镇痛作用与PAG、下丘脑内NE、5-HT的释放可能无关。     

芬氟拉明合用电针对大鼠脑内中央灰质单胺类释放的影响

目的:研究5-羟色胺释放剂芬氟拉明加强针刺镇痛前后大鼠脑内中央灰质(PAG)腹侧部单胺类递质的变化。方法:运用微透析及高效液相电化学检测方法。结果:电针后Nor的释放减少,而5-HT,5-HIAA和DA,HVA在AG部位含量升高(P<0.05,vs NS组)。当芬氟拉明合用电针时,5-HT,5-HIAA含量进一步升高,但Nor,DA及其代谢产物却无明显变化(P<0.05 vs NS EA组)。结论:电针能促进DA和5-HT释放但抑制Nor释放。芬氟拉明合用电针能进一步加强5-HT的释放。芬氟拉明加强针刺镇痛可能与进一步激活5-羟色胺系统有关。     

都可喜对慢性间断性缺氧大鼠学习记忆能力及脑内单胺类神经递质的影响

目的:探讨都可喜(Duxil,阿米三嗪+萝巴新)对慢性间断性缺氧(EHYP)大鼠学习记忆能力和脑内单胺类神经递质水平的影响。方法:建立EHYP大鼠模型,并给予Duxil(0.03片·350g~(-1)体重,bid)干预。用被动避暗回避反射试验评价大鼠学习记忆能力,潜伏期(STL)越长,学习记忆能力越强;用高效液相色谱电化学检测器法测定大鼠皮层、海马和纹状体内去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)和5-羟色胺(5-HT)等单胺类神经递质的含量。结果:与对照组相比,EHYP组大鼠STL明显缩短(P<0.01),各脑区单胺类神经递质水平显著降低(P<0.05)。与EHYP组相比,Duxil组大鼠STL显著延长(P<0.01),皮层NE和DA含量、海马NE,DA和5-HT含量以及纹状体NE,DA和5-HT含量显著升高(P<0.05)。结论:Duxil可改善EHYP大鼠学习记忆能力并提高脑内单胺类神经递质水平。     

高效液相色谱-电化学法测定大鼠纹状体细胞外液中单胺类神经递质含量

目的:建立应用常规高效液相色谱-电化学法(HPLC-ECD)测定大鼠脑微透析液中单胺类神经递质及其代谢产物。方法:将探针插入大鼠右侧纹状体,在清醒自由活动状态下,用Ringer氏液以1.5μL.min-1的速度灌流,每20 min收集l管透析液,将其注入HPLC-ECD仪,考察本方法的专属性、线性范围、精密度和准确度等,并对其中所含的NE、DA、DOPAC、HIAA、HVA和5-HT进行含量测定。结果:各递质在0.025～0.5 ng.μL-1范围内线性关系良好,方法加样回收完全,日间日内测定均RSD<3.8%。结论:本实验选用了高效液相色谱与电化学检测器连用的方法测定神经递质的含量,该方法简单准确、灵敏、特异性好。     

松果菊苷对脑缺血大鼠纹状体细胞外液中单胺类神经递质的影响

目的研究松果菊苷(ECH)对局灶型脑缺血大鼠纹状体细胞外液中单胺类递质的影响,以探讨ECH对脑神经保护作用的可能机制。方法 SD大鼠随机分为对照组、模型组、ECH高、低剂量组和川芎嗪(CXQ)组。各组大鼠给予相应的药物或生理盐水腹腔注射,每天1次,连续7 d。给药第3天,脑纹状体埋置探针套管,末次给药1 h后,制作大鼠局灶性脑缺血模型(MCAO),造模后立刻进行微透析,将透析液注入高效液相-电化学检测器(HPLC-ECD)测定各组纹状体细胞外液中去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)、3,4-二羟苯乙酸(DOPAC)、高香草酸(HVA)、5-羟吲哚乙酸(HIAA)的含量。结果与对照组相比,模型组NE、DA、5-HT水平升高,其酸性代谢产物DOPAC,HVA,HIAA也随之升高。与模型组比较,ECH高、低剂量组(30、15 mg.kg-1.d-1)和CXQ组的6种物质的含量均有所降低。结论 ECH的神经保护作用可能与对抗脑缺血后单胺类神经递质的升高有关。     

HPLC-ED联用同时测定脑中的5-羟色胺酸、5-羟色胺和5-羟吲哚乙酸

本文用反相高效液相色谱-电化学检测(HPLC-ED)法同时测定脑中5-羟色胺(5-HT),5-羟色胺酸(5-HTP)及5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)。本方法具有专一性强、快速、简便、高灵敏度等特点。5-HTP、5-HT 和5-HIAA 的标准溶液用含0.005%(w/v)抗坏血酸的0.1NHCl 配制,于-20°贮存待用。实验溶液和流动相均用去离子重蒸馏水配     

抗抑郁候选化合物GL-21对大鼠脑皮质中神经递质含量影响的研究

目的:研究抗抑郁候选化合物GL-21对大鼠脑皮质中神经递质去甲肾上腺素(NE)及5-羟色胺(5-HT)含量的影响。方法:采用微透析法取样和高效液相色谱法测定大鼠脑皮质中NE及5-HT的含量。结果:分别给大鼠GL-21 2,4和8 mg/kg后,可大幅增加大鼠脑皮质中神经递质NE及5-HT的含量(P<0.05 or P<0.01),且呈一定的剂量关系。结论:抗抑郁候选化合物GL-21可增加大脑皮质单胺类递质NE及5-HT含量。     

抑郁症模型大鼠血清雌激素水平与海马5-HT含量之间的关系

目的:观察抑郁症模型大鼠血清雌二醇(E2)水平、海马5-羟色胺(5-HT)含量及其中缝核雌激素受体β(ERβ)和色氨酸羟化酶2(TPH2)表达的变化,探讨抑郁症发生的可能机制.方法:雌性SD大鼠20只,随机平均分为正常组和模型组,模型组给予孤养和21 d慢性不可预见性的温和应激(CUMS)制备抑郁症大鼠模型.采用放射免疫分析法(RIA)测定血清雌二醇(E2)水平、高效液相色谱-电化学检测法(HPLC-ECD)测定海马5-羟色胺(5-HT)含量、RT-PCR技术检测中缝核ERβ mRNA和TPH2 mRNA表达以及荧光免疫组化双重染色法检测中缝核ERβ蛋白和TPH2蛋白表达.结果:21 d应激后,模型组大鼠血清E2水平下降、海马5-HT含量减少、中缝核ERβ mRNA和TPH2 mRNA相对表达量下降及ERβ阳性细胞数和TPH2阳性细胞数明显减少.结论:E2与海马5-HT之间可能存在E2→中缝核5-HT能神经元ERβ→TPH2→海马5-HT的功能作用链.     

松果菊苷对帕金森病大鼠纹状体及海马细胞外液中单胺类神经递质的影响

目的研究松果菊苷(echinacoside,ECH)对帕金森病(Parkinson's disease,PD)大鼠纹状体及海马细胞外液中单胺类神经递质的影响,以探讨ECH对脑神经保护作用的可能机制。方法采用双点注射6-羟基多巴胺损毁术制作PD模型,各组大鼠腹腔注射相应的药物或生理盐水连续4周,进行双靶点微透析程序,将透析液注入高效液相-电化学检测器(HPLC-ECD),测定各组大鼠纹状体及海马细胞外液中多巴胺(DA)、3,4-二羟基苯乙酸(DOPAC)、高香草酸(HVA)、去甲肾上腺素(NE)及5-羟色胺(5-HT)的含量。结果与对照组相比,模型组大鼠纹状体及海马细胞外液中NE、DA、DOPAC、HVA、5-HT含量均明显降低(P<0.01);与模型组相比,各给药组大鼠的纹状体及海马细胞外液中5种物质的含量均明显升高(P<0.05,P<0.01);ECH高剂量组与阳性药MD组相差不大。结论 ECH对PD大鼠纹状体及海马细胞外液中的单胺类神经递质的含量减少具有改善作用,对于PD具有一定的治疗作用,这是ECH对PD大鼠脑神经保护作用的可能机制之一。     

Cedemex对吗啡依赖性大鼠不同脑区3种单胺类神经递质的影响

目的:观察Cedemex对吗啡依赖性大鼠不同脑区单胺类神经递质的影响.方法:采用反相高效液相色谱-荧光检测法分别测定大鼠腹侧被盖区(VTA)、海马区、大脑皮层和伏隔核(NAe)共4个脑区的多巴胺(DA),去甲肾上腺素(NE)、及5-羟色胺(5-HT)的含量.结果:吗啡依赖大鼠脑内各区的DA,NE及5-HT等单胺类神经递质发生紊乱,其含量均明显高于正常.Cedemex能够促进吗啡依赖戒断后脑区内DA,NE及5-HT等单胺类神经递质含量趋于正常.结论:单胺类递质(DA,NE,5-HT)在吗啡依赖中可能起重要作用,Cedemex改善吗啡依赖性大鼠脑内单胺类神经递质的含量,可能是Cedemex临床治疗的作用机制之一.     

红人归胶囊治疗更年期综合征作用机制初探

目的进行红人归胶囊(HRG)治疗更年期综合征机制的研究。方法采用去势雌性(ovariec-tomized,OVX)大鼠作为更年期动物模型,放射性免疫法测定OVX大鼠血清雌二醇含量,高效液相色谱-电化学检测法测定下丘脑单胺神经递质及其代谢产物的含量,并测定其免疫器官的脏器系数。结果HRG可使OVX大鼠血清雌二醇含量升高,使下丘脑升高的5-羟色胺(5-HT)及其代谢产物5-羟色胺酸(5-HIAA)含量明显下降,显著提高去甲肾上腺素(NE)和多巴胺(DA)含量,使升高的5-HT含量与NE含量的比值降低至接近正常;HRG能提高OVX大鼠胸腺系数和脾系数。结论HRG通过调节植物神经功能、生殖内分泌系统和免疫功能,多层次、多途径、多环节地作用于更年期衰退的神经内分泌免疫网络,从而起到稳定机体内环境,缓解更年期症状的作用。     

伊立替康在晚期胃癌中的作用与地位

目的评价伊立替康在晚期胃癌化疗中的临床疗效及毒副作用。方法将52例晚期胃癌患者随机分为两组,A组应用伊立替康联合希罗达,B组应用伊立替康联合替加氟,均化疗2个周期以上,观察疗效及毒副作用。结果两组患者近期疗效比较,A组有效率为50%,B组有效率为46.15%,差异无统计学意义;毒副反应A组恶心、呕吐发生率、腹泻发生率较B组高,B组血小板减少较A组高(P<0.05)具有统计学意义。结论以CPT-11为基础的化疗方案对晚期胃癌有良好的疗效,且毒副反应可以耐受,CPT-11有望在晚期胃癌的治疗中起重要的作用。     

高效液相色谱-电化学法测定大鼠不同脑区的单胺类神经递质

目的:建立同时测定大鼠脑组织中单胺类神经递质去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)和5-羟色胺(5-HT)的高效液相色谱-电化学检测法(HPLC-ECD).方法:采用Diamonsil C18柱,以Na2HP04-枸橼酸-EDTA-庚烷磺酸钠-甲醇-水(80:40:2:7:32:89)为流动相,流速:1.2 ml/min.大鼠脑组织样品经高氯酸沉淀除去蛋白后,电化学检测脑内NE、DA和5-HT的含量.结果:脑组织中NE、5-HT的线性范围为0.50～10.00 ng,DA的线性范围为0.25～30.00ng.脑组织样品的相对回收率为91.7%～110.2%,日内、日间变异均小于15%.经初步研究,正常雄性SD大鼠不同脑区内NE、DA和5-HT的含量分别为伏隔核(508±203)、(3140±486)、(601±105)ng/g,腹侧被盖区(695±152)、(746±143)、(1049±222)ng/g,下丘脑(2032±351)、(332±236)、(847±218)ng/g,纹状体(790±205)、(5816±805)、(538±112)ng/g.结论:该方法具有准确、灵敏、样品制备简便等优点,可用于大鼠部分脑区内单胺类神经递质的分离测定.     

高效液相色谱-电化学法测定大鼠不同脑区的单胺类神经递质

目的:建立同时测定大鼠脑组织中单胺类神经递质去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)和5-羟色胺(5-HT)的高效液相色谱-电化学检测法(HPLC-ECD).方法:采用Diamonsil C18柱,以Na2HP04-枸橼酸-EDTA-庚烷磺酸钠-甲醇-水(80:40:2:7:32:89)为流动相,流速:1.2 ml/min.大鼠脑组织样品经高氯酸沉淀除去蛋白后,电化学检测脑内NE、DA和5-HT的含量.结果:脑组织中NE、5-HT的线性范围为0.50～10.00 ng,DA的线性范围为0.25～30.00ng.脑组织样品的相对回收率为91.7%～110.2%,日内、日间变异均小于15%.经初步研究,正常雄性SD大鼠不同脑区内NE、DA和5-HT的含量分别为伏隔核(508±203)、(3140±486)、(601±105)ng/g,腹侧被盖区(695±152)、(746±143)、(1049±222)ng/g,下丘脑(2032±351)、(332±236)、(847±218)ng/g,纹状体(790±205)、(5816±805)、(538±112)ng/g.结论:该方法具有准确、灵敏、样品制备简便等优点,可用于大鼠部分脑区内单胺类神经递质的分离测定.