低氧条件下三氧化二砷对人肺腺癌A549细胞增殖的影响

目的:对比研究常氧和低氧条件下三氧化二砷（arsenic trioxide,As2O3）对人肺腺癌A549细胞增殖的抑制作用。方法:分别在常氧（21％ O2）和低氧（5％ O2）条件下以1、2、4 μmol/L As2O3处理人肺腺癌A549细胞，12、24、48 h后收集细胞，以MTT法检测细胞增殖抑制率，以Annexin VPI双染色流式细胞术检测细胞凋亡，分析两种条件下As2O3对细胞增殖抑制率及凋亡率的影响。结果: 常氧及低氧条件下，细胞增殖抑制率、细胞早期凋亡率及总凋亡率均随As2O3浓度的增加及作用时间的延长而增加（均P<0.05），晚期凋亡率变化不显著。在As2O3相同浓度、相同处理时间，低氧条件下细胞增殖抑制率及凋亡率较常氧条件下无明显降低。结论: As2O3可促进细胞凋亡，显著抑制A549细胞增殖，且在低氧条件下的上述作用未见减弱。     

三氧化二砷对人肺癌细胞株增殖和凋亡的影响

目的 探讨三氧化二砷（Ａｓ２Ｏ３）对人肺癌的潜在性治疗作用及可能的机制。方法 选用人肺癌细胞株ＧＬＣ－８３,运用细胞培养法、ＭＴＴ法、流式细胞术（ＦＣＭ）检测细胞生长曲线、细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡。结果 三氧化二砷可明显抑制ＧＬＣ－８２细胞的增殖,其抑制作用具有时－效和量－效关系。当４．０μｍｏｌ／Ｌ三氧化二砷处理ＧＬＣ－８２细胞９６小时,增殖抑制率达８１．０５％,ＦＣＭ检测肿瘤细胞ＤＮＡ含量,观察到三氧化二砷ＧＬＣ－８２细胞周期阻滞于Ｇ２／Ｍ期,细胞周期进程变慢,同时出现剂量依赖性Ｇ１峰。结论 三氧化二砷能有效地抑制人肺癌细胞株ＧＬＣ－８２的增殖,其可能的机制与三氧化二砷使细胞阻滞于Ｇ２／Ｍ期并诱导其调亡有关。     

三氧化二砷诱导A549^DDP细胞株耐药基因表达的研究

目的：探讨三氧化二胂（As2O3）的耐药机制。方法：用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测A549^DDP细胞对As2O3的耐药基因(mdrl）及多药耐药相关蛋白（MRP）基因表达。结果：A549^DDP细胞对As2O3具有交叉耐药性。A549和A549^DDP细胞中mdrl基因低表达,MRP基因呈较高水平表达。结论：A549^DDP细胞对As2O3基因过度表达可能是As2O3耐药的主要机制之一。     

缺氧诱导对人非小细胞肺癌A549凋亡及Survivin基因表达的影响

背景与目的:观察缺氧诱导对非小细胞肺癌细胞株A549凋亡及其Survivin 基因表达变化的影响.材料与方法:利用COCl2构建缺氧诱导模型,采用MTT法观察不同浓度CoCI2(0、50、100、200、400 μmol/L)作用A549细胞以及相同浓度CoOl2(200 μmol/L)作用不同时间(4、12、24 h)后,A549细胞增殖的变化,实验同时设对照组;荧光显微镜观察细胞核的形态变化;RT-PCR法检测A549细胞Survivin mRNA表达水平.结果:CoCl2作用A549细胞后,其生长抑制率呈现一定的时间、剂量依赖性,且随着CoCl2浓度的增加细胞的Survivin mRNA表达水平呈下降趋势.结论:缺氧能抑制AM9细胞增殖,并诱导其凋亡;Survivin基因表达水平的下降与缺氧诱导的细胞凋亡有关.     

吗啡对人肺腺癌A549细胞增殖的作用研究

目的 观察不同浓度吗啡对A549细胞增殖及凋亡的影响。方法 采用不同浓度的吗啡（0.3、3、30 μg/ml）处理A549细胞48 h后采用CCK-8法检测其增殖情况,Annexin-V FITC/PI双染法检测30 μg/ml吗啡作用48 h后的细胞凋亡率,Western blotting检测30 μg/ml吗啡作用48 h后的X连锁凋亡抑制蛋白（XIAP）、Survivin、Bcl-2、caspase-3和Bax蛋白表达水平。 结果 吗啡可以剂量依赖性促进A549细胞增殖,各浓度间的差异均有统计学意义（P＜0.05）。与对照组相比,30 μg/ml吗啡降低了A549细胞的凋亡率（P＜0.05）,且Survivin和XIAP蛋白水平升高,而caspase-3蛋白水平降低（P＜0.05）。 结论 吗啡可促进人肺腺癌A549细胞增殖并抑制其凋亡,可能与吗啡上调XIAP、Survivin蛋白的表达和抑制caspase-3蛋白活化有关。     

三氧化二砷对人肺腺癌A549细胞的放射增敏作用

[目的]探讨三氧化二砷(As2O3)对人肺腺癌A549细胞的放射增敏作用.[方法]MTT法确定As2O3对A549细胞的半数致死浓度(LD50),采用集落形成法观察20％LD50的As2O3对A549细胞的放射增敏作用.[结果]细胞生长抑制随As2O3浓度的增加而增强.As2O3+照射组的细胞存活率低于单纯照射组,D0值小于单纯照射组(1.46Gy vs 2.03 Gy),Dq值也小于单纯照射组(0.49 Gy vs 1.35Gy),存活曲线肩区(Dq)变小,放射增敏比(SER)为1.39.[结论]As2O3对肺腺癌A549细胞有明显的放射增敏作用,抑制A549细胞的修复能力使照射后细胞存活分数降低是其放射增敏的可能机制.     

MLN4924促进人肺腺癌细胞株A549凋亡的机制研究

  目的  观察MLN4924对人肺腺癌A549细胞增殖、凋亡的影响,探讨MLN4924促进凋亡的作用机制。  方法  不同浓度的MLN4924作用细胞不同时间后,采用CCK-8检测细胞增殖抑制率;Hoechst33342荧光染色、流式细胞仪检测细胞凋亡率及细胞周期;Western blot检测凋亡相关蛋白Caspase-3、NF-κB p65及CDT1相对表达量。  结果  MLN4924能够明显抑制A549细胞的增殖,并且具有浓度和时间依赖性。流式细胞仪检测结果显示药物作用后,细胞被阻滞在S期。Western blot结果显示药物作用后细胞内Caspase-3、CDT1蛋白的表达量增加,而NF-κB p65的表达量减少。  结论  MLN4924能够明显抑制A549细胞增殖、促进细胞凋亡,其相关机制为MLN4924可阻滞细胞于S期,增加Caspase-3蛋白表达,抑制NF-κB通路的激活。      

三氧化二砷诱导A549DDP细胞株耐药基因表达的研究

目的:探讨三氧化二砷(As2O3)的耐药机制.方法:用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测A549DDP细胞对As2O3的耐药性,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测As2O3处理后A549DDP细胞多药耐药基因(mdr1)及多药耐药相关蛋白(MRP)基因表达.结果:A549DDP细胞对As2O3具有交叉耐药性.A549和A549DDP细胞中mdr1基因低表达,MRP基因呈较高水平表达.结论:A549DDP细胞中MRP基因过度表达可能是As2O3耐药的主要机制之一.     

三氧化二砷对A549细胞增殖抑制作用及其机制

[目的]探讨三氧化二砷对肺癌A549细胞的增殖抑制作用及其作用机制.[方法]以不同浓度三氧化二砷作用于体外培养的A549细胞,MTT法检测细胞生长抑制率,应用流式细胞仪及Hoechst 33258荧光染色法观察细胞凋亡,TRAP-PCR-ELISA法检测细胞凋亡前后的端粒酶活性.[结果]三氧化二砷可显著降低A549细胞端粒酶活性,抑制细胞的生长,诱导细胞发生凋亡,并呈现出明显的量-效与时-效关系;在Hoechst染色图片上可见细胞染色质浓缩及细胞核碎裂等典型的凋亡改变.[结论]三氧化二砷能抑制A549细胞的生长并诱导细胞发生凋亡,降低细胞端粒酶活性可能是其重要作用机制之一.     

三氧化二砷逆转人肺腺癌A549/ R 细胞耐药及对GSTs 表达的影响

 目的 探讨三氧化二砷（As₂O₃）对人肺腺癌A549／R细胞耐药的逆转及谷胱甘肽S转移酶（GSTs）表达的变化。方法 分别采用生化方法及RT-PCR方法检测GSTs活性及GST-πmRNA表达水平的变化。结果 0．15μmol／L As2O3可使A549／R细胞内阿霉素（ADM）浓度增加，其IC50值由原来的0．495μmol／L降低至0．217μmol／L，逆转倍数为2．3倍。耐药细胞中GSTs活性增高，GST-πmRNA呈过表达状态。不同浓度的As2O3作用后，GSTs活性下降（P〈0．05），GST-πmRNA表达水平下调，呈浓度依赖性变化。结论 As₂O₃可部分逆转A549／R细胞对ADM的耐药性，GST-π的改变参与其耐药机制。     

三氧化二砷对HL-60细胞凋亡及Survivin和Caspase-3表达的影响

目的:探讨三氧化二砷(As2O3)诱导HL-60细胞凋亡过程中Survivin基因表达以及Caspase-3蛋白变化情况。方法:采用7.5μmol/L As2O3和20μmol/LAc-devd-cho单独或联合作用于HL-60细胞,半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测Survivin mRNA、免疫组织化学法检测Caspase-3蛋白的变化,流式细胞术检测HL-60细胞的凋亡率。结果:7.5μmol/LAs2O3作用HL-60细胞24h和48h后,其凋亡率分别为(31.93±0.34)%和(55.91±0.52)%,Survivin mRNA比值分别为51.42%和22.37%,Caspase-3蛋白激活逐渐增加;20μmol/L Ac-devd-cho对HL-60细胞凋亡和Survivin mRNA表达均无影响;20μmol/L Ac-devd-cho和7.5μmol/L As2O3共同作用HL-60细胞24h和48h,细胞凋亡率分别为(9.61±0.21)%和(13.05±0.35)%,分别与As2O3单独作用组相比有显著性差异(P<0.05),Survivin mRNA比值分别为52.14%和21.08%,分别与As2O3单独作用组相比无显著性差异(P>0.05),Caspase-3蛋白激活被阻断。结论:As2O3诱导HL-60细胞凋亡与抑制Survivin基因表达、激活Caspase-3蛋白的活性有关。     

三氧化二砷作用机制研究进展

砷化合物在我国作为药物应用已有2400多年的历史了。自从20世纪90年代,我国学者应用三氧化二砷（As2O3）治疗急性早幼粒细胞性白血病并获得成功以来,人们对砷化合物进行了深入的研究,发现As2O3不仅对各型白血病有效,对其他多种恶性肿瘤也有良好的治疗效果。As2O3主要是通过抑制肿瘤细胞生长和肿瘤新生血管形成、诱导肿瘤细胞部分分化和凋亡等发挥抗肿瘤作用的。本文不仅对上述问题进行总结,还展望了新发展起来的基因表达谱分析技术--基因芯片技术在研究As2O3作用机制方面的应用前景。     

三氧化二砷对肝癌细胞survivin基因和端粒酶活性的影响

目的:探讨三氧化二砷(As2O3)诱导肝癌细胞凋亡时survivin基因表达和端粒酶活性的变化。方法:采用倒置相差显微镜观察细胞形态,流式细胞仪分析细胞亚二倍体百分率,逆转录-多聚酶链式反应检测细胞survivin mRNA表达,免疫组织化学染色检测细胞survivin蛋白的表达,端粒酶检测试剂盒检测端粒酶活性。结果:0.25~2.00μmol/L As2O3明显抑制肝癌Bel-7402细胞生长,诱导细胞凋亡,survivin mRNA和蛋白表达上调,端粒酶活性下降,呈时间、剂量依赖关系。结论:As2O3抑制肝癌Bel-7402细胞增殖,诱导细胞凋亡,可能与其降低端粒酶活性有关;而survivin基因表达上调,可能是抵抗As2O3诱导凋亡的途径之一。     

三氧化二砷抑制淋巴瘤细胞株血管内皮生长因子表达的研究

 目的　探讨三氧化二砷（ATO）对人类淋巴瘤细胞株内血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响。方法　应用实时荧光定量聚合酶链（Real-time PCR）技术及酶联免疫吸附（ELISA）法检测ATO作用前后淋巴瘤细胞株Raji及Jurkat内VEGF基因及其蛋白表达量的变化。结果　在ATO诱导淋巴瘤细胞株凋亡过程中,两种细胞未经ATO处理前均高表达VEGF mRNA（Raji加药2 μmol／L 12 h△△Ct值0.75±0.15,Jurkat加药3.5 μmol／L 72 h△△Ct值1.67±0.13）及VEGF蛋白（加药12 h,Raji 198.38±4.37;Jurkat 563.11±3.81）,且Jurkat细胞较Raji细胞的VEGF蛋白的表达量高;经ATO作用24、48、72 h后VEGF的mRNA表达量均较加药前明显减少（加药72 h△△Ct值,Raji：8.95±0.38;Jurkat：9.09±0.16）,差异有统计学意义（t＝3.54,P＜0.01;t＝3.65,P＜0.01）;同时蛋白表达量也较加药前明显减少（加药72 h,Raji：23.55±2.06;Jurkat：57.11±3.88）,差异有统计学意义（t＝2.48,P＜0.05;t＝2.59,P＜0.05）,且两者与药物作用时间明显相关,各时间点之间蛋白表达量差异均有统计学意义（F＝2.47,P＜0.05;F＝2.50,P＜0.05）。结论　ATO通过阻断淋巴瘤细胞生长所需的血管条件,从而抑制淋巴瘤细胞的增殖。     

PTEN在三氧化二砷诱导肝癌细胞(SMMC-7721)凋亡中的作用

目的 研究PTEN在三氧化二砷(arsenic trioxide,As2O3)诱导肝癌细胞凋亡中的作用.方法 采用四甲基偶氮唑盐(MTT)方法检测As2O3对SMMC-7721细胞增殖的抑制作用;流式细胞仪定量检测各组细胞的凋亡率;Western blot方法检测各组细胞中PTEN蛋白的表达情况;用PTEN siRNA转染SMMC-7721细胞,观察其对As2O3诱导细胞凋亡作用的影响.结果 As2O3能显著抑制SMMC-7721细胞存活率,其抑制率呈剂量依赖关系;As2O3剂量依赖性诱导肝癌细胞凋亡;Western blot检测显示As2O3明显增加细胞中PTEN蛋白的表达;PTEN siRNA转染可减弱As2O3对SMMC-7721细胞凋亡的诱导作用.结论 As2O3诱导SMMC-7721细胞凋亡可能与其诱导PTEN表达有关.     

三氧化二砷对涎腺导管癌抑制作用的初步观察

目的观察三氧化二砷（As2O3）对人涎腺导管癌（Salivaryductcarcinoma）细胞的抑制作用,探索治疗人涎腺导管细胞癌的新途径。方法建立人涎腺导管癌细胞系,应用不同浓度As2O3在不同时间点作用人涎腺导管癌细胞株,以MTT和形态学分析法观察细胞的变化。结果不同浓度三氧化二砷在不同时间点对人涎腺导管癌细胞均有明娃抑制作用,并呈时间剂量依赖关系,癌细胞异形性逐渐消失,细胞凋亡现象明显,可见凋亡小体。结论As2O3对人涎腺导管癌细胞株具有显著的抑制增殖、诱导分化和促进凋亡作用。     

三氧化二砷诱导多药耐药白血病细胞K562-n/VCR凋亡

目的 研究三氧化二砷(AS2O3)对裸鼠高成瘤性慢性粒细胞白血病(CML)急变细胞系K562-n及其表达mdr-1的多药耐药细胞系K562-n／VCR诱导凋亡作用的差异。方法 采用WST法、细胞形态学、流式细胞术等多参数分析。结果 AS2O3对K562-n及K562-n／VCR的抑制作用无显著性差异。AS2O3对K562-n及K562-n／VCR细胞的凋亡诱导作用呈作用时间和浓度依赖关系。结论 AS2O3对表达mdr—1的CML急变期细胞系K562-n／VCR具有抑制生长及较明显的诱导凋亡作用。     

三氧化二砷对人卵巢癌耐药细胞株细胞增殖和转移能力的影响

背景与目的:卵巢恶性肿瘤细胞对顺铂的耐药性及早期发生转移严重影响着卵巢恶性肿瘤患者的化疗效果。本研究探讨三氧化二砷(arsenictrioxide,As2O3)对人卵巢癌耐药细胞株3AO/cDDP细胞增殖和转移能力的影响及其机制。方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测不同浓度As2O3对3AO/cDDP细胞的生长抑制率;采用流式细胞技术(FCM)检测As2O3对细胞凋亡率、细胞周期以及Fas、N-myc基因和nm23H1、MTA1基因表达的影响。所有结果均与对照组比较。采用透射电镜技术观察As2O3作用后3AO/cDDP细胞的形态变化。结果:As2O3明显抑制3AO/cDDP细胞的增殖,抑制作用呈时间和剂量依赖性(P<0.05)。在一定浓度范围内,3AO/cDDP细胞凋亡率与As2O3的浓度和作用时间呈依赖关系,诱导凋亡的最适浓度是3μmol/L。低浓度As2O3作用下,3AO/cDDP细胞周期S期通过受阻,高浓度时诱导S期细胞凋亡;As2O3作用后,两种细胞株Fas和nm23H1基因的表达均上调,N-myc和MTA1基因的表达均下调,差异均有显著性(P>0.05);形态学观察可看到As2O3作用后3AO/cDDP形成典型的凋亡小体。结论:As2O3通过上调Fas、nm23H1和下调N-myc、MTA1基因的表达,有效地降低人卵巢癌耐药细胞株细胞的增殖和转移能力。     

三氧化二砷抗肝癌作用的研究进展

 临床已证实三氧化二砷（As2O3）能有效治疗急性早幼粒细胞性白血病，在此基础上，有关As2O3抗肝癌作用的研究报告也越来越多，该文就As2O3抗肝癌作用的实验研究和临床应用作一综述。     

氧化砷对MR2细胞耐药转运分子作用的研究

目的探讨三氧化二砷(As2O3)对肿瘤耐药转运分子的作用。方法以耐全反式维甲酸(ATRA)早幼粒白血病细胞株MR2为研究对象,以非耐药早幼粒白血病细胞株NB4为对照组,用免疫组化法观察P糖蛋白(Pgp)、多药耐药相关蛋白(MRP)和肺耐药相关蛋白(LRP)的表达。结果MR2细胞Pgp表达为30%～40%,NB4细胞为10%～20%,二者差异有极显著性(P<0.001)。MR2细胞MRP表达为56.9±3.4～21.2±1.1,NB4细胞为20.6±5.3～16.7±1.2,二者差异有极显著性(P<0.001)。0.5～2.0μmol/LAs2O3能显著降低MR2细胞中Pgp和MRP的表达,而对LRP的表达无影响。MR2细胞中Pgp和MRP表达的降低与As2O3作用浓度和作用时间呈负相关。结论MR2细胞耐药转运分子Pgp和MRP表达的下调,可能是As2O3克服耐药的敏感靶分子,而LRP则否。ATRA可能是Pgp和MRP的转运底物