新型铕络合物用于HBsAg的时间分辨荧光免疫检测

利用稳定的新型铕荧光络合物BHHCT与Eu3+标记羊抗人HBsAb和Eu3+标记BSA-SA,建立定量测定血清HBsAb的Eu3+-BHHCT-HBsAb-TRFIA法和Eu3+-BHHCT-BSA-SA-TRFIA法.结果表明,这两种方法最低检出值分别为0.2ng/mL和0.05ng/mL,标准曲线范围均为0-100ng/mL,批内变异系数CV均小于10%,后者回收率为85%-115%.用Eu3+-BHHCT-BSA-SA-TRFIA法与ELISA法同时检测118份血清样品,结果表明前者的检出率比后者高.     

基于纳米铕核铁蛋白时间分辨荧光免疫方法的建立

以人铁蛋白(ferritin,FER)为材料,制备纳米铕核微粒,并建立竞争型FER免疫检测方法。用稀盐酸解离FER的亚基后,纯化脱去游离铁,再通过酸碱中和方法重组蛋白外壳,同时将铕离子包裹于去铁蛋白内,制备铕核铁蛋白。经反应条件优化,确定pH 2.0为FER最适解离酸度。FER外壳重组时,铕试剂的添加量约为FER物质量的10 000倍时能获得最大捕获效率。以此建立了铕核-FER时间分辨荧光免疫检测方法,其灵敏度为0.576ng/mL,IC_(50)为13.15ng/mL,批间变异系数CV%<15%,非特异性结合率低。用制备成的铕核-FER构建的竞争法TRFIA与FER夹心法试剂盒对照,两者相关系数达0.966。通过上述方法获得免疫活性好、铕含量高的标记用纳米分子,简化了传统的铕标记方法,建立了构建纳米铕核铁蛋白的新方法。     

时间分辨荧光分析测定细胞活性和破膜法实验研究

采用Eu3+-DTPA标记L-929株靶细胞，经时间分辨荧光仪测定，建立一种崭新的时间分辨荧光分析法来测定细胞活性，此法具有灵敏度高，有效期长，不污染环境等优点。     

时间分辨荧光免疫法测定血清AFP的方法学评价

对时间分辨荧光免疫法(TRFIA)测定血清AFP的方法学予以评价.评价TRFIA法测定AFP的线性范围、灵敏度、精密度、回收率及与ELISA法和RIA法的相关性.结果显示:AFP线性范围1～1000U/mL,检测下限≤0.1 U/mL,批内及批间变异系数分别为2.3%、5.3%,回收率97.85%,与ELISA法及RIA法高度相关,r值分别为0.982与0.991.正常血清AFP参考值0.8～10.5 U/mL.结论:TRFIA测定AFP线性范围宽,稳定性好,灵敏度与准确度高,无放射性污染,是当前免疫分析中有发展前途的一项超微量检测技术.     

镧系元素时间分辨荧光免疫分析

一、概述 应用镧系元素的时间分辨荧光(TRF)分析技术,已在免疫检测中显示出它的优越性。在医学各学科中;如内分泌激素的检查、肿瘤标志物的检测,以及体内各种内或外源     

CEA时间分辨荧光免疫分析

以ＣＥＡ单克隆抗体Ｃ５０包被微孔板,异硫氰酸苄基二乙烯三胺四乙酸络合Ｅｕ＾３＋标记Ｃ１７单抗。采用平衡法建立ＣＥＡ时间分辨荧光免疫分析,数据采用Ｌｏｇ＝Ｌｏｇｉｔ函数数据自理程序处理。方法的批内和批间ＣＶ分别为２．９７％和１．６０％,平均回收率为１０１．９８％,灵敏度为０．２０μｇ／Ｌ,可测范围为２．３９～５０８．９μｇ／Ｌ,ＥＤ５０为６０．９１μｇ／Ｌ。本方法与ＡＦＰ和ＣＡ１２５和ＣＡ１５３无交     

在时间分辨荧光免疫分析中铕标记技术的初步探讨

本文介绍了稀土元素标记白蛋白和时间分辨荧光测定。采用二步标记法,借助二乙基三胺五醋酸酐将Eu~(3+)标记到白蛋白抗原上的简便方法。用LKB的时间分辨荧光计和紫外分光光度计测得标记率为10Eu~(3+)/白蛋白分子,为建立白蛋白的时间分辨荧光免疫分析法打下基础。     

时间分辨荧光免疫分析技术在寄生虫病诊断中的应用

时间分辨荧光免疫分析（Time—resolved fluoroimmunoassay,TRFIA）是一种新型的体外超微量分析技术．被公认为是目前灵敏度最高的分析方法之一,并以其独特的优势近些年迅速发展,已延伸至生物医学、临床医学研究的各个领域。本文就该技术的研究进展及在某些寄生虫病检测诊断中的相关应用作一简要综述。     

时间分辨荧光免疫分析方法学评价

目的：通过内质控的定量分析，对时间分辨荧光分析的方法学进行客观评价。方法：以促甲状腺激素检测为例，对系统探测灵敏度 ，低、中、高持控血清的批内和批间精密度，批间稳定性参数Slope、ED20、ED50、ED80等4项指标，系统探测的准确度（回收试验），系统探测的有效性（平行试验），受试者工作特性曲线（receiver operator characteristic,ROC）等进行定量测定和描述。结果；TSH的最小测定值为0．002μU/mL.低、中、高3种质控样品批内和批间变异系数均小于5％，批间稳定性参数各变异系数均小于5％，与统计学要求相一致，且符合标准曲线质控参数的重现性。回收试验满足临床要求，符合检验统计结果。理论值与实测值间作回归分析，相关系数r=0．999。ROC显示，甲亢诊断的最佳阈值为0．3μU/mL，甲低诊断的最佳阈值为5．0μU/mL。甲亢敏感度为89．3％，特异度为93．3％，准确度为90．1％，阳性似然比为13．4，甲低敏感度为83．8％，特异率为90．9％，准确度为86．4％，阳性似然比为9．2。结论：时间分辨荧光免疫分析方法是一种效果好、准确度高、灵敏度高、特异性强、测试精度良好的自动化免疫分析方法。     

铁蛋白时间分辨荧光免疫分析法的建立

用夹心法建立铁蛋白(FER)时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA),测定血清FER的含量。以FER单克隆抗体(McAb)806#包被板,双功能螯合剂异氰酸苄基二乙烯三胺四乙酸络合Eu^3 及标记FERMcAb 803#,发光增强系统为以β-二酮体为主的增强液。采用双对数函数数据处理程序,方法的批内和批间CV分别为2．2％和3．7％,平均回收率为118％,灵敏度为0．5μg／L,可测范围为0．5-1000μg／L。ED20、ED50和ED80分别为27．8μg／L、88．5μg／L和247μg／L。Eu^3 FER McAb于-30℃保存至少4个月,免疫反应性基本无损失,同批试剂连续分析4个月结果稳定。本法与PE公司的FER-TRFIA试剂盒所得样品的测定值的相关系数为0．98。本文建立的FER-TRFIA法,是一种适用于人群贫血普查和各种肝脏疾病及肿瘤的联合诊断的良好方法,分析范围、灵敏度和稳定性均较理想,值得推广应用。     

BAS—时间分辨荧光免疫测定中的一些实验条件

本文综述ＢＡＳ－时间分辨荧光免疫测定技术的实验条件。包括链亲合系的Ｅｕ＾３＾＋标记，抗体或抗原生物素化方法，因相抗体或抗原包被等最佳实验条件。并观察了Ｅｕ＾３＾＋链亲合素的稳定性以及影响测定结果的主要因素。     

昆明地区正常人甲状腺相关激素时间分辨荧光免疫分析

为确定本地区甲状腺相关激素时间分辨荧光免疫分析法 (TRFIA)的正常参考值范围 ,对本地区 96名正常成人血清T3 、T4 、TSH、FT3 和FT4 作TRFIA测定。测量结果批间CV <5 % ,批内CV <2 % ;本地区正常参考值范围为 :T4 :6 6 - 171nmol/L ;T3 :1.0 - 2 .5nmol/L ;TSH :0 .3- 4.5mIU/L ;FT3 :3.1- 7.0 2 pmol/L ;FT4 :6 .4-2 2 .0 pmol/L。     

血清铁蛋白时间分辨荧光免疫分析试剂盒的研制

目的 血清铁蛋白(sFER)时间分辨荧光免疫(TRFIA)分析试剂盒的研制.方法 采用双抗体夹心法建立sFER-TRFIA试剂盒,并对试剂盒的各项指标进行评价.结果 试剂盒的线性测量范围为2.2～1 070 ng/mL,灵敏度为0.22 ng/mL,批内、批间的精密度分别为4.6%～7.2%、5.4%～8.9%,与癌胚抗原(CEA)、甲胎蛋白(AFP)和人白蛋白无交叉反应.86份血清样本用本试剂盒与国外其他试剂盒同时检测,其相关系数为0.994.结论 试剂盒各项指标均达到临床检测要求,可替代国外同类产品试剂盒.     

Anytest-2000时间分辨荧光分析仪介绍

时间分辨荧光免疫分析方法(TRFIA)是一种先进的免疫检验新技术,TRFIA方法是20世纪80年代中期发展起来的一种新的荧光标记技术,它与传统的FIA、ELISA和RIA相比,具有很多优点：灵敏度高、特异性强、稳定性好、动态范围宽、试剂货架期长、无放射性危害等,迄今已被国际上公认为现代标记免疫最佳方法之一。本文介绍Anytest-2000时间分辨荧光分析仪(TRF仪)。     

HBeAg时间分辨荧光免疫分析法的建立

采用平衡饱和法建立了乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)时间分辨荧光免疫分析法.以针对HBeAg的单克隆抗体G8包被板,双功能螯合剂异氰酸苄基二乙烯三胺四乙酸络合Eu3+及标记C4单抗,发光增强系统为以β-二酮体为主的增强液.数据采用Log-Logit法函数和四参数Logitc函数数据处理程序处理.结果表明方法的批内和批间CV分别为2.39%和5.28%,平均回收率为97.62%,灵敏度为0.58NCU/mL,可测范围为12.01-529.84NCU/mL,ED20、ED50和ED80分别为6.36NCU/mL、26.85NCU/mL和136.7NCU/mL.本方法与HBsAg有13.1%的交叉反应.Eu3+标记抗体-30℃保存6个月免疫反应性基本无损失,同批试剂连续5个月应用分析结果稳定.HBeAg时间分辨荧光免疫分析的质量参数优于EIA和IRMA.     

时间分辨荧光免疫分析方法建立中有关问题的探讨

本文报告了时间分辨荧光免疫分析技术建立中有关问题的实验研究结果。包括对Eu~(3+)标记技术的改进,增强液的配制和检定,抗体包被固相材料的选择及操作中必须注意的防止稀土元素污染的措施。     

AFP时间分辨荧光免疫分析试剂盒的研制及其临床应用

目的:研制AFP时间分辨荧光免疫分析(TrFIA)试剂盒。方法:采用双抗体夹心法建立AFP-Tr-FIA试剂盒,对反应条件进行优化,并对试剂盒的各项指标进行评价。结果:抗体包被浓度确定为5μg/m l,铕标抗体最佳稀释比为1 50。试剂盒的线性范围为1ng/m l~1210ng/m l,灵敏度为0.41ng/m l,准确度高,批内和批间变异系数分别5.1%~8.8%,6.7%~11.9%。与CA199、CA125、CEA和白蛋白无交叉反应。破坏试验表明试剂在37℃可稳定7d。收集50例肝癌患者和370例健康人血清,用本试剂盒测得肝癌患者血清AFP浓度(557.3ng/m l±322.1ng/m l)显著高于健康人(6.5ng/m l±5.4ng/m l)(P<0.001)。370例正常人血清标本测试该试剂盒的正常参考范围为(0~12.0)ng/m l。本试剂盒检测结果与商用W allac AFP试剂盒检测结果相关系数为0.9988。结论:试剂盒各项指标达到规定的要求,可用于临床血清AFP检测。     

时间分辨荧光免疫分析法测定人血清α-FP

本文报告应用时间分辨荧光免疫分析技术测定人血清α-FP浓度。研究结果表明,将BAS引入该技术,使方法学稳定性和灵敏度有明显提高。本法批内CV为3.8～5.2％。批间CV为4.80～12.3％,最小检出值<1ng/ml,平均回收率为102.8％。健康成人测定参考值为5.56±5.38ng/ml(±SD)。聚苯乙烯微量滴定孔条经戊二醛处理后可提高包被抗体含量。