四叶参内生真菌SYY1抗氧化及抑菌活性的初步研究

目的:研究四叶参内生真菌SYY1的抗氧化活性及其抑菌活性。方法:采用DPPH法和铁氰化钾还原力法测定四叶参内生真菌SYY1的抗氧化活性,用滤纸片法测定其抑菌活性。结果:在测试浓度0~6mg/m L范围内,四叶参内生真菌SYY1对DPPH自由基清除率及其还原能力与浓度均呈明显的量效关系。其IC50值为12.25mg/m L,EC50值为2.16mg/m L。在测试菌株中,四叶参内生真菌SYY1对白色念珠菌YEM30和白色念珠菌SU5314有抑菌作用,其对白色念珠菌YEM30抑菌圈直径为6.69±0.26mm,对白色念珠菌SU5314抑菌圈直径为5.93±0.54mm。结论:四叶参内生真菌SYY1具有一定抗氧化和抑菌活性,是筛选天然生物活性成分的潜在资源。     

3种仙人掌植物内生真菌抑菌活性的研究

目的从墨西哥仙人掌、元江仙人掌、绿仙人掌的肉质茎中分离内生真菌,并进行初步鉴定及活性筛选。方法选择30种病原微生物作为指示菌进行抑菌试验。结果从3种仙人掌的茎中分离出111株内生真菌,其中49株内生真菌对一种或多种病原微生物有抑制作用,来自墨西哥仙人掌、元江仙人掌、绿仙人掌的抗菌活性菌株比例分别为48.4%、42.9%及42.3%,其中平板抑菌直径大于15mm的高抗菌株有20株。抗菌活性菌株主要分布于青霉属、曲霉属等19个属中。结论首次从仙人掌中分离和鉴定出111株内生真菌,仙人掌内生真菌中广泛分布着活性菌株。     

桃儿七内生真菌分离及其抑菌活性初步研究

目的 探明桃儿七内生真菌资源多样性及其抑菌活性特征。方法 通过组织块法对内生真菌进行分离,并选择5种植物病原真菌和4种细菌作为指示菌,采用对峙法和改进的菌块法测定抑菌活性。结果 从桃儿七根、茎、叶中分离出49株内生真菌,根部最多,22株,其次为茎部,18株,叶部最少,9株;经形态学分类鉴定归于2个目,3个科,9个属,梭孢霉属为优势菌属;有22株菌对1种或多种供试植物病原真菌有不同程度的抑制作用,占分离菌株数的44.8%,有8株菌对2种或多种供试植物病原真菌有明显的抑制作用,其占所分离菌株总数的16.3%,有3株菌对4种或多种供试植物病原真菌有明显抑制作用,2株内生真菌分别对2种供试指示细菌具有明显的抑制作用。结论 桃儿七内生真菌具有多样性和明显的抗外源真菌活性,抑菌活性菌株主要分布在曲霉属、单孢枝霉属、梭孢霉属,其内生真菌的研究和开发具有重要的生态和经济意义。     

见血封喉内生真菌的分离鉴定及抑菌活性研究

目的 分离和鉴定见血封喉Antiaris toxicaria根韧皮部中的内生真菌,并检测其抑菌活性。方法 以金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA)和白色念珠菌Candida albicans作为指示菌,采用杯碟法对内生真菌发酵上清液进行抑菌试验。结果 从见血封喉根的韧皮部中分离出6株内生真菌,经形态鉴定分属于聚端孢霉属(Trichothecium LK. ex Fr.)、枝顶孢霉属(Acremonium LK. ex Fr.)和丝核菌属(Rhizoctonia DC. ex Fr.)。其中内生真菌J6的发酵上清液对MRSA有抑菌活性,抑菌圈直径为18 mm。结论 首次对见血封喉内生真菌进行了研究,内生真菌J6对MRSA有明显的抑菌活性,其抑菌活性成分值得进一步研究。     

金叶女贞内生真菌分离及抑菌活性

［摘要］目的　探讨金叶女贞内生真菌的多样性及其次生代谢产物抑制细菌活性．方法　采用植物组织块培养分离法从金叶女贞茎和叶中分离内生真菌,分别进行YPD液体培养,将培养物过滤后用丙酮萃取次生代谢产物,以大肠杆菌（Escherichia coli）、绿脓杆菌（Pseudomonas aeruginosa）、金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）为试验指示菌株,用滤纸片法分别测定次生代谢产物对3种供试菌的抑菌活性．结果　从金叶女贞茎和叶中共分离得到29株内生真菌,有25株内生真菌对试验菌株有一定的抑制作用,占总分离菌株的86.2%．不具抗菌活性的菌株为4株,占总分离菌株的13.8%．结论　金叶女贞茎、叶中均存在丰富的内生真菌资源,其次生代谢产物具有良好的抑菌活性．     

泰山黄精内生真菌的分离鉴定及抑菌活性研究

目的 研究泰山黄精内生真菌的分布及其多样性,并筛选具有抑菌活性的内生真菌。方法 采用平板分离法分离黄精内生真菌,采用滤纸片扩散法测试黄精内生真菌培养物抗耐药菌活性,同时采用分子生物学方法对筛选出的活性菌株进行鉴定。结果 从泰山野生黄精的根、茎、叶和果实中共分离出32株内生真菌,分属于7个属,分布最广的类群是镰刀菌属Fusarium sp.,占总菌株的31.3%,其次是不产孢真菌Sterile mycelia（28.1%）和链格孢属Alternaria sp.（21.9%）。各组织中内生真菌的分布存在一定的组织差异性,根中内生真菌的分离率最高,茎和叶中次之,果实中最少。共有来自5个属的14株内生真菌至少对1种供试菌株有抗菌活性,其中8株具有广谱抗耐药菌活性。对活性最强、抑菌谱最广的不产孢菌株HJG-10进行分子生物学鉴定,将其确定为裂褶菌Schizophyllum commune。结论 泰山黄精中蕴含着大量具有抑菌活性的内生真菌,为寻找和开发新型抑菌生物制剂开辟了一条新途径。     

滇重楼内生真菌的分离及其抑菌活性

目的 从滇重楼新鲜植株中分离内生真菌并研究其代谢产物抑制人体病原细菌的能力.方法 滇重楼新鲜植株表面消毒后, 采用YPD平板分离培养内生真菌.各菌株的液体发酵物经乙酸乙酯萃取并浓缩.然后, 以金黄色葡萄球菌、伤寒沙门菌、屎肠球菌3种可感染人体的细菌为指示菌, 采用滤纸片琼脂扩散法测定抑菌活性.结果 分离到54株内生真菌.其中20株内生真菌有抑菌活性, 活性菌株占总菌株数量的37%.其中, J09对上述3种细菌的抑菌圈直径分别为 (49.67±1.25) mm、 (50.33±0.52) mm、 (37.00±1.63) mm, 经形态学观察及分子生物学鉴定, J09为灰黄青霉.同时, 经高效液相色谱检测确定, 该抑菌成分并非青霉素或灰黄霉素.结论 内生真菌 (J09) 的代谢产物抑菌活性较强, 具有开发抗菌药物的潜在价值.     

麻栎内生真菌抗菌活性的研究

从壳斗科植物麻栎中共分得81株内生真菌,对其发酵液的乙酸乙酯提取物进行抗菌活性测定,其中36株菌的代谢产物显示出较强的抑制细菌或真菌的能力.对其中一株抗菌活性很强的曲霉进行了产物富集,通过活性追踪分离得到Rubrofusarin B和Fonsecinone A.     

滇重楼内生灰黄青霉抑菌产物的热稳定性

目的 对1株滇重楼内生灰黄青霉的代谢产物108号洗脱物进行成分分析和热稳定性研究, 并与阿莫西林的热稳定性进行对比.方法 采用薄层色谱法和柱色谱法分离提纯该菌株的次生代谢产物;在体外以金黄色葡萄球菌、伤寒沙门菌、屎肠球菌为指示菌, 检测108号洗脱物抑菌效果 (纸片法) , 根据抑菌圈直径对比108号洗脱物与阿莫西林的热稳定性.结果 从该灰黄青霉次生代谢产物中, 分离得到组分108号洗脱物.经紫外扫描法及薄层色谱分析, 初步判定分离产物108号洗脱物为单一化合物.常温下, 其对3种不同指示菌的抑菌圈依次为24 mm、25.3 mm、7.6 mm;经121.3℃加热处理后, 与阿莫西林相比, 该化合物对指示菌均保持了较稳定的抑菌圈直径.结论 化合物108号洗脱物可以耐受高压蒸汽灭菌, 在一定程度上具有较强的热稳定性.     

厚朴内生真菌的分离鉴定及药理学活性的分析

目的：从要用植物厚朴的枝条的皮质部分离内生真菌,并对抗肿瘤,抑菌等药理学活性进行分析。方法：采用马铃薯葡萄糖培养基（PDA）为分离及发酵培养基,并对分离出的内生真菌进行发酵培养,提取代谢产物进行抑菌活性分析。结果：从来源不同的三种厚朴中共分离出51株内生真菌;分别来自青霉属（Penicillium）,镰刀菌属（Fusarium）,交链孢属（Alternaria）,等20个属。其中青霉属有生长优势。对各菌株发酵液的提取物进行药理学检测,发现各发酵产物均呈现出不同的抗肿瘤及抑菌活性,而其中的13株有抑菌活性。结论：发酵产物中含有大量的抑菌物质。可以并有良好的抑菌效果。可以为下一步开发提供良好的微生物资源基础。     

植物内生真菌抗稻瘟病菌活性菌株的筛选

目的筛选具有抗稻瘟病菌活性的植物内生真菌菌株。方法以稻瘟病（Magnaporthe grisea）菌株GUY11为靶标菌,对分离自南方红豆杉的56株内生真菌菌株进行抗稻瘟病菌活性筛选。结果共有16株菌株发酵液对GUY11孢子萌发的ID50在10以上,且对其附着胞形成的ID50在50以上,占总菌株数的28.6%;活性菌株主要分布在拟青霉属（Paecilomyces sp.）和木霉属（Trichoderma sp.）,分别是9株和2株;不同内生真菌的发酵液对孢子萌发和附着胞形成的抑制作用是不同的。结论红豆杉内生真菌对稻瘟病菌具有较高的抑制活性。     

兰科药用植物的5种内生真菌产生的植物激素

目的　研究促进兰科药用植物生长发育的5种内生真菌产生的植物激素,从物质角度探讨内生真菌促进其生长发育的机制。方法　从真菌发酵液和菌丝体中分别提取植物激素,用高效液相色谱进行梯度洗脱,分析鉴定其中赤霉素(GA3),吲哚乙酸(IAA)、脱落酸(ABA)、玉米素(Z)、玉米素核苷(ZR)5种植物激素并测定其含量。结果　5种内生真菌均能不同程度地产生一种或几种上述激素。结论　以上结果为阐明内生真菌促进兰科药用植物生长发育的作用机制提供实验依据。     

杜仲内生真菌的分离鉴定及其对异甜菊醇的生物转化研究

目的:从植物杜仲的根、茎、叶中分离内生真菌并进行初步鉴定,并研究获得的杜仲内生真菌对异甜菊醇的生物转化活性。方法:采用形态学方法对分离菌株进行鉴定,并对其进行异甜菊醇生物转化活性筛选实验。结果:从健康杜仲的根、茎、叶中分离获得52株内生真菌,属于2纲,2目,4科,10属。其中有4株内生真菌对异甜菊醇具有生物转化活性,分别为交链孢霉Alternaria sp.EL3、瘤座霉Tubercularia sp.ER3、镰孢霉Fusarium sp.EL7及青霉Penicillium sp.ES2。结论:杜仲内生真菌多样性丰富,部分内生真菌对异甜菊醇具有生物转化活性,具有很好的研究和应用价值。     

半夏内生菌SY-Z5不同发酵方式代谢产物的抗菌、抗肿瘤活性研究

[目的]通过固体和液体两种方式对实验室保存的半夏内生菌SY-Z5进行发酵,分别提取代谢产物,初步研究其抑菌和抗肿瘤活性。[方法]将固体培养和摇床发酵的产物预处理后,分别依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取,通过抑菌实验和抗肿瘤实验初步检测其提取物活性。[结果]SY-Z5两种发酵方式的代谢产物均具有抑菌和抗肿瘤活性,其中乙酸乙酯粗提物效果最明显,固体发酵效果好于液体发酵。[结论]内生菌SY-Z5代谢产物具有抑菌和抗肿瘤活性,活性代谢产物主要存在于乙酸乙酯相中,为进一步分离抑菌和抗肿瘤活性物质和新药开发筛选前体化合物奠定基础。     

荒漠植物牛心朴子耐盐内生真菌活性初筛

目的考察含盐马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基对宁夏野生荒漠植物牛心朴子内生真菌分离、纯化及抗真菌活性的影响,为牛心朴子耐盐研究奠定基础。方法采用含不同质量分数NaCl(0%,5%,10%,15%,20%,30%)的PDA培养基对牛心朴子内生真菌进行分离、纯化;将得到的内生真菌发酵培养,发酵物分别用乙酸乙酯、正丁醇萃取后,采用稻瘟霉模型初步筛选萃取物活性菌株。结果共得到45株内生真菌,其中PDA培养基组15株(占全部菌株数的33.3%),5%NaCl组24株(占全部菌株数的53.3%),10%NaCl组6株(占全部菌株数的13.3%),NaCl质量分数大于15%时无菌株生长。乙酸乙酯部位完全抑制稻瘟霉孢子萌发共16株,其中PDA培养基组3株,且菌株Dy-3的活性极强(15.6μg/m L),几乎与酮康唑相当(7.8μg/m L),5%NaCl组共13株,10%NaCl组无活性;正丁醇部位完全抑制孢子萌发共18株,其中3株活性较强,且对应其乙酸乙酯部位活性较弱。结论耐盐培养对内生真菌的分离及抗稻瘟霉活性均有显著影响,5%NaCl为筛选耐盐活性菌株的较优质量分数;耐盐培养下正丁醇萃取物仍有活...     

红豆杉根的显微结构及其内生真菌分布

目的研究南方红豆杉根的显微结构及其内生真菌的分布。方法取自然生长状态下南方红豆杉根,石蜡切片光学显微观察并照相。结果南方红豆杉根的次生结构由周皮和维管系统组成,次生木质部由轴向系统和径向系统两部分构成。轴向系统由管胞和木薄壁组织细胞组成;径向系统由木射线构成;根的次生韧皮部则由筛胞和韧皮薄壁细胞组成。次生韧皮中分布有少量韧皮纤维,韧皮射线不明显。根被细胞中分布有大量内生真菌菌丝。结论南方红豆杉根的次生构造与其他裸子植物和双子叶植物一致,但次生木质部由管胞,次生韧皮部由筛胞组成。内生真菌分布于红豆杉根被细胞,并只在一定区域细胞中分布。     

人参内生真菌的分离及其体外抗真菌、抗肿瘤活性

目的:分离人参内生真菌,并探讨其代谢产物粗提物的体外抗真菌、抗肿瘤活性。方法：首次对5年生园参和15年生移山参内生真菌进行了分离,以稻瘟霉（Pyricularia oryzae P-2b）为筛选模型,采用微量稀释法筛选人参内生真菌体外抗病原真菌活性,MTT法检测其体外抗肿瘤活性。结果：从人参中共计分离得到内生真菌48株,其中16株（33.3%）能完全抑制稻瘟霉活性。16株具有活性的内生真菌中11株（22.9%,11/48）抗白念珠菌（Candida albicans）、新生隐球菌（Cryptococcus neoformans）、红色毛癣菌（Trichophyton rubrum）、薰烟曲霉菌（Aspergillus fumigatus）活性较好;5株（10.4%,5/48）抗胃癌细胞（MKN45）、肠癌细胞（LOVO）、肝癌细胞（HepG2）、白血病细胞（HL-60）活性较好。其中,以园参-25（Yuan-25）抗真菌活性最佳,其抗红色毛癣菌的MIC80为4 mg/L,与阳性对照氟康唑的抗菌活性相当;园参-27（Yuan-27）抗肿瘤活性最优,其抗肿瘤细胞的IC50均与阳性对照阿霉素较接近。结论：分离得到的人参内生真菌具有潜在的抗肿瘤、抗真菌活性,值得进一步研究和开发。