肉苁蓉多糖的分离、纯化和鉴定

目的 分离、纯化和鉴定壮阳中药肉苁蓉Cistanche deserticola中的多糖成分。方法 经脱脂、沸水抽提、乙醇沉淀、Sevag法脱蛋白得到的粗多糖，再经DEAE－Sephadex A-50离子交换层析和Sephacryl S-200凝胶柱层析得到纯净的肉苁蓉多糖（CDPS），用红外光谱和紫外光谱分析鉴定该多糖。结果 红外光谱分析具有典型的多糖特征吸收峰，紫外光谱分析未见核酸和蛋白质的特征吸收峰。结论 本实验所提取的肉苁蓉多糖为单一、纯净的多糖。     

虫草真菌多糖的分离纯化及鉴定

<正> 1.材料1·1 菌种:菌株A(本实验室保存菌株)。1·1·1 培养基 黄豆粉培养基:蚕蛹粉15％蛋白胨3.5％ 酵母浸汁1.5％ Na_2HPo_4 1％ 黄豆粉30％ MgSo_41％ 葡萄糖3％自来水配制调 PH7.2 15Pa灭菌20分钟1·1·2 培养条件:26℃200rpm振荡培养5天。1·2 试剂:山梨糖、半乳糖、葡萄糖(北京化工厂产品)甘露糖(上海试剂工厂产品)薄层层折硅胶G     

当归多糖的提取纯化工艺研究

目的 优选并确立当归多糖的最佳提取和纯化工艺。方法 以多糖收率为指标,采用正交试验法对提取过程中加水倍量,提取时间及提取次数进行优化研究;以多糖收率和质量分数为考察指标,采用传统乙醇沉淀法进行比较。结果 最优提取工艺为加水10倍量,提取3次,每次提取时间3 h;最佳纯化工艺为：当归水提液浓缩后,加入乙醇使醇沉体积分数达到80％,静置12 h,醇沉2次。结论 所得当归多糖的质量分数达到50％以上,满足实验要求。     

闽产木立芦荟多糖的分离纯化及初步分析

目的 分离纯化及初步分析产木立芦荟中的多糖。方法 芦荟经沸水提取,醇沉,Sevage法去除蛋白质,Sephadex G-200柱色谱分离纯化,制得闽产木立芦荟多糖,以硫酸－苯酚法测定其总糖含量。结果 闽产木立芦荟多糖经紫外吸收光谱扫描具有多糖特征吸收峰,未见核酸和蛋白质吸收峰,多糖含量可达89．7％,初步分析由D－甘露糖和D－葡萄糖等单糖组成。结论 从闽产木立芦荟中可提取分离纯度较高的杂多糖。     

肉苁蓉水溶性多糖的分离纯化及分析

目的:从肉苁蓉药材中提取、分离、纯化肉苁蓉多糖,并对其进行分析.方法:采用95%乙醇脱脂、水提醇沉得粗多糖,Sephadex柱层析精制多糖;用薄层层析鉴定其单糖组成,测定其比旋光度和紫外光谱对多糖的纯度进行鉴定.结果:该多糖的紫外光谱只有单一峰位、其不同浓度乙醇的沉淀物比旋光度一致.结论:用此方法分离纯化的多糖为均一组分.     

龙葵多糖的分离、纯化和鉴定(Ⅱ)

首次从中草药龙葵Ｓｏｌａｎｕｍ ｎｉｇｒｕｍ Ｌ．的稀碱提取液中分离得到２种多糖ＳＮＬ－３,ＳＮＬ－４。分别经琼脂糖凝脉电泳、凝胶柱层析法分析,证实均为单一组分。ＳＮＬ－３,ＳＮＬ－４经酸水解、Ｓｍｉｔｈ降解、红外等确知,ＳＮＬ－３由Ｄ－木糖（７５．７％）、Ｄ－甘露糖（９．２％）、Ｄ－葡萄糖（４．９％）和Ｄ－半乳糖（１０．２％）组成,分子量为２３７００;ＳＮＬ－４由Ｄ－木糖（８９．４％）、Ｄ－甘露     

白毛藤多糖的分离、纯化和鉴定

目的分离、纯化和鉴定白毛藤S olanum ly ra tum中的多糖的成分。方法经脱脂、沸水抽提、乙醇沉淀、酶-Sevag法脱蛋白得到的粗多糖,再经DEAE-Sepharose fast flow阴离子交换和Sephadex G-200葡聚糖凝胶柱色谱分离得到纯化的白毛藤多糖(SLPS),用红外光谱和紫外光谱分析鉴定该多糖,凝胶渗透色谱(GPC)法测定其相对分子质量,运用薄板色谱(TLC)和纸色谱(PC)法初步测其结构组成。结果红外光谱分析具有典型的多糖特征吸收峰,紫外光谱分析未见蛋白质(280 nm)与核酸(260 nm)的特征吸收峰。结论本实验所提取的白毛藤多糖为单一组分的多糖。     

荔枝多糖分离纯化及纯度鉴定

目的：从荔枝肉中提取多糖,并对其进行分级纯化及纯度鉴定。方法：利用热水提取,乙醇沉淀提取荔枝多糖,通过去蛋白、去色素对多糖进行纯化,用凝胶色谱柱sephadex G-25对荔枝多糖进行分级纯化,纯化后的多糖分别用聚丙烯酰胺凝胶柱P-100、聚丙烯酰胺凝胶电泳和醋酸纤维薄膜电泳法检测多糖的纯度。结果：经水提醇沉后,经sephadex G-25分级得两种级分得到多糖A1和多糖A2,A1、A2的得率分别为0．726％、0．957％。对A2进行纯度鉴定：从聚丙烯酰胺凝胶P—100柱的洗脱图谱、聚丙烯酰胺凝胶电泳和醋酸纤维薄膜电泳的电泳色带均证明A2为纯品。结论：荔枝多糖存在两个级分。     

当归多糖AP-0对小鼠移植性肿瘤的抑制作用

目的　观察当归总多糖AP 0对于 3种小鼠移植性肿瘤的抑制作用。方法　小鼠肉瘤S180模型建立 :二级昆明种小鼠 ,每只鼠鼷部接种 5× 10 6瘤细胞。接种次日起 ,每日 1次定时ipAP 0 30mg·kg-1,10 0mg·kg-1和 30 0mg·kg-1,阳性对照组ip环磷酰胺 (Cy) 30mg·kg-1,共 10d ,第 11天活杀小鼠 ,称瘤质量、体质量、胸腺和脾质量 ,统计结果。小鼠Ehrlich腹水癌 (EAC)模型建立 :二级昆明种小鼠 ,每鼠ip接种 2 .5× 10 6瘤细胞。接种后次日起 ,每日 1次定时ipAP 0 30mg·kg-1,10 0mg·kg-1和 30 0mg·kg-1,阳性对照组ip氟尿嘧啶 ( 5 FU) 2 0mg·kg-1,共 10d ,观察各组 6 0d平均存活天数 ,计算生命延长率。小鼠白血病L12 10模型建立 :二级DBA/2小鼠 ,每鼠ip接种 1× 10 5瘤细胞。接种后次日起 ,每日 1次定时ipAP 0 30mg·kg-1,10 0mg·kg-1和 30 0mg·kg-1,阳性对照组ip环磷酰胺 (Cy) 30mg·kg-1,共 10d ;第 30天处死 ,计算生命延长率。结果　小鼠肉瘤 180实验结果 :瘤质量指标 :NS组和各治疗组瘤质量均大于Cy组 (P <0 .0 1) ;胸腺质量指标 :10 0mg·kg-1组胸腺质量小于NS组 (P <0 .0 5 ) ,30mg·kg-1和 30 0mg·kg-1组胸腺质量明显小于NS组 (P <0 .0 1) ,但 30mg·kg-1组胸腺质量大于Cy组 (P <0 .0 5 ) ,10 0mg·     

反相高效液相色谱法测定当归挥发油中藁苯内酯含量

目的：采用反相高效液相色谱法测定当归挥发油中藁苯内酯含量,为当归挥发油皮肤渗透动力学研究提供依据.方法：以乙腈-水（78∶22）为流动相,流速1.0mL/min,25℃下经Inertsil ODS-3（4.6mm×250mm,5μm）色谱柱分离,于280nm波长处检测.结果：藁苯内酯与挥发油中其它成分的分离效果良好,在0.5～80.0mg/L浓度范围内呈良好的线性关系,回归方程为：Y=45342.52X-8462.62（r=0.9998,n=5）;平均回收率为100.07%,相对标准偏差为0.18%.结论：本方法简便、准确,可快速测定当归挥发油中藁苯内酯的含量,可为质量控制提供依据.     

蛇床子中喔斯脑、欧芹属素乙的提取分离及鉴定

从蛇床果实的乙醇提取物中经柱层析、薄板层析、高效液相层析证明有八种成分,已测定其中喔斯脑(Qsthol,欧芹酚—7—甲醚)及欧芹属素乙(imperatonin)为主要成分,并分离得到单体,其它六种化合物因含量少,未进一步进行分离。     

归芍止痛汤治疗原发性痛经84例疗效观察

目的观察归芍止痛汤治疗原发性痛经的临床疗效。方法将符合条件的166例患者随机分为治疗组84例,对照组82例。治疗组给予归芍止痛汤治疗,对照组给予消炎痛治疗。结果治疗组治愈率65.5%,总有效率95.2%;对照组治愈率26.8%,总有效率70.7%。结论归芍止痛汤治疗原发性痛经疗效确切。     

当归对体外黑素细胞和酪氨酸酶的激活作用

目的观察中药当归对黑素细胞和酪氨酸酶的影响。方法采用MTT法测定黑素细胞增殖情况,NaOH裂解法测定黑素合成,以蘑菇酪氨酸酶多巴速率氧化法测定酪氨酸酶活性。结果(1)当归对黑素细胞具有促增殖作用,其最佳促增殖浓度为1 g/L;(2)当归可增强黑素合成能力,其最佳促合成浓度为1 g/L;(3)当归对酪氨酸酶亦具有激活作用,其最佳激活浓度为1g/L(P<0.05)。结论当归可促进黑素细胞增殖、黑素合成以及激活酪氨酸酶活性,可能是当归治疗皮肤色素性疾病的机制之一。     

大鼠胰岛细胞的分离纯化及培养

目的　探讨大鼠胰岛细胞分离纯化和培养的方法。方法　采用胰导管逆行灌注Hanks液分离成年大鼠胰岛,Ⅴ型胶原酶消化,不连续密度梯度Ficoll 4 0 0纯化胰岛。用台盼蓝和双硫腙染色检测胰岛活性和纯度,葡萄糖刺激胰岛素释放试验检测胰岛功能。结果　胰岛细胞的收获量为5 4 0±15 0个胰岛 胰腺,活性>90 % ,纯度>90 % ,高糖刺激后胰岛素释放量为低糖刺激的2倍多。结论　胰导管灌注Hanks液,Ⅴ型胶原酶消化和不连续密度梯度葡聚糖纯化胰岛,可以获取数量多,活性和纯度好的胰岛     

人巨细胞病毒地方分离株的鉴定及其UL83序列分析

目的鉴定从合肥市某医院先天性脑瘫患儿尿标本中分离的4株人巨细胞病毒（HCMV）毒株并对其UL83基因序列进行分析，为HCMV感染的预防及pp65蛋白疫苗的研制提供参考依据。方法应用细胞培养法复苏病毒，间接免疫荧光法检测pp65蛋白表达，并用特异性引物对UL73基因进行PCR，扩增的产物经凝胶纯化后测序；序列结果运用DNAMAN软件和GenBank登录的3株代表性HCMV毒株进行核苷酸和氨基酸序列比对。结果HCMV AD169株与HCMV-1分离株的UL83基因核苷酸及编码氨基酸序列的同源性均为100％，与其余3株的同源性也达99．26％～99．69％；4株HCMV分离株与Merlin株、Towne株在相应基因片段核苷酸及氨基酸的同源性最低的分别为98．95％，99．06％。结论UL83序列分析结果表明，HCMV UL83编码pp65蛋白的优势抗原决定簇氨基酸序列无变化。     

猪肾CD26的分离、纯化及动力学研究

目的：纯化CD26,并对其部分性质进行研究。方法：采用ADA-Sepharose 4B亲和层析法分离纯化CD26,采用Egawa法测定酶活性。结果：纯化达电泳纯,得率为31.3%,纯化倍数达341,用SDS-PAGE测得其分子量为109.2 KD。另外,采用非线性回归分析法求得了CD26对底物Gly-Pro-p-nitroanilide的Km=（101.5±2.2） μmol/L和Vmax=（19.5±0.3） U/mg protein。结论：用ADA-Sepharose 4B亲和层析法可纯化CD26达电泳纯。     

厚壳贻贝多糖的提取和免疫学活性研究

目的:深入研究海洋生物多糖的药用价值,对厚壳贻贝多糖进行提取分离和免疫学活性的研究.方法:通过热碱法提取厚壳贻贝多糖粗品,用双蒸水配成三种浓度的厚壳贻贝多糖溶液,然后对其进行正常小鼠脾淋巴细胞转化实验、迟发型变态反应、NK细胞活性测定、抗体生成细胞的检测、碳廓清实验、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞等实验,并用MTT法对荷瘤小鼠进行了脾淋巴细胞增殖活力测定.结果:成功获得厚壳贻贝多糖粗品,呈白色粉末状;各项免疫学活性测定结果表明厚壳贻贝多糖粗品溶液能有效地增加正常小鼠的脾淋巴细胞转化率,增强小鼠迟发型变态反应、NK细胞活性、抗体形成细胞活性、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞百分率(P<0.01),且随多糖溶液浓度增高而增强(各浓度组间相比P<0.01);厚壳贻贝粗品溶液还能非常显著地提高荷瘤小鼠的脾脏细胞的增殖能力(P<0.01).结论:厚壳贻贝多糖能从细胞免疫功能、体液免疫功能、单核-巨噬细胞功能及NK细胞活性方面促进正常小鼠的免疫活性作用,并具有明显的抗肿瘤作用.     

利用硝酸银处理的硅胶色谱方法分离和提纯中药有效成分的思考

【目的】探讨了AgNO3-双键配合物的实验规律及原理。【方法】收集并整理经AgNO3处理的硅胶色谱柱分离的挥发油中含双键的混合物;通过分离纯化中药半边旗中的抗癌有效成分以及用银离子络合法从油脂中分离花生四烯酸等,从中找出规律,并用配位化学理论分析其原理。【结果】分离和纯化结果比较满意。【结论】AgNO3-配合物的稳定性规律是：当无空间障碍时,双键个数越多,络合越牢;环外双键比环内双键络合得牢;顺式比反式络合得牢;末端双键比顺式络合得牢;多重苯环芳烃的配合物比单环芳烃络合得牢。这些规律可以指导结构和理化性质相近、用普通色谱法或萃取法难以分离的双键化合物的分离和纯化。