蛇床子中的细胞毒活性香豆素

研究植物蛇床Cnidium monnieri干燥成熟果实中的香豆素类成分及其细胞毒活性,为进一步开发利用蛇床子提供依据。采用大孔树脂、硅胶和Sephadex LH-20、C₁₈柱色谱等方法分离纯化,并运用波谱方法对所分离的化合物进行结构鉴定。采用MTT法对所分离得到的化合物进行L1210癌细胞毒活性实验。从蛇床子中分离鉴定了11个香豆素类化合物,分别为蛇床子素(1)、佛手柑内酯(2)、花椒毒酚(3)、花椒毒素(4)、欧前胡素(5)、异虎耳草素(6)、欧前胡素酚(7)、补骨脂素(8)、5,7-二甲氧基香豆素(9)、水合羟基前胡内酯(10)、swietenocoumarin F(11)。化合物 7,9~11 为首次从蛇床属植物中分离得到。在样品溶液浓度为1×10^-5 mol·L^-1的条件下,化合物 1,5,10, 11 对小鼠白血病L1210细胞体外生长的抑制率分别是70.13%,63.10%,55.77%,75.08%,表明上述化合物对L1210细胞具有较明显的体外细胞毒活性。     

蛇床子总香豆素的测定及其提取条件的正交设计优选

目的 建立蛇床子总香豆素的RP-HPLC测定方法，探讨其提取分离的优化条件。方法 以蛇床子素，欧前胡素为定量指标成分。通过对蛇床子浸出，水煎，超声等提取方法的比较与筛选。确定乙醇浓度，水浴温度，超声时间，浸渍时间，并以L9（3^4)正交设计表安排试验。结果 蛇床子药材细粉加20倍量75%乙醇55℃水浴温度下43Hz超声提取90min为蛇床子总香豆素的最佳提取工艺。结论 优选的超声提取条件效率高，可增加蛇床子药材的利用率。     

蛇床子总香豆素对新生大鼠成骨细胞的作用

目的：研究蛇床子总香豆素（TCFC）在体外对新生大鼠颅盖骨成骨细胞增殖及成骨作用的影响。方法：酶消化法分离培养新生大鼠颅盖骨成骨细胞;^3H-胸腺嘧啶和^3H-脯氨酸掺入法分别测定细胞增殖和胶原合成;磷酸苯二钠法测定细胞内骨碱性磷酸酶（ALP）活性;并以抗骨质疏松药物异丙黄酮（ipriflavone,IP)作为阳性对照药物。结果：TCFC对新生大鼠成骨细胞的增殖,ALP活性,骨胶原合成具有显的促进作用。结论：TCFC抗骨质惊讶松的作用与其增加成骨细胞的数量,促进细胞胶魇蛋白及ALP的活性有关。     

蛇床子素和蛇床子总香豆素对肾阳虚小鼠免疫功能的影响

采用醋酸氢化可的松肾阳鼠模型，观察蛇床子素和蛇床子总香豆素对肾阳虚，观察蛇床子素和蛇床子总香豆素对肾阳虚小鼠疫功能的影响。结果：肾阳虚组与正常对照组比较，腹巨噬细胞吞噬百分率和吞噬指数、血清溶血清５０％溶血值、脾淋巴细胞＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入数等指标明显降低；肾阳虚用ｏｓｈｔｏｌ及ＴＣＲ组与肾阳虚小鼠比较，上述各项指标均有显著提高（Ｐ＜０．０５，＜０．０１）。提示ｏｓｔｈｏｌ和ＴＣＲ可以增强肾阳虚小鼠     

蛇床子总香豆素止喘作用机理探讨

蛇床子总香豆素具有松驰由药物引起的支气管痉挛和直接扩张支气管的作用,这一作用均能被β-受体阻滞剂心得安所阻断。此外,蛇床子总香豆素对麻醉动物无加快心率和升高血压的作用。提示蛇床子总香豆素的解痉作用可能是通过兴奋β₂-受体所致。     

续断总皂苷和三七总皂苷配伍对去卵巢大鼠骨质疏松症的治疗作用

目的 观察续断总皂苷和三七总皂苷配伍对去卵巢大鼠骨质疏松症的治疗作用.方法 采用双侧摘卵巢手术建立大鼠原发性骨质疏松模型,术后3个月开始连续给药3个月,观察续断总皂苷和三七总皂苷配伍对去卵巢骨质疏松大鼠骨密度、骨生物力学及骨代谢相关血清生化的影响.结果 续断总皂苷和三七总皂苷配伍可显著增加大鼠股骨与腰椎的骨密度、提高骨生物力学(P<0.01),同时提高血清ALP的水平(P<0.01).结论 续断总皂苷和三七总皂苷配伍可使去卵巢所致的实验性骨质疏松大鼠骨密度增加,骨生物力学提高,有明显的治疗骨质疏松作用,且配伍后有一定的协同增效作用.     

蛇床子总香豆素对激素致大鼠骨质疏松的骨密度影响

用骨密度测定来探讨蛇床子总香豆素（TCCM）对激素所致雄性大鼠骨代谢变化的影响。结果表明：与对照组比较，激素组大鼠股骨近段、中段和远段的骨密度（BMD）分别减少了12．4％（P＜0.05）、13．9％（P＜0.05）和11．9％（P＜0.05）；与激素组相比，预防组大鼠股骨近段、中段和远段的BMD分别增加了25．9％（P＜0．01）、34．4％（P＜0．01）和30．6％（P＜0．01）。提示，TCCM能预防激素所致的骨质丢失。     

蛇床子总香豆素的药理研究

蛇床子总香豆素对豚鼠吸入致痉剂所致的药物性哮喘有明显的保护作用,在体外能拮抗组胺、慢反应物质(SRS—A)对豚鼠气管和回肠平滑肌的收缩效应,对小鼠被动皮肤过敏反应(PCA)有抑制作用,能明显地延长戊巴比妥钠的睡眠时间,并有一定的祛痰作用。     

巴戟天提取物对去卵巢大鼠骨质疏松症的防治作用

目的:探讨巴戟天提取物对实验性骨质疏松症大鼠的影响。方法:健康雄性SD大鼠60只,随机分为假手术组、模型对照组、阳性对照组及巴戟天提取物高、中、低剂量组,每组各10只。对除假手术组外的其余组大鼠通过手术摘除大鼠双侧卵巢建立骨质疏松症模型,造模后分别给予阳性药物碳酸钙D3颗粒0. 5mg/kg,巴戟天提取物高、中、低剂量(0. 36g/kg、0. 18g/kg、0. 09g/kg)干预,假手术组与模型对照组给予等体积蒸馏水,每天1次,共90d,剥离右侧股骨测量股骨中心骨密度与远心端骨密度;称量股骨重量,采用原子吸收分光光度法测定骨钙含量。结果:与假手术组比较,模型对照组大鼠骨密度、骨钙含量、血清雌二醇含量均显著降低,血清碱性磷酸酶含量显著升高,差异均有统计学意义(P 0. 01);与模型对照组比较,巴戟天高剂量组大鼠骨密度及高、中剂量组大鼠骨钙含量、血清雌二醇含量均显著升高,碱性磷酸酶含量显著降低,差异均有统计学意义(P 0. 05或P 0. 01)。结论:巴戟天提取物能够有效阻止骨丢失,促进钙沉积,从而改善骨质疏松症,其作用机制可能与调节雌性激素水平有关。     

升麻提取物对去卵巢所致大鼠骨质疏松症的作用

毛茛科升麻属多种植物的根茎在我国传统中药中作为治疗妇女崩漏、子宫下坠等症的妇科良药。在欧洲,升麻属植物总状升麻Cimicifuga racemosa(Turcz.)Maxim.也用于治疗妇女更年期综合征,其提取物制成的产品已在欧美上市[1]。最近研究发现其中的三萜类成分具有抗骨质疏松活性。本实验利用去卵巢诱导大鼠骨质疏松症模型,研究升麻提取物(含升麻三萜苷71.2%)对去卵巢致骨质疏松大鼠股骨生物力学及血清雌二醇(E2)水平的影响,以探讨其作用机制,为开发防治骨质疏松的药物提供理论依据。1材料与方法1.1药材、试剂及仪器:升麻提取物(山东省天然药物工…     

蛇床子总香豆素对成骨细胞产生NO，IL-1及IL-6的影响

 目的以新生大鼠颅盖骨成骨细胞为模型，观察蛇床子总香豆素对成骨细胞产生NO，IL-1和IL-6的影响。方法原代培养新生大鼠颅盖骨成骨细胞，³H-胸腺嘧啶掺入法测定成骨细胞的增殖；Griess 试剂法、小鼠胸腺细胞增殖法和用B9细胞作为靶细胞的生物测定法，分别检测与蛇床子总香豆素共育的无刺激或受LPS及TNF等刺激的成骨细胞培养上清液中NO，IL-1和IL-6的含量。结果蛇床子总香豆素在0.025～2.5 mg·L_-1的范围内抑制成骨细胞自发地或在LPS及细胞因子刺激下产生NO，IL-1及IL-6。结论蛇床子总香豆素的抗骨质疏松作用与其抑制成骨细胞产生NO，IL-1和IL-6的分泌而调节成骨细胞的功能有关。     

蛇床种内变异的RAPD分析

目的 :从DNA分子水平上探讨不同地区产蛇床的种内变异。方法 :用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术分析 9个产地的蛇床基因组DNA多态性 ,并构建树状聚类图。结果 :从 2 0个 10bp随机引物中筛选出 12个有效引物 ,共扩增出 75条DNA带 ,其中 6 4条表现出多态性。结论 :地理分布距离越小 ,蛇床的遗传差异越小 ,反之越大 ,但生态环境对蛇床遗传变异的作用也不可忽视。     

超临界CO2萃取工艺对蛇床子素的影响

目的研究超临界CO2萃取蛇床子中有效成分蛇床子素的工艺,考察工艺参数改变后对蛇床子素量的影响规律。方法保持分离压力为5MPa,萃取时间为80min和CO2流速为18L/h不变的情况下,采用二次回归连贯设计的方法,对萃取压力、萃取温度、分离压力、分离温度、分离温度这5个条件进行优选,确定最佳工艺参数。结果最佳工艺条件为萃取压力40MPa,萃取温度40℃;分离压力5MPa,分离温度45℃;分离温度46℃,此条件下蛇床子素的量可达21.08%。结论本文采用超临界CO2萃取蛇床子中的有效成分蛇床子素,工艺条件简单、稳定、可行,可为以后进行工业生产提供参考。     

中药蛇床子的研究进展

概述近年来有关蛇床子的化学成分、药理作用和临床应用和研究进展。     

蛇床子挥发油化学成分的GC-MS分析

目的:用气相色谱-质谱法对蛇床子挥发油化学成分进行分析。方法:采用水蒸气蒸馏法从蛇床子中提取挥发油。用气相色谱-质谱法对化学成分进行鉴定。用归一化法确定其相对百分含量。结果:共鉴定了50个成分,占挥发油总成分的86％以上。结论:本方法稳定可靠,重现性好,适用于中药挥发油的化学成分分析。     

蛇床子中3种逆转肿瘤细胞多药耐药活性香豆素

目的：从蛇床子Cnidium monnier中分离逆转肿瘤细胞多药耐药活性成分。方法：用生物活性跟踪法，经硅胶柱层析、RP-HPLC等。结果：分离得到3种活性成分，分别为欧芹属素乙（imperatorin），爱得尔庭（edultin），9-异丁酰氧基-O-乙酰基哥伦比亚苷元（3′-isboutyryloxy -O-acetyl columbionetin）。结论：体外实验表明3种化合物对耐药的肿瘤细胞KBV200具有明显的逆转作用。     

Antitumor effects of Osthol from Cnidium monnieri: an in vitro and in vivo study

Cnidium monnieri (L.) Cusson is a Chinese medicine which is used widely by traditional medicine doctors. Osthol is a major bio-activity compound of the herb. In this study, osthol was isolated from C. monnieri and its in vitro and in vivo antitumor effects studied. The results of the in vitro study showed: that osthol inhibited the growth of HeLa, in a time- and concentration-dependent manner, with IC(50) values of 77.96 and 64.94 microm for 24 and 48 h, respectively; that osthol had lower cytotoxic effects in primary cultured normal cervical fibroblasts; and that increased DNA fragmentation and activated PARP in HeLa after treatment with osthol which could induce apoptosis. The results of the in vivo model showed that the survival days of the P-388 D1 tumor-bearing CDF(1) mice were prolonged (ILS% = 37) after osthol (30 mg/kg) was given once a day for 9 days. Based on these results, it is suggested that osthol could inhibit P-388 D1 cells in vivo and induce apoptosis in HeLa cells in vitro, and that osthol is good lead compound for developing antitumor drugs. However, C. formosanum Yabe of Taiwan's endemic plants contained little osthol, with no imperatorin, and its major components were different from that of C. monnieri. Therefore, it is suggested that C. formosanum also may possess economic worth.     

蛇床子中蛇床子素提取工艺研究

目的优选蛇床子素提取工艺。方法采用正交实验考察碱用量（A）、浸泡时间（B）、超声时间（C）和碱浓度（D）4个影响因素，以蛇床子素含量为评价指标，并采用HPLC法进行测定。结果蛇床子超声提取的最佳工艺为加30倍量2％NaOH，浸泡时间1．5h，超声时间10min。结论该工艺稳定可行，经济实用。     

超临界CO2萃取蛇床子挥发性成分的研究

用超临界CO_2流体萃取技术从蛇床子中萃取出油状物质,得率为10％,用GC—MS技术对其进行研究,从中检出34个成分,鉴定出33个成分。有17个成分为首次从该植物中发现,油状物中蛇床子素、亚油酸、油酸含量最高,其中有效成分蛇床子素的含量高达22.61％。     

Qualitative Analysis and Quality Evaluation of Cnidium monnieri Using UHPLC-ESI-Q-TOF/MS

Objective To identify the coumarins constituents in Cnidium monnieri and classify ten samples into three groups and this helpful chemical information could be used for the further pharmacological and clinical study on C. monnieri. Methods Qualitative analysis of coumarins in C. monnieri was detected by UHPLC-ESI-Q-TOF/MS. Quadrupole TOF/MS in either full scan mode or extracted ion mode was used for the qualitative analysis of the constituents. Relative peak area of each component was used for the hierarchical cluster analysis. Results According to UHPLC-ESI-QTOF-MS data, chemical structures of 28 coumarins in the fruits of C. monnieri were identified, including 19 simple coumarins, seven linear coumarins, and two angular coumarins. Among these constituents, ten coumarins were firstly identified in C. monnieri. In addition, hierarchical cluster analysis suggested that C. monnieri from different regions could be classified into four groups, and this clustering was correlated to the distribution significantly, Xuzhou could be regarded as the genuine producing area. Conclusion UHPLC-ESI-Q-TOF-MS is a viable method for qualitative analysis and quality evaluation of coumarins from the fruit of C. monnieri. Coumarins in C. monnieri exists intra-species variance, which indicates significant meaning for the quality control and choice of famous region drug for C. monnieri in the clinic medication.